同濟醫(yī)院檢驗科ISO15189體系文件21柯薩奇病毒IgM抗體（COXB-IgM）測定

1、同濟大學(xué)附屬同濟醫(yī)院檢驗科免疫組項目操作指導(dǎo)書TJYYJYKMY/XMZ721第2版標(biāo)題：柯薩奇病毒IgM抗體（COXB-IgM）測定第7章 第21號第 PAGE 3 頁 共 NUMPAGES 3 頁1. 目的：檢測血清標(biāo)本中的抗COXB-IgM抗體。2. 適用范圍：同濟醫(yī)院檢驗科免疫室。3. 項目名稱：柯薩奇病毒IgM抗體測定4. 檢測方法：酶免疫分析法。5. 檢測原理：應(yīng)用柯薩奇B1-6病毒抗原包被反應(yīng)條孔，采用間接酶免疫法測定血清中IgM抗體。6. 試劑：6.1 品牌：購自北京福瑞公司。6.2 包裝規(guī)格:48人份.6.3 內(nèi)含物:每盒試劑含以下成分：6.3.1 預(yù)包被反應(yīng)條48孔；6.3

2、.2 酶結(jié)合物工作液1瓶（6ml）；6.3.3 20倍濃縮洗滌液1瓶（13ml）；6.3.4 顯色劑A 1瓶（3ml）；6.3.5 顯色劑B 1瓶（3ml）；6.3.6 陽性對照1支（0.3ml）；6.3.7 陰性對照1支（0.3ml）；6.3.8.終止液1瓶（3ml）；6.3.9 樣品稀釋液1瓶（3ml）；6.3.10 說明書1份。7. 儀器品牌、型號：BIORAD3550UV酶標(biāo)儀，測定波長為450nm。8. 操作步驟8.1 打印工作單:8.1.1 打開電腦及打印機電源；8.1.2 雙擊齊效檢驗系統(tǒng) ，登陸工號與密碼；8.1.3 雙擊報告處理，單擊標(biāo)本申請信息，打開標(biāo)本申請明細(xì)信息查詢，打

3、開左上角的所有信息，選擇未生成報告信息。8.1.4 在檢驗項目處選擇COXB-AB執(zhí)行查詢，點擊打印申請單，打印出工作單。8.2 排列被檢測標(biāo)本:根據(jù)工作單上的庫位號找出相應(yīng)標(biāo)本，并按工作單上的順序排列。8.3 按以下步驟開始操作:8.3.1 按所需人份取出包被板放在板架上，剩余板條放回袋中封口備用8.3.2 用去離子水或蒸餾水將一瓶洗滌液全部稀釋至500ML。8.3.3 樣本稀釋：取400l生理鹽水于塑料試管中，在加10l樣本混勻。陰、陽對照已經(jīng)1：40稀釋可直接使用。8.3.4 加樣：每孔加2滴樣本稀釋液，分別加10l陰、陽對照和稀釋過的樣本于各自孔中，留一孔作空白對照。37孵育45分鐘。

4、甩干后用稀釋洗滌液洗4次（手洗、機洗均可），每次靜置片刻，每次甩去洗滌液后都要在面巾紙上拍干。8.3.5 加酶：每孔加2滴酶結(jié)合物（除空白對照孔），37孵育30分鐘，洗滌拍干。8.3.6 顯色：各孔滴加顯色劑A、B各1滴，37孵育避光10分鐘，每孔滴加終止液1滴。在酶標(biāo)儀上，測定波長為450nm，參考波長為655nm，測OD值。8.4 結(jié)果判定：Cutoff值=02.+陰性對照(低于0.05以0.05計)，樣本值大于 Cutoff值者為陽性。8.5 發(fā)送報告：詳見免疫報告發(fā)送程序。9. 參考范圍：陰性。10. 臨床意義：10.1 確診有無柯薩奇病毒感染及感染程度；10.2 急性心肌炎患者的診斷；10.3 優(yōu)生優(yōu)育，防止新生兒感染；10.4 柯薩奇病毒的流行病學(xué)調(diào)查。11. 病人準(zhǔn)備、標(biāo)本要求：血清，脂血、溶血不可使用。12. 注意事項：12.1 溫育時，反應(yīng)板溫育時間必須嚴(yán)格控制，洗滌須徹底。12.2 實驗前試劑盒置室溫30分鐘后方