腎氣丸“陰中求陽(yáng)”配伍對(duì)桂皮醛含量的影響

1、腎氣丸“陰中求陽(yáng)配伍對(duì)桂皮醛含量的影響李政木陳煒璇卓廉佳吳勇【關(guān)鍵詞】腎氣丸陰中求陽(yáng)桂皮醛高效液相色譜法腎氣丸始載于?金匱要略?，由桂枝、附子、干地黃、山茱萸、山藥、茯苓、澤瀉、牡丹皮組成，有溫補(bǔ)腎陽(yáng)之成效，是臨床治療腎陽(yáng)虛證的名方。其“陰中求陽(yáng)的組方原理，即在大量滋陰補(bǔ)腎的藥物中參加少量的附子、桂枝，是方劑現(xiàn)代研究中值得討論的課題。本研究將腎氣丸的組方進(jìn)展拆分，以桂枝的主要有效成分桂皮醛為指標(biāo)，測(cè)定各腎氣丸拆方組水煎液中桂皮醛的含量，并比擬其含量變化?，F(xiàn)報(bào)道如下。1儀器與試劑1.1儀器DINEXP680高效液相色譜儀；UVD170U型紫外可見(jiàn)光檢測(cè)器；hrelen工作站；分析天平；超聲清洗儀

2、。1.2試劑無(wú)水乙醇，乙醚，甲醇色譜純，其他試劑均到達(dá)色譜分析要求。1.4藥材桂枝、附子、干地黃、山藥、山茱萸、茯苓、澤瀉、牡丹皮均由廣州中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室張丹雁教授鑒定為正品。2方法與結(jié)果2.2高效液相色譜條件色譜柱DinsilT185，4.6250；柱溫為室溫；流動(dòng)相為甲醇-水60：45，流速1l/in；檢測(cè)波長(zhǎng)310n；進(jìn)樣量10l。2.3標(biāo)準(zhǔn)曲線制備精細(xì)稱取桂皮醛對(duì)照品17.2g，置50l容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度每毫升含桂皮醛0.344g，作為對(duì)照品儲(chǔ)藏溶液。分別精細(xì)量取對(duì)照品溶液0.4，0.6，0.8，1.0，1.2，1.4l，置25l量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，制得桂皮

3、醛標(biāo)準(zhǔn)溶液，取上述標(biāo)準(zhǔn)溶液，按“2.2項(xiàng)下色譜條件分別進(jìn)樣10l測(cè)定，以桂皮醛標(biāo)準(zhǔn)品液濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)A，得回歸方程A=0.8407-0.2633，r=0.999，桂皮醛在5.50419.264g/l內(nèi)線性關(guān)系良好，符合外標(biāo)法定量測(cè)定要求。2.4供試品溶液的制備精細(xì)稱取含桂枝4g以桂枝、附子、干地黃、山茱萸、山藥、茯苓、澤瀉、牡丹皮1：1：8：4：4：3：3：3的比例計(jì)算各拆方組，浸泡30in，煎煮60in，得藥液約15l，用乙醚萃取2次15l/次，合并醚液，室溫?fù)]干，殘?jiān)眉状既芙獠⒍ㄈ葜?l，用0.45的有機(jī)微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液即得。2.5精細(xì)度實(shí)驗(yàn)取一樣濃度對(duì)照品溶液，連續(xù)

4、進(jìn)樣測(cè)定，根據(jù)所得峰面積計(jì)算，RSD=1.15%，n=6。2.6穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取供試品溶液在室溫下放置，每隔2h測(cè)定1次，共測(cè)定6次，按測(cè)得峰面積積分值計(jì)算，供試品在10h內(nèi)穩(wěn)定，RSD=1.65%。2.7陰性對(duì)照實(shí)驗(yàn)?zāi)I氣丸全方按照含桂枝4g的比例稱取不含桂枝的其他藥，按照上述供試品制備方法，制作陰性供試品溶液，用與樣品一樣的色譜條件測(cè)定，在與樣品一樣保存時(shí)間處無(wú)干擾峰。結(jié)果見(jiàn)圖13。圖1桂皮醛對(duì)照品HPL色譜圖圖2腎氣丸全方HPL色譜圖圖3腎氣丸缺桂枝陰性對(duì)照色譜圖2.8樣品測(cè)定按照含量測(cè)定方法測(cè)定各拆方組的樣品，記錄峰面積，計(jì)算桂皮醛在各拆方組中的含量，用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)展分析。結(jié)果見(jiàn)表1，

