血脂以及血漿脂蛋白檢驗(yàn)

1、關(guān)于血脂及血漿脂蛋白檢驗(yàn)1第一張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2血脂、血漿脂蛋白及載脂蛋白檢驗(yàn)的重要性 動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis, AS) 冠心病（CHD）等心、腦血管疾病 血脂代謝異常 第二張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3第三張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月4臨床常規(guī)血脂和脂蛋白測(cè)定項(xiàng)目:總膽固醇（totalcholesterol，TC，包括FC和CE）甘油三酯(TG)高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)低密度脂蛋白膽固醇(LDL- C)載脂蛋白等。第四張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月5第一節(jié) 概述第二節(jié) 血脂、脂蛋白及載脂蛋白測(cè)定本章內(nèi)容概

2、要第五張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月6一、血脂及血漿脂蛋白 血脂：是血漿中脂類（脂質(zhì)）物質(zhì)的總稱。包括中性脂肪（甘油三酯TG）和類脂（膽固醇Ch、膽固醇酯CE 、磷脂、糖脂、游離脂肪酸）。 定義： 脂蛋白：脂類難溶于水，正常血漿脂類物質(zhì)與蛋白質(zhì)結(jié)合成脂蛋白的形式運(yùn)輸和代謝 。 第一節(jié) 概 述第六張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月7（一）血漿脂蛋白的分類 超速離心法：乳糜微粒 CM極低密度脂蛋白 VLDL低密度脂蛋白 LDL高密度脂蛋白 HDL電泳法:密度從低到高脂蛋白前脂蛋白-脂蛋白乳糜微粒（CM）電泳速度由慢到快中間密度脂蛋白 IDL脂蛋白(a) Lp(a) 第七張，PPT共

3、八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月8原點(diǎn) 2 1 清蛋白血漿蛋白電泳 原點(diǎn) 前（CM）血漿脂蛋白電泳第八張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月9（二）血漿脂蛋白的組成與結(jié)構(gòu)血漿脂蛋白脂類：蛋白質(zhì)：甘油三酯、磷脂、膽固醇、膽固醇酯載脂蛋白第九張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月10 CM 乳糜微粒 VLDL 前脂蛋白 LDL 脂蛋白 HDL 脂蛋白密度0.950.951.0061.0061.0631.0631.210組成脂類蛋白質(zhì)主要生理功能9899%最少, 1%9095%510%含膽固醇及其酯最多含脂類50%2025%最多，約50%轉(zhuǎn)運(yùn)外源性TG轉(zhuǎn)運(yùn)內(nèi)源性TG轉(zhuǎn)運(yùn)膽固醇到肝外組織逆向轉(zhuǎn)運(yùn)肝外膽

4、固醇回肝含TG最多 TG多 （次于CM）7580%各種血漿脂蛋白的組成及功能第十張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月11（三）載脂蛋白脂蛋白的蛋白部分稱為載脂蛋白(apolipoprotein，Apo) 定義：種類： 第十一張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月12apoA apo B apoC apo D apoE B48 B100 C-, E B100A-, CM VLDLLDLHDL第十二張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月13功能： 與脂質(zhì)的親和作用而使脂質(zhì)溶于水性介質(zhì)中。運(yùn)轉(zhuǎn)膽固醇和甘油三酯。作為脂蛋白外殼的結(jié)構(gòu)成分，與脂蛋白外生物信息相聯(lián)系。以配體的形式作為脂蛋白與特異受

5、體的連接物。（如：apoB100和apoE參與LDL受體的識(shí)別；apoE能被CM受體識(shí)別）激活某些與血漿脂蛋白代謝有關(guān)的酶類（如：ApoAI和CI能激活卵磷脂-膽固醇?；D(zhuǎn)移酶LCAT，ApoC激活LPL） 第十三張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月14分布及特點(diǎn)： 第十四張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月15（四）脂蛋白受體定義： 脂蛋白受體是一類位于細(xì)胞膜上的糖蛋白。它能以高度的親和方式與相應(yīng)的脂蛋白配體作用，從而介導(dǎo)細(xì)胞對(duì)脂蛋白的攝取與代謝，進(jìn)一步調(diào)節(jié)細(xì)胞外脂蛋白的水平。 第十五張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月16脂蛋白受體的作用： 位于各種細(xì)胞的膜上，脂蛋白轉(zhuǎn)化分解后

