同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科ISO15189體系文件18白細(xì)胞介素-2受體（IL-2R）測(cè)定

1、同濟(jì)大學(xué)附屬同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫組項(xiàng)目操作指導(dǎo)書(shū)TJYYJYKMY/XMZ718第2版標(biāo)題：白細(xì)胞介素-2受體（IL-2R）測(cè)定第7章 第18號(hào)第 PAGE 4 頁(yè) 共 NUMPAGES 4 頁(yè)1. 目的：檢測(cè)血清標(biāo)本中的白細(xì)胞介素-2受體（IL-2R）。2. 適用范圍：同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室。3. 項(xiàng)目名稱(chēng)：白細(xì)胞介素-2受體（IL-2R）。4. 檢測(cè)方法：酶免疫分析法。5. 檢測(cè)原理：采用雙抗體夾心法。將抗人IL-2R抗體包被于酶標(biāo)板上，加入標(biāo)本和生物素化檢測(cè)抗體，形成抗體-IL-2R-抗體復(fù)合物，再加入HRP標(biāo)記的親和素，在生物素-親和素結(jié)合后，加入顯色劑，最后加入終止液。上酶標(biāo)儀在450n

2、m處測(cè)OD值，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)算樣本中IL-2R的濃度。6. 試劑：6.1 品牌：購(gòu)自北京晶美公司。6.2 包裝規(guī)格:48人份。6.3 內(nèi)含物:每盒試劑含以下成分：6.3.1 標(biāo)準(zhǔn)品1支；6.3.2 標(biāo)準(zhǔn)品/標(biāo)本稀釋液1瓶；6.3.3 濃縮生物素化抗體1支；6.3.4 生物素化抗體稀釋液1瓶；6.3.5 濃縮酶結(jié)合物1支；6.3.6 酶結(jié)合物稀釋液1瓶；6.3.7 濃縮洗滌液1瓶；6.3.8 底物顯色劑1瓶；6.3.9 終止液1瓶；6.3.10抗IL-2R抗體包被板條8*6；6.3.11封板膠紙2張。6.3.12說(shuō)明書(shū)1份。7. 儀器品牌、型號(hào)：BIORAD3550UV酶標(biāo)儀，測(cè)定波長(zhǎng)為450n

3、m。8. 操作步驟：8.1 打印工作單:8.1.1 打開(kāi)LIS電腦及打印機(jī)電源；8.1.2 雙擊齊效檢驗(yàn)系統(tǒng)，登陸工號(hào)與密碼；8.1.3 雙擊報(bào)告處理，單擊標(biāo)本申請(qǐng)信息，打開(kāi)標(biāo)本申請(qǐng)明細(xì)信息查詢(xún)，打開(kāi)左上角的所有信息，選擇未生成報(bào)告信息。8.1.4 在檢驗(yàn)項(xiàng)目處選擇IL-2R執(zhí)行查詢(xún)，點(diǎn)擊打印申請(qǐng)單，打印出工作單。8.2 排列被檢測(cè)標(biāo)本:根據(jù)工作單上的庫(kù)位號(hào)找出相應(yīng)標(biāo)本，并按工作單上的順序排列。8.3 實(shí)驗(yàn)操作流程:8.3.1 將標(biāo)準(zhǔn)品用稀釋液稀釋成不同濃度：500、250、125、62.5、31.25、15.125 pg/ml。8.3.2 將標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)標(biāo)本（1：10稀釋?zhuān)└骷?00ul到板

4、條的微孔中，振蕩混勻后37孵育90分鐘。8.3.3 洗板4次。8.3.4 每孔中加入生物素化抗體（1：100稀釋?zhuān)?00ul，37孵育60分鐘。8.3.5 洗板4次。8.3.6 每孔加入酶結(jié)合物（1：100稀釋?zhuān)?00ul，37孵育30分鐘。8.3.7 洗板4次。8.3.8 每孔加入底物顯色劑100ul，避光，37孵育15-20分鐘。8.3.9 每孔加入終止液100ul，混勻后上酶標(biāo)儀450nm處測(cè)量OD值（5分鐘內(nèi)）。8.4 結(jié)果判定：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)算出待測(cè)樣品的濃度。8.5 發(fā)送報(bào)告：詳見(jiàn)免疫報(bào)告發(fā)送程序。9. 參考范圍：1-4.2ng/ml。10. 臨床意義：10.1 白細(xì)胞及淋巴系統(tǒng)惡性疾病患者血清sIL-2R明顯升高，病情緩解時(shí)sIL-2R水平下降。10.2 AIDS病及AIDS相關(guān)綜合征（ARC）患者血清sIL-2R升高并且sIL-2R水平與CD4細(xì)胞數(shù)呈負(fù)相關(guān)。10.3 器官移植排斥患者血清sIL-2R水平可動(dòng)態(tài)反應(yīng)患者對(duì)移植物的反應(yīng)，排斥期sIL-2R水平明顯升高。10.4 其他：一些自身免疫性疾?。蝗缁顒?dòng)期SLE血清sIL-2R明顯升高。11. 病人準(zhǔn)備、標(biāo)本要求：血清，脂血、溶血不可使用。12. 注意事項(xiàng)：12.1 溫育時(shí)，反應(yīng)板溫育時(shí)間必須嚴(yán)格控制，洗滌須徹底。12.2 實(shí)驗(yàn)前試劑盒置室溫30分鐘后方可加樣。12.3