儀器分析QC應(yīng)知應(yīng)會(huì)(初級(jí))

1、儀器組QC應(yīng)知應(yīng)會(huì)第一部分 實(shí)驗(yàn)室安全一、實(shí)驗(yàn)室安全準(zhǔn)則。1）、實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配備足夠的安全用具2）、實(shí)驗(yàn)室分析人員應(yīng)認(rèn)真遵守實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范、了解儀器設(shè)備的使用方法及操作過程中可能出現(xiàn)的事故。知道事故的處理方法。3）、實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行危險(xiǎn)性操作時(shí)，例：易燃易爆品的處理、危險(xiǎn)廢液的處理、危險(xiǎn)品的取樣分析等，應(yīng)穿有防護(hù)服并有第二人員陪伴，陪伴者應(yīng)能清晰并完整地觀察操作的全過程。4）、玻璃管與膠管、膠塞拆離時(shí)，應(yīng)先用水潤(rùn)濕，戴上工作手套，以免玻璃管折斷扎傷。5）、打開濃鹽酸、濃硝酸、濃氨水試劑瓶時(shí)應(yīng)帶防護(hù)用具，開前用冷水冷卻，瓶口不得對(duì)人。6）、稀釋濃硫酸、濃硝酸時(shí)是放熱的過程，必要時(shí)應(yīng)及時(shí)用冷水冷卻。只能將濃

2、硫酸緩緩倒入水中，不能倒反。倒時(shí)應(yīng)用玻璃棒不斷攪拌。7）、蒸餾易燃液體時(shí)嚴(yán)禁明火。蒸餾過程人不得離開，以防溫度過高或冷卻水突然中斷。8）、每個(gè)試劑瓶?jī)?nèi)應(yīng)貼有與內(nèi)容物相符的顯著的標(biāo)簽，嚴(yán)禁標(biāo)簽亂貼。9）、操作中不可擅自離開工作崗位，必須離開時(shí)應(yīng)有有處理能力的人負(fù)責(zé)看管。10）、實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)禁進(jìn)食（吸煙公司已經(jīng)禁止），不可用實(shí)驗(yàn)器皿放置、處理食物。離室前應(yīng)用洗手液（洗潔精）洗手。11）、工作時(shí)應(yīng)穿工作服，長(zhǎng)發(fā)不可披肩，應(yīng)扎起，不可在食堂等公共場(chǎng)所穿工作服。進(jìn)行危險(xiǎn)性工作時(shí)應(yīng)穿戴防護(hù)用具。實(shí)驗(yàn)操作時(shí)建議戴上眼鏡。12）、微生物檢驗(yàn)室操作人員在開紫外燈殺菌前，應(yīng)確認(rèn)無菌室無人后方可開紫外燈殺菌，開紫外燈順

3、序?yàn)椋合却蜷_操作臺(tái)紫外燈后立即離開無菌室緩沖間，再打開無菌室紫外燈。在紫外燈殺菌燈關(guān)閉半小時(shí)后方可進(jìn)入緩沖無菌室。13）、使用高壓殺菌鍋殺菌前，應(yīng)查看殺菌鍋內(nèi)的水是否充分（應(yīng)至少?zèng)]過殺菌鍋底的幾個(gè)棱角1cm），在確認(rèn)殺菌鍋各組件安裝正確后，方可開始?xì)⒕?，殺菌完成后，?yīng)關(guān)閉電源開關(guān)、安全閥、放氣閥，待其壓力自然下降至壓力表指至零位后，方可打開殺菌鍋，切勿打開放汽閥及強(qiáng)行打開殺菌鍋蓋。14）、每天下班離開公司前應(yīng)檢查水電氣窗，檢查完畢后方可鎖門離開。二、實(shí)驗(yàn)室安全。一切勞動(dòng)工作以人為本。保證實(shí)驗(yàn)人員的安全與健康、防止污染環(huán)境、保證實(shí)驗(yàn)室工作安全而有效的進(jìn)行是實(shí)驗(yàn)室管理工作的重要內(nèi)容。實(shí)驗(yàn)室安全包括

