呼吸道病原體抗體檢測及臨床應用課件

1、呼吸道病原體抗體檢測及臨床應用呼吸道病原體抗體檢測及臨床應用呼吸道病原體檢測的必要性實現(xiàn)呼吸道感染的早期診斷和治療；明確病因-指導治療決策；重癥肺炎的病因?qū)W診斷；社區(qū)獲得性肺炎或醫(yī)院內(nèi)感染的快速診斷；減少抗菌素的不合理使用；監(jiān)控新發(fā)或突發(fā)傳染病，快速、準確的實驗室檢測是早期發(fā)現(xiàn)傳染病病例和傳染病早期預警的有效科學手段。 由于呼吸道感染的病原體種類繁多 ，病癥相似臨床上不易區(qū)分 ，建立切實有效的呼吸道病原體快速檢測技術(shù)必不可少。呼吸道病原體檢測的必要性實現(xiàn)呼吸道感染的早期診斷和治療；呼吸道病原體感染的特點 病原學復雜，病毒變異性大、高度傳染性，易在人群中造成爆發(fā)流行； 大部分情況下，病毒入侵部位

2、、入侵后繁殖部位、由此引起發(fā)的組織和免疫病理改變以及表現(xiàn)出的臨床癥狀和體征的部位基本在呼吸道；大多數(shù)病毒不通過血液侵入機體其他部位，往往查不出病毒血癥；有些病毒還可以引起腸道病毒感染； 表面感染后獲得的免疫力，一般來說是不持久的。呼吸道病原體感染的特點 病原學復雜，病毒變異性大、高度傳染呼吸道感染狀況-兒童5歲以下兒童死亡的首位病因易出現(xiàn)反復的呼吸道感染兒童反復呼吸道感染的主要原因：與兒童呼吸道生理特點有關，兒童鼻腔短小，沒有鼻毛，鼻粘膜柔嫩，容易受感染。兒童免疫功能不成熟。過敏體質(zhì)常見。因喂養(yǎng)不當所致營養(yǎng)不良有關。病毒感染占急性上呼吸道感染90%左右。呼吸道感染狀況-兒童5歲以下兒童死亡的首

3、位病因呼吸道感染狀況-孕婦 由于妊娠期患者生理狀況與普通成人患者有所不同，臨床醫(yī)生可能會面臨兩種情況：1、妊娠期的生理改變會使呼吸臨床表現(xiàn)更為復雜，這些復雜的臨床表現(xiàn)影響疾病及時診斷；妊娠期的生理改變是否會使疾病的臨床表現(xiàn)不典型，并因此影響疾病的及時診斷；2、各種檢查診斷技術(shù)應用及治療藥物是否可能對胎兒產(chǎn)生不利的影響。呼吸道感染狀況-孕婦 由于妊娠期患者生理狀況與普通成人呼吸道感染-概述呼吸道感染：指病原體感染人體的鼻腔、咽喉、氣管和支氣管等呼吸系統(tǒng)。分為上呼吸道感染和下呼吸道感染。上呼吸道感染： 鼻腔、咽或喉部急性炎癥的概稱。常見病因以病毒為主，主要有鼻病毒、腺病毒、呼吸道合胞病毒、流感、副

4、流感病毒、冠狀病毒等。細菌感染可以是原發(fā)的，也可以繼發(fā)于病毒感染。細菌以化膿性鏈球菌為最常見，其次是流感嗜血桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、卡他莫拉菌等，肺炎支原體和肺炎衣原體較少見?；颊卟环帜挲g、性別、職業(yè)和地區(qū)。不僅具有較強的傳染性，而且可引起嚴重并發(fā)癥。包括普通感冒，急性鼻竇炎、中耳炎、扁桃體炎等。下呼吸道感染： 氣管、支氣管、肺部急性炎癥的概稱。常見病原體為病毒，支原體、衣原體，少數(shù)是細菌引起。常見的有氣管、支氣管炎、毛細支氣管炎、肺炎等。 呼吸道感染是兒童最常見的感染性疾病，占兒科住院患兒的24.5-65.2。急性呼吸道疾病是全球范圍內(nèi)人類疾病和死亡的主要原因之一。 目前已證明95

