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1、100100血清立接膽紅素測定.實驗原理在PH3左右、有表面活性劑和間接反應膽紅素抑制劑 的條件下,樣品中的直接膽紅素容易被磯酸鹽氧化成 膽綠素,而間接膽紅素不能。在450nm (膽紅素吸收 峰)處監(jiān)測反應。磯酸鹽氧化前后吸光度的下降與樣 品中膽紅素的濃度成正比。由此可計算出樣品中直接 膽紅素濃度。.標本:病人準備:無特殊要求。最好用禁食的標本以減少乳 糜血的干擾。類型:血清、肝素或EDTA血漿,應避光保存。.標本存放:1525保存可穩(wěn)定2天;28保存可穩(wěn)定 7天;-20保存可穩(wěn)定3個月,如冰凍保存,不可反復凍融!。.標本運輸:常溫條件下避光保存運輸。.標本拒收標準:標本溶血、細菌污染、脂血、
2、非避光保 存運輸?shù)臉吮尽?實驗材料試劑:上海歐泰克直接膽紅素試劑盒6.L 1試劑組成 酒石酸鹽緩沖液mmol/L表面活化劑I適量磷酸鹽緩沖液10mmol/L磯酸鈉鹽4mmol/L試劑準備:試劑為即用式。試劑穩(wěn)定性與貯存:試劑避光保存于28C,若無污 染,可穩(wěn)定至失效期。試劑有效期為18個月。試劑2必需避 光保存。試劑不可冰凍。變質(zhì)指示:當試劑有濁度時,表明有細菌污染,不能 繼續(xù)使用。注意事項:此試劑為體外診斷用。警告!腐蝕劑!不 要入口。避免和眼睛,皮膚或衣服接觸。如果接觸到,立即 用大量的水沖洗受損害的部位15分鐘。接觸到眼睛或吞服, 立即尋找醫(yī)療保護。6.2校準品:使用羅氏復合校準品對自動
3、分析儀進行校 準,參見生化檢驗校準品和質(zhì)控品.SOP文件. 3質(zhì)控品:參見生化檢驗校準品和質(zhì)控品.SOP文件.儀器:日立7060生化分析儀.操作步驟項目基本參數(shù):參見生化檢驗日立7060生化分析儀項目測定參數(shù).SOP文件儀器操作步驟:參見生化檢驗日立7060生化分析儀操作 規(guī)程.SOP文件 檢驗結果的判斷與分析10.質(zhì)量控制:在每一批標本中都應把非定值血清水平I與 H質(zhì)控做為未知標本進行分析,以2s為質(zhì)控警告限,3s為失控限,繪制質(zhì)控圖,判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見生化室室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程SOP文件。11.計算方法11.計算方法以羅氏復合校準品校準儀器后,在病人結果可報告范圍內(nèi),儀器直接報告可靠的
4、檢測結果,無需手工計 算,以umol/L報告。.參考值范圍:06. 8 umol/L.臨床意義:膽紅素是血紅蛋白的降解產(chǎn)物。游離膽紅素 非極性很強,幾乎不溶解于水。在血液中與白蛋白形成復合 物由脾臟向肝臟運輸。在肝臟中,膽紅素與葡萄糖醛酸結合, 生成可溶性膽紅素葡萄糖醛酸酯由膽管排入腸道。溶血(肝前黃疸)、實質(zhì)的肝損傷(肝性黃疸)和膽管 堵塞(肝后黃疸)都會導致血液膽紅素增高,形成高膽紅素 血癥。人群中常見先天性慢性高膽紅素血癥,稱為Gilbert 綜合癥。由于膽紅素降解酶的功能滯后以及出生后紅細胞破 碎增多,使6070%的嬰兒血液出現(xiàn)總膽紅素增高。常用的 膽紅素檢測方法能檢測總膽紅素和直接膽紅素。直接膽紅素的測定主要檢測水溶性的結合膽紅素,因此可以根據(jù)總膽紅 素和直接膽紅素的差來估計游離膽紅素的含量。.線性范圍:1.7684 umol/L15超出范圍結果處理15超出范圍結果處理本法線性上限為
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