6、的殘基主要通過(guò)脂蛋白受體被攝入細(xì)胞。不僅是運(yùn)送脂蛋白至細(xì)胞所必需，也是從血和外周組織中有效清除具有潛在致動(dòng)脈粥樣硬化的脂蛋白所必需的。 種類： 已有很多種，主要有LDL受體、殘粒受體（remnant receptor）及清道夫受體（scavenger receptor）其它有ApoE受體（CM）HDL受體和-VLDL受體等。第十六張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月17LDL受體：分布于肝細(xì)胞、動(dòng)脈壁平滑肌細(xì)胞等細(xì)胞膜表面識(shí)別結(jié)合ApoB100、E的脂蛋白如LDL、VLDL等。合成受體內(nèi)膽固醇的負(fù)反饋調(diào)節(jié)各種脂蛋白受體功能殘粒受體： 分布在代謝活躍的心肌、骨骼肌、脂肪等組織細(xì)胞。 識(shí)別、結(jié)

7、合含ApoE的脂蛋白如CM殘粒和-VLDL殘粒清道夫受體： 存在于巨噬細(xì)胞表面 識(shí)別、結(jié)合修飾的LDL（氧化型LDL和-VLDL）第十七張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月18（五）脂代謝有關(guān)的酶類與特殊蛋白質(zhì)酶：LPL、肝脂肪酶（HL或HTGL）、LCAT、HMG-CoA還原酶 參與TG分解、FC合成和酯化第十八張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月19脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白定義： 血漿中脂蛋白部分含有一種特殊的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，能促進(jìn)血漿各脂蛋白間膽固醇酯、甘油三酯和磷脂的單向或雙向轉(zhuǎn)運(yùn)和交換，這類特殊轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白稱脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（lipid transfer protein,LTP）。 組成：膽固醇酯轉(zhuǎn)運(yùn)

8、蛋白（CETP）：可將LCAT催化生成的膽固醇酯由HDL轉(zhuǎn)移至VLDL、IDL和LDL中，在膽固醇的逆向轉(zhuǎn)運(yùn)中起關(guān)鍵作用 磷脂轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（PTP）：可促進(jìn)磷脂由CM、VLDL轉(zhuǎn)移至HDL 甘油三酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（TTP）：在富含TG的VLDL和CM組裝和分泌中起主要作用蛋白質(zhì)：第十九張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月20（一）CM的代謝來(lái)源：由小腸粘膜細(xì)胞合成，經(jīng)淋巴入血。 代謝過(guò)程：二、血漿脂蛋白代謝第二十張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月21 功能：轉(zhuǎn)運(yùn)外源性TG。正常人CM在血漿中代謝迅速，半衰期為5-15分鐘，故正常人空腹12-14h后血漿中不含CM。第二十一張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)

9、作于2022年6月22（二）VLDL 及LDL的代謝來(lái)源：VLDL主要由肝細(xì)胞合成，分泌入血，少量來(lái)自小腸；LDL是在血漿中由VLDL轉(zhuǎn)變而來(lái)代謝過(guò)程：第二十二張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月23功能： VLDL轉(zhuǎn)運(yùn)內(nèi)源性TG ；LDL轉(zhuǎn)運(yùn)膽固醇到肝外組織第二十三張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月24（三）HDL的代謝來(lái)源：主要由肝細(xì)胞合成，此外，小腸也可合成少量，還有血漿中CM、VLDL 脂解過(guò)程中所釋放的磷脂、膽固醇及apo也可產(chǎn)生新生的HDL。代謝過(guò)程：第二十四張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月25功能：將膽固醇從肝外組織轉(zhuǎn)運(yùn)到肝進(jìn)行代謝（逆向轉(zhuǎn)運(yùn)）。第二十五張，PP