5、%的急性上呼吸道疾病和大部分的下呼吸道疾病是由細菌外的病原引起，其中以呼吸道病毒最常見。肺炎支原體、腺病毒、呼吸道合胞病毒、流感病毒和副病毒等病原體IgM抗體都在1周左右出現(xiàn)，因此IgM可作為近期感染的一個有效指標。呼吸道感染-概述呼吸道感染：指病原體感染人體的鼻腔、咽喉、呼吸道感染-病因呼吸道合胞病毒流感病毒副流感病毒腺病毒鼻病毒柯薩奇病毒?？刹《竟跔畈《締渭儼捳畈《綞B病毒其它類型病毒繼發(fā)溶血性鏈球菌肺炎鏈球菌流感嗜血桿菌肺炎支原體肺炎衣原體金黃色葡萄球菌其它病毒感染后繼發(fā)細菌感染呼吸道感染-病因呼吸道合胞病毒繼發(fā)溶血性鏈球菌病毒感染后繼目前國內(nèi)外檢測較多的呼吸道病原體1、病毒： 呼吸道合

6、胞病毒、腺病毒、流感病毒A、流感病毒B、副流感病毒、柯薩奇B組病毒、埃可病毒、水痘-帶狀皰疹病毒、巨細胞病毒、EB病毒、腮腺炎病毒、麻疹病毒、風疹病毒、鼻病毒等。2、其它微生物： 肺炎支原體、肺炎衣原體、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌等。3、目前國內(nèi)外檢測較多的是下面15種： 呼吸道合胞病毒、腺病毒、A型流感病毒、B型流感病毒、副流感病毒、柯薩奇B組病毒、埃可病毒、水痘-帶狀皰疹病毒、巨細胞病毒、EB病毒、腮腺炎病毒、麻疹病毒、風疹病毒、肺炎衣原體、肺炎支原體。目前國內(nèi)外檢測較多的呼吸道病原體1、病毒：呼吸道病原體感染率呼吸道病原體感染率呼吸道病原體抗體檢測及臨床應用呼吸道病原體感染臨床特征的異同

7、點病原體名稱臨床共同特征臨床特異特征流感病毒A頭痛發(fā)燒畏寒鼻塞咳嗽咽痛發(fā)燒體溫較高、惡寒明顯、肌肉酸痛、常年流行流感病毒B發(fā)燒體溫較高不如A型高，惡寒不如A型明顯、肌肉酸痛副流感病毒小兒肺炎、小兒哮喘、中耳炎腺病毒腺病毒肺炎、流行性角膜炎、闌尾炎、腸炎呼吸道合胞病毒喘憋性肺炎、中耳炎、胸膜炎、心肌炎EB病毒傳單、慢性活動性EBV感染、EBV相關嗜血淋巴組織細胞增多癥、鼻咽癌、淋巴瘤、何杰金氏病柯薩奇B組病毒病毒性心肌炎、無菌性腦膜炎、流行性心痛?？刹《静《拘孕募⊙?、無菌性腦膜炎、胸膜炎、腦脊髓炎腮腺炎病毒腮腺炎、腦膜炎、睪丸炎、卵巢炎、胰腺炎水痘帶狀皰疹病毒水痘、帶狀皰疹、無菌性腦炎、格林巴利

8、綜合癥、萊耶綜合征腦炎、水痘性肺炎麻疹病毒結(jié)膜炎、口腔黏膜斑、全身丘疹風疹病毒出疹巨細胞病毒肝炎肺炎支原體非典型肺炎、兒童哮喘、過敏性紫癜肺炎衣原體社區(qū)獲得性肺炎、鼻竇炎呼吸道病原體感染臨床特征的異同點病原體名稱臨床共同特征臨床特臨床組合推薦門診病人 ： 血常規(guī) + CRP （PCT） + 肺炎支原體 / 肺炎衣原體 流感季節(jié)： 甲流、乙流、副流感 +（合胞病毒、腺病毒、肺炎支原體、肺炎衣原體） 感冒咳嗽兩項：血常規(guī)+肺炎支原體+肺炎衣原體 感冒咳嗽兩項：肺炎支原體+合胞病毒或者肺炎衣原體+合胞病毒住院病人： 肺炎支原體+肺炎衣原體+肺炎鏈球菌+金黃色葡萄球菌+呼吸道病毒（流感、副流感、合胞病

