體外培育牛黃技術(shù)幻燈3課件

1、中藥一類新藥體外培育牛黃技術(shù)研究報(bào)告 武漢大鵬藥業(yè)有限公司 牛黃 乃百草之精華， 為世之神物， 諸藥莫及。 神農(nóng)本草經(jīng) 體外培育牛黃概述 具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的國(guó)家中藥I類新藥體外培育牛黃是我國(guó)科學(xué)家運(yùn)用現(xiàn)代生物及仿生技術(shù)首創(chuàng)的醫(yī)藥原料藥生產(chǎn)技術(shù)。 體外培育牛黃經(jīng)過(guò)處方、工藝、成份、結(jié)構(gòu)、超微結(jié)構(gòu)、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、穩(wěn)定性等一系列藥學(xué)研究和藥效學(xué)、毒理學(xué)、特殊毒理等臨床前十八個(gè)項(xiàng)目的一百多個(gè)指標(biāo)的研究，并進(jìn)行多中心臨床試驗(yàn)研究，表明體外培育牛黃在技術(shù)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)上，完全符合中華人民共和國(guó)藥典（2000版）牛黃項(xiàng)下的要求，其療效和性能非常接近甚至超過(guò)優(yōu)質(zhì)天然牛黃，且有效成份可控，比天然牛黃穩(wěn)定，可工業(yè)化大規(guī)模生

2、產(chǎn). 體外培育牛黃已正式載入2005版中華人民共和國(guó)藥典與天然牛黃的標(biāo)準(zhǔn)完全一致。 國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局文件，國(guó)食藥監(jiān)注200421號(hào)規(guī)定，體外培育牛黃替代天然牛黃等量投料使用。體外培育牛黃機(jī)理結(jié)石機(jī)理 牛黃(膽紅素鈣結(jié)石)形成原因：多種原因造成細(xì)菌性葡萄糖醛酸甙酶和可大量水解結(jié)合型膽紅素為游離膽紅素與葡萄糖醛酸。游離膽紅素與鈣等金屬離子結(jié)合，形成膽紅素鈣鹽顆粒和膽紅素高聚物顆粒，因此膽汁理化性改變了，稱為成石膽汁。這是成石的物質(zhì)基礎(chǔ)。成石膽汁在一定條件下，產(chǎn)生靜電效應(yīng)，高分子有機(jī)物質(zhì)架橋作用，形成膽結(jié)石。 體外培育牛黃機(jī)理工藝路線 (配方) 新鮮牛膽汁-生物牛膽汁-成石牛膽汁- 膽汁核心-

3、成品 生物反應(yīng) 生化過(guò)程 牛黃機(jī)(搖轉(zhuǎn)) 分層培育干燥 調(diào)節(jié)pH體外培育牛黃技術(shù)應(yīng)用膽紅素鈣結(jié)石形成的靜電效應(yīng)原理,將新鮮牛膽汁通過(guò)生物技術(shù)制成成石膽汁，在一定必備的條件下，加入生物成核觸發(fā)物，發(fā)生生物、生化反應(yīng)，使成石膽汁內(nèi)蛋白氫鍵形成，部分蛋白凝固變性，形成核心，其活動(dòng)中心吸引母液中膽紅素鈣鹽顆粒等物質(zhì)，向中心沉淀。以高分子有機(jī)物質(zhì)對(duì)沉淀顆粒的架橋作用，即線型聚合物的功能對(duì)顆粒的吸附作用，層層沉附，逐漸增大，脫水，干燥。形成牛膽結(jié)石，即牛黃成品天然牛黃分析研究不同產(chǎn)地的天然牛黃成分及含量的分析研究參照國(guó)內(nèi)外有關(guān)學(xué)者對(duì)天然牛黃成分含量的分析方法和結(jié)果，對(duì)國(guó)內(nèi)外五個(gè)不同產(chǎn)地的優(yōu)質(zhì)牛黃進(jìn)行了分析

4、研究，其結(jié)果如下:(成分含量（%）) 產(chǎn) 地 澳大利亞牛黃1 西藏牛黃2 京牛黃3 進(jìn)口牛黃1 進(jìn)口牛黃2 水 分 6.9 6.8 7.0 7.0 6.7 灰 分 6.8 6.7 6.9 7.1 6.8 膽 紅 素 36.700.67* 39.621.39* 35.800.55* 29.290.72* 40.900.67* 膽 酸 20.101.48* 15.001.13* 14.900.88* 15.301.03* 17.040.92* 去氧膽酸 6.480.77* 4.900.76* 4.860.75 10.630.86* 7.150.63* 牛 磺 酸 6.420.49* 5.920.7

