《家禽抗腫瘤和抗病素養(yǎng)感染新制劑-干擾素》

1、家禽抗腫瘤和抗病素養(yǎng)感染新制劑干擾素論文摘要家禽腫瘤和病毒感染性疾病的治療一直是困惑禽病防治的難題之一。至今仍未有一類藥物能特異性地有效殺滅家禽病毒性病原，干擾和抑制其病原的復(fù)制。據(jù)報(bào)道，中藥制劑對某些病毒性禽病具有較好的治療作用，但其作用機(jī)理不盡祥析。細(xì)胞因子干擾素（interfern，ifn）的出現(xiàn)及其臨床試驗(yàn)證明，該類細(xì)胞因子在病毒性禽病和禽腫瘤的治療上極具臨床應(yīng)用前景。論文家禽腫瘤和病毒感染性疾病的治療一直是困惑禽病防治的難題之一。至今仍未有一類藥物能特異性地有效殺滅家禽病毒性病原，干擾和抑制其病原的復(fù)制。據(jù)報(bào)道，中藥制劑對某些病毒性禽病具有較好的治療作用，但其作用機(jī)理不盡祥析。細(xì)胞因

2、子干擾素（interfern，ifn）的出現(xiàn)及其臨床試驗(yàn)證明，該類細(xì)胞因子在病毒性禽病和禽腫瘤的治療上極具臨床應(yīng)用前景。1957年isaas和lindenann首先發(fā)現(xiàn)了病毒干擾現(xiàn)象，即病毒感染的細(xì)胞能產(chǎn)生一種因子。作用于其他細(xì)胞干擾病毒的復(fù)制，因而命名為干擾素。目前已知干擾素并不能直接殺傷病毒，而是誘導(dǎo)宿主細(xì)胞產(chǎn)生數(shù)種酶，干擾病毒的基因轉(zhuǎn)錄或病毒蛋白組分的翻譯。根據(jù)產(chǎn)生干擾素細(xì)胞的來源不同、理化性質(zhì)和生物學(xué)活性的差異；可分為-干擾素（interfern，ifn一）、-干擾素（ifn-）、-干擾素（ifn-）。家禽是否存在干擾素及是否存在有類似于哺乳動物的各類干擾素，一直是近年來有爭議的問題。

3、1994年。skellik等克隆到雞胚成纖維細(xì)胞干擾素基因。該dna編碼區(qū)全長579bp。編碼162個氨基酸。前31個為信號肽。成熟的ifn含有131個氨基酸，分子量為14.5ku。其dna與哺乳動物型ifn只有43%的序列同源性，與ifn的同源性為31%。1997年ladreht等根據(jù)skellik發(fā)展的干擾素序列設(shè)計(jì)引物，通過pr擴(kuò)增得到絲裂原刺激的雞脾淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的干擾素基因，在大腸桿菌及真核細(xì)胞內(nèi)表達(dá)可產(chǎn)生具有生活活性的ifn。1干擾素的產(chǎn)生ifn和ifn有許多相似之處：兩種ifn基因來自同一個祖先基因（nanestergene）；由產(chǎn)生；結(jié)合相同的受體并發(fā)揮相似的生物學(xué)作用。ifn-

4、/以往稱為型ifn，主要由白細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等在細(xì)菌、dna或rna病毒、多聚肌苷酸、多聚胞苷酸（plyi-）、多核苷酸等刺激物誘導(dǎo)下產(chǎn)生。ifn-主要由活化的t細(xì)胞產(chǎn)生，在小鼠。由thi亞群產(chǎn)生。當(dāng)抗原、pha或na刺激后、t細(xì)胞分泌ifn-，通常與白細(xì)胞介素-2（il2）的產(chǎn)生相一致、目前認(rèn)為巨噬細(xì)胞活化因子（af）的主要活性存在于ifn-中。此外，活性nk細(xì)胞亦可產(chǎn)生ifn。2干擾素的分子結(jié)構(gòu)和基因ifn-和ifn基因位于人9號染色體和小鼠的4號染色體。并連鎖在一起。ifn-基因至少有20個，成串排列在一個區(qū)域,元內(nèi)含子。同一種屬ifn-不同基國產(chǎn)物其氨基酸同源性80%。人和小鼠ifn-

5、基因只有一個，無內(nèi)含子，與ifn基因連鎖在一起。ifn-與ifn-氨基酸組成的26%-30%同源性。ifn由兩個亞族組成，分別稱為ifn1和ifn2，其中ifn-1至少由20個有功能的基因成員。目前只有90%左右的同源性，ifn2亞族有56個基因成員，目前只發(fā)現(xiàn)l個有功能的基因，其余是假基因。人和小鼠ifn在dna水平上，有65%左右的分子由143個氨基酸組成，糖蛋白以同源雙體存在，分子量為40kda，其生物學(xué)作用有嚴(yán)格的種屬特異性。3干擾素的受體一般認(rèn)為，ifn-和ifn-結(jié)構(gòu)相同的受體，ifn-/r基因定位于21號染色體。受體的親和力kd在10-910-10之間。受體膜外結(jié)構(gòu)屬細(xì)胞因子受體

