工業(yè)微生物與育種學實驗一無菌技術(shù)及培養(yǎng)基的配制

1、工業(yè)微生物與育種學實驗一無菌技術(shù)及培養(yǎng)基的配制主要參考資料微生物學實驗指導：黃秀梨 ，高等教育出版社 ，2002微生物學實驗教程：楊革 ，科學出版社微生物學教程（第2版）：周德慶 ，高等教育出版社，2000工業(yè)微生物實驗操作手冊，諸葛健，輕工出版社，1997。 伯杰士細菌系統(tǒng)發(fā)育手冊、真菌鑒定手冊、酵母鑒定手冊、放線菌鑒定手冊等工具書成績評定單獨設(shè)課，作為一門獨立課程嚴格進行成績考核。本門課程成績評定由平時成績（80%）+實驗理論考試（20%）組成。平時成績包括下列項目：實驗紀律及準備（20）平時實驗操作和技能（25）實驗報告（20）實驗設(shè)計創(chuàng)新能力及其它能力（15）實驗考試為理論與實踐結(jié)合的

2、考試，隨機從題庫中抽取題目，分為：(1)微生物學實驗的基本操作技能，包括根據(jù)菌落形態(tài)鑒別所屬菌類，制片鏡檢，選擇相應(yīng)的配方，配制斜面、平板培養(yǎng)基，包扎滅菌，在培養(yǎng)基上進行分離接種操作等； (2)設(shè)計一個大型綜合實驗的具體實驗方案。相對應(yīng)的考核方法為： (1)由學生從題庫中隨機抽取5道題，現(xiàn)場口頭回答，每題2分力，教師根據(jù)其回答情況評分，一共10分；(2)開卷，在大型綜合實驗，即實驗四進行之前完成，占10分。 實驗安排模塊實驗項目學時備注I培養(yǎng)基的制備6必做微生物的分離純化8必做微生物顯微技術(shù)6必做II曲藥中高溫芽孢菌的分離及初步鑒定12選做釀酒微生物生產(chǎn)特性的檢測12選做窖（曲）房空氣微生物的

3、檢測12選做釀酒酵母的誘變及高乙醇耐受性菌株的篩選12選做四大類型菌DNA的提取及PCR擴增12選做實驗報告內(nèi)容目的要求實驗原理實驗材料實驗步驟結(jié)果與討論1.1 無菌技術(shù)與培養(yǎng)基的制備（1）微生物培養(yǎng)的常用器具及其滅菌（2）培養(yǎng)基配置的一般過程（3）選擇培養(yǎng)基1、 Petri dish（1）微生物培養(yǎng)的常用器具及其滅菌（2）培養(yǎng)基制備的一般程序調(diào)配 過濾 矯正pH 分裝過濾 滅菌（一般121.3，20-30min） 鑒定是否有菌 放入冰箱冷藏備用鑒定是否有菌可將培養(yǎng)基置于37 培養(yǎng)24小時，然后觀察培養(yǎng)基：液體培養(yǎng)基；固體培養(yǎng)基；半固體培養(yǎng)基；固體培養(yǎng)基；半固體培養(yǎng)基；瓊脂實驗室常用培養(yǎng)基肉膏

4、蛋白胨培養(yǎng)基： 牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl5g，瓊脂15-20g，水1000ml，；淀粉瓊脂培養(yǎng)基（高氏1號培養(yǎng)基）： 可溶性淀粉20g，KNO31g，NaCl0.5g，K2HPO40.5g，F(xiàn)eSO40.01g，瓊脂20g，水1000ml，pH7.0-7.2;PDA培養(yǎng)基： 馬鈴薯（去皮）200g，蔗糖或葡萄糖15g，瓊脂15-20g，水1000ml;因高壓之后pH值會下降0.1左右，所以矯正pH時應(yīng)比所需的pH高 e.加棉塞，包裝。待分離的微生物生長，其它微生物的生長被抑制 高溫下培養(yǎng)：分離嗜熱細菌； 培養(yǎng)基中不含N：分離固氮菌； 培養(yǎng)基加抗生素：分離抗性菌；（3）選擇培養(yǎng)基富集培養(yǎng)從自然界中分離到所需的特定微生物特定的環(huán)境條件僅適應(yīng)于該條件的微生物旺盛生長待分離微生物在群落中的數(shù)量大大增加營養(yǎng)和生理條件幾乎可無窮盡組合根據(jù)微生物的特殊要