5、3* 6.250.78* 4.660.74* 6.460.55* 膽 固 醇 4.801.09* 5.451.08* 5.790.72* 10.550.41* 4.400.66* 磷 脂 1.750.38* 1.700.39* 1.900.38* 1.300.41* 2.960.37* 無(wú) 機(jī) 鹽 3.36 3.58 3.45 3.73 2.96 氨 基 酸 0.655 0.633 0.748 0.565 0.688 糖 蛋 白 1.74 2.05 2.59 1.99 2.06 合 計(jì) 95.70 92.35 90.19 92.62 97.37體外培育牛黃成分分析研究體外培育牛黃成分含量的分析

6、研究通過(guò)對(duì)體外培育牛黃處方、制備工藝及其原理的研究，對(duì)所生產(chǎn)出的產(chǎn)品成分含量的研究分析如下:(成分含量（%）) 批 號(hào) 901102 901128 901220 910220 920418 水 分 7.1 6.9 7.0 6.9 7.0 灰 分 7.3 7.2 7.2 7.0 7.1 膽 紅 素 35.580.62*3 36.610.66* 37.370.90 36.870.67* 37.960.82 膽 酸 14.450.50* 16.900.59* 16.900.59* 16.850.60* 16.360.99* 去氧膽酸 6.800.48* 6.790.40* 6.610.55* 6.6

7、00.40* 6.800.68* 牛 磺 酸 6.480.66* 6.700.44* 6.720.46* 6.830.48* 6.700.44* 膽 固 醇 5.950.29* 5.201.16* 5.000.40* 5.100.71* 5.300.41* 磷 脂 1.770.30* 1.800.62* 1.880.25* 1.880.36* 1.750.15* 無(wú) 機(jī) 鹽 3.68 3.40 3.35 3.43 3.28 氨 基 酸 0.788 0.695 0.698 0.670 0.762 糖 蛋 白 2.57 2.26 2.43 2.49 1.98 合 計(jì) 92.47 94.46 95.

8、16 94.62 95.26 * n=12 * n=6相關(guān)儀器檢測(cè)對(duì)比性研究體外培育牛黃、天然牛黃相關(guān)儀器檢測(cè)對(duì)比性研究紅外光譜分析結(jié)果：天然牛黃與體外培育牛黃在1730-1350cm-1區(qū)間，均有膽紅素鹽及膽紅素高聚物質(zhì)的特征峰。傅立葉變換紅外分光光譜儀分析結(jié)果：體外培育牛黃與天然牛黃均見(jiàn)1690cm-1為羧酸類；1629-1565cm-1為酰胺類；1404cm-1為羥基類。高效液相色譜分析結(jié)果：膽酸、去氧膽酸對(duì)照品的圖譜與體外培育牛黃、天然牛黃中的膽酸、去氧膽酸一致。薄層色譜分析結(jié)果：體外培育牛黃、天然牛黃色譜中，在與膽酸、去氧膽酸對(duì)照品相應(yīng)的位置上顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。微量元素含量測(cè)定結(jié)

9、果：體外培育牛黃與天然牛黃的微量元素及其含量均一致。氨基酸含量測(cè)定結(jié)果：體外培育牛黃與天然牛黃含有相同的17種氨基酸。項(xiàng) 目品 名體外培育牛黃天 然 牛 黃人工牛黃粉性 狀外 觀棕黃色球、類球形、質(zhì)輕、松、脆 直徑0.5-3cm棕黃色球、類球形、質(zhì)輕、松、脆 直徑0.5-3cm無(wú)形狀、粉末、淺黃色斷 面斷層金黃色，有同心層紋結(jié)構(gòu)斷層金黃色，有同心層紋結(jié)構(gòu)無(wú)結(jié)構(gòu)氣 味氣香、味苦而后甜氣香、味苦而后甜微腥，微苦顯 微觀 察光 鏡10 倍取少許粉末加50%甘油乙醇液裝片，鏡下見(jiàn)絮狀、團(tuán)絮狀棕色膽紅素鈣顆粒取少許粉末加50%甘油乙醇液裝片，鏡下見(jiàn)絮狀、團(tuán)絮狀棕色膽紅素鈣顆大量淀粉顆粒，呈圓形、多面形掃