10、T共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月26三、脂蛋白代謝紊亂（一）高脂蛋白血癥（多見）定義： 高脂血癥（hyperlipidemia，HLP）是指血漿中膽固醇和（或）甘油三酯濃度異常升高。血漿脂類以血漿脂蛋白形式存在，因此，高脂血癥一般指高脂蛋白血癥（hyperlipoproteinemia）。 近年來(lái)，已逐漸認(rèn)識(shí)到血漿中HDL降低也是一種脂代謝紊亂。 成人空腹1214h血清（漿）TG2.26mmol/L(200mg/dl)，膽固醇6.21mmol/ L (240mg/dl) ，兒童膽固醇4.14mmol/ L (160mg/dl)LDL：與動(dòng)脈粥樣硬化和冠心病呈正相關(guān)HDL：與動(dòng)脈粥樣硬化和冠心病

11、呈負(fù)相關(guān)VLDL：與動(dòng)脈粥樣硬化和冠心病呈正相關(guān)第二十六張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月271.按表型分類 主要是基于各種血漿脂蛋白升高的程度不同而進(jìn)行分型。該分類法不包括病因?qū)W，故稱表型分類。 分型：第二十七張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月28（罕見）（罕見）（常見）（常見）（極常見）（罕見）CM帶明顯脂蛋白明顯增高前及脂蛋白均增高前及脂蛋白帶融合，寬而濃染的“寬帶”前脂蛋白明顯增高CM帶明顯，前脂蛋白增高或透明CM殘粒及VLDL殘粒（IDL）第二十八張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月292.按是否繼發(fā)于全身性疾病分類 繼發(fā)性高脂血癥： 原發(fā)性： 繼發(fā)性者由一些全身性疾

12、病引起血脂異常，如糖尿病、腎病綜合征、腎功能衰竭、甲狀腺功能減退癥、肝膽疾病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、肥胖癥、飲酒等。此外，某些藥物如-受體阻斷劑、降壓藥等也可引起血脂異常。 在排除繼發(fā)性高脂血癥后，可診斷為原發(fā)性。已知部分原發(fā)性高脂血癥由先天性基因缺陷所致 第二十九張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月303.高脂血癥的基因分型法 表10-5 家族性高脂血癥的臨床特征常 用 名基因缺陷臨床特征表型分類家族性高膽固醇血癥L LDL受體缺陷以膽固醇升高為主，可伴輕度甘油三酯升高，LDL明顯增加，可有肌腱黃色瘤，多有冠心病和高脂血癥家族史。ab家族性Apo B100缺陷癥 ApoB100缺陷同上同上家族

13、性混合型高脂血癥不清楚膽固醇和甘油三酯均升高，VLDL和LDL都增加，無(wú)黃色瘤，家族成員中有不同型高脂蛋白血癥，有冠心病家族史。b家族性異常脂蛋白血癥ApoE異常膽固醇和甘油三酯均升高，乳糜微粒和VLDL殘粒以及IDL明顯增加，可有掌皺黃色瘤，多為Apo E2（2/2）表型。家族性高甘油三酯血癥不清楚以甘油三酯升高為主，可有輕度膽固醇升高，VLDL明顯增加。第三十張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月31（二）低脂蛋白血癥 一般將血清TC3.3mmol/L，或TG0.45mmol/L，或LDL-C2.1mmol/L者，稱為低脂蛋白血癥。脂質(zhì)如TC和TG同時(shí)降低或脂蛋白如HDL、LDL和VLD

14、L同時(shí)降低多見。定義：原因：因某種原因使脂蛋白合成減少，另外分解代謝旺盛也可導(dǎo)致。分類：原發(fā)性和繼發(fā)性第三十一張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月32第二節(jié) 血脂、脂蛋白及載脂蛋白測(cè)定TC測(cè)定TG測(cè)定HDL-C測(cè)定LDL-C測(cè)定Lp（a）測(cè)定ApoAI測(cè)定ApoB測(cè)定脂蛋白電泳分析其他測(cè)定： 有關(guān)的蛋白質(zhì)、酶和受體測(cè)定血清或血漿外觀（血清/漿靜置試驗(yàn)） 血清脂質(zhì)和脂蛋白檢測(cè)的分析程序及項(xiàng)目選擇第三十二張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月33血脂測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)化：血脂分析前變異來(lái)源于：生物因素，如年齡、性別、種族等因素的個(gè)體差異。生活方式，包括飲食習(xí)慣、吸煙、運(yùn)動(dòng)及應(yīng)激等。臨床方面包括疾病或藥

