淡竹葉中總黃酮提取工藝研究

1、淡竹葉中總黃酮提取工藝研究【摘要】目的用正交試驗(yàn)法優(yōu)選淡竹葉中總黃酮的提取工藝。方法以20g原藥材的總黃酮提取量為評(píng)價(jià)指標(biāo),選擇乙醇用量(倍)、提取時(shí)間(h)、提取次數(shù)(次)為考察因素,采用正交試驗(yàn)法l9(34)確定醇提取淡竹葉中總黃酮的最正確工藝。結(jié)果最正確提取工藝條件為75%乙醇18倍量提取1.0h,共提取1次,乙醇用量為顯著影響因素。結(jié)論首次進(jìn)展了淡竹葉總黃酮正交提取工藝的研究,結(jié)果比擬可靠?！娟P(guān)鍵詞】淡竹葉；總黃酮；正交試驗(yàn)abstrat：bjetivetstudytheptiuethanlextratinpressfttalflavnidsinlphatherungrailebrng

2、n.ethdstheextratinfttalflavnidsashsenastheassessentindex.ethanlvlunextratingtieandtieserethestudingfatrs.theptiuethanlextratinpressasseletediththerthgnaldesign.resultstheptiuethanlextratingpressnditinsereasflls：adding18fldf75%ethanl,extratingfr1.0handneinall.ethanldsageasthepredinantinflueningfatr.n

3、lusinthisptiuextradinpressfttalflavnidsinlphatherugralebrngnisreliable.keyrds：lphatherugrailebrngn；ttalflavnids；rthgnaldesign淡竹葉為禾本科多年生草本植物淡竹葉(lphatherugrailebrngn.)的枯燥莖葉,主產(chǎn)于河南、安徽、江蘇、浙江、福建、廣東、廣西等地。該藥味甘、淡、寒,歸心、胃、小腸經(jīng),具有清熱除煩、利尿的成效,多用于熱病煩渴、口舌生瘡、小便赤色淋痛等癥1。淡竹葉中含有的黃酮類化合物具有降脂、抗血栓、抗氧化、降糖等多種生理活性2,因此有效地開發(fā)和利用淡竹

4、葉中黃酮類化學(xué)成分具有重要意義。筆者選擇總黃酮提取量3為評(píng)價(jià)指標(biāo),利用l9(34)正交試驗(yàn),挑選醇提取淡竹葉中總黃酮的工藝條件,可為新藥研究和充分利用淡竹葉藥材資源提供參考根據(jù)。1儀器、試劑與材料hh-s型水浴鍋(鞏義市英峪華儀器廠)；re-52a旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠)；shz-d()循環(huán)水式真空泵(鞏義市英峪華儀器廠)；754型紫外可見分光光度計(jì)(上海光譜儀器)；ay220電子天平(島津)；dzf-6050真空枯燥箱(上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備)。對(duì)照品蘆丁購自中國藥品生物制品檢定所,批號(hào)為0080-9705；淡竹葉產(chǎn)地為浙江,加工單位為安徽豐原銅陵中藥飲片,經(jīng)南京中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室吳

5、啟南教授鑒定,粉碎后備用。醫(yī)用酒精；甲醇ar級(jí)；蒸餾水；其余所用試劑均為分析純。2方法與結(jié)果2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精細(xì)稱取在105枯燥下的蘆丁對(duì)照品0.0200g,置100l容量瓶中,加適量甲醇溶解,定容至刻度,搖勻,即得對(duì)照品溶液(每1l中含無水蘆丁0.2g)。精細(xì)汲取上述對(duì)照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0l,分別置25l容量瓶中,各加水至6.0l,加5%亞硝酸鈉溶液1l,混勻,放置6in,加10%硝酸鋁溶液1l,搖勻,放置6in,加4%氫氧化鈉試液10l,再加水至刻度,搖勻,放置15in,進(jìn)展全波長掃描,在510n處均有最大吸收。以510n得的吸收度a對(duì)濃度回歸

6、,以吸光度為縱坐標(biāo)、濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算回歸方程為a=3.8657-0.0525(r=0.9994)。在848g/l的范圍內(nèi),濃度與吸收度有良好的線性關(guān)系。2.2總黃酮提取量的測(cè)定按2.3.3項(xiàng)下方法制備樣品。精細(xì)稱定一定量的枯燥品,用甲醇定容至25l容量瓶中,再精細(xì)汲取3l,置25l容量瓶中,照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下的方法,自“加水至6.0l起,依法測(cè)定吸光度。按照2022版?中國藥典?(一部)4規(guī)定的方法測(cè)定。2.3醇提工藝條件的選擇2.3.1醇提濃度的選擇將浙江產(chǎn)淡竹葉藥材粉碎,稱取20g/份,共3份,加15倍量的50%乙醇,回流提取2h(85),3份提取液分別進(jìn)展抽濾,將濾液在旋

7、轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮(80,0.08pa),濃縮液在水浴鍋上蒸至成稠膏狀,再放置真空枯燥箱中(80,0.08pa),24h后取出,取少量醇浸膏測(cè)定總黃酮提取量。同法測(cè)定60%、75%、95%醇提液的總黃酮提取量(見表1)。結(jié)果說明,以20g原藥材中總黃酮提取量為考察指標(biāo),75%醇提液得到的總黃酮量最多,故采用75%乙醇提取的工藝。表1醇提濃度的選擇略2.3.2提取工藝的正交試驗(yàn)按照上述單因素考察結(jié)果,按表2中的因素程度進(jìn)展正交試驗(yàn)。表2因素程度表略2.3.3正交試驗(yàn)方法與結(jié)果將淡竹葉藥材粉碎后,稱取20g,用l9(34)正交表安排試驗(yàn)(見表3)。將回流提取液分別過濾,濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮(80,0

8、.08pa),濃縮液放置在蒸發(fā)皿中于水浴鍋上蒸至成稠膏狀后,放置真空枯燥箱中(80,0.08pa),24h后取出,于枯燥器中枯燥1h后稱量,再按照2.2.1項(xiàng)下方法測(cè)定總黃酮的提取量,結(jié)果見表3。表3正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)表及結(jié)果略2.3.4方差分析(見表4)表4方差分析表略注：f0.05(2,2)=19。由上述直觀分析結(jié)果可知,以總黃酮提取量為考察指標(biāo),最正確提取工藝條件為a1b21,即18倍量75%乙醇回流提取1次,每次1.5。方差分析結(jié)果顯示：a因素(加醇量)對(duì)總黃酮提出有顯著影響,b因素(提取時(shí)間),因素(提取次數(shù))對(duì)總黃酮提出無顯著影響。結(jié)合消費(fèi)實(shí)際,從降低消費(fèi)本錢出發(fā),對(duì)提取條件作適當(dāng)調(diào)整,確定醇提工藝條件為a1b31,即18倍量75%乙醇回流1h,提取1次。2.3.5驗(yàn)證試驗(yàn)稱取20g原藥材,按照a1b31進(jìn)展驗(yàn)證試驗(yàn),結(jié)果見表5。表5驗(yàn)證試驗(yàn)分析表略3討論通過l9(34)正交表試驗(yàn),最終確定淡竹葉中總黃酮醇提取工藝的條件為：75%乙醇18倍量提取1.0h,共提取1次,其結(jié)果經(jīng)歷證試驗(yàn)確認(rèn)該條件可行,可以作為大消費(fèi)的參考工藝條件?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典(下冊(cè)).上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,1977.22532254.2韓公羽,沈