10、 描電 鏡呈網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，網(wǎng)孔7-350u呈網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，網(wǎng)孔7-350u含 量膽 紅素35%以上35%以上0.7%膽 酸12%以上7%以上12.5%去氧膽酸5%以上4%以上豬去氧膽酸15% 體外培育牛黃、天然牛黃、人工牛黃比較表 三種牛黃比較表游離膽紅素含量對(duì)比性研究 體外培育牛黃、天然牛黃游離膽紅素含量對(duì)比性研究游離膽紅素含量對(duì)比表批 號(hào) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 平均值天然牛黃 4.420 3.238 2.026 3.703 4.300 4.50 3.36 2.756 1.294 1.27 3.82 3.153體外培育牛黃 0.500 0.500 0.490 0.630 0

11、.670 0.622 0.550 0.526 0.480 0.460 0.532 0.544HPLC指紋圖譜的比較研究體外培育牛黃與天然牛黃HPLC指紋圖譜的比較研究研究?jī)?nèi)容：根據(jù)牛黃所含化學(xué)成分，我們分別對(duì)以下主要成分進(jìn)行研究： 氨基酸、肽類 (蛋白質(zhì)) 膽汁酸類 膽紅素類。微量元素 擬定以下樣品前處理方法：酸水用于檢測(cè)氨基酸、肽類成分；酸水/醇用于檢測(cè)膽汁酸類成分；二甲亞砜用于檢測(cè)膽紅素類成分 1）、10批體外培育牛黃酸水提取液HPLC-MS TIC疊加圖譜10批體外培育牛黃酸水提取液HPLC-MS TIC圖譜有很好的一致性圖 譜HPLC指紋圖譜的比較研究2、 4批天然牛黃與1批體外培育牛

12、黃酸水提取液HPLC-MS TIC疊加圖譜l顯然，不同產(chǎn)地的天然牛黃酸水提取液HPLC-MS TIC圖譜各主要膽汁酸的比例有一定差異圖 譜HPLC指紋圖譜的比較研究3）、10批體外培育牛黃酸醇提取液中有紫外吸收成分的HPLC疊加圖譜顯然，10批體外培育牛黃酸醇提取液中有紫外吸收成分的HPLC圖譜有很好的一致性圖 譜HPLC指紋圖譜的比較研究 4）、4批天然牛黃與1批體外培育牛黃酸醇提取液中有紫外吸收成分的HPLC疊加圖譜 （2天然牛黃，13西牛黃，14巴西牛黃，15印度牛黃）天然牛黃與體外培育牛黃比較，有紫外吸收成分的種類基本一致，但相對(duì)含量有差異圖 譜HPLC指紋圖譜的比較研究5）、10批體

13、外培育牛黃二甲亞砜提取液HPLC疊加圖譜顯然，10批體外培育牛黃二甲亞砜提取液的HPLC圖譜有較好的一致性圖 譜HPLC指紋圖譜的比較研究6）、4批天然牛黃與1批體外培育牛黃二甲亞砜提取液HPLC疊加圖譜 （ 6天然牛黃， 16巴西牛黃， 17西牛黃，18印度牛黃）。天然牛黃與體外培育牛黃比較，二甲亞砜提取液中成分種類基本一致，但相對(duì)含量稍有差異圖 譜HPLC指紋圖譜的比較研究HPLC指紋圖譜的比較研究 結(jié) 論：1、 體外培育牛黃與天然牛黃三個(gè)提取部位（包括酸水、酸醇和二甲亞砜提取液）的成分種類均基本一致，但含量有差異。2 、10批體外培育牛黃三個(gè)提取部位（包括酸水、酸醇和二甲亞砜提取液）的H

14、PLC指紋圖譜有較好的一致性，說(shuō)明體外培育牛黃的工藝是穩(wěn)定的。 天然牛黃與體外培育牛黃質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比分析類項(xiàng)體外培育牛黃（國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)）牛黃（藥典2000版）來(lái)源本品為以?？苿?dòng)物牛的新鮮牛膽汁液,配成成石膽汁,在體外培育所得的牛膽紅素鈣結(jié)石。本品為?？苿?dòng)物牛干燥的膽結(jié)石。宰牛時(shí)，如發(fā)現(xiàn)有牛黃，即濾去膽汁，將牛黃取出，除出外部薄膜，陰干。性狀呈球形、類球形，直徑0.5-3cm，表面光滑，呈黃紅色至棕黃色，體輕，質(zhì)松脆，有同心層紋。氣香，味苦而后甘，有清涼感，嚼之易碎，不粘牙。呈卵形、類球形，直徑0.6-3（4.5）cm，表面黃紅色至棕黃色，體輕，質(zhì)松脆，有同心層紋。氣香，味苦而后甘，有清涼感，嚼之

