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1、2I 四川省地方標(biāo)準(zhǔn)川產(chǎn)道地藥材生產(chǎn)技術(shù)規(guī)范 麥冬編 制 說 明編制單位:成都中醫(yī)藥大學(xué)2022年06月22日目 錄 TOC o 1-2 h z u HYPERLINK l _Toc59972898 一、工作簡況 PAGEREF _Toc59972898 h 3 HYPERLINK l _Toc59972902 二、規(guī)范的主要技術(shù)指標(biāo)確定依據(jù)與說明 PAGEREF _Toc59972902 h 4 HYPERLINK l _Toc59972907 三、主要試驗(驗證)的分析、綜述報告 PAGEREF _Toc59972907 h 5 HYPERLINK l _Toc59972912 四、采用國
2、際標(biāo)準(zhǔn)和國外先進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)的程度 PAGEREF _Toc59972912 h 38 HYPERLINK l _Toc59972913 五、與現(xiàn)行強制性國家標(biāo)準(zhǔn)或政策法規(guī)的關(guān)系 PAGEREF _Toc59972913 h 38 HYPERLINK l _Toc59972914 六、重大分歧意見的處理經(jīng)過和依據(jù) PAGEREF _Toc59972914 h 38 HYPERLINK l _Toc59972915 七、作為推薦性標(biāo)準(zhǔn)使用的建議 PAGEREF _Toc59972915 h 38 HYPERLINK l _Toc59972916 九、廢止現(xiàn)行有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的建議 PAGEREF _Toc599
3、72916 h 38 HYPERLINK l _Toc59972917 十、其他應(yīng)予說明的事宜 PAGEREF _Toc59972917 h 38 HYPERLINK l _Toc59972918 十一、相關(guān)附件 PAGEREF _Toc59972918 h 381工作簡況(一)任務(wù)來源根據(jù)四川省市場監(jiān)督管理局關(guān)于下達(dá)2021年度地方標(biāo)準(zhǔn)制修定項目立項計劃(第二批)的通知(川質(zhì)監(jiān)函2021304號),批準(zhǔn)由成都中醫(yī)藥大學(xué)牽頭起草地方標(biāo)準(zhǔn)川產(chǎn)道地藥材生產(chǎn)技術(shù)規(guī)范 麥冬。(二)目的意義麥冬作為常用的大宗藥材之一,其藥用歷史悠久,產(chǎn)量大,質(zhì)量優(yōu)。四川和浙江是我國傳統(tǒng)的麥冬道地產(chǎn)區(qū),產(chǎn)自四川者為“川麥
4、冬”,主要種植于三臺縣及其周邊地區(qū),產(chǎn)自浙江者為“杭麥冬(浙麥冬)”,集中栽培于慈溪、余姚、蕭山等縣。川麥冬與杭麥冬均為藥典收載麥冬藥材的正品來源,杭麥冬生長期為23年,栽培面積少,產(chǎn)量低。而川麥冬栽培期為1年,其生長期周期短,種植面積大,產(chǎn)量較高。浙麥冬種植面積逐年萎縮,川麥冬種植區(qū)逐年增加,僅四川三臺縣常年種植面積已達(dá)5萬畝以上,年產(chǎn)麥冬約15000噸,占全國總產(chǎn)量的70 %以上。以麥冬為主要原料的中成藥總共538種。其中全國銷售額前100名的中成藥品種中含有麥冬原料的品種有咽炎片、小兒肺熱咳喘顆粒、川貝清肺糖漿、鐵笛片、復(fù)方片仔癀含片、參松養(yǎng)心膠囊等。此外,開發(fā)了以麥冬為原料的保健食品有
5、麥冬酒、麥冬保健茶等,日化產(chǎn)品如佰草集、百雀羚等,市場前景廣闊。麥冬以其較高的藥用價值和經(jīng)濟(jì)價值帶動了種植人員的積極性,但因缺乏相應(yīng)的規(guī)范的種植、采收、加工等技術(shù)指導(dǎo)內(nèi)容,致使麥冬藥材質(zhì)量得不到保證。因此,急需建立科學(xué)、規(guī)范的麥冬藥材生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程,指導(dǎo)麥冬科學(xué)合理的生產(chǎn),有效控制生產(chǎn)成本、提高麥冬質(zhì)量,實現(xiàn)較高的經(jīng)濟(jì)效益和社會效益,從而促進(jìn)麥冬大產(chǎn)業(yè)、大健康的可持續(xù)性發(fā)展。(三)起草單位1. 主要起草單位成都中醫(yī)藥大學(xué),主要負(fù)責(zé)標(biāo)準(zhǔn)的設(shè)計、樣品收集、實驗方案制定、實施及標(biāo)準(zhǔn)的編制。2. 標(biāo)準(zhǔn)主要起草人及分工按照起草人順序,包括姓名、單位、職務(wù)或職稱、承擔(dān)的主要工作等內(nèi)容,見 REF _Ref1
6、06901663 h * MERGEFORMAT 表 1。表 SEQ 表 * ARABIC 1 主要起草人及主要工作內(nèi)容姓名工作單位職務(wù)/職稱任務(wù)分工李敏成都中醫(yī)藥大學(xué)教授統(tǒng)籌協(xié)調(diào)/標(biāo)準(zhǔn)制定胡尚欽四川嘉道博文生態(tài)科技有限公司標(biāo)準(zhǔn)修訂/資料復(fù)核陳崗福四川代代為本農(nóng)業(yè)科技有限公司董事長樣品收集/標(biāo)準(zhǔn)修訂蔡曉洋成都中醫(yī)藥大學(xué)博士研究生標(biāo)準(zhǔn)修訂/資料復(fù)核鄧紅梅成都中醫(yī)藥大學(xué)碩士研究生標(biāo)準(zhǔn)修訂/資料復(fù)核李紅彥成都中醫(yī)藥大學(xué)碩士研究生樣品收集/測試分析萬子玉成都中醫(yī)藥大學(xué)博士研究生田間試驗/標(biāo)準(zhǔn)修訂瞿雅懿成都中醫(yī)藥大學(xué)碩士研究生樣品收集/測試分析顏雨豪成都中醫(yī)藥大學(xué)碩士研究生田間試驗/測試分析張雪四川嘉道
