血栓和止血檢驗(yàn)基本方法

1、關(guān)于血栓與止血檢驗(yàn)的基本方法第一張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月教學(xué)要求 1.掌握PT時(shí)間、APTT 、3P試驗(yàn)、FDPs、血漿D-二聚 體等試驗(yàn)的檢測(cè)的原理及臨床意義、正常吸附血 漿、正常血清所含的凝血因子、過敏性紫癜、ITP 、DIC、Even綜合征的概念及臨床表現(xiàn)，過敏性紫 癜的主要過敏原、ITP的診斷標(biāo)準(zhǔn)，血友病診斷和 分型。2.熟悉各型血友病及血管性血友病因子檢測(cè)的意義、 血栓與止血篩選試驗(yàn)的應(yīng)用，過敏性紫癜、ITP、 血友病、DIC、Even綜合征的實(shí)驗(yàn)室檢查。3.了解血小板檢測(cè)、抗凝血酶檢測(cè)、血漿纖溶活性 檢測(cè)和血栓前狀態(tài)檢測(cè)的意義、其他凝血障礙性 疾病的檢驗(yàn)。血液檢驗(yàn)

2、第二張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月血液檢驗(yàn)第一節(jié) 血栓與止血的篩選試驗(yàn)一、一期止血缺陷的篩選試驗(yàn) 臨床上常作的試驗(yàn)：主要有出血時(shí)間（bleeding time，BT）、血小板計(jì)數(shù)（platelet count，PLT）和血塊收縮試驗(yàn)（clot retraction test，CRT）。第三張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月血液檢驗(yàn)二、二期止血缺陷的篩選試驗(yàn) 主要涉及凝血因子和抗凝血物質(zhì)的異常，用于凝血與抗凝血功能篩查的試驗(yàn)較多，常用的有：凝血酶原時(shí)間（prothrombin time，PT）、活化部分凝血活酶時(shí)間（activated partial thromboplast

3、in time，APTT）、試管法凝血時(shí)間（clotting time，CT）。第四張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月(一)血漿凝血酶原時(shí)間測(cè)定（PT）1.原理 在受檢血漿中加入足量組織凝血活酶（即TF）浸出液和和適量Ca2+離子后，血漿凝固所需的時(shí)間稱為血漿PT。血液檢驗(yàn)第五張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月2.參考值 (1)平均為12s1s,男性：11s13.7s； 女性：11s14.3s，超過對(duì)照3s以下為異 常。 (2)PT時(shí)間比值（PTR）=被檢血漿PT（s） /正 常參比血漿PT（s），宜用多份正常血漿PT 的幾何均數(shù)參考值為1.000.15 (3)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比值(

4、INR)=PTRS 參考值因國(guó)際敏感度指數(shù)S而異。血液檢驗(yàn)第六張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月 INR：需先求得所用組織凝血活酶的國(guó)際敏感度指數(shù)S，是所用組織凝血活酶與已知參比品相比較的一個(gè)參數(shù)。是用多份凝血因子水平不同的血漿（包括正常人和口服抗凝劑患者的血漿），用參比品測(cè)得它們的logPT，再用待標(biāo)定的組織凝血活酶測(cè)得它們的logPT，以前者為縱坐標(biāo)，后者為橫坐標(biāo)作圖，經(jīng)回歸求得直線斜率。即待標(biāo)定的組織凝血活酶的S =已知S 斜率。S值越低，試劑對(duì)有關(guān)凝血因子降低的敏感度越高。再按下式求得INR： INR=PTRS血液檢驗(yàn)第七張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月3.臨床意義：

5、是外源性凝血途徑的篩選試驗(yàn)。 (1)PT延長(zhǎng) Vitk缺乏：、統(tǒng)稱為依賴Vitk凝 血因子。Vitk、因子 PT。 抗凝治療，香豆素類抗凝藥物與Vitk化學(xué)結(jié) 構(gòu)相似，競(jìng)爭(zhēng)性拮抗，使PT。 肝?。焊闻K是合成除組織因子（）、鈣（） 及因子外其他因子的主要場(chǎng)所，肝受損凝 血因子合成PT。 先天性凝血因子缺乏癥：、。 抗凝物質(zhì)增多。 (2)PT縮短：常見于血栓前狀態(tài)和血栓性疾病。 血液檢驗(yàn)第八張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月(二)活化部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定 1. 原理：37條件下，以白陶土激活因子和 ，以腦磷脂（部分凝血活酶）代替血小板3 因子，在Ca2+參與下，觀察貧血小板血漿凝固 所需的

