基礎(chǔ)知識回歸-答案即全日制八、高三春季標(biāo)課下基礎(chǔ)

1、必記-選修新課標(biāo)高考生物最后沖刺回歸選修 1 一、 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用一、果酒和果醋的制作1果酒制作的原理所需菌種為酵母菌，其代謝類型 兼性厭氧型菌種的生活特點(diǎn)。酶在有氧氣條件下，進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖反應(yīng)式：C6H12O6 + 6O2 + 6H2O6CO2 + 12H2O + 能量酶在無氧條件下，進(jìn)行無氧呼吸。反應(yīng)式：C6H12O6發(fā)酵最適溫度： 18252果醋制作的原理2C2H5OH + 2CO2 + 能量所需菌種：醋酸菌，其代謝類型為菌種的生活特點(diǎn)異養(yǎng)需氧型，最適生長溫度為 3035 。當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變成乙醛，再變?yōu)榇姿帷?/p>

2、酶反應(yīng)簡式：C H OH2 5+ O2CH COCOOH+ H O2+ 能量33果酒、果醋的制作流程挑選葡萄沖洗榨汁發(fā)酵醋酸發(fā)酵果酒果醋二、腐乳的制作所需菌種：多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，如青霉、曲霉、毛霉等，起主要作用的是 毛霉。菌種的作用特點(diǎn)產(chǎn)生蛋白酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸。產(chǎn)生的脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。3腐乳制作的實(shí)驗(yàn)流程讓豆腐上長出毛霉4.影響腐乳品質(zhì)的條件加鹽腌制加鹵湯裝瓶密封腌制。（1）鹵湯直接關(guān)系到腐乳的色、香、味。鹵湯中的酒可以選用料酒、黃酒、米酒、高粱酒等，含量一般控制在_12% 左右。加酒可以抑制微生物的生長，同時(shí)能使腐乳具有獨(dú)特的香味。香辛料種

3、類很多，如：胡椒、花椒、八角、桂皮、姜、辣椒等，香辛料可以調(diào)制腐乳的風(fēng)味，也具有 防腐殺菌作用的作用。（2）控制好材料的用量用鹽腌制時(shí)，若鹽的濃度_過低，以抑制微生物生長，可能導(dǎo)致豆腐會影響腐乳的口味。變質(zhì)；若鹽的濃度 過高，鹵湯中酒的含量應(yīng)控制在 12%左右。含量過高，腐乳成時(shí)間會_延長 ；含量過低，以抑制微生物生長，可能導(dǎo)致豆腐。二、DNA 的粗提取與鑒定思路利用 DNA 與 RNA、蛋白質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異，提取 DNA，去除其他成分。原理（1）利用 DNA 的溶解性DNA 和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度 NaCl 中溶解度不同，鹽濃度為 0.14 mol/l 時(shí)，DNA 溶解度

4、最小。DNA 不溶于溶液，某些 蛋白質(zhì)則溶于（2）利用 DNA 的耐受性蛋白酶水解：蛋白酶能水解蛋白質(zhì)，但是對 DNA 沒有影響。高溫變性：大多數(shù)蛋白質(zhì)受 6080的高溫，而 DNA 在 80以上才會變性。洗滌劑能夠3實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)細(xì)胞膜，但對 DNA 沒有影響。（1）材料的選取：選用DNA相對較高的生物組織。加蒸餾水 用過濾（2）細(xì)胞的破碎（以雞血為例） 雞血細(xì)胞玻璃棒攪拌收集濾液。（3）雜質(zhì)的去除：方案之一是利用 DNA 在不同濃度的 NaCl 中溶解度的不同，通過控制 NaCl 溶液的濃度去除雜質(zhì)。具體做法：在濾液中加入 NaCl，使 NaCl 溶液的濃度為 2 mol/ L，過濾除去不溶的雜

5、質(zhì)，再加蒸餾水 調(diào)節(jié) NaCl 溶液的濃度為 0.14 mol/ L，析出 DNA,過濾除去溶液中的雜質(zhì)，在我用 2 mol/ L 的溶液溶解 DNA。 （4）DNA 的析出：處理后的溶液過濾，加入與濾液體積相等的、冷卻的4DNA 的鑒定 DNA 溶解在 2 mol/l 的 NaCl溶液中 + 二苯胺試劑溶液可使 DNA 析出。溶液顏色變藍(lán)。沸水浴加熱選修三 一、工程一工程的概念由于二工程是在 DNA 分子水平上進(jìn)行操作,因此又叫做 重組 DNA 技術(shù) 。工程的基本工具（一）“分子手術(shù)刀”限制性核酸內(nèi)切酶（簡稱限制酶）來源：主要是從原核生物中分離純化出來的。功能：能夠識別雙鏈 DNA 分子的某

