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1、血液分析儀及其臨床應(yīng)用廣州醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院吳曉蔓功能特點(diǎn):1.多參數(shù)分析;2.精確度高;3.操作簡(jiǎn)易速度快;4.標(biāo)本用血量少;5.自動(dòng)打印結(jié)果;6.具備質(zhì)量控制功能;7.設(shè)置清洗功能;8.報(bào)警功能;9.篩選功能一、檢測(cè)原理(一)細(xì)胞計(jì)數(shù)及體積測(cè)定原理1.阻抗型:血細(xì)胞通過-電阻變化-電脈沖信號(hào)CoWter原理:血細(xì)胞是相對(duì)不良導(dǎo)體,當(dāng)其懸浮于電解質(zhì)溶液中通過檢測(cè)微孔時(shí),會(huì)改變 微孔內(nèi)外原來的恒定電阻,產(chǎn)生電脈沖。脈沖的大?。杭?xì)胞體積;脈沖的數(shù)量:細(xì)胞數(shù)量1.原理及組成(1)檢測(cè)原理:基本結(jié)構(gòu):訊號(hào)發(fā)生器、放大器、甄別器、閾值調(diào)節(jié)器、檢測(cè)計(jì)數(shù)系統(tǒng)、自動(dòng)控制保保護(hù)系 統(tǒng)和電源。血細(xì)胞直方圖:血液
2、分析儀在測(cè)定紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板的多種數(shù)據(jù)的同時(shí),把它們體_積的大小(橫軸)、出現(xiàn)的相對(duì)頻率(縱軸)以坐標(biāo)曲線圖表示出來,形成血細(xì)胞體積分布直 方圖。2.流式細(xì)胞術(shù)加光學(xué)檢測(cè)原理:?jiǎn)蝹€(gè)細(xì)胞通過檢測(cè)區(qū);前向散射光(二)白細(xì)胞分類原理1.電阻抗法白細(xì)胞直方圖:兩個(gè)明顯分離的峰:左峰:小細(xì)胞群(淋巴細(xì)胞:35-90fl ),兩峰之間:中間細(xì)胞群(中間細(xì)胞:90-160fl )的分布。右峰:大細(xì)胞群(粒細(xì)胞:160-450fl )2容量、電導(dǎo)、光散射白細(xì)胞分類法( VCS體積(volume):電阻抗原理;電導(dǎo)卜( conductivity ):采用高頻電磁探針測(cè)量細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)一細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)的比例、
3、細(xì)胞內(nèi)的化學(xué)成份;光散射(scantter ):特別具有對(duì)細(xì)胞顆粒的構(gòu)造和顆粒質(zhì)量的區(qū)別能力,細(xì)胞粗顆粒的光 散射要比細(xì)顆粒強(qiáng)。3阻抗與射頻法通過四個(gè)不同檢測(cè)系統(tǒng)完成:(1)嗜酸性粒細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng):特殊的pH的溶血?jiǎng)┤芙饣蛭s除嗜酸性粒細(xì)胞以外的所有細(xì)(2)嗜堿性粒細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng):(3)淋巴、單核、粒細(xì)胞的檢測(cè)系統(tǒng):采用電阻抗與射頻聯(lián)合檢測(cè)的方式。電阻抗(DC):細(xì)胞大小射頻(RF):核的大小及顆粒的多少。兩個(gè)不同的脈沖信號(hào),以DC信號(hào)為橫坐標(biāo),RF為縱坐標(biāo),把同一個(gè)細(xì)胞定位于二維的細(xì)胞散射圖上。(4)幼稚細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng):原理:幼稚細(xì)胞膜上脂質(zhì)較少。加入硫化氨基酸后,結(jié)合在幼稚細(xì)胞的硫化氨基酸較成熟
4、細(xì)胞多,且對(duì)溶血?jiǎng)┯械挚棺饔?。?dāng)加入溶血?jiǎng)┖?,成熟?xì)胞被溶解,幼稚細(xì)胞不受破壞。4.激光與細(xì)胞化學(xué)法(SCC)1)過氧化物酶檢測(cè)通道Eos-很強(qiáng)的過氧化物酶活性;Neu-較強(qiáng)的過氧化物酶活性;Mon-較弱的過氧化物酶活性;Lym,Bas-無此酶由于酶反應(yīng)強(qiáng)度不同,以X軸為吸光率標(biāo)記(酶反應(yīng)強(qiáng)度), Y軸為光散射(細(xì)胞大小)。每個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生的兩個(gè)信號(hào)結(jié)合定位在細(xì)胞圖上。2)嗜堿性粒細(xì)胞/分葉核檢測(cè)通道5.多角度偏振光散射法術(shù)四個(gè)角度測(cè)定散射光的密度:0。:前角光散射粗略地測(cè)定細(xì)胞大小;10 :狹角光散射測(cè)細(xì)胞結(jié)構(gòu)及其復(fù)雜性;90。:垂直光散射主要對(duì)細(xì)胞內(nèi)部顆粒和細(xì)胞成份進(jìn)行測(cè)量;90 : 90消偏