15、易碎，不粘牙。鑒別粉末加清水調(diào)和，涂于指甲，能將指甲染成黃色。加清水調(diào)和，涂于指甲上，能將指甲染成黃色。顯微鑒別呈正反應(yīng)顯微鑒別呈正反應(yīng)膽紅素鑒別呈正反應(yīng)膽紅素鑒別呈正反應(yīng)膽酸鑒別呈正反應(yīng)膽酸鑒別呈正反應(yīng)去氧膽酸鑒別呈正反應(yīng)去氧膽酸鑒別呈正反應(yīng)無(wú)無(wú)檢查按藥典附錄水份測(cè)定法測(cè)定不得過(guò)9.0%按藥典附錄水份測(cè)定法測(cè)定不得過(guò)9.0%游離膽紅素吸收度不得超過(guò)0.70無(wú)含量測(cè)定按藥典測(cè)定薄層掃描法膽酸含量不得少于6.0%。按藥典薄層掃描法測(cè)定膽酸含量不得少于4.0%。按藥典分光光度法測(cè)定膽紅素含量不得少于35.0%。按藥典分光光度法測(cè)定膽紅素含量不得少35.0%。功能主治清心，豁痰，開竅，涼肝，息風(fēng)，解

16、毒。用于熱病神昏，中風(fēng)痰迷，驚厥抽搐，癲癇發(fā)狂，咽喉腫痛，口舌生瘡，癰腫疔瘡。清心，豁痰，開竅，涼肝，息風(fēng)，解毒。用于熱病神昏，中風(fēng)痰迷，驚厥抽搐，癲癇發(fā)狂，咽喉腫痛，口舌生瘡，癰腫疔瘡。用法用量0.15-0.35g。多入丸散用；外用適量，研末敷患處。0.15-0.35g。多入丸散用；外用適量，研末敷處。貯藏置陰涼干燥處，遮光，密閉保存，防潮防壓。遮光，密閉，置陰涼干燥處，防潮，防壓。 天然牛黃與體外培育牛黃質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比分析 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比分析(一)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比分析（二）天然牛黃與體外培育牛黃質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比分析（2005版藥典） 天然牛黃與體外培育牛黃質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：完全一致主要藥效學(xué)對(duì)照性研究體外培育

17、牛黃、天然牛黃主要藥效學(xué)對(duì)照性研究抗炎作用：表明ICCB對(duì)急性炎癥的滲出和白細(xì)胞的趨化均有抑制作用。ICCB的抗炎作用強(qiáng)度與天然牛黃相近。解熱作用：ICCB對(duì)酵母所致大鼠的發(fā)熱及對(duì)傷寒副傷寒三聯(lián)疫苗致家兔發(fā)熱均有顯著的抑制作用，其作用強(qiáng)度與天然牛黃相似。中樞抑制作用：ICCB對(duì)安鈉咖致小鼠驚厥，嗎啡致小鼠豎尾反應(yīng)有明顯的對(duì)抗作用，以上作用強(qiáng)度均與天然牛黃相近。人工牛黃粉則無(wú)上述中樞抑制作用 抗菌作用： ICCB能顯著降低感染金黃色葡萄球菌小數(shù)的死亡率。 一般藥理對(duì)照性研究體外培育牛黃、天然牛黃一般藥理對(duì)照性研究對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響：ICCB具有鎮(zhèn)靜、抗驚厥作用，無(wú)鎮(zhèn)痛作用。TPN對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)

18、的作用與天然牛黃相同。對(duì)心血管系統(tǒng)的影響：ICCB能明顯降低大鼠的血壓，但不影響心率的心電圖。這一作用與天然牛黃一致。對(duì)呼吸系統(tǒng)的影響：ICCB和天然牛黃對(duì)大鼠的呼吸頻率和幅度均無(wú)明顯影響。體外培育牛黃耐缺氧、中樞神經(jīng)作用的研究體外培育牛黃的主要藥效集中反映在中樞作用方面：除了前述抗驚厥、鎮(zhèn)靜、解熱作用外，還有耐缺氧、清除自由基，保護(hù)腦細(xì)胞，保護(hù)心功能的作用。（1）體外培育牛對(duì)小鼠密閉缺氧耐受力的影響組別動(dòng)物數(shù)劑量給藥途徑成活時(shí)間XSD（min）NS1020ml/Kgig31.042.88ICCB10800mg/Kgig37.572089*ICCB101200 mg/Kgig39.542.70