7、博文生態(tài)科技有限公司標(biāo)準(zhǔn)修訂/樣品收集規(guī)范的主要技術(shù)指標(biāo)確定依據(jù)與說明(一)產(chǎn)地環(huán)境條件1、環(huán)境空氣應(yīng)符合控制質(zhì)量GB 3095 二級的要求。2、農(nóng)田灌溉水應(yīng)符合農(nóng)田灌溉水質(zhì)量GB 5084的要求。3、土壤應(yīng)符合GB 15618中關(guān)于“土壤污染風(fēng)險篩選值”規(guī)定的指標(biāo)限值的要求。作為道地藥材,土壤環(huán)境風(fēng)險控制適度從嚴(yán)。 4、地理氣候條件應(yīng)符合GB/T 23400中氣候條件的要求。(二)種苗培育技術(shù)1、品種要求使用百合科植物麥冬Ophiopogon japonicus(L.f.)Ker-Gawl.,物種須經(jīng)過鑒定。宜選用經(jīng)過審定或認(rèn)定的品種。2、繁育技術(shù)采用分株繁殖法,繁育用種苗應(yīng)符合DB 51/
8、T 2557中一級種苗的要求,田間管理同藥材生產(chǎn)。生長過程中,去除混雜、變異、生長不良及遭受病蟲害植株。于翌年3月中旬至4月下旬采收。3、種苗處理、分級與保存采收后的麥冬植株剪去塊根,切去下部根狀莖和須根,保留1 cm以下的莖節(jié),切好的種苗按DB 51/T 2557的要求進(jìn)行分級清理、堆碼整齊,并掛種苗標(biāo)簽。采收的種苗宜及時栽種。如不能及時栽種,可將種苗存放在陰濕處的疏松土壤上,種苗莖基部周圍用細(xì)土護(hù)苗,種苗根部保持濕潤,養(yǎng)苗時間不應(yīng)超過 7 d。4、種苗運輸輸工具應(yīng)干燥、無污染,不應(yīng)與可能造成污染的貨物混裝。(三)藥材栽培技術(shù)麥冬的選地整地、栽種、田間管理參考地理標(biāo)志產(chǎn)品 涪城麥冬(GB/T
9、 23400-2009)的規(guī)定。栽種時間參考地理標(biāo)志產(chǎn)品 涪城麥冬(GB/T 23400-2009)的規(guī)定,結(jié)合產(chǎn)地生產(chǎn)實際,最遲不超過5月上旬。麥冬施肥,基肥可參考地理標(biāo)志產(chǎn)品 涪城麥冬(GB/T 23400-2009)中基肥要求,同時增加了有機肥替代人畜糞水等農(nóng)家肥的建議。根據(jù)土壤肥力和植株長勢進(jìn)行施肥,可考慮每畝使用優(yōu)質(zhì)腐熟有機肥(人畜糞水、餅肥等)3000 kg5000 kg或商品有機肥500 kg1000 kg,同時施入復(fù)合肥(NPK=111)40Kg/畝,隨整地施入。追肥分四次,其中第一次追肥提苗生根肥、第二次追肥分蘗肥可參照地理標(biāo)志產(chǎn)品 涪城麥冬(GB/T 23400-2009)
10、的要求,同時增加了無機復(fù)(混)合肥替代人畜糞水等農(nóng)家肥的建議;第三次追肥為塊根膨大肥,每畝施無機復(fù)混肥(N:P2O5:K2O= 1:1:2)40-70kg左右,淹水均勻施用;第四次追肥為塊根二次膨大肥,可參照地理標(biāo)志產(chǎn)品 涪城麥冬(GB/T 23400-2009)的要求施用。同時增加了有機肥替代人畜糞水的建議。禁止使用多效唑、壯根靈、膨大素等生長調(diào)節(jié)劑用于增大麥冬塊根。麥冬病蟲害等防治技術(shù)可參照地理標(biāo)志產(chǎn)品 涪城麥冬(GB/T 23400-2009)和浙麥冬生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程(DB33/T 950-2014)中病蟲害防治內(nèi)容,同時增加了枯草芽孢桿菌制劑用于麥冬根腐病的防治。(四)采收技術(shù)采收期為次年
11、3月中旬到4月下旬。采收方式可參考地理標(biāo)志產(chǎn)品 涪城麥冬(GB/T 23400-2009)中采收方法進(jìn)行。根據(jù)實際生產(chǎn),增加機械輔助采收,將“用鋤或鍬”更改為“用鋤、鍬或機械采收”。(五)產(chǎn)地初加工技術(shù)產(chǎn)地初加工可采用曬干法或烘干法。曬干法:可將沖洗干凈的麥冬塊根攤放在竹席上曝曬,厚度3 cm5 cm為宜,也可以搭建簡易日光大棚,曬干過程中每天翻曬34次,使水分快速散失。曬至7成干時,可用機械或手工搓揉去除須根,再進(jìn)行晾曬。烘干法:烘干溫度為5565,烘至67成干時去除須根,之后繼續(xù)烘烤。干燥至水分18.0 %,干燥結(jié)束后去除須根、米粒小冬、霉變麥冬及雜質(zhì)等。用水應(yīng)符合生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)(GB
12、 5749)的規(guī)定,加工干燥過程保證場地、工具潔凈,不受雨淋等。(六)包裝、標(biāo)識與貯存技術(shù)包裝前應(yīng)對每批藥材按照國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行質(zhì)量檢驗。符合國家標(biāo)準(zhǔn)的藥材,采用不影響質(zhì)量的內(nèi)膜編織袋、內(nèi)膜紙箱、塑料盒等包裝,禁止采用包裝過肥料、農(nóng)藥等的包裝袋包裝。包裝外貼或掛標(biāo)簽、合格證,標(biāo)識牌內(nèi)容應(yīng)有品種、基原、產(chǎn)地、批號、規(guī)格、重量、采收日期、企業(yè)名稱等,并有追溯碼。放行應(yīng)制定符合企業(yè)實際情況的放行制度,有審核、批準(zhǔn)、生產(chǎn)、檢驗等的相關(guān)記錄。不合格藥材有單獨處理制度。麥冬藥材應(yīng)貯藏于陰涼干燥處,倉庫控制溫度在20 以下、相對濕度45%75 %。也可采用現(xiàn)代氣調(diào)貯藏方法,庫內(nèi)氧氣2%4%,二氧化碳1%3%,溫