9、毒、腺病毒、柯薩奇病毒、埃可病毒、腮腺炎病毒等）臨床組合推薦門診病人 ：臨床組合推薦社區(qū)獲得型肺炎（CAP）：肺炎支原體 + 肺炎衣原體 + 肺炎鏈球菌毛細支氣管炎（呼吸四項）：呼吸道合胞病毒、腺病毒、肺炎支原體、肺炎衣原體 小兒病毒性心肌炎患者：柯薩奇B組病毒 + ?？刹《拘耗X膜炎等神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者：柯薩奇B組病毒+?？刹《?水痘病毒+腮腺炎病毒（HSV-I, EB，CMV。）傳染性單核細胞增多癥患兒：EB病毒系列手足口病患兒：柯薩奇A組病毒腸道病毒臨床組合推薦社區(qū)獲得型肺炎（CAP）：肺炎支原體 + 肺炎衣呼吸道病毒早期檢測的臨床意義減少不必要的抗生素使用，降低醫(yī)療費用監(jiān)控和控制院內(nèi)感染

10、提供臨床診斷需要的流行病學信息呼吸道病毒早期檢測的臨床意義減少不必要的抗生素使用，降低醫(yī)療呼吸道病毒早治療的益處緩解癥狀，縮短病程，并降低并發(fā)癥發(fā)生率縮短排毒時間，降低病死率在流行期間，預防性使用可降低患病率呼吸道病毒早治療的益處緩解癥狀，縮短病程，并降低并發(fā)癥發(fā)生率實驗室檢測技術(shù)涂片及培養(yǎng)血培養(yǎng)免疫學診斷（血清學檢測） 抗體：目前常用的診斷技術(shù) 尿抗原：SP、LP Biomarker:降鈣素原：-區(qū)分細菌及非細菌感染-評估感染嚴重程度-比CRP特異血清學檢測：酶聯(lián)免疫法（ELISA）：目前為首選的檢測方法。靈敏度高（10-15g）, 特異性強。75分鐘內(nèi)出結(jié)果。即可單人份，又可批量檢測?；瘜W

11、發(fā)光法（CLIA）：靈敏度高（10-18 g）, 特異性強。板式發(fā)光90分鐘內(nèi)出結(jié)果，全自動磁微粒發(fā)光30分鐘內(nèi)出結(jié)果。分子診斷：病原體核酸檢測陽性的價值逐漸提高。實驗室檢測技術(shù)涂片及培養(yǎng)呼吸道病原體潛伏期及IgM抗體產(chǎn)生情況呼吸道病原體潛伏期及IgM抗體產(chǎn)生情況病原體感染后 IgM、IgG相關臨床意義病原體感染后 IgM、IgG相關臨床意義新鮮采集的血清樣本應先充分離心，然后取澄清的液體進行檢測，如未充分沉淀，懸浮的纖維蛋白可能引起假陽性。避免使用含懸浮纖維蛋白或聚集物、重度溶血（血紅蛋白含量大于10g/L）、高膽紅素（膽紅素含量大于0.2g/L）、高脂（甘油三脂含量大于20g/L）的樣品。

12、標本中含有EDTA、檸檬酸鈉、肝素鈉等抗凝劑時，不影響結(jié)果，可用于本實驗。短期（1周）內(nèi)進行檢測的血清樣品可存放于28，如需長期保存，應置于-20以下凍存，避免反復凍融。使用前請將樣品室溫平衡30分鐘以上，冷凍樣品實驗前需混勻。樣本要求19新鮮采集的血清樣本應先充分離心，然后取澄清的液體進行檢測，如儲存條件、有效期及適用儀器ELISA法試劑盒：于28避光保存，有效期12個月。ELISA法試劑盒：開包裝后請在30天內(nèi)用完。加樣器、溫箱、洗板機、單波長450nm或者是雙波長450nm/630nm的酶標儀。膠體金法試劑盒：于4-30避光保存，有效期12個月。膠體金法試劑盒：使用環(huán)境相對濕度60%時，開袋后30分鐘內(nèi)使用。儲存條件、有效期及適用儀器ELISA法試劑盒：于28避光注意事項1.測定結(jié)果的判斷必須以酶標儀讀數(shù)為準。2.任何血清都應作為具有傳染性樣品對待。3.試劑盒置28保存，有效期12個月，請于有效期內(nèi)使用。4.不同批號試劑請勿混用。5.嚴格