6、中干擾素受體素族。ifn/受體分布相當(dāng)廣泛。包括單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞；多形核白細(xì)胞、b細(xì)胞、t細(xì)胞、血小板、上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞等。ifnr基因定位于第6號染色體小鼠在第10號染色體，ifn受體分布廣泛。受體陽性細(xì)胞每個細(xì)胞約表達(dá)1001000個受體。親和力kd在10-9510-10。裸肽分子量50kda，糖基化后90kda，其n末端與ifn/受體有一定的同源性，具有種屬特異性。目前認(rèn)為。ifn-r可能存在著第2條鏈。4干擾素的生物學(xué)作用4.1inf-/的生物學(xué)作用4.1.1抗病毒作用：ifn-/具有廣譜抗病毒作用。其作用機(jī)理是：通過抑制某些病毒的吸附、脫殼和最初的病毒核酸轉(zhuǎn)錄，病毒蛋白

7、合成以及成熟病毒的釋放等不同環(huán)節(jié)；通過nk、巨噬細(xì)胞和tl殺傷病毒感染相細(xì)胞。4.1.2抑制某些細(xì)胞的生長（ytstai）：如抑制成纖維細(xì)胞，上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和造血細(xì)胞的增殖，其機(jī)制可能通過使細(xì)胞停留在g/i期，降低dna合成，下調(diào)-y、-fs等細(xì)胞原癌基因轉(zhuǎn)錄水平。下調(diào)某些生長因子受體表達(dá)，如egf、r、胰島素-ir和-sfr等。4.1.3免疫調(diào)節(jié)作用；促進(jìn)大多數(shù)細(xì)胞hi類抗原的表達(dá)，活化nk細(xì)胞和tl。4.1.4抑制和殺傷腫瘤細(xì)胞；ifn/殺傷腫瘤細(xì)胞主要是通過促進(jìn)機(jī)體免疫功能，提高巨噬細(xì)胞、nk和tl的殺傷水平。4.2ifn-的生物學(xué)作用4.2.1誘導(dǎo)單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、皮

8、膚成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞和星狀細(xì)胞等hit類抗原的表達(dá)，使其參與抗原提呈和特異性免疫的識別過程。此外，ifn-克上調(diào)內(nèi)皮細(xì)胞-a-1（d54）表達(dá)，促進(jìn)巨噬細(xì)胞frr表達(dá)，協(xié)同誘導(dǎo)并促進(jìn)巨噬細(xì)胞殺傷病原微生物。4.2.2促進(jìn)lps體外刺激小鼠b促進(jìn)t細(xì)胞il2r表達(dá)。4.2.3協(xié)同il-2誘導(dǎo)lak活性，促進(jìn)t細(xì)胞il-2r表達(dá)。4.2.4誘導(dǎo)急性期蛋白合成，誘導(dǎo)髓樣細(xì)胞分化。5干擾素抑制病毒復(fù)制的作用機(jī)理有很多類型的細(xì)胞在被某些病毒感染幾小時內(nèi)就能產(chǎn)生干擾素，幾天內(nèi)就能達(dá)到高濃度，能在初次免疫反應(yīng)尚未形成之前。發(fā)揮兔疫作用。干擾素有宿主細(xì)胞的基因編碼。病毒感染細(xì)胞后、病毒遺傳物質(zhì)和宿主細(xì)胞

9、核糖體作用。使靶細(xì)胞產(chǎn)生干擾素的編碼基因去抑制，產(chǎn)干擾素。干擾素細(xì)胞內(nèi)釋放出來可保護(hù)與其接后的其他細(xì)胞下受感染。干擾素對未感染細(xì)胞的作用是通過對它們的dna去抑制作用而實(shí)現(xiàn)的。由于這種去抑制作用，未感染細(xì)胞產(chǎn)生一種稱作翻譯抑制蛋白質(zhì)（tip）的物質(zhì)，它可以阻止病毒rna侵占細(xì)胞核糖體，因此抑制病毒的復(fù)制。病毒進(jìn)入細(xì)胞病毒rna附著于宿主細(xì)胞核糖體使形成干擾素rna的宿主細(xì)胞dna順反子去抑制干擾素rna刺激干擾素產(chǎn)生干擾素進(jìn)入細(xì)胞使形成翻譯抑制蛋白質(zhì)。rna的細(xì)胞dna順反子去抑制tip形成并結(jié)合到核糖體tip阻止病毒rna結(jié)合到核糖體6干擾素的臨床作用ifn是第一個應(yīng)用于臨床的基因工程產(chǎn)品；目前ifn、ifn-、ifn都有基因工程產(chǎn)物，40多個國家使用干擾素制劑。治療30多種疾并但主要是用于臨床腫瘤和病毒性感染等治療。與之相類似。ifn在家禽腫瘤和病毒性疾病的臨床治療上也有極其廣泛的應(yīng)用前景，（見表1）主要表現(xiàn)在以下兩方面：6.1治療病毒性感染6.2抗腫瘤：ifn抗腫瘤的機(jī)理是：抑制腫瘤細(xì)胞增殖；誘導(dǎo)tl、nk等殺傷細(xì)胞。并協(xié)間il-2增強(qiáng)lak活性；誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞表達(dá)hi