13、度811。貯存時間不宜超過24個月。定期檢查,防止蟲蛀、霉變、腐爛、泛油等發(fā)生;不同批次等級藥材分區(qū)存放;建有定期檢查制度。運輸應(yīng)防止發(fā)生混淆、污染、異物混入、包裝破損、雨雪淋濕等。主要試驗(驗證)的分析、綜述報告,技術(shù)經(jīng)濟(jì)論證,預(yù)期的經(jīng)濟(jì)效果(一)麥冬種苗良種繁育技術(shù)研究目前麥冬沒有良種繁育統(tǒng)一的技術(shù)規(guī)范,難以保證麥冬種苗質(zhì)量,因此亟需建立科學(xué)的麥冬良種繁育技術(shù)規(guī)程,達(dá)到提苗復(fù)壯的目的,能有效控制成本、提高麥冬產(chǎn)量,實現(xiàn)較高的經(jīng)濟(jì)效益和社會效益,從而促進(jìn)麥冬大產(chǎn)業(yè)、大健康的可持續(xù)性發(fā)展。1 材料1.1 試驗基地概況位于四川省三臺縣(北緯N 30433125,東經(jīng)E 1044310518)的實
14、驗區(qū)為亞熱帶濕潤季風(fēng)型氣候區(qū),年平均氣溫1617,年平均日照時數(shù)1260 h,年均降雨量850900 mm,年均無霜期275天,土壤類型為沙質(zhì)土。1.2 試驗材料來自四川省三臺縣涪城麥冬種植區(qū),麥冬種苗均經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室李敏教授鑒定為Ophiopogon japonicus (L.f) Ker-Gawl.的植株。2 方法2.1 種苗生長情況測定方法不同等級的麥冬種苗種下后(清明節(jié)),從8月開始,跟蹤測定麥冬種苗的農(nóng)藝性狀情況。每個試驗小區(qū)隨機選取5株種苗,分別測定每株種苗的株高、葉長、葉片數(shù)、冠幅。株高測定采用鋼直尺量取種苗從基部至最長葉片頂端的自然高度,葉長測定采用鋼直尺量取種
15、苗從基部至最長葉片頂端的長度,冠幅測定采用鋼直尺量取種苗從南北和東西方向的寬度,葉片數(shù)為麥冬種苗葉片總數(shù)。2.2 田間實驗設(shè)計方法將種苗指標(biāo)測定分等后進(jìn)行大田栽種。采用隨機區(qū)組方法劃定小區(qū),試驗小區(qū)面積為1m2,每個小區(qū)種植100株,三次重復(fù),試驗設(shè)計見 REF _Ref106901766 h * MERGEFORMAT 表 2。表 SEQ 表 * ARABIC 2 麥冬種苗良種繁育實驗設(shè)計表等級葉片數(shù)(片)株高(cm)樣本量(株)重復(fù)總株數(shù)一級葉片數(shù)20株高121003300二級20葉片數(shù)15株高121003300三級15葉片數(shù)1012株高81003300等外級葉片數(shù)1012株高810033
16、002.3 產(chǎn)量測定藥材生物產(chǎn)量:采收后,清洗晾干并稱量每小區(qū)麥冬塊根鮮重,按小區(qū)面積折算畝產(chǎn)。按照課題組前期方法,干燥后,測量每個小區(qū)塊根干重,并按小區(qū)面積折算畝產(chǎn)量。種苗產(chǎn)量:采收時統(tǒng)計各試驗小區(qū)不同等級麥冬種苗數(shù)量。3 結(jié)果與分析3.1 不同等級麥冬種苗生長情況對不同等級麥冬種苗生長情況進(jìn)行跟蹤測定,測定結(jié)果見 REF _Ref106901860 h * MERGEFORMAT 表 3、 REF _Ref106901937 h * MERGEFORMAT 圖 1。比較不同等級的種苗對麥冬種苗植株的生長情況的影響,可見麥冬植株的株高、葉片數(shù)、葉長、冠幅均隨著種苗等級的升高而升高。顯著性差異
17、分析結(jié)果表明,從第三次測定開始,一級種苗栽種后麥冬植株的株高、葉片數(shù)與二、三、四級種苗的株高存在顯著差異(P0.05),二級種苗與一、三、四級種苗之間存在顯著差異(P0.05),而三級與四級之間差異不顯著。一級、二級種苗的冠幅與四級種苗之間存在顯著差異(P0.05),一級與二級之間差異不顯著。不同等級種苗的葉長之間均存在顯著性差異(P0.05)。說明以一級、二級麥冬種苗得到的麥冬植株的生長發(fā)育越健壯,植株越高,葉片數(shù)越多,冠幅越大。表 SEQ 表 * ARABIC 3 不同等級麥冬種苗株高、葉長生長情況(x s,n=5)指標(biāo)等級第一次第二次第三次第四次株高一級16.681.84a18.21.4
18、1a23.241.21a27.421.59a二級14.400.61ab15.661.31ab20.121.36b22.221.11b三級13.061.14bc14.221.44b15.860.21cd17.381.57cd四級13.122.16bc13.321.70b14.581.57d15.282.15d葉片數(shù)一級53.05.00a6211.29a742.97a763.25a二級50.45.41a51.84.71ab624.34b674.33b三級29.62.88b3610.49bc425.87cd465.34cd四級24.26.38b29.23.11c37.85.72d413.94d葉長一
19、級20.820.83a21.861.71a28.640.98a29.220.79a二級18.440.51a19.421.36ab25.341.13b26.821.34b三級16.481.99a17.401.84bc21.701.44c23.342.01c四級14.263.13b15.901.10c16.121.10d16.621.33d冠幅一級24.721.84a24.082.43a28.882.43a31.243.02a二級21.061.90a23.440.73ab29.002.23a29.122.69a三級20.022.17ab21.882.09ab25.221.71ab27.981.77
20、ab四級14.043.78b19.701.66b20.043.23b22.143.10b圖 SEQ 圖 * ARABIC 1 不同等級麥冬種苗生長情況測定結(jié)果圖3.2 不同等級麥冬種苗產(chǎn)量3.2.1 各等級種苗的藥材生物產(chǎn)量不同等級的種苗對種植一年后麥冬藥材產(chǎn)量的影響較大,見 REF _Ref106902013 h * MERGEFORMAT 表 4。其中一級種苗產(chǎn)量較二級種苗產(chǎn)量增加了16.20%,一級種苗較三級種苗的產(chǎn)量增加了45.16%,一級種苗較四級種苗產(chǎn)量增加了70.88%。進(jìn)行顯著性差異分析,4個等級的種苗種植一年后的產(chǎn)量均達(dá)到了極顯著差異(P0.01),等級越高,產(chǎn)量越高。通過計