6、種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二 酯鍵斷開。3結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的 DN（二）“分子針線”DNA 連接酶段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。分類：根據(jù)酶的來源不同，可分為EcoliDNA 連接酶和T4DNA 連接酶兩類功能：恢復(fù)被限制酶切開了的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。兩種 DNA 連接酶(EcoliDNA 連接酶和 T4DNA 連接酶)的比較：相同點(diǎn)：都縫合磷酸二酯鍵 區(qū)別：EcoIiDNA連接酶來源于大腸桿菌，只能使黏性末端之間連接；T4DNA連接酶能縫合兩種平末端，但連接平末端之間的效率較低。DNA 連接酶與 DNA 聚合酶作用的比較DNA

7、連接酶DNA 聚合酶不 同點(diǎn)連接的 DNA雙鏈單鏈模板不要模板要模板連接的對 象2 個(gè) DN段單個(gè)脫氧核苷酸加到已存在的單鏈 DN段上相 同點(diǎn)作用實(shí)質(zhì)形成磷酸二酯鍵化學(xué)本質(zhì)蛋白質(zhì)操作環(huán)境操作對象操作水平基本過程結(jié)果生物體外分子水平剪切拼接導(dǎo)入表達(dá)人類需要的產(chǎn)物(三) “分子車” 載體 1.載體具備的條件：能在受體細(xì)胞中并穩(wěn)定保存；具有一至多個(gè) 限制酶切割位點(diǎn)，段；具有標(biāo)記，供重組 DNA 的鑒定和選擇。供外源 DN工程常用的載體有： 質(zhì)粒 、 噬菌體 和動、植物等最早應(yīng)用的載體是質(zhì)粒，它是雙鏈環(huán)2.狀 DNA 分子。三工程的基本過程(一) 獲得目的（目的的獲取）1.獲取方法主要有兩種：從自然界

8、中已有的物種中分離出來，如可從文庫中獲取。用人工的方法。獲得原核細(xì)胞的目的可采取 直接分離，獲取真核細(xì)胞的目的一般是人工。人工目的的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)法。2.利用 PCR 技術(shù)擴(kuò)增目的PCR 的含義：是一項(xiàng)在生物體外目的：獲取大量的目的原理： DNA 雙鏈特定 DN段的核酸技術(shù)。過程：第一步：加熱至 9095DNA 解鏈為單鏈 第二步：冷卻到 5560，引物與兩條單鏈 DNA 結(jié) 合；第三步：加熱至 7075，熱穩(wěn)定 DNA 聚合酶從引物起始進(jìn)行互補(bǔ)鏈的。特點(diǎn)：指數(shù)形式擴(kuò)增(二)重組 DNA 分子（表達(dá)載體的構(gòu)建）1重組 DNA 分子的組成：除了目的外，還必須有標(biāo)記。標(biāo)記的作用：鑒定受體

9、細(xì)胞中是否含有 目的，從而將含有目的的細(xì)胞 篩選出來。2方法： 同種限制酶分別切割載體和目的，再用 DNA 連接酶把兩者連接。(三) 轉(zhuǎn)化受體細(xì)胞（將目的導(dǎo)入受體細(xì)胞）轉(zhuǎn)化的概念：是 目的進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定 和 表達(dá)的過程。常用的轉(zhuǎn)化方法：將目的導(dǎo)入植物細(xì)胞：采用最多的方法是 農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化技術(shù)（農(nóng)桿菌 轉(zhuǎn)化法），其次還有槍 介導(dǎo)轉(zhuǎn)化技術(shù)（槍 法）和花粉管通道技術(shù)（花粉管通道法 法）。導(dǎo)入動物細(xì)胞：最常用的方法是顯微注射技術(shù)。此方法受體細(xì)胞多是卵。將目的將目的導(dǎo)入微生物細(xì)胞： Ca處理法。(四) 篩選出獲得目的的受體細(xì)胞、培養(yǎng)受體細(xì)胞并誘導(dǎo)目的的表達(dá)（目的的檢測與鑒定）1