19、*ICCB101600 mg/Kgig40.023.06*PPN1020 mg/Kgig38.012.95*:p0.001體外培育牛黃耐缺氧、中樞神經(jīng)作用的研究組別動(dòng)物數(shù)劑量給藥途徑SOD(Nu/mgprc) XSD腦肝血清心NS920ml/Kgig31.2010.7980.0010.79115.5726.1960.449.29ICCB101200 mg/Kgig39.90507*94.6814.8*203.1623.73*69.878.71*: p0.005 *: p0.01（3）體外培育牛對(duì)缺氧小鼠的腦、心、肝組織及血清MDA含量的影響組別動(dòng)物數(shù)劑量給藥途徑MDA nmol/mg(XSD)

20、腦心肝血清NS920ml/Kgig5.900.98.451.968.761.906.890.71ICCB101200 mg/Kgig4.7011*5.511.4*7.291.5*5.201.02*: p0.05 *: p0.01 *: p0.001（2）體外培育牛對(duì)缺氧小鼠的血清及腦、心、肝組織勻漿SOD活性影響 體外培育牛黃耐缺氧、中樞神經(jīng)作用的研究（4）缺氧小鼠腦組織超微結(jié)構(gòu)改變之電鏡所見(jiàn)對(duì)照組治療組神經(jīng)元細(xì)胞水腫，胞漿內(nèi)細(xì)胞器不同程度變性，線粒體腫脹，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張，核糖體數(shù)量減少，部分膠質(zhì)細(xì)胞核周積液，胞漿空亮，細(xì)胞器溶解，部分有髓神經(jīng)纖維的髓鞘結(jié)構(gòu)紊亂，部分無(wú)髓神經(jīng)纖維腫脹，呈大小不

21、等泡狀，神經(jīng)絲消失，見(jiàn)局限性神經(jīng)纖維溶解灶。毛細(xì)血管管徑不等，內(nèi)皮細(xì)胞腫脹，胞漿內(nèi)空泡增多，大部分毛細(xì)血管周圍見(jiàn)積液性間隙。僅少量神經(jīng)元細(xì)胞輕微變性。線粒體輕度腫脹，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)無(wú)明顯擴(kuò)張。核糖體數(shù)量基本正常，少數(shù)膠質(zhì)細(xì)胞核周間隙增寬，有髓及無(wú)髓神經(jīng)纖維的髓鞘結(jié)構(gòu)規(guī)則。毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞無(wú)明顯腫脹，毛細(xì)血管周圍無(wú)積液性間隙。體外培育牛黃耐缺氧、中樞神經(jīng)作用的研究體外培育牛黃急性、長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)體外培育牛黃急性毒性試驗(yàn)從急性毒性試驗(yàn)結(jié)果可以看出，體外培育牛黃給予小鼠和大鼠口服后的急性毒性很低。小鼠口服TPN的LD50為9.0（8.0-10.1）g/kg，是人口服用量（0.3g或5mg/kg）的1800

22、倍。大鼠口服TPN的LD50大于10g/kg，是人口服用量的2000倍以上。體外培育牛黃長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)在長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)中，大鼠耐受TPN1500mg/kg達(dá)35天，犬耐受TPN500mg/kg達(dá)33天。結(jié)果表明TPN長(zhǎng)期口服大鼠和犬各系統(tǒng)的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能無(wú)不良影響，而且用藥組動(dòng)物的體重增長(zhǎng)均高于對(duì)照組。體外培育牛黃致突變、染色體畸變?cè)囼?yàn)體外培育牛黃致突變?cè)囼?yàn)體外培育牛黃在本試驗(yàn)條件下，從定性的標(biāo)準(zhǔn)和平皿摻入試驗(yàn)的觀測(cè)結(jié)果，其對(duì)各受試菌株引起的回復(fù)菌落數(shù)均未超過(guò)對(duì)照組自發(fā)突變菌落數(shù)的2倍，表明試驗(yàn)結(jié)果為陰性顯示體外培育牛黃對(duì)組氨酸缺陷型沙門氏菌無(wú)明顯的致回復(fù)突變作用。培養(yǎng)細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn)在體外培