21、算麥冬藥材的折干率,發(fā)現(xiàn)不同等級種苗產(chǎn)藥材的折干率間無顯著差異??梢婝湺N苗的等級越高,采收后麥冬藥材的生物產(chǎn)量越高。表 SEQ 表 * ARABIC 4 不同等級麥冬種苗所產(chǎn)藥材產(chǎn)量結(jié)果(x s,n=3)等級鮮重kg/667m2干重kg/667m2折干率一級1364.02157.83a351.9566.53a0.260.02a二級1184.15160.78b302.8881.83b0.260.07a三級1056.08197.94c242.4572.87c0.240.12a四級903.34150.17d205.9634.24d0.230.00a3.2.2 各等級種苗的產(chǎn)量統(tǒng)計產(chǎn)生的不同等級麥冬
22、種苗數(shù)量,結(jié)果見 REF _Ref106902065 h * MERGEFORMAT 表 5。顯著性差異分析結(jié)果顯示,種苗的總數(shù)存在顯著性差異(P0.05),其中一級種苗(525株)二級種苗(455株)三級種苗(367株)四級種苗(244株)。即麥冬種苗等級越高,產(chǎn)種苗數(shù)量越多,其中一、二級麥冬種苗數(shù)量越多。表 SEQ 表 * ARABIC 5 不同等級麥冬種苗產(chǎn)量(x s,n=3)處理一級種苗(株)二級種苗(株)三級種苗(株)四級種苗(株)總數(shù)(株)一級123.6742.03b255.3327.61a129.0036.06a17.335.69a525.3330.01a二級189.0075.9
23、0a198.6729.19b52.6710.26bbc15.003.46ab455.3342.85b三級110.6719.86c181.6714.29b65.0020.07bc10.001.00b367.3325.01c四級55.002.830d113.000.00c61.507.78c14.500.71ab244.0011.31d綜上所述,麥冬種苗等級越高,各等級種苗總數(shù)產(chǎn)量越高,一、二級麥冬種苗產(chǎn)量越高。去除良種繁育地中的混雜植株、變異植株、及生長不良植株和遭受病蟲害植株,選取葉色深綠,生長健壯,塊根多而飽滿、無病蟲害的一級、二級麥冬種苗作為繁育材料,一、二、三級麥冬種苗用于大田生產(chǎn)。(二
24、)麥冬種植密度研究長期以來,三臺農(nóng)戶種植麥冬密度差異較大,每667m2從6萬株到11萬株都有實施,但目前尚無專門研究麥冬種植密度的相關(guān)報道。麥冬屬于耐密植物,在禁用多效唑的種植的背景下,是否可以通過改變種植密度來提升麥冬產(chǎn)量,值得深入研究。為此,在松埡鎮(zhèn)標(biāo)準(zhǔn)試驗田(麥冬傳統(tǒng)主產(chǎn)區(qū))進(jìn)行了麥冬密度研究試驗,現(xiàn)報告如下。1 試驗材料1.1供試品種川麥冬1號。1.2試驗地點綿陽市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)化試驗田。該地塊灌水條件良好,土壤肥力均勻,土質(zhì)沙壤,前茬是油菜(未等油菜籽收獲,1月下旬油菜抽薹前田塊翻耕,油菜植株作為綠肥)。2 試驗設(shè)計采用單因素隨機區(qū)組設(shè)計,共設(shè)5個密度處理(A:40000株/6
25、67m2、B:70000株/667 m2、C:100000株/667 m2、D:130000株/667 m2、D:160000株/667 m2),共15個小區(qū)( REF _Ref107256824 h * MERGEFORMAT 圖 2),小區(qū)面積8 m2(2m4m)。 ABEBCACDBDECEAD圖 SEQ 圖 * ARABIC 2小區(qū)田間布置3 田間管理4月10日,人工耙地、施基肥,栽種,所有試驗小區(qū)同一天栽種完,栽后澆水,土壤發(fā)白及時澆水,各小區(qū)單排單灌,發(fā)現(xiàn)麥冬苗死亡立即補苗。整個生育期采用人工除草,做到有草即除。本試驗不使用多效唑,其余田間管理按照當(dāng)?shù)毓芾矸绞脚c三臺麥冬種植習(xí)慣保持
26、一致。4 試驗材料采收第二年4月9日進(jìn)行試驗田采收,每小區(qū)取樣20株,測試分蘗、葉片數(shù)、株高、根長、須根數(shù)、側(cè)根數(shù)、麥冬塊根數(shù)、葉片寬、葉重、須根重等考種數(shù)據(jù),測試小區(qū)產(chǎn)量(折算為畝產(chǎn))??挤N、產(chǎn)量數(shù)據(jù)使用Excel2010和DPS7.55進(jìn)行統(tǒng)計分析。5 試驗結(jié)果5.1 種植密度對麥冬生長指標(biāo)的影響方差分析結(jié)果( REF _Ref107256317 h * MERGEFORMAT 表 6)表明,所有測試指標(biāo)不同密度下差異均達(dá)極顯著水平。進(jìn)一步進(jìn)行多重比較結(jié)果( REF _Ref107256317 h * MERGEFORMAT 表 6)表明,每667 m2密度從4萬株增加到7萬株,667 m
27、2麥冬數(shù)、單株須根重、單個麥冬重這幾個指標(biāo)差異不顯著,其他指標(biāo)差異顯著;從7萬株增加到10萬株,單株分葉數(shù)、葉片數(shù)、667 m2麥冬數(shù)、單個麥冬重這幾個指標(biāo)差異不顯著,其他指標(biāo)差異顯著;從10萬株增加到13萬株,單株分葉數(shù)、葉寬、株高、側(cè)根數(shù)、須根數(shù)、須根重差異不顯著,其他指標(biāo)差異顯著;從13萬株增加到16萬株,單株分葉數(shù)、葉片數(shù)、側(cè)根數(shù)、須根數(shù)、葉重、須根重、單株麥冬重、單個麥冬重差異不顯著,其他指標(biāo)差異顯著。由圖3圖11可以看出,隨著密度增加,株高和667 m2麥冬總數(shù)呈上升趨勢,密度達(dá)到10萬株之后,麥冬總數(shù)上升趨勢變緩;密度增加,其他指標(biāo)均呈下降趨勢,但在不同的密度變化區(qū)間,各指標(biāo)下降