15、物引起的脂代謝改變。血標(biāo)本采集與處理方面 準(zhǔn)確測(cè)定應(yīng)從分析前的準(zhǔn)備開始，包括受試者的準(zhǔn)備，標(biāo)本采集，合格的試劑、校準(zhǔn)物的選用，檢測(cè)方法選擇。 方法學(xué)上應(yīng)該采用美國(guó)疾病控制中心（CDC）或中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)分會(huì)推薦的操作方法。 第三十三張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月34抽血前應(yīng)有兩周時(shí)間保持平常的生活習(xí)慣，近期內(nèi)體重穩(wěn)定，無(wú)急性病、外傷、手術(shù)等意外情況，24小時(shí)內(nèi)不飲酒，禁食12-14小時(shí)，早上空腹、安靜狀態(tài)下采血。 注意事項(xiàng)：（1）檢驗(yàn)前，應(yīng)根據(jù)藥物的特性，盡可能停止用藥數(shù)天或數(shù)周。（2）妊娠前、后期各項(xiàng)血脂都會(huì)增高，產(chǎn)后、終止哺乳3個(gè)月后，才能反映其基本血脂水平。（3）血脂水平有季節(jié)性

16、變動(dòng)，對(duì)于體檢者建議應(yīng)在每年同一季節(jié)檢查。（4）結(jié)合生理和臨床情況，綜合、動(dòng)態(tài)分析檢驗(yàn)結(jié)果。1.受檢者的準(zhǔn)備標(biāo)本采集與處理第三十四張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月352.靜脈采血3.抗凝劑4.標(biāo)本處理除非是臥床的患者，一般在采血時(shí)取坐位。止血帶的使用不可超過(guò)1 min ，穿刺成功后應(yīng)立即松開止血帶，然后抽血。我國(guó)多用血清作血脂分析。如果用血漿，多主張用EDTA 2Na 抗凝標(biāo)本應(yīng)盡快送往實(shí)驗(yàn)室，室溫下放置30 - 45 min 后離心，分離血清。第三十五張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月36血清或血漿外觀（血清/漿靜置試驗(yàn)）第三十六張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月37TC

17、、TG均正常（正常人）TC,TG正常（IIa型）TC,TG（IIb型）TC N/,TG（I型）TC,TG（III型/V型）TC,TG（ IIb型/III型）TC N/ ,TG （IV型）TGCMVLDLCM及VLDL血清（漿）靜置試驗(yàn) 將患者空腹12h后采集靜脈血分離出血清置4冰箱中過(guò)夜，然后觀察其分層現(xiàn)象及清澈度。 第三十七張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月38第三十八張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月39第三十九張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月40TC測(cè)定TG測(cè)定HDL-C測(cè)定LDL-C測(cè)定第四十張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月41血清（漿）總膽固醇（TC）測(cè)定

18、化學(xué)法酶法 血清中TC包括CE和FC， 其中CE占70，F(xiàn)C占30。第四十一張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月42（一）化學(xué)測(cè)定法（直接法和間接法）1.膽固醇與醋酐 硫酸試劑產(chǎn)生藍(lán)綠色L B反應(yīng)： Liberman發(fā)現(xiàn)膽固醇在硫酸、醋酐溶液中顯色， Burchard用此反應(yīng)測(cè)定膽固醇稱為L(zhǎng)-B反應(yīng)。（條件要求嚴(yán)格、試劑腐蝕性強(qiáng)、對(duì)FC與CE的顯色強(qiáng)度不一致、呈色不穩(wěn)定 ） Abell法（ALBK法）：公認(rèn)的參考方法皂化（KOH乙醇溶液水解CE成為FC）、抽提（正己烷或石油醚提取FC）、顯色（L-B反應(yīng)）。2.膽固醇與高鐵 硫酸試劑產(chǎn)生穩(wěn)定的紫紅色Zak反應(yīng)： Zak提出用硫酸、醋酸和Fe