6、時(shí)間，即為活化部分凝血活酶時(shí)間 （APTT）。 血液檢驗(yàn)第九張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月2.參考值 男：37s3.3s 女：37.5s2.8s 超過正常對(duì)照10s以上為異常。血液檢驗(yàn)第十張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月3. 臨床意義：是內(nèi)源性凝血系統(tǒng)敏感而簡(jiǎn)便的篩 選試驗(yàn)。 (1)APTT時(shí)間延長(zhǎng)： 內(nèi)源性凝血途徑因子缺乏：、。 外源性凝血途徑因子缺乏：、。 血中抗凝物質(zhì)增多。 (2)APTT時(shí)間縮短：可見于高凝狀態(tài)及血栓形成 性疾病。血液檢驗(yàn)第十一張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月三、纖溶活性的篩查試驗(yàn) 血漿纖溶活性增強(qiáng)的篩查，一般選用能直接或間接檢測(cè)出血漿纖

7、溶酶降解纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物（FDPs）的試驗(yàn)，臨床常用的有：凝血酶時(shí)間（thrombin time，TT）、血漿魚精蛋白副凝固試驗(yàn)（plasma protamine pracoagulation test，3P test）。血液檢驗(yàn)第十二張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月(一)凝血酶時(shí)間測(cè)定1.原理：受檢血漿中加入“標(biāo)準(zhǔn)化”的凝血酶溶液后、血漿凝固所需要的時(shí)間，即為凝血酶時(shí)間。2.參考值：16s18s。超過對(duì)照3s以上為異常。血液檢驗(yàn)第十三張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月 3.臨床意義 (1)TT延長(zhǎng)： 肝素及肝素類抗凝物增多。 FgDP(FbDP)DIC(消耗Fb 或F

8、g)。 先天性纖維蛋白(原)異?；蛉狈ΠY。 (2)TT縮短:極罕見,主要見于某些異常蛋 白血癥如巨球蛋白血癥。血液檢驗(yàn)第十四張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月(二)可溶性纖維蛋白單體試驗(yàn)：3P試驗(yàn)1原理：血漿硫酸魚精蛋白副凝固試驗(yàn)（plasma protamine paracoagulation test,3P test），是在待測(cè)血漿中加入硫酸魚精蛋白,可使可溶性纖維蛋白單體(FM)與FDP(主要是X片段)形成可溶性復(fù)合物解離,游離的FM之間自行聚合呈肉眼可見的纖維絮狀或膠凍狀沉淀。血液檢驗(yàn)第十五張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月2.參考值：陰性3.臨床意義(1)原發(fā)性纖溶時(shí)

9、：陰性。(2)繼發(fā)性纖溶時(shí)早期：陽性。(3)DIC的晚期因FgDP或FbDP（X、Y）被降解為低分子量小碎片（D、E）：陰性。血液檢驗(yàn)第十六張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月(三)血漿D-二聚體檢測(cè) 乳膠顆粒濁度分析法 1.原理：受檢血漿中加入標(biāo)有D-二聚體單抗的膠乳 顆粒懸液，如果血漿中D-二聚體含高于0.5mg/L 時(shí)即可與膠乳顆粒上的抗體結(jié)合，發(fā)生膠乳顆 粒凝集。血液檢驗(yàn)第十七張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月2血漿D-二聚體 是交聯(lián)纖維蛋白降解產(chǎn)物之一，為繼發(fā)纖溶特有的代謝物。血液檢驗(yàn)第十八張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月 纖維蛋白（原）降解過程及產(chǎn)物 凝血酶

10、 XIIIa 纖維蛋白（原） 可溶性纖維蛋白 交聯(lián)纖維蛋白 FPA、FPB （A1-6 ） (B1-14) B1-42 B15-42 A極附屬物多聚體 A極附屬物 A極附屬物 D-二聚體（A、B、C、H） （A、B、C、H） DD/E復(fù)合物 X、Y、D、E X、Y、D、E X、Y、D、E纖溶酶纖溶酶纖溶酶第十九張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月3意義 參考值陰性，在繼發(fā)纖溶時(shí)（DIC）陽性；原發(fā)纖溶時(shí)陰性。常作為鑒別原發(fā)性纖溶與繼發(fā)性纖溶的可靠指標(biāo)，也是溶栓治療的有效觀察指標(biāo)。D-二聚體陽性或增高是診斷DIC的重要依據(jù)之一。第二十張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月第二節(jié) 血管壁