28、緩急程度有差異,例如“單個麥冬重”在4萬10萬密度變化區(qū)間降低趨勢較緩,10萬13萬密度變化區(qū)間降低趨勢較急,而13萬16萬密度變化區(qū)間降低趨勢又變急。單株須根數(shù)和單株麥冬數(shù)變化趨勢較為一致。以上結(jié)果表明,麥冬生長指標(biāo)隨密度變化而變化是一個較復(fù)雜的過程,指標(biāo)之間的差異顯著性、變化趨勢的升、降、緩、急均存在不同。表 SEQ 表 * ARABIC 6 不同種植密度下麥冬生長指標(biāo)及方差分析處理重復(fù)單株分葉數(shù)(個)單株葉片數(shù)(片)平均葉寬(mm)株高(cm)單株側(cè)根數(shù)(根)單株須根數(shù)(根)單株麥冬數(shù)(個)667m2麥冬數(shù)(個)單株葉重(g)單株須根重(g)單株麥冬重(g)單個麥冬重(g)AI4.851
29、55.904.1337.404.8034.2522.95918000.0033.547.6421.440.93II4.90150.004.1237.803.8534.0522.35894000.0035.117.9322.060.99III5.15167.204.0837.955.7536.5024.95998000.0037.338.3824.460.98平均4.97a157.7a 4.11a37.72d4.80a34.93a23.42a936666.67a35.33a7.98a22.65a0.97aBI4.65105.054.1139.702.3528.2519.651375500.003
30、1.577.6218.500.94II4.80104.203.9839.952.0527.3518.401288000.0030.937.1917.480.95III4.65104.854.0138.601.9027.2017.651235500.0030.547.3117.530.99平均4.70b104.70b4.03a39.42c2.10b27.60b18.57b1299666.67ab31.01b7.37a17.84b0.96aCI4.40101.053.7240.921.2524.2515.701570000.0026.015.4214.130.90II4.5098.103.7641
31、.951.1523.5514.201420000.0028.966.2214.851.05III4.5597.853.6141.301.2026.6014.401440000.0024.395.8012.410.86平均4.48b99.00b3.70b41.39b1.20c24.80c14.77c1476666.67b26.45c5.82b13.80c0.93aDI4.5586.203.6441.800.7525.1312.301599000.0021.935.129.360.76II4.6590.403.5742.950.6523.4012.351605500.0023.115.569.58
32、0.78III4.4082.753.6741.900.5023.3511.651514500.0020.584.998.640.74平均4.53b86.45c3.63b42.22b0.63c23.96cd12.10d1573000.00c21.87d5.22bc9.19d0.76bEI4.7590.103.4644.400.5022.4510.251640000.0021.254.906.970.68II4.6082.653.5145.950.4522.159.651544000.0022.514.297.200.75III4.7581.703.5546.430.4523.0010.80172
33、8000.0023.994.607.790.72平均4.70b84.82c3.51c45.59a0.47c22.53d10.23e1637333.33d22.58d4.60c7.32d0.72b方差分析F值7.48899.82255.85674.46946.7372.613103.1548.62136.50747.72197.51620.978p值0.00820.00010.00010.00010.00010.00010.00010.00010.00010.00010.00010.0003注:小寫字母不同表示不同密度下測試指標(biāo)差異達(dá)5%顯著水平 圖 SEQ 圖 * ARABIC 3單株分葉數(shù)
34、圖 SEQ 圖 * ARABIC 4單株葉片數(shù) 圖 SEQ 圖 * ARABIC 5平均葉寬 圖 SEQ 圖 * ARABIC 6株高 圖 SEQ 圖 * ARABIC 7單株側(cè)根數(shù) 圖 SEQ 圖 * ARABIC 8單株須根數(shù)、麥冬數(shù) 圖 SEQ 圖 * ARABIC 9 667麥冬總數(shù) 圖 SEQ 圖 * ARABIC 10單個麥冬重圖 SEQ 圖 * ARABIC 11 單株葉、須根、麥冬重5.2 種植密度對麥冬產(chǎn)量的影響方差分析結(jié)果( REF _Ref107256691 h * MERGEFORMAT 表 7)表明,不同密度之間麥冬667 m2鮮貨和干貨產(chǎn)量均達(dá)顯著水平。進(jìn)一步多重比
35、較表明,667m2密度在10萬株時,產(chǎn)量最高,且與其他密度下產(chǎn)量差異達(dá)顯著水平;密度在7萬株、13萬株、16萬株時,以7萬株密度產(chǎn)量最高,但與另外兩個密度差異不顯著;密度4萬株時產(chǎn)量最低,且與其他密度下差異顯著。由 REF _Ref107256996 h * MERGEFORMAT 圖 12可以看出,鮮貨麥冬產(chǎn)量和干貨麥冬產(chǎn)量變化趨勢一致,均是先升高后降低。從密度4萬到密度7萬的產(chǎn)量上升幅度,大于密度7萬到密度10萬;而密度10萬到13萬的產(chǎn)量下降幅度,大于密度13萬到密度16萬。表 SEQ 表 * ARABIC 7 不同種植密度下麥冬產(chǎn)量及方差分析處理重復(fù)鮮麥冬667m2產(chǎn)量(kg)干麥冬6
36、67m2產(chǎn)量(kg)AI718.02221.68II757.21227.80III736.82242.13平均739.13 c230.54 cBI1003.26328.43II983.28328.17III1040.85302.54平均1007.88 b319.71 bCI1235.77346.42II1176.31380.77III1022.01348.05平均1120.39 a358.41 aDI964.95319.86II1031.18323.32III984.33293.15平均993.49 b312.11 bEI922.63290.31II959.19293.19III946.173