19、3+等與膽固醇作用生成紫紅色化合物來(lái)測(cè)定膽固醇，稱為Zak反應(yīng)。 （比L-B反應(yīng)的靈敏度高，呈色穩(wěn)定不需要皂化，反應(yīng)特異性差）3.膽固醇與鄰苯二甲醛 硫酸試劑生成穩(wěn)定的紫紅色 第四十二張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月43CEH-COD-PAP法 原理： CEH2O FCFFA FCO2 4-膽甾烯酮H2O2 H2O24-AAP苯酚 醌亞胺H2O 試劑：膽固醇酶測(cè)定法的試劑中，除了上述三種酶、酚和4-氨基安替比林外，還有維持pH恒定的緩沖液、膽酸鈉、表面活性劑以及穩(wěn)定劑等。膽酸鈉是為了提高膽固醇酯酶的活性，表面活性劑的作用是促進(jìn)膽固醇從脂蛋白中釋放出來(lái) 500nm(二)酶測(cè)定法(常規(guī)方法

20、）第四十三張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月44評(píng)價(jià)：優(yōu)點(diǎn)：特異性好，精密度和靈敏度都能很好地滿足臨床實(shí)驗(yàn)室的要求，操作簡(jiǎn)便，試劑無(wú)腐蝕性，手工和自動(dòng)分析皆可，終點(diǎn)法與速率法皆可。 缺點(diǎn)：某些膽固醇酯酶對(duì)膽固醇酯的水解不完全，不能用純膽固醇結(jié)晶以有機(jī)溶劑配制的溶液作為TC分析的校準(zhǔn)液，而應(yīng)以準(zhǔn)確定值的血清作為標(biāo)準(zhǔn)。 表面活性劑，如吐溫-40可以干擾膽固醇酯酶的作用，而聚乙烯醇6000可使結(jié)果提高12； 本法具有氧化酶反應(yīng)途徑的共同缺陷，易受到一些還原性物質(zhì)如尿酸、膽紅素、維生素C和谷胱甘肽等的干擾。 第四十四張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月45 血清總膽固醇合適范圍：5.20mm

21、ol/L (200mg/dl)，邊緣升高：5.235.69mmol/L(201219mg/dl)，升高：5.72mmol/L (220mg/dl)。參考范圍：第四十五張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月46 TC除了作為高膽固醇血癥的診斷指標(biāo)之外，不能作為其它任何疾病的診斷指標(biāo)，對(duì)于動(dòng)脈粥樣硬化和冠心病而言，TC是一個(gè)明確的危險(xiǎn)因子，與冠心病的發(fā)病率呈正相關(guān)。臨床意義：高TC血癥：原發(fā)和繼發(fā) （了解） 低TC血癥：原發(fā)和繼發(fā) （了解） 第四十六張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月47TC測(cè)定TG測(cè)定HDL-C測(cè)定LDL-C測(cè)定第四十七張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月48血清（漿

22、）甘油三酯（TG）測(cè)定化學(xué)法酶法第四十八張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月49基本操作：（一）化學(xué)測(cè)定法1、抽提：用有機(jī)溶劑抽提標(biāo)本中的TG，并去除磷脂等干擾物質(zhì)2、皂化：用堿（ KOH ）水解（皂化 ）TG生成甘油3、氧化：以過(guò)碘酸氧化甘油生成甲醛4、顯色：用顯色反應(yīng)對(duì)甲醛定量（變色酸、乙酰丙酮）Van Handel法（參考方法）氯仿抽提TG、硅酸吸附掉磷脂、KOH皂化、過(guò)碘酸氧化、變色酸顯紫紅色第四十九張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月50(二)酶測(cè)定法1、磷酸甘油氧化酶法（GPO-PAP法）常規(guī)方法原理：第五十張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月51去除FG干擾可用下列方

23、法：1、外空白法：同時(shí)用不含LPL的酶試劑測(cè)定FG 作空白。2、內(nèi)空白法：又稱兩步法或雙試劑法將LPL和4-AAP組成試劑2，其余部分為試劑1。此兩步法目前為中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)分會(huì)推薦方法。特異性和準(zhǔn)確性好，主要缺點(diǎn)是測(cè)定結(jié)果包括血清中的游離甘油（FG） 特點(diǎn)：第五十一張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月52 2乳酸脫氫酶法 原理： TG + 3H2O LPL Glycerol + 3RCOOH Glycerol + ATP GK+Mg2+ G-3-P + ADP ADP + 磷酸烯醇式丙酮酸 丙酮酸激酶 丙酮酸 + ATP丙酮酸+NADH LDH NAD+ + 乳酸 由于反應(yīng)消耗NADH，故