11、(內(nèi)皮)的檢驗(yàn)一、血管性血友病因子檢測(cè)1.原理：血漿中的血管性血友病因子(vWF)是一種多聚體大分子蛋白,血漿濃度為710g/L。vWF具有與膠原、肝素、F輕鏈、GPb/b-a、瑞斯托霉素等結(jié)合的多個(gè)功能區(qū)。因此vWF的分析包括含量、活性、功能、多聚體等多功項(xiàng)檢測(cè)。血液檢驗(yàn)第二十一張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月2參考值：檢測(cè)的方法同其值也不同，一般大于 50%。3. 臨床意義：vWF：Ag檢測(cè)是臨床常用的較為敏感和實(shí)用的試驗(yàn)之一，是研究和診斷vWD 的重要指標(biāo)。(1)減低：見于血管性血友?。╲onillebrand disease .vWD），是vWD的診斷及分型的重要指標(biāo)。(2)

12、增高：vWF是一種急性反應(yīng)蛋白，在很多情況下都可增高，常見于血栓性疾病，如心肌梗死、心絞痛、腦血管病變、腎小球疾病、糖尿病、妊娠高血壓綜合征、大手術(shù)后等。血液檢驗(yàn)第二十二張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月第三節(jié) 凝血因子的檢測(cè)一、血漿纖維蛋白原 1. 原理:Clauss法以凝血酶作用受檢血漿中 纖維蛋白原(Fg)，使其形成纖維蛋白而使 血漿凝固,測(cè)定凝固時(shí)間。纖維蛋白的量 與凝固時(shí)間成負(fù)相關(guān)，檢測(cè)結(jié)果與參比血 漿制成的標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比，可得出纖維蛋白 原的含量。2.正常參考值：24g/L。血液檢驗(yàn)第二十三張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月 3.臨床意義 (1) 增高 機(jī)體感染；毒血

13、癥、肝炎、輕型肝炎、膽囊炎及 長(zhǎng)期局部炎癥 無菌性炎癥：糖尿病、腎病綜合癥、尿毒癥、風(fēng) 濕熱、惡性腫瘤、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等。 糖尿病酸中毒。 心血管疾病：動(dòng)脈硬化癥、腦血栓、血栓靜脈炎、心肌梗塞、放射治療。 婦女經(jīng)期、妊趁晚期、妊高癥及劇烈運(yùn)動(dòng)后。 放療后，灼傷，休克，外科大手術(shù)后，惡性腫瘤 等。 血液檢驗(yàn)第二十四張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月(2)減低 肝臟疾?。郝愿窝住⒏斡不?、急性肝萎縮。 砷、氯仿、四氯化碳中毒均可使纖維蛋白原減 少。DIC：因纖維蛋白原消耗及繼發(fā)性纖溶活性亢進(jìn) 纖維蛋白原呈進(jìn)行性下降。原發(fā)性纖維蛋白原缺乏癥。原發(fā)性纖溶活性亢進(jìn)。惡性貧血及肺、甲狀腺、子宮、前列

14、腺手術(shù)。天門冬酰胺酶治療白血病。監(jiān)控：溶栓治療的監(jiān)控范圍：1.2g/L1.5g/L， 低于1.2g/L時(shí)引起病人出血。 血液檢驗(yàn)第二十五張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月 二、F、F、F、F凝血活性測(cè)定 1.原理：將病人血漿與缺乏因子 ：C ； ： C ；：C ；：C基質(zhì)血漿混合， 作APTT，計(jì)算病人血漿中所含因子含量占 正常人的百分率。 2.優(yōu)點(diǎn)：方法簡(jiǎn)便，可分型。 3.缺點(diǎn)：缺乏因子：C等基質(zhì)血漿，來源 困難。血液檢驗(yàn)第二十六張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月三、 Biggs凝血活酶生成試驗(yàn)1.原理：在試管中，血漿凝血因子、PF3、鈣可形 成凝血活酶(凝血酶原酶)，使正常