37、12.96平均942.67 b298.82 b方差分析F值19.703028.8230p值0.00030.0001注:小寫字母不同表示不同密度下測試指標(biāo)差異達(dá)5%顯著水平.圖 SEQ 圖 * ARABIC 12 667產(chǎn)量6 小結(jié)研究團(tuán)隊調(diào)研中發(fā)現(xiàn),目前三臺農(nóng)戶麥冬每667m2種植密度從6萬株至11萬株,但大部分集中在7萬株至8萬株,農(nóng)戶反應(yīng)的產(chǎn)量情況也不盡相同。本研究通過標(biāo)準(zhǔn)田間試驗結(jié)果表明,在目前常規(guī)土壤條件和田間管理條件下,每667m2種植密度10萬株產(chǎn)量最高,增產(chǎn)幅度在10%以上,且與其他密度下產(chǎn)量差異顯著,故建議三臺麥冬種植密度在目前基礎(chǔ)上略做提升,根據(jù)實際操作難易程度降低株距或行距
38、,使種植密度達(dá)到10萬株/667 m2左右。隨著密度發(fā)生變化,麥冬產(chǎn)量構(gòu)成因素變化趨勢及麥冬生長生理生化指標(biāo)變化較為復(fù)雜,高密度下,單株麥冬數(shù)量雖然降低,但田塊麥冬總數(shù)持續(xù)上升,因此,如能在增加密度的情況下,增加單個麥冬的重量,將會更好的實現(xiàn)田間群體效應(yīng),從而大幅度提升麥冬產(chǎn)量。建議今后繼續(xù)深入研究密度與肥、水管理之間的關(guān)系,形成增株調(diào)肥、合理管水的新型栽培模式,實現(xiàn)麥冬穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn),徹底杜絕多效唑等生長調(diào)節(jié)劑使用。(三)追肥試驗研究肥料的施用與藥材產(chǎn)量及品質(zhì)密切相關(guān),產(chǎn)地調(diào)研結(jié)合文獻(xiàn)查閱可知,麥冬共追肥四次。第一次為提苗生根肥(6月中旬);第二次為分蘗肥(7月下旬至8月上旬);第三次為塊根膨大肥
39、(9月中下旬至10月上旬);第四次為塊根二次膨大肥(翌年2月中下旬)。其中第三次追肥塊根膨大肥為最重要的一次施肥。同時,調(diào)研結(jié)果顯示,部分種植人員在第三次施肥時大量施用多效唑,既影響麥冬藥材品質(zhì)亦造成了環(huán)境污染,故課題組針對第三次追肥開展大田試驗研究,擬為指導(dǎo)麥冬藥材的綠色科學(xué)種植,提高藥材品質(zhì)提供數(shù)據(jù)支撐。1 試驗地概況試驗地位于四川省三臺縣(北緯:N 30433125、東經(jīng):E 1044310518)的實驗區(qū)為亞熱帶濕潤季風(fēng)型氣候區(qū),年平均氣溫 1617,年平均日照時數(shù)1260h,年均降雨量850900mm,年均無霜期275天,土壤類型為沙質(zhì)土。2 實驗材料本試驗研究所用種苗來自四川省三臺
40、縣涪城麥冬種植區(qū)。氮肥為尿素(陜西城化股份有限公司,總氮46%)、磷肥為過磷酸鈣(四川安縣宏達(dá)化工有限公司,P2O512%)、鉀肥為硫酸鉀(國投新疆羅布泊鉀鹽有限公司,K2O51%)。3 實驗設(shè)計追肥試驗在四川省三臺縣試驗區(qū)開展,試驗設(shè)計包括氮、磷、鉀3個因素、設(shè)計3個水平、共計10個處理。4個肥料水平的含義:2水平指當(dāng)?shù)赝扑]用肥量,1水平(指用肥不足)=2水平0.5,3水平(指過量施肥)=2水平1.5。栽種時間為4月下旬,第一次追肥時間為9月9日,追施追肥總量的60%,第二次追肥10月14日,追施追肥總量的40%。翌年3月下旬采收。試驗小區(qū)面積2平方米,重復(fù)2次。小區(qū)間隔離帶為30 cm,采
41、用隨機區(qū)組實驗設(shè)計。每區(qū)按照每畝80000株的種植密度栽種,田間管理按照常規(guī)方法進(jìn)行。表 SEQ 表 * ARABIC 8 追肥試驗因素水平設(shè)計試驗編號處理N(kg/667m2)P2O5 (kg/667m2)K2O (kg/667m2)1N1P2K29.1018.2023.802N2P1K218.209.1023.803N2P2K218.2018.2023.804N2P3K218.2027.3023.805N2P2K118.2018.2011.906N2P2K318.2018.2035.707N3P2K227.3018.2023.808N1P1K29.109.1023.809N1P2K19.1
42、018.2011.9010N2P1K118.209.1011.90表 SEQ 表 * ARABIC 9 追肥實驗處理設(shè)計追肥編號氮(kg/667m2)磷(kg/667m2)鉀(kg/667m2)第一次(總量的60% )15.25.26.8210.410.413.6315.615.620.4第二次(總量的40% )13.93.95.127.87.810.2311.711.715.34 產(chǎn)量采收后,清洗晾干后稱量每小區(qū)麥冬塊根鮮重,按小區(qū)面積折算畝產(chǎn)。5 結(jié)果與分析追肥實驗結(jié)果見 REF _Ref106902457 h * MERGEFORMAT 表 10,6號處理的產(chǎn)量顯著高于其他處理。表 SE
43、Q 表 * ARABIC 10 追肥實驗產(chǎn)量(x s)編號產(chǎn)量(kg/667m2)編號產(chǎn)量(kg/667m2)1764.1695.25bc6934.91117.16a2792.8449.23abc7730.81152.45c3677.4589.79c8892.8939.36ab4738.5996.56c9759.7284.03bc5767.9461.58bc10797.5171.71abc6 小結(jié)本研究采用大田試驗的方式,針對塊根膨大肥(9月中下旬至10月上旬)進(jìn)行研究;結(jié)果顯示追施 NPK 為施用氮(N)18.2 kg/667m2、磷(P2O5)18.2 kg/667m2、鉀(K2O)35.