24、可利用NADH在340nm吸光度降低來(lái)測(cè)定甘油三脂的濃度。第五十二張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月53評(píng)價(jià)： 本法結(jié)果準(zhǔn)確，但靈敏度較低，試劑也不太穩(wěn)定。由于血清本身存在游離甘油和丙酮酸等干擾物質(zhì)，所以測(cè)定時(shí)除了要做試劑空白外，還要做標(biāo)本空白（外空白） 第五十三張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月543甘油氧化酶法 第一步： FG + O2 甘油氧化酶 甘油醛+ H2O2 H2O2 + EMAE POD 無(wú)色物質(zhì)消除游離甘油的影響，3-5min后進(jìn)行第二步反應(yīng)：TG + 3H2O LPL Glycerol + 3RCOOHFG + O2 甘油氧化酶 甘油醛+ H2O2H2O2 +4

25、-AAP+ EMAE POD 有色化合物注：EMAE作用與酚相似，是還原劑，但靈敏度比酚高。原理：該法分兩步完成。第五十四張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月55 參考值 血清甘油三酯一般隨年齡增加而升高，體重超過(guò)標(biāo)準(zhǔn)者往往偏高。 合適范圍：1.70mmol/L(150mg/dl)， 升高：1.70mmol/L (150mg/dl)。第五十五張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月56臨床意義 原發(fā)性高TG血癥多有遺傳因素，包括家族性高TG血癥與家族性型高脂（蛋白）血癥等。繼發(fā)性高TG血癥見于糖尿病、糖原累積病、甲狀腺機(jī)能減退、腎病綜合征、妊娠、口服避孕藥、酗酒等。 大量前瞻性的研究證實(shí)，

26、富含TG的脂蛋白是CHD的獨(dú)立的危險(xiǎn)因子，TG增加表明患者存在代謝綜合癥，需進(jìn)行治療。甘油三酯降低比較少見，甲狀腺功能亢進(jìn)、腎上腺皮質(zhì)功能減退和肝功能嚴(yán)重?fù)p傷時(shí)可以見到甘油三酯降低 第五十六張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月57TC測(cè)定TG測(cè)定HDL-C測(cè)定LDL-C測(cè)定第五十七張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月58HDL-C測(cè)定 常以測(cè)定HDL-C含量代表HDL水平。 HDL分離（超速離心、沉淀、層析等）HDL-C測(cè)定（化學(xué)法、酶法） 第五十八張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月59常規(guī)方法: 1磷鎢酸-鎂法 2HDL直接測(cè)定法 （勻相法）參考方法: 超速離心除去VLDL，然

27、后用肝素-Mn沉淀LDL，上清液中的HDL-C用ALBK法測(cè)定。第五十九張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月60磷鎢酸-鎂法此法曾為中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)分會(huì)的推薦方法，目前基層單位還在應(yīng)用，雖不能完全自動(dòng)化，但測(cè)定結(jié)果尚能滿足臨床要求。原理：第六十張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月61HDL直接測(cè)定法 （勻相法）HDL直接測(cè)定法大致分三類，分別是:聚乙二醇/抗體包裹法酶修飾法選擇性抑制法，又稱掩蔽法，目前國(guó)內(nèi)應(yīng)用最多。 最近中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)學(xué)會(huì)血脂專題委員會(huì)推薦勻相法作為臨床實(shí)驗(yàn)室測(cè)定HDL C的常規(guī)方法第六十一張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月62成人：男性1.161.42mmol/

28、L(4555mg/dl)女性1.291.55mmol/L(5060mg/dl) 理想范圍：1.04mmol/L (40mg/dl), 降低：0.91mmol/L (35mg/dl)【參考范圍】【臨床意義】 流行病學(xué)與臨床研究證明，HDL-C與冠心病發(fā)病呈負(fù)相關(guān)，HDL-C低于0.9 mmol/L 是冠心病危險(xiǎn)因素。HDL-C大于1.55mmol/L被認(rèn)為是冠心病的“負(fù)”危險(xiǎn)因素。 HDL-C下降還多見于腦血管病、糖尿病、肝炎、肝硬化病人。高TG血癥往往伴以低HDL-C，肥胖者的HDL-C也多偏低。吸煙可使HDL-C下降，適量飲酒、長(zhǎng)期體力勞動(dòng)和運(yùn)動(dòng)會(huì)使HDL-C升高。第六十二張，PPT共八十頁(yè)