15、血漿凝固， 將病人與正常人標(biāo)本進(jìn)行不同組合，測(cè)定凝固 時(shí)間，可檢出病人缺乏何種凝血因子。血液檢驗(yàn)第二十七張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月2.要求 (1)吸附血漿：含、。（注意： 有、無） (2)血清：含、。（注意：有、 無）3.臨床意義 (1)PT正常，可確定是否有：、 、 PF3缺乏或抗凝物質(zhì)存在。 (2)/缺乏的結(jié)果：PT延長(zhǎng)，推測(cè)可能有 缺乏。 (3)/缺乏的結(jié)果：PT延長(zhǎng)，推測(cè)可能有 缺乏。血液檢驗(yàn)第二十八張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月例：推測(cè)凝血因子缺乏的檢測(cè)試驗(yàn) 首先：如PT正常，可除外共同凝血途徑異常，而內(nèi)源性凝血途徑中可能出現(xiàn)了、缺乏。管號(hào) 吸附血漿 血清

16、 時(shí)間 結(jié)果推測(cè) 1 正 + 正 正常 正常 2 病 + 病 延長(zhǎng) 異常 正常：病人有、可能無 3 正 + 病 異常：病人無 正常：病人有、可能無 4 病 + 正 異常：病人無血液檢驗(yàn)第二十九張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月 臨床常用PT、APTT、TT組合，作止血與血栓性疾病的篩選試驗(yàn)：1PT延長(zhǎng)，APTT、TT正常：外源途徑異常， 進(jìn)一步作PT延長(zhǎng)糾正試驗(yàn)鑒別。2APTT延長(zhǎng)，PT、TT正常：內(nèi)源途徑異常， 進(jìn)一步作凝血活酶生成試驗(yàn)。3PT、APTT延長(zhǎng)，TT正常：共同途徑異常， 肝病、vitk。4PT、APTT、TT延長(zhǎng)：抗凝物質(zhì)增多或纖 維蛋白（原）缺乏。血液檢驗(yàn)第三十張，P

17、PT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月 第十四章 血栓與止血檢驗(yàn)的臨床應(yīng)用 第一節(jié) 出血性疾病中的應(yīng)用 一、血栓與止血篩選檢驗(yàn)的應(yīng)用血液檢驗(yàn)第三十一張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月（一）一期止血缺陷篩檢試驗(yàn) 一期止血缺陷：是指血管壁和血小板異常所引起的止血功能缺陷。如臨床出現(xiàn)不同程度的出血時(shí)，篩檢試驗(yàn)可分為以下四種情況： 血液檢驗(yàn)第三十二張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月 出血時(shí)間延長(zhǎng)合并血小板計(jì)數(shù) 減少 正常 增多 血小板增多 血小板減少 某些凝血因子缺乏 血小板功能缺陷 血管性血友病 低(無)纖維蛋白原血癥 原發(fā)性/繼發(fā)性血小板減少癥遺傳性 / 獲得性血小板功能缺陷遺傳性/

18、獲得性vWF缺陷遺傳性/獲得性低(無)纖維蛋白原血癥原發(fā)性/繼發(fā)性血小板增多血液檢驗(yàn)第三十三張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月（二）二期止血缺陷篩檢試驗(yàn) 二期止血缺陷：是指血液凝固和纖溶異常所引起的止血功能缺陷。若臨床出現(xiàn)不同程度的出血時(shí)，篩檢試驗(yàn)分為以下四種情況： 血液檢驗(yàn)第三十四張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月 APTT(N) APTT(N) APTT(A) APTT(A) PT(A) PT(N) PT(N) PT(A) 外源途徑 因子定性 內(nèi)源凝血途徑缺陷 共同途徑缺陷 缺陷 試驗(yàn)陽性 有出血 無出血 因子缺陷癥 (遺傳性/獲得性) 因子缺陷癥 (遺傳性/獲得性)因子、

19、PKHMWK、缺陷癥 (遺傳性/獲得性)因子、缺陷癥 (遺傳性/獲得性)因子、Fg缺陷癥或存在血液凝固調(diào)節(jié)異常同時(shí)檢測(cè)APTT和PT對(duì)二期止血缺陷的應(yīng)用血液檢驗(yàn)第三十五張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月 二、 過敏性紫癜 (P315) （一）概念：本病是一種變態(tài)反應(yīng)性疾病，主要是由于機(jī)體對(duì)某些致敏物質(zhì)（過敏原）發(fā)生變態(tài)反應(yīng)而引起全身性毛細(xì)血管壁的通透性和（或）脆性增加，導(dǎo)致以皮膚和粘膜出血為主要表現(xiàn)的臨床綜合征。好發(fā)于兒童和青年人，并且在20歲以前發(fā) 病率約占80%以上。血液檢驗(yàn)第三十六張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月（二）主要過敏原： 1.感染：細(xì)菌、病毒、和寄生蟲等； 2