44、7 kg/667m2時增產(chǎn)最顯著,即N:P2O5:K2O為1:1:2時,增產(chǎn)最顯著,此追肥肥料配比適宜在生產(chǎn)中推廣使用。(四)根腐病防治研究根腐病為麥冬中最常見的病害之一,發(fā)生時塊根尖端出現(xiàn)紅褐色的斑點,隨后斑點擴大為斑塊,并逐漸水漬狀腐爛,塊根生長停止,藥材干燥后外表仍清晰可見銹狀斑塊,造成麥冬藥材產(chǎn)量下降、品質(zhì)降低。因化學(xué)農(nóng)藥易產(chǎn)生殘留、環(huán)境污染、病原菌抗藥性等諸多問題,故本研究選用生物藥劑進(jìn)行防治。1 試驗材料與方法1.1 試驗基地概況實驗基地一:位于四川省三臺縣(北緯N 30433125 、東經(jīng)E 1044310443)的實驗區(qū)為亞熱帶濕潤季風(fēng)型氣候區(qū),年平均氣溫1617,年平均日照時
45、數(shù)1260 h,年均降雨量850900 mm,年均無霜期275天,土壤類型為潮沙泥土;試驗基地二:位于四川省蓬安縣(北緯N 310819.96 東經(jīng)E 1061657.01)的試驗區(qū)為亞熱帶濕潤季風(fēng)氣候區(qū),年均溫度17.5 ,年均無霜期275天,年均降雨1000 mm,土壤類型為潮沙泥土。1.2 實驗材料本試驗研究所用種苗來自四川省三臺縣涪城麥冬種植區(qū),麥冬種苗均經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室李敏教授鑒定為Ophiopogon japonicus (L.f.) Ker-Gawl.的植株。1.3 試劑微生物菌劑(壽光市綠士達(dá)生物工程有限公司,登記有效菌種名稱:枯草芽孢桿菌,登記技術(shù)指標(biāo):有效活菌
46、數(shù)2.0億/克,產(chǎn)品形態(tài):粉劑);哈茨木霉菌(美國拜沃股份有限公司,有效成分含量:3億CFU/克,劑型:可濕性粉劑)。1.4 試驗方法針對化學(xué)農(nóng)藥極易產(chǎn)生殘留、環(huán)境污染等問題,本研究選擇生物農(nóng)藥對麥冬進(jìn)行根腐病防治,根據(jù)文獻(xiàn)及產(chǎn)地調(diào)研選擇有效成分分別為哈茨木霉菌和枯草芽孢桿菌的生物防治藥劑,實驗設(shè)計詳見 REF _Ref106902577 h * MERGEFORMAT 表 11,使用方式為灌根,每個實驗區(qū)1m2,每種藥劑處理均設(shè)計3次重復(fù)。表 SEQ 表 * ARABIC 11 根腐病防治實驗設(shè)計表編號有效成分用量施用時間YJ1哈茨木霉菌0.6kg/畝9月YJ2枯草芽孢桿菌0.6kg /畝9
47、月CK-注:“-”表示無處理。2 結(jié)果與分析不同試驗處理的防治效果見 REF _Ref106902717 h * MERGEFORMAT 表 12。病情分級標(biāo)準(zhǔn):0級:塊根無紅褐色銹斑;1級:塊根低端或頂端出現(xiàn)紅褐色銹斑;2級:塊根中部出現(xiàn)紅褐色銹斑。病情指數(shù)=(各級樣本數(shù)各級病情級值)/(調(diào)查總樣本數(shù)最高病情級值)100%防治效果(%)=1-(防治區(qū)病情指數(shù)/對照區(qū)病情指數(shù))100%表 SEQ 表 * ARABIC 12 不同試驗處理的防治效果(x s,n=3)編號有效成分發(fā)病率(%)病情指數(shù)防治效果(%)YJ1哈茨木霉菌61.87 2.07b50.335.9424.728.88bYJ2枯草
48、芽孢桿菌42.81 3.30c36.365.2045.617.79aCK-77.49 1.19a66.851.88-注:“-”表示無數(shù)據(jù)。實驗結(jié)果表明:對比CK組的發(fā)病率情況,哈茨木霉菌試驗組的發(fā)病率降低了15.62%,枯草芽孢桿菌試驗組的發(fā)病率降低了34.68%,使用兩種生物農(nóng)藥均能顯著降低麥冬根腐病的發(fā)病率;防治效果為枯草芽孢桿菌試驗組顯著高于哈茨木霉菌試驗組。3 小結(jié)麥冬根腐病會導(dǎo)致塊根出現(xiàn)紅褐色銹斑,嚴(yán)重者甚至?xí)仕疂n狀壞死腐爛,嚴(yán)重影響藥材的品質(zhì)。對麥冬根腐病進(jìn)行防治研究為避免化學(xué)農(nóng)藥易產(chǎn)生的殘留、環(huán)境污染、病原菌抗藥性等諸多問題,本研究選用生物藥劑進(jìn)行防治,篩選出主要有效成分為枯草
49、芽孢桿菌的生防藥劑每畝施用0.6kg對麥冬根腐病防治效果較優(yōu)并顯著降低發(fā)病率。(五)麥冬采收期研究采收期是影響中藥材產(chǎn)量與質(zhì)量的重要環(huán)節(jié),麥冬在實際生產(chǎn)中采收時間較長,質(zhì)量變化規(guī)律不明確。故課題組考察不同時期,麥冬藥材的產(chǎn)量與質(zhì)量變化,擬為麥冬藥材采收期的確定提供數(shù)據(jù)支撐。1 材料與方法試驗地位于四川省綿陽市三臺縣蘆溪鎮(zhèn),屬川麥冬傳統(tǒng)產(chǎn)區(qū)。2 材料來源麥冬種苗為四川麥冬主產(chǎn)區(qū)三臺縣栽培品種川麥冬1號,經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)李敏教授鑒定為百合科沿階草屬植物麥冬Ophiopogon japonicus(L.f.)Ker-Gawl.。3 方法采用隨機區(qū)組試驗設(shè)計,小區(qū)面積2 m2(三個平行),設(shè)置不施用多
50、效唑處理(設(shè)定為N組)和施用多效唑(設(shè)定為D組)兩個處理,多效唑處理按照3kg/667m2畝噴施(9月27日),其他管理同大田生產(chǎn)。當(dāng)年10月1日開始至翌年4月30日,每間隔710日連續(xù)采樣,供后續(xù)研究。采用“S”采樣法隨機樣15株,洗凈、剪取塊根,分別稱量單株塊根鮮重,并計算平均單株塊根鮮重,于電熱烘箱干燥(60)后分別測定單株塊根干重,計算平均單株塊根干重。根據(jù)每畝8萬株的種植密度,產(chǎn)量計算公式如下:產(chǎn)量(kg/667m2)=單株塊根重(kg)81044 產(chǎn)量分析麥冬產(chǎn)量見 REF _Ref107257506 h * MERGEFORMAT 表 13,由 REF _Ref106902927
51、 h * MERGEFORMAT 圖 13、 REF _Ref106902934 h * MERGEFORMAT 圖 14可以看出,N組麥冬塊根從11月中旬開始膨大至4月上旬結(jié)束,其間產(chǎn)量逐漸升高,到3月中旬達(dá)到高峰,從3月開始產(chǎn)量呈現(xiàn)動態(tài)平衡。D組麥冬塊根膨大時間較N組提前了1個月,但其產(chǎn)量的提升速率相對較慢,產(chǎn)量從10月份開始至3月初呈持續(xù)增大趨勢,從3月開始產(chǎn)量呈現(xiàn)動態(tài)平衡。表 SEQ 表 * ARABIC 13 不同采收時間的麥冬產(chǎn)量編號采收時間N組D組鮮重/kg干重/kg鮮重/kg干重/kg110月1日/43.27.2210月9日/71.211.2310月18日/83.210.441