23、育牛黃的劑量分別為1.0、10.0和100ug/ml的試驗(yàn)條件下，對(duì)人外周血淋巴細(xì)胞誘發(fā)的染色體細(xì)胞畸變率增加與溶劑對(duì)照組比較，均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差別意義，試驗(yàn)結(jié)果為陰性，表明在試驗(yàn)條件下，對(duì)人外周血淋巴細(xì)胞染色體無(wú)明顯的致畸變性作用。體外培育牛黃對(duì)小鼠微核、生殖毒性試驗(yàn)體外培育牛黃對(duì)小鼠微核試驗(yàn)體外培育牛黃的劑量為50、150、500mg/kg體重的試驗(yàn)條件下，對(duì)小鼠的骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核率未引起顯著增加，表明體外培育牛黃未呈現(xiàn)明顯的致突變性作用。生殖毒性試驗(yàn)本試驗(yàn)條件下，體外培育牛黃對(duì)大鼠的生殖行為和能力、著床數(shù)及著床后胚胎存活數(shù)、存活胎仔的生長(zhǎng)發(fā)育等方面均未觀察到不良影響；對(duì)存活的胎仔亦未

24、見(jiàn)有明顯的致畸作用。體外培育牛黃食品安全性評(píng)價(jià)體外培育牛黃食品安全性評(píng)價(jià)： 根據(jù)食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序與方法對(duì)體外培育牛黃的食品安全性毒理學(xué)進(jìn)行了第一二階段的檢驗(yàn)。結(jié)果顯示其通過(guò)食品安全性毒理學(xué)第一、第二階段的檢驗(yàn)。 根據(jù)食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序與方法對(duì)體外培育牛黃的食品安全性毒理學(xué)進(jìn)行了大鼠90天喂養(yǎng)試驗(yàn)，結(jié)果顯示其結(jié)果為陰性。臨床對(duì)比性研究體外培育牛黃與天然牛黃單劑和復(fù)方制劑II、III期臨床對(duì)比性研究總結(jié)用體外培育牛黃及以其為原料藥的復(fù)方制劑治療中風(fēng)、乙腦、急性咽炎、牙周炎、癤腫病人共1852例，療效良好，與優(yōu)質(zhì)天然牛黃無(wú)差異（見(jiàn)附表）；臨床試驗(yàn)表明體外培育牛黃無(wú)明顯毒副作用。（注:I

25、CCB:體外培育牛黃, NN:天然牛黃 ）II、III期臨床試驗(yàn)共1852例治療結(jié)果： 組別 藥名 病名 總例數(shù) 愈顯率（%） 總有效率（%） 治療組 安宮牛黃丸（ICCB） 乙腦 182 93.95 99.45 對(duì)照組 安宮牛黃丸（NN） 乙腦 78 88.46 97.43 治療組 單味（ICCB） 乙腦 124 92.74 99.20 對(duì)照組 單味（NN） 乙腦 41 75.60 87.80 治療組 安宮牛黃丸（ICCB） 中風(fēng) 248 47.98 84.78 對(duì)照組 安宮牛黃丸（NN） 中風(fēng) 148 47.97 84.93 治療組 單味（ICCB） 中風(fēng) 95 37.9 86.30 對(duì)照

26、組 單味（NN） 中風(fēng) 32 32.25 80.60 治療組 片仔癀（ICCB） 急性咽炎 416 75.50 96.64 對(duì)照組 片仔癀（NN） 急性咽炎 102 80.38 97.06 治療組 單味（ICCB） 牙周炎 148 90.54 99.32 對(duì)照組 單味（NN） 牙周炎 39 84.61 94.87 治療組 單味（ICCB） 癤腫 110 76.36 96.36 對(duì)照組 單味（NN） 癤腫 39 66.67 94.87國(guó)家藥典委員會(huì)意見(jiàn) 國(guó)家藥典委員會(huì)國(guó)藥典字200364號(hào)關(guān)于盡快解決牛黃系列產(chǎn)品在中成藥處方中合理使用問(wèn)題的請(qǐng)示國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局： 今年以來(lái)，我們受局委托，對(duì)