20、.食物：魚、蝦、蟹、蛋、奶等； 3.藥物：某些抗生素、鎮(zhèn)痛解熱藥和抗結(jié)核 藥等； 4.其他：花粉、昆蟲叮咬、預(yù)防接種和寒冷 氣候等。血液檢驗(yàn)第三十七張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月 （三）發(fā)病機(jī)機(jī)制：是過敏原通過以下兩種變態(tài) 反應(yīng)引起血管病變。 1.速發(fā)型變態(tài)反應(yīng)：由肥大細(xì)胞所釋放的組織 胺等生物活性物質(zhì)使毛細(xì)血管擴(kuò)張或通透性 增加。 2.抗原抗體復(fù)合物：主要是IgA的復(fù)合物沉積在 毛細(xì)血管壁上從而激活補(bǔ)體引起血管炎癥性 反應(yīng)。 血液檢驗(yàn)第三十八張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月 （四）臨床表現(xiàn)：本病發(fā)病前常有上呼吸道感染的 前驅(qū)癥狀或有相關(guān)的過敏原接觸史。其典型表 現(xiàn)分為以

21、下五型。 1.單純紫癜型：好發(fā)于下肢、關(guān)節(jié)周圍和臀部，紫 癜常呈對(duì)稱分布，大小不等、呈暗紅色。 2.關(guān)節(jié)型：多見于膝、肘、踝、碗等大關(guān)節(jié)，呈游 走性紅、腫、熱、痛。 3.腹型：呈陣發(fā)性腹絞痛或持續(xù)性鈍痛，有壓痛但 無肌緊張，可伴惡心、嘔吐、腹瀉、血便等。 4.腎型：呈不同程度蛋白尿、血尿、管型尿等。 5.混合型：有上述兩型或兩型以上表現(xiàn)者。 血液檢驗(yàn)第三十九張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月 （五）實(shí)驗(yàn)室檢查： 1.血象：白細(xì)胞數(shù)、中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞 可增高，血小板計(jì)數(shù)正常。 2.骨髓象：大致正常，部分病例可有嗜酸性粒細(xì) 胞比值增高。 3.凝血功能檢測(cè)：血小板功能試驗(yàn)、凝血和纖溶

22、 試驗(yàn)均正常。 4.尿液檢測(cè)：部分病人（約占25%50%）腎功能 異常。 5.其他：ESR增快、血清IgA增高。血液檢驗(yàn)第四十張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月三、 特發(fā)性血小板減少性紫癜（一）概念 特發(fā)性血小板減少性紫癜（idiophathic thrombocytopenic purpura， ITP）是一種免疫性血小板破壞過多所致的血小板減少性疾病。 兒童、急性；成人、慢性；女男。血液檢驗(yàn)第四十一張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月 （二）病因及發(fā)病機(jī)理 1免疫因素：病人血清中抗血小板抗體，與血小板 GPb/a結(jié)合單核-巨噬系統(tǒng)清除。 2脾臟：（1）血小板抗體產(chǎn)生部位；（2

23、）結(jié)合抗 體 的血小板破壞部位。 3血小板無效生成：巨核、血小板共同抗原性，抗 體巨核成熟障礙，原位破壞。 血液檢驗(yàn)第四十二張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月（三）臨床表現(xiàn)，發(fā)病前有病毒感染史，起病急， 皮膚大片紫癜、瘀斑，鼻腔、口腔粘膜出 血。也可內(nèi)臟出血，自限性。1急性型：37歲嬰幼兒，紫癜出現(xiàn)前1 3周常 有上呼吸道感染史，起病急驟，常伴發(fā)熱、皮膚紫癜、粘膜和內(nèi)臟出血。2慢性型：青壯年，女男，反復(fù)發(fā)作皮膚紫癜、 口腔刷牙出血，月經(jīng)量過多，內(nèi)臟出血少。反 復(fù)發(fā)作可輕度脾大，貧血。 血液檢驗(yàn)第四十三張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月（四）實(shí)驗(yàn)室檢查1血象：血小板減少（急性2%，正常2%。 血液檢驗(yàn)第六十張，PPT共六十七頁，創(chuàng)作于2022年6月（五）第一屆止血與血栓學(xué)術(shù)會(huì)議標(biāo)準(zhǔn)1存在引起DIC的基礎(chǔ)疾病。2有下列二項(xiàng)以上臨床表現(xiàn)。多發(fā)性出血傾向。不易用原發(fā)病解釋的微循環(huán)衰竭或休克。多發(fā)性微血