52、0月26日/153.618.4511月02日/236.828.0611月06日/198.428.8711月14日5.60.8200.826.4811月26日8.02.4262.435.2912月04日152.826.4242.441.61012月13日93.619.2157.628.81112月20日138.429.6198.440.81212月27日157.639.2340.864.0131月04日192.844.0312.860.0141月10日210.454.4297.644.8151月20日264.884.8274.453.6161月27日308100361.668.8172月05日4
53、13.6115.2449.6114.4182月13日488119.2504.8120192月27日508127.2541.6153.6203月06日596128658.4160.8213月16日610.4130.4642.4166.4223月23日548133.6680.8163.2233月30日586.4132653.6167.2244月13日615.2128.8701.6161.6254月20日567.2133.6671.2159.2264月28日599.2130.4668166.4圖 SEQ 圖 * ARABIC 13 N組麥冬不同時期產(chǎn)量變化圖 SEQ 圖 * ARABIC 14 D組
54、麥冬不同時期產(chǎn)量變化5 質(zhì)量檢測方法5.1麥冬總皂苷含量測定總皂苷按照中國藥典2020年版一部麥冬項下含量測定方法進(jìn)行測定。5.2麥冬總黃酮含量測定參考文獻(xiàn)測定總黃酮含量的方法,進(jìn)行優(yōu)化。(1)對照品溶液制備:取橙皮苷對照品配置成0.2 mg/mL的對照品溶液(精密稱定橙皮苷對照品20 mg,加甲醇溶解并定容至100 mL,作為對照品溶液。)精密量取對照品溶液0.1 mL、0.2 mL、0.4 mL、0.5 mL、0.6 mL、0.8 mL分別置10 mL的容量瓶中稀釋并定容。(2)麥冬供試品溶液制備:取麥冬粉末3 g,精密稱定,加甲醇50 mL,靜置24 h,超聲(20kHz,500W)提取
55、1 h,濾過,濾渣加甲醇20 mL繼續(xù)超聲提取30 min,抽濾,加甲醇溶解并定容至100 mL,再精密量取0.5 mL,加甲醇稀釋并定容至10 mL。以甲醇為空白,在285 nm條件下測定吸光度。5.3麥冬總多糖含量測定參考文獻(xiàn)測定總多糖含量的方法,進(jìn)行優(yōu)化。(1)對照品溶液制備:取105 干燥至恒重的無水果糖對照品配制成每1 mL含無水果糖1.0 mg的對照品溶液(精密稱取干燥恒重的果糖對照品10 mg,加水溶解并定容至10 mL,作對照品溶液)。精密量取對照品溶液0.4 mL、0.6 mL、0.8 mL、1 mL、1.2 mL、1.4 mL、1.6 mL分別置10 mL容量瓶定容,吸取對
56、照品試液各1 mL,置于10 mL具塞試管中,于冰浴中精密加入蒽酮-硫酸(精密稱取20 mg蒽酮固體,加入10 mL水,邊攪拌邊加入30 mL濃硫酸(A.R.),現(xiàn)配現(xiàn)用)顯色劑4 mL,混勻,冰浴30 min后,用最大吸收波長625 nm測定吸光度。(2)麥冬供試品溶液制備條件:取麥冬粉末0.5 g,精密稱定,置錐形瓶中,加95 乙醇80 mL,水浴加熱回流1 h,趁熱濾過,殘渣用95 熱乙醇洗滌3次,每次10mL,將殘渣及濾紙置燒瓶中,加水80 mL,沸水浸提1.5 h,趁熱濾過,殘渣及錐形瓶用熱水洗滌2次,每次10 mL,合并濾液與洗液,放冷,轉(zhuǎn)移至1000 mL量瓶中(轉(zhuǎn)入100 mL
57、容量瓶,取5 mL轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶),加水至刻度,搖勻。精密吸取1 mL至具塞試管中,于冰浴中精密加入蒽酮-硫酸顯色劑4 mL,混勻,冰浴30 min 后,于625 nm條件下測定吸光度。5.4麥冬皂苷成分含量測定5.4.1色譜條件色譜柱為Kromasil 100-5 C18柱(4.6 mm250 mm,5 m);流動相為乙腈(A)-水(B),梯度洗脫:045 min,35%55 %A,體積流量1.0 mL/min;柱溫35 ,漂移管溫度100 ,氣體流速3.0 L/min;進(jìn)樣量15 L。5.4.2溶液制備(1)混合對照品溶液制備:精密稱定麥冬皂苷D、麥冬皂苷D、Ophiopojapo
58、nin C、3-O-L-鼠李糖-(12)-葡萄糖麥冬苷元、去乙?;鵒phiopojaponin A 5種對照品9.90、5.30、4.40、8.40、3.90 mg,加甲醇超聲溶解并定容至25 mL,制成濃度分別為0.396、0.212、0.176、0.336、0.156 mg/mL的對照品供試溶液。(2)麥冬供試品溶液制備:取麥冬粉末(過4號篩)3 g,精密稱定,加甲醇50 mL,超聲提取45 min,過濾,濾渣加甲醇30 mL,超聲提取30 min,抽濾,合并濾液,回收溶劑至干,殘渣加水15 mL使溶解,用水飽和正丁醇振搖提取5次,每次15 mL,合并正丁醇液,用氨試液洗滌2次,每次5 m
59、L,棄去氨液,正丁醇液蒸干。殘渣用甲醇溶解并定容至5 mL,0.45 m濾膜濾過,濾液即為麥冬樣品供試溶液。5.5麥冬黃酮成分含量測定5.5.1色譜條件色譜柱為Comatex C18柱(4.6 mm250 mm,5 m);流動相為乙腈:水(58:42),體積流量1.0 mL/min;柱溫30,檢測波長296 nm,進(jìn)樣量20 L。5.5.2溶液制備(1)混合對照品溶液制備條件 精密稱定甲基麥冬高黃酮A、麥冬甲基黃烷酮A和甲基麥冬二氫高異黃酮B 3種對照品9.98、10.02、9.86mg,加甲醇超聲溶解并定容至25mL,制成濃度分別為0.3392、0.4008、0.3944 mg/mL的對照品
60、溶液。(2)麥冬供試品溶液制備條件 取麥冬粉末(過4號篩)3.0 g,精密稱定,加甲醇50 mL,靜置24 h,超聲(20kHz,500W)提取45 min,過濾,濾渣加甲醇30 mL,超聲提取30 min,過濾,合并濾液,回收溶劑至12 mL,轉(zhuǎn)入5 mL容量瓶中,洗滌34次,洗滌液一并轉(zhuǎn)入容量瓶中,定容至刻度,0.45 m濾膜濾過,濾液即麥冬供試品溶液。6 含量測定結(jié)果與分析6.1大類成分含量測定結(jié)果見 REF _Ref106903315 h * MERGEFORMAT 表 14。表 SEQ 表 * ARABIC 14 麥冬大類成分含量(%)編號采收時間N組D組總皂苷總黃酮總多糖總皂苷總黃
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