27、牛黃系列產(chǎn)品在中成藥處方中使用問(wèn)題，組織有關(guān)專家進(jìn)行了多次研討論證。在6月份就牛黃與人工牛黃使用問(wèn)題形成明確意見(jiàn)和建議的基礎(chǔ)上，在9月及10月份又分別組織中醫(yī)藥專家就體外培育牛黃、培植牛黃在中藥制劑中使用的有關(guān)問(wèn)題進(jìn)行了研究論證，現(xiàn)將其會(huì)議紀(jì)要一并上報(bào)。 我委綜合了各專家意見(jiàn)，希望我局盡快予以解決牛黃、體外培育牛黃、培植牛黃及人工牛黃在中成藥處方中合理使用的問(wèn)題，以確保人民群眾用藥需求，促進(jìn)中醫(yī)藥的可持續(xù)發(fā)展，推動(dòng)醫(yī)藥高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)化，為我國(guó)醫(yī)藥衛(wèi)生的健康發(fā)展做出新的貢獻(xiàn)。 附：關(guān)于體外培育牛黃與培植牛黃應(yīng)用問(wèn)題會(huì)議紀(jì)要 二00三年十一月十四日關(guān)于體外培育牛黃與培植牛黃應(yīng)用問(wèn)題會(huì)議紀(jì)要（一） 受

28、國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局委托，國(guó)家藥典委員會(huì)于2003年9月19-20日，在武漢組織召開了“體外培育牛黃在中藥成方制劑中使用有關(guān)問(wèn)題研討會(huì)”。王永炎、周超凡、高學(xué)敏、張伯禮、季紹良、姚達(dá)木等十名著名中醫(yī)藥專家參加了會(huì)議。國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)司呂藥處麻廣霖同志以及武漢市藥監(jiān)局的領(lǐng)導(dǎo)亦參加了會(huì)議。 會(huì)議由藥典委員會(huì)中藥處錢忠直處長(zhǎng)主持，周福成副秘書長(zhǎng)扼要介紹了藥品標(biāo)準(zhǔn)工作情況并對(duì)開好這次會(huì)議提了要求。會(huì)上，聽取了體外培育牛黃發(fā)明人蔡紅嬌教授關(guān)于體外培育牛黃的研制過(guò)程、臨床試驗(yàn)、藥理作用、單味藥材與牛黃質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中所含成分的對(duì)比、臨床對(duì)照，以及與幾個(gè)含牛黃成分的中藥成方制劑的臨床對(duì)照（如片仔癀、安

29、宮牛黃丸、牛黃解毒片等）的試驗(yàn)結(jié)果介紹。廣州中醫(yī)藥大學(xué)賴世隆教授詳細(xì)介紹了II期和III期臨床驗(yàn)證情況。江蘇中康新藥指紋圖譜開發(fā)公司的盛龍生研究員介紹了用指紋圖譜對(duì)體外培育牛黃與天然牛黃主要化學(xué)成分的研究成果。 會(huì)議期間，代表們還就體外培育牛黃的全部生產(chǎn)流程進(jìn)行了實(shí)地參觀考察并作進(jìn)一步了解。 會(huì)議由王永炎院士和高學(xué)敏教授分別擔(dān)任專家組組長(zhǎng)。經(jīng)認(rèn)真討論，與會(huì)專家一致認(rèn)為：體外培育牛黃工藝成熟，質(zhì)量穩(wěn)定，安全有效，與牛黃可以等同使用。另外，藥典委員、中科院陳可冀院士雖未能到會(huì)，但特地提交了書面意見(jiàn)，亦與各專家意見(jiàn)一致。我們認(rèn)為: 一、在中藥成方制劑的處方中，凡含牛黃的中成藥，體外培育牛黃、培植牛黃

30、與牛黃均可等量投料使用。 二、從國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)管理角度應(yīng)履行相應(yīng)的程序，在藥品說(shuō)明書中必須寫明所使用的是何種牛黃，同時(shí)相應(yīng)修訂國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)，使其名副其實(shí)，確保臨床效果和質(zhì)量可控。 三、為確保中醫(yī)藥的可持續(xù)發(fā)展，今后尤其要對(duì)瀕危動(dòng)植物藥材資源替代品的研究與應(yīng)用制訂鼓勵(lì)政策，并大力推動(dòng)醫(yī)藥原材料高新技術(shù)成果產(chǎn)業(yè)化。 四、為確保臨床效果，用藥安全有效，建議今后中藥新藥研究中，盡可能推廣使用體外培育牛黃或培植牛黃。 二OO三年十一月十四日關(guān)于體外培育牛黃與培植牛黃應(yīng)用問(wèn)題會(huì)議紀(jì)要（二）“體外培育牛黃在中藥成方制劑中使用有關(guān)問(wèn)題研討會(huì)”國(guó)家藥典委員會(huì)主要成員：陳可冀院士、王永炎院士、高學(xué)敏教授、張伯禮教授