4、防火、防爆、防毒、防腐蝕、電氣安全和防止污染環(huán)境等方面。（一）、防止中毒、化學(xué)灼傷、割傷一切藥品和試劑要有與其內(nèi)容物相符的標(biāo)簽。劇毒藥品應(yīng)嚴(yán)格單獨(dú)上鎖保管。劇毒試劑用畢應(yīng)做解毒處理。嚴(yán)禁試劑入口以及用鼻子直接接近瓶口進(jìn)行鑒別。鑒別時(shí)應(yīng)將試劑瓶遠(yuǎn)離鼻子，用手輕輕煽動(dòng)，稍聞即止。取用帶腐蝕性的藥品，如強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、濃氨水、冰乙酸等，建議戴上防護(hù)手套，不要以為自己是超人。拿比較重的瓶子時(shí)，應(yīng)一手托住底部，一手拿住瓶口。處理有毒有害的氣體、有揮發(fā)性的藥品及有毒有機(jī)試劑時(shí)（如氮氧化物、溴、氯、硫化物、汞、砷化物、乙晴、吡啶等），應(yīng)在通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行。沒有通風(fēng)櫥也要站在上風(fēng)口。稀釋稀硫酸時(shí)，處理得容器必須耐熱，

5、玻璃棒必須不斷地?cái)嚢瑁仨殞⑺峋従彽谷胨?。溶解氫氧化鈉、氫氧化鉀等藥品時(shí)，因其會(huì)大量放熱，故也必須用耐熱容器處理。濃酸濃堿必須在各自稀釋后再中和。沸騰的液體不可馬上取下。如果必須立馬取下時(shí)，需用燒杯夾等工具夾住搖動(dòng)后再取下，以防液體突然爆沸濺出傷人。玻璃管插拔時(shí)應(yīng)戴工作手套。玻璃管套橡皮管前，應(yīng)用水潤(rùn)濕。（二）、防火、防爆（本公司內(nèi)嚴(yán)禁任何明火）實(shí)驗(yàn)室內(nèi)必須具備滅火用具。實(shí)驗(yàn)人員必須知道如何使用。操作易燃物時(shí)必須遠(yuǎn)離火源，瓶塞打不開時(shí)，切忌用火加熱或用力敲打。傾倒易燃液體時(shí)還必須謹(jǐn)防靜電。加熱可燃易燃物時(shí)，必須在水浴或者嚴(yán)密的電熱板上緩慢進(jìn)行，嚴(yán)禁用明火或電爐加熱。蒸餾液體時(shí)，如果需要補(bǔ)充液

6、體時(shí)，應(yīng)先等其冷卻后再補(bǔ)充。蒸餾易燃物時(shí)應(yīng)先通水再通電加熱。身上或手上沾有易燃物時(shí)，應(yīng)立即清洗干凈。不是所有的易燃物都是可以用水清洗的。烘箱、電爐周圍嚴(yán)禁放有易燃物或帶揮發(fā)性的易燃液體。（三）、滅火發(fā)生火災(zāi)時(shí)不得大呼小叫、到處亂跑，應(yīng)及時(shí)滅火。發(fā)生大規(guī)?；馂?zāi)時(shí)，首先應(yīng)快速?gòu)陌踩ǖ离x開失火場(chǎng)所，安全后撥打119，不可單獨(dú)沖入火災(zāi)現(xiàn)場(chǎng)滅火。（搶救公司財(cái)產(chǎn)的精神值得肯定，但此行為只會(huì)招致不必要的損失。）發(fā)生局部火災(zāi)時(shí)，應(yīng)立即切斷電源，選擇使用合適的滅火器滅火。滅火器滅火劑適用范圍二氧化碳滅火器二氧化碳液體適用于撲滅油類、易燃燒、氣體和電氣設(shè)備的火災(zāi)1211滅火器二氟一氯一溴甲烷用于油類、檔案資料、

7、電氣設(shè)備、精密儀器的滅火合成泡沫發(fā)泡劑為蛋白、氟碳表面活性劑撲救非水溶性可燃液體、油類和一般固體物的火災(zāi)干粉滅火器分為ABC型 BC型。前者為磷酸銨鹽干粉滅火劑，后者為碳酸氫鈉干粉滅火劑。用于撲救油類、可燃液體、可燃?xì)怏w和電氣設(shè)備的火災(zāi) 身上的衣物著火時(shí)不可跑動(dòng)。應(yīng)迅速脫去衣物，或在地上打滾撲滅。滅火器不可對(duì)人臉。（四）、有毒有害化學(xué)物質(zhì)的處理無機(jī)酸類：將廢酸慢慢倒入過量的含碳酸鈉或氫氧化鈣的水溶液中或用廢堿相互中和。中和后用大量水沖洗。氫氧化鈉、氨水：用鹽酸水溶液中和后，再用大量水沖洗。含氰廢液：加入氫氧化鈉使PH大于10，加入過