10、. 首先要檢測轉(zhuǎn)生物的技術(shù)。DNA 上是否了目的，方法是采用DNA 分子雜交2.其次還要檢測目的是否轉(zhuǎn)錄出 mRNA，方法是采用 分子雜交技術(shù)。最后檢測目的是否翻譯成蛋白質(zhì) ，方法是采用抗原抗體雜交技術(shù)。有時(shí)還需進(jìn)行生物學(xué)水平的鑒定。如抗蟲或抗病的鑒定等。工程的應(yīng)用1運(yùn)用工程改良動植物品種最突出的優(yōu)點(diǎn)是：能打破常規(guī)育種難以突破的物種之間的界限。2工程的應(yīng)用植物動物工程：抗 蟲 、抗 病 、抗 逆 轉(zhuǎn)植物，利用轉(zhuǎn)改良植物的品質(zhì)。工程：提高動物生長速度來提高動物生長速度，改善產(chǎn)品 品質(zhì) ，用轉(zhuǎn)動物生產(chǎn) 藥物，用動物作移植的 供體等。轉(zhuǎn)（3）和治療：又稱為 DNA，是采用的方法來判斷患者是否出現(xiàn)了異

11、常或攜帶病原體。治療：指利用 正常置換或彌補(bǔ)缺陷的治療方法。實(shí)例：ADA缺陷癥的治療二、細(xì)胞工程（一）植物細(xì)胞工程理論基礎(chǔ)（原理）：細(xì)胞全能性全能性表達(dá)的難易程度：卵生殖細(xì)胞干細(xì)胞體細(xì)胞； 植物細(xì)胞動物細(xì)胞植物組織培養(yǎng)技術(shù)（1）過程：離體的植物、組織或細(xì)胞 愈傷組織 試管苗 植物體（2）用途：微型繁殖、作物脫毒、制造人工、單倍體育種、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。（3）地位：是培育轉(zhuǎn)植物、植物體細(xì)胞雜交培育植物新品種的最后一道工序。3.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)（1）過程：誘導(dǎo)融合的方法：物理法包括離心、振動、電刺激等?；瘜W(xué)法一般是用聚乙二醇（PEG）作為誘導(dǎo)劑。意義：克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的。（二）動物細(xì)胞工

12、程動物細(xì)胞培養(yǎng)（1）概念：動物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動物機(jī)體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè) 細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長和繁殖。（2）動物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的或組織）剪碎用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞制成細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。（3）細(xì)胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。細(xì)胞數(shù)目不斷增多，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長到表面相互抑制時(shí)，細(xì)胞就會停止增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。（4）動物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無菌處

13、理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染。此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害。營養(yǎng)：培養(yǎng)基成分：糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等。通常需加入、血漿等天然成分。溫度：適宜溫度：哺乳動物多是 36.50.5；pH：7.27.4。氣體環(huán)境：95%空氣5%CO2。O2 是細(xì)胞代謝所必需的，CO2 的主要作用是維持培養(yǎng)液的 pH。（5）動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用：、單克隆抗體、檢測物質(zhì)、培養(yǎng)醫(yī)學(xué)研究的各種細(xì)胞。2.動物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動物（1）哺乳動物核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植（比較容易）和體細(xì)胞核移植（比較難）。（2）選用去核)細(xì)胞的原因：)

14、細(xì)胞比較大，容易操作；)細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)多，營養(yǎng)豐富。（4）體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用：加速家畜遺傳改良進(jìn)程，促進(jìn)良畜群繁育； 保護(hù)瀕危物種，增大存活數(shù)量；生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白；用于組織的移植等。（5）體細(xì)胞核移植技術(shù)存在 克隆動物存在著健康問題、作為異種移植的供體；：遺傳和生理缺陷等。（3）體細(xì)胞核移植的大致過程是：（右圖）核移植胚胎移植3.動物細(xì)胞融合（1）動物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交，是指兩個(gè)或多個(gè)動物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。融合后形成的具有原來兩個(gè) 或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞，稱為雜交細(xì)胞。（2）動物細(xì)胞融合與植物原生融合的原理基本相同，誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法與植物原生融合的方法類似，常用的誘導(dǎo)有聚乙二醇、滅活的、電刺激等。（3）動物細(xì)胞融合的意義：克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性，成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物生物新品種培育的重要。（4）動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較：4.單克隆抗體（1）抗體：一個(gè) B 淋巴細(xì)胞只一種特異性抗體。從中分離出的抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差。（2）單克隆抗體的過程：雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體。單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)，靈敏度高，并能大量。比較項(xiàng)目細(xì)胞融合的原理細(xì)胞融合的方法誘導(dǎo)用法植物體細(xì)胞雜交細(xì)胞膜的性去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生融合離心、電刺激、振動，聚乙二醇等試劑誘導(dǎo)克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親