29、，創(chuàng)作于2022年6月63TC測(cè)定TG測(cè)定HDL-C測(cè)定LDL-C測(cè)定第六十三張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月641Friedewald公式法 LDL-CTCHDL-CTG/5（以mg/dl為單位時(shí)），或LDL-CTCHDL-CTG/2.2（以mmol/L為單位時(shí)）。 2聚乙烯硫酸鹽沉淀法 本法并非對(duì)LDL-C作直接測(cè)定，而是用聚乙烯硫酸（PVS）選擇性沉淀血清中LDL，再以血清TC減去上清液（含HDL與VLDL）膽固醇即得LDL-C值。 3直接測(cè)定法:兩類目前各類方法測(cè)定的LDL-C值都包括IDL和LP(a)的chol在內(nèi) LDL-C測(cè)定 常以測(cè)定LDL-C含量代表LDL水平。 第六

30、十四張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月65 LDL-C合適范圍：3.12mmol/L (120mg/dl)， 邊緣升高：3.153.61mmol/L(121139mg/dl) 升高：3.64mmol/L (140mg/dl)。 【參考值】【臨床意義】 LDL-C增高是動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展的主要脂類危險(xiǎn)因素。由于TC水平同時(shí)也受HDL-C水平的影響，所以最好以LDL-C代替TC作為冠心病危險(xiǎn)因素指標(biāo)。美國(guó)國(guó)家膽固醇教育計(jì)劃成人治療專業(yè)組規(guī)定以LDL-C水平作高脂蛋白血癥的治療決策及其需要達(dá)到的治療目標(biāo)。 第六十五張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月66Lp（a）測(cè)定ApoAI測(cè)定Apo

31、B測(cè)定第六十六張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月67脂蛋白(a)測(cè)定 脂蛋白（a）是由特異的載脂蛋白apo(a)與LDL的apoB-100以二硫鍵相連而成,因而脂質(zhì)組成與LDL相似。apo(a)決定 Lp(a)的特異性,是Lp(a)的特異性抗原, apo(a)結(jié)構(gòu)與纖溶酶原(PNG)極為相似,二者有交叉反應(yīng)。apo(a)可以競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合PNG受體或纖維蛋白等大分子，LP（a）攜帶的膽固醇結(jié)合至血管損傷部位，促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化形成，也阻礙血管內(nèi)凝血塊的溶解，它是動(dòng)脈粥樣硬化的一項(xiàng)獨(dú)立危險(xiǎn)因子。第六十七張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月68Lp(a)測(cè)定有兩類方法 一是以免疫化學(xué)原理測(cè)定其

32、所含Apo(a)，結(jié)果以Lp(a)質(zhì)量表示，也有以Lp(a)顆粒數(shù)mmol/L表示的。 另一類方法測(cè)定其所含的膽固醇，結(jié)果以 Lp(a)-C表示。目前大都用免疫學(xué)方法測(cè)定。 第六十八張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月69 正常人群的Lp(a)水平呈明顯的正偏態(tài)分布，大多在200mg/L以下，平均數(shù)在120180 mg/L，中位數(shù)約100mg/L。Lp(a)水平高于醫(yī)學(xué)決定水平（300mg/L），冠心病危險(xiǎn)性明顯增高?！緟⒖贾怠俊九R床意義】 血清Lp(a)水平是動(dòng)脈粥樣硬化性疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,與動(dòng)脈粥樣硬化成正相關(guān)。 第六十九張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月70Lp（a）測(cè)定ApoAI測(cè)定ApoB測(cè)定第七十張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月71血清載脂蛋白測(cè)定免疫化學(xué)法： 單向免疫擴(kuò)散（RID）電免疫分析（如火箭電泳法）放射免疫分析（RIA）酶聯(lián)免疫吸附分析（ELISA）等 早期目前： 目前比較適合于臨床實(shí)驗(yàn)室的是免疫濁度法，包括免疫散射比濁法（INA）和免疫透射比濁法（ITA）。 第七十一張，PPT共八十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月72免疫透射比濁法（ITA）Apo的特異抗體與血清中相應(yīng)的抗原結(jié)合形成抗原抗體免疫復(fù)合物，并形成微細(xì)顆粒，混懸于溶液介