31、、周文泉教授、姚達(dá)木主任藥師、錢忠直教授、周超凡研究員、賴世隆教授、季紹良教授、張啟明主任藥師、張立群主任藥師 關(guān)于體外培育牛黃與培植牛黃應(yīng)用問(wèn)題會(huì)議紀(jì)要（三） 受國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局委托，國(guó)家藥典委員會(huì)于2003年9月19-20日，在武漢組織召開了“體外培育牛黃在中藥成方制劑中使用有關(guān)問(wèn)題研討會(huì)”。王永炎、周超凡、高學(xué)敏、張伯禮、季紹良、姚達(dá)木等十名著名中醫(yī)藥專家參加了會(huì)議。國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)司呂藥處麻廣霖同志以及武漢市藥監(jiān)局的領(lǐng)導(dǎo)亦參加了會(huì)議。 會(huì)議由藥典委員會(huì)中藥處錢忠直處長(zhǎng)主持，周福成副秘書長(zhǎng)扼要介紹了藥品標(biāo)準(zhǔn)工作情況并對(duì)開好這次會(huì)議提了要求。會(huì)上，聽取了體外培育牛黃發(fā)明人蔡

32、紅嬌教授關(guān)于體外培育牛黃的研制過(guò)程、臨床試驗(yàn)、藥理作用、單味藥材與牛黃質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中所含成分的對(duì)比、臨床對(duì)照，以及與幾個(gè)含牛黃成分的中藥成方制劑的臨床對(duì)照（如片仔癀、安宮牛黃丸、牛黃解毒片等）的試驗(yàn)結(jié)果介紹。廣州中醫(yī)藥大學(xué)賴世隆教授詳細(xì)介紹了II期和III期臨床驗(yàn)證情況。江蘇中康新藥指紋圖譜開發(fā)公司的盛龍生研究員介紹了用指紋圖譜對(duì)體外培育牛黃與天然牛黃主要化學(xué)成分的研究成果。 會(huì)議期間，代表們還就體外培育牛黃的全部生產(chǎn)流程進(jìn)行了實(shí)地參觀考察并作進(jìn)一步了解。 會(huì)議由王永炎院士和高學(xué)敏教授分別擔(dān)任專家組組長(zhǎng)。經(jīng)認(rèn)真討論，與會(huì)專家一致認(rèn)為：體外培育牛黃工藝成熟，質(zhì)量穩(wěn)定，安全有效，與牛黃可以等同使用。另

33、外，藥典委員、中科院陳可冀院士雖未能到會(huì)，但特地提交了書面意見(jiàn)，亦與各專家意見(jiàn)一致。我們認(rèn)為: 一、在中藥成方制劑的處方中，凡含牛黃的中成藥，體外培育牛黃、培植牛黃與牛黃均可等量投料使用。 二、從國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)管理角度應(yīng)履行相應(yīng)的程序，在藥品說(shuō)明書中必須寫明所使用的是何種牛黃，同時(shí)相應(yīng)修訂國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)，使其名副其實(shí)，確保臨床效果和質(zhì)量可控。 三、為確保中醫(yī)藥的可持續(xù)發(fā)展，今后尤其要對(duì)瀕危動(dòng)植物藥材資源替代品的研究與應(yīng)用制訂鼓勵(lì)政策，并大力推動(dòng)醫(yī)藥原材料高新技術(shù)成果產(chǎn)業(yè)化。 四、為確保臨床效果，用藥安全有效，建議今后中藥新藥研究中，盡可能推廣使用體外培育牛黃或培植牛黃。 二OO三年十一月十四日國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局文件（一） 國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局文件國(guó)食藥監(jiān)注200421號(hào) 國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局文件（二）關(guān)于牛黃及其代用品使用問(wèn)題的通知各省、自治區(qū)、直轄市食品藥品監(jiān)督管理局（藥品監(jiān)督管理局）： 牛黃是傳統(tǒng)名貴中藥材，是中成藥的重要原料。長(zhǎng)期以來(lái)，藥源緊缺，難以滿足臨床用藥的需要，大量牛黃依賴進(jìn)口。為此，國(guó)家藥品監(jiān)督管理部門自1972年陸續(xù)批準(zhǔn)了3個(gè)牛黃代用品，即：人工牛黃、培植牛黃和體外培育牛黃。但由于歷史原因，在國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)處方中牛黃代用品的使用問(wèn)題一直沒(méi)有明確，在一定程度上造成中成藥生產(chǎn)和使用過(guò)程中