5、振光散射(70110 )從這四個(gè)角度同時(shí)對(duì)每個(gè)白細(xì)胞進(jìn)行測(cè)量,將白細(xì)胞分為嗜酸粒細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞5種。(三)紅細(xì)胞測(cè)定原理.RBC.Hct :電阻抗法.Hb:比色法:HiCN SLS-Hb.MCV,MCH,MCHC,RD Wf 算(四)Plt測(cè)定原理血小板體積分布直方圖2-20fl 之間。21-30fl之間有少量大血小板,一般儀器以30fl為最大的分析界標(biāo)。(五)網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)原理(六)工作流程以國(guó)內(nèi)使用較多一種為例:該儀器配有二個(gè)小孔管,三個(gè)測(cè)試系統(tǒng)。二、血液分析儀的類型全自動(dòng)和半自動(dòng)分析儀的區(qū)別:-血液在機(jī)外是否需要預(yù)稀釋半自動(dòng)分析儀:需事先稀釋;全自動(dòng)分
6、析儀:機(jī)內(nèi)自動(dòng)稀釋四、臨床應(yīng)用(一)檢測(cè)參數(shù)臨床意義.紅細(xì)胞參數(shù)MCV RDW紅細(xì)胞體積分布寬度臨床意義(red cell volume distribution width RDW)RDM反映紅細(xì)胞體積異質(zhì)性的參數(shù),表示方法為紅細(xì)胞體積大小的變異系數(shù)(CV% o增大時(shí)有臨床意義。1)鑒別缺鐵性貧血和B-珠蛋白合成障礙性貧血:MCV RDW缺鐵性貧血 J TB-珠蛋白合成障礙性貧血J2)用于缺鐵性貧血的診斷與療效觀察:缺鐵性貧血RDWf大;鐵劑治療有效時(shí),RDW匕給藥前更大,以后逐漸降至正常水平。原因:補(bǔ)鐵后產(chǎn)生網(wǎng)織紅細(xì)胞,及正常紅細(xì)胞生成并釋放入血與給藥前的小紅細(xì)胞并存,故RDWE增大,隨著
7、正常紅細(xì)胞的增多和小紅細(xì)胞的減少,RDWg逐漸降至參考范圍3)用于貧血的分類:MCVR能反映紅細(xì)胞平均體積的大小,不能代表紅細(xì)胞體積大小的異質(zhì)性;RDWlg較好地反映紅細(xì)胞體積的異質(zhì)性;MCV RDW吉合用于對(duì)貧血的分類將更為完善。2血小板參數(shù)MPV勺臨床意義(結(jié)合PLT變化)1)PLT 與 MPV骨髓造血功能損傷,MPV減少;血小板破壞增多,MPV曾大;血小板分布異常,MPV正常。2)MPV增大可作為骨髓造血功能恢復(fù)的較早期指征:骨髓造血功能衰竭時(shí),MPV與PLT同時(shí)持續(xù)下降;造血功能抑制越嚴(yán)重,MPV越?。划?dāng)造血功能恢復(fù)時(shí),MPVm大常先于PLT升高。3)其他方面應(yīng)用:MPV曾大:見于骨髓
8、纖維化、原發(fā)T血小板減少性紫瘢(ITP)、血栓性疾病及血栓前狀態(tài)、脾切除、慢粒、巨大血小板綜合征、鐮刀細(xì)胞性貧血等。MPV減?。阂娪谄⒖骸⒒熀?、再障、巨幼細(xì)胞性貧血等。(二)紅細(xì)胞直方圖在貧血中應(yīng)用可鑒別貧血類型1.小細(xì)胞性貧血輕型B 血紅蛋白合成障礙;缺鐵性貧血;鐵粒幼細(xì)胞性貧血輕型B 血紅蛋白合成障礙(輕型 B 一珠蛋白生成障礙性貧血):峰左移,峰底變窄,典 型的小細(xì)胞均一性貧血。缺鐵性貧血治療前:波峰左移,峰底變寬,顯示小細(xì)胞不均一性。缺鐵性貧血治療后:雙峰形鐵粒幼細(xì)胞性貧血:呈典型的“雙峰形”性改變。在缺鐵性貧血經(jīng)治療有效時(shí),也可出現(xiàn)類 似的圖形,但峰底要更寬些葉酸缺乏引起的巨幼細(xì)胞性貧血治療前-波峰右移,峰底增寬,顯示明顯的大細(xì)胞不均一性葉酸缺乏引起的巨幼細(xì)胞性貧血治療后-雙峰形。(三)血小板直方圖的臨床應(yīng)用2-20fl之間。21-30fl之間有少量大血小板,一般儀器以30fl為最大的分析界標(biāo)。血小板體積增大:明顯的拖尾現(xiàn)象。小紅細(xì)胞或紅細(xì)胞碎
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