5、色譜圖見(jiàn)圖48。表1樣品含量測(cè)定結(jié)果s3討論對(duì)腎陽(yáng)虛證的現(xiàn)代研究說(shuō)明1，腎陽(yáng)虛證具有下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)軸不同環(huán)節(jié)(層次)、不同程度的功能紊亂，腎陽(yáng)虛證與神經(jīng)內(nèi)分泌免疫網(wǎng)絡(luò)有內(nèi)在聯(lián)絡(luò)，補(bǔ)腎藥是調(diào)節(jié)下丘腦、神經(jīng)內(nèi)分泌免疫網(wǎng)絡(luò)、下丘腦-垂體-腎上腺-胸腺軸的有效手段。生理?xiàng)l件下，下丘腦產(chǎn)生的促腎上腺皮質(zhì)釋放激素經(jīng)垂體門(mén)脈系統(tǒng)到達(dá)垂體，促進(jìn)垂體促腎上腺皮質(zhì)激素ATH分泌，垂體分泌的ATH進(jìn)入血液，作用于腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞，促使其分泌皮質(zhì)醇，而血漿皮質(zhì)醇又可以反應(yīng)抑制RH和ATH的分泌。外源性糖皮質(zhì)激素氫化可的松能明顯降低血液中皮質(zhì)醇、ATH的含量，使腎上腺皮質(zhì)分泌類固醇激素的釋放減少，從而使大鼠表現(xiàn)

6、出一系列的腎陽(yáng)虛病癥。桂皮醛是桂枝中的有效成分之一。有研究說(shuō)明2桂皮醛進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)后，到達(dá)腎上腺，促使腎上腺釋放兒茶酚胺，從而進(jìn)步血漿中兒茶酚胺的濃度。而兒茶酚胺對(duì)許多激素的分泌有促進(jìn)作用，如ATH、胰高血糖素、生長(zhǎng)素、甲狀腺素、腎素等。而增加腎陽(yáng)虛大鼠血中ATH的含量，那么可明顯改善腎陽(yáng)虛證病癥。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為陰陽(yáng)互相依存，互為根本，“孤陰不生，獨(dú)陽(yáng)不長(zhǎng)。?醫(yī)貫陰陽(yáng)論?曰：“陰陽(yáng)又各互為其根，陽(yáng)根于陰，陰根于陽(yáng)；無(wú)陽(yáng)那么陰無(wú)以生，無(wú)陰那么陽(yáng)無(wú)以化。腎陽(yáng)虛證假設(shè)單用大量的溫補(bǔ)腎陽(yáng)的藥物反致虛不受補(bǔ)且有助熱之弊，假設(shè)在滋陰補(bǔ)腎的根底上參加少量溫陽(yáng)的藥物，使陽(yáng)得陰之助而生化有源，以達(dá)陰中求陽(yáng)之效。腎氣

7、丸是“陰中求陽(yáng)配伍的代表方劑，方中大量滋陰補(bǔ)腎藥配以少量溫陽(yáng)的桂枝、附子，在于溫通陽(yáng)氣，使溫陽(yáng)而有生化之源，滋陰藥得溫陽(yáng)藥相助那么滋而不膩，微微生火，“少火生氣，以鼓舞腎中真陽(yáng)。綜上所述，桂皮醛進(jìn)入機(jī)體后通過(guò)作用于腎上腺，促使其釋放兒茶酚胺，使血漿中兒茶酚胺的濃度增高，間接促進(jìn)血中ATH含量增加來(lái)改善腎陽(yáng)虛證，結(jié)合本實(shí)驗(yàn)結(jié)果，以“陰中求陽(yáng)的腎氣丸全方組水煎液中桂皮醛的含量最高，高于補(bǔ)陽(yáng)組。實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示腎氣丸“陰中求陽(yáng)的配伍可能是通過(guò)桂皮醛進(jìn)步血漿中兒茶酚胺的濃度來(lái)調(diào)節(jié)神經(jīng)內(nèi)分泌以治療腎陽(yáng)虛證，桂皮醛可能是腎氣丸“陰中求陽(yáng)的配伍在治療腎陽(yáng)虛證中的有效成分之一。【參考文獻(xiàn)】1沈自尹從腎本質(zhì)研究到證本質(zhì)研究的考慮與理論J.上海中醫(yī)藥雜志，2000,344：4.2Harada，Hira