臨床免疫學檢驗：第17章 補體檢測及應用

1、第十七章 補體檢測及應用(Chapter 17 Detection of complement and its application)臨床免疫學檢驗第十七章 補體檢測及應用第一節(jié) 補體的生物學特性及功能第二節(jié) 血清總補體活性測定第三節(jié) 補體結合試驗第四節(jié) 單個補體成分測定第五節(jié) 補體測定的臨床應用第一節(jié) 補體的生物學特性及功能一、補體的理化性質補體是存在于人和動物血清、組織液及某些細胞膜上的一組經激活后具有酶活性的蛋白質理化性質合成化學組成含量易滅活第一節(jié) 補體的生物學特性及功能二、補體的激活第一節(jié) 補體的生物學特性及功能三、補體的生物學功能溶解細胞、細菌和病毒調理作用清除免疫復合物第一節(jié)

2、補體的生物學特性及功能三、補體的生物學功能溶解細胞、細菌和病毒調理作用清除免疫復合物介導炎癥反應免疫調節(jié)作用第二節(jié) 血清總補體活性測定一、CH50測定原理CH50(50% complement hemolysis): 50%溶血引起50%溶血所需要的最小補體量為一個CH50單位第二節(jié) 血清總補體活性測定二、CH50測定方法要點及結果判定調制綿羊紅細胞懸液2%SRBC, 無溶血溶血素2U緩沖液pH7.2-7.4磷酸鹽緩沖液或巴比妥緩沖液配置50%溶血標準管100%溶血管: 2%SRBC 0.5ml+蒸餾水 2.0ml 50%溶血標準管:100%溶血管+蒸餾水 2.5ml正式試驗第二節(jié) 血清總補體

3、活性測定二、CH50測定方法要點及結果判定管號1:20稀釋血清緩沖液溶血素2%SRBC50%溶血總補體值（U/ml）10.10 1.40 0.50 0.50 20020.15 1.35 0.50 0.50 13330.20 1.30 0.50 0.50 10040.25 1.25 0.50 0.50 8050.30 1.20 0.50 0.50 66.560.35 1.15 0.50 0.50 57.170.40 1.10 0.50 0.50 5080.45 1.05 0.50 0.50 44.490.50 1.00 0.50 0.50 40100.00 1.50 0.50 0.50 不溶血第

4、二節(jié) 血清總補體活性測定二、CH50測定方法要點及結果判定調制綿羊紅細胞懸液溶血素緩沖液配置50%溶血標準管正式試驗50%溶血總補體活性的計算CH50(U/ml)=(1/終點管稀釋血清的用量)血清稀釋度第二節(jié) 血清總補體活性測定三、方法評價和臨床意義優(yōu)點簡便, 快速缺點敏感度低, 重復性差臨床意義補體的缺陷自身免疫病肝臟疾病或營養(yǎng)不良第三節(jié) 補體結合試驗一、試驗原理反應系統(tǒng)已知抗原(或抗體), 待測抗體(或抗原)指示系統(tǒng)綿羊紅細胞, 溶血素補體系統(tǒng)新鮮豚鼠血清第三節(jié) 補體結合試驗一、試驗原理反應系統(tǒng)已知抗原(或抗體), 待測抗體(或抗原)指示系統(tǒng)綿羊紅細胞, 溶血素補體系統(tǒng)新鮮豚鼠血清第三節(jié) 補體結合試驗二、結果判定陽性不溶血陰性溶血華氏反應第三節(jié) 補體結合試驗三、方法評價優(yōu)點敏感度高、特異性強、結果容易觀察、可測范圍廣缺點難以標準化第四節(jié) 單個補體成分測定一、免疫溶血法二、免疫化學法C3、C4 、C1q 、B因子和C1抑制物自動化免疫比濁法第五節(jié) 補體測定的臨床應用臨床應用機體免疫系統(tǒng)的功能評價疾病的診斷與治療流行病學調查HLA分型的補體依賴性細胞毒試驗(complement-dependent celluar cytotoxicity, CDCC)總結掌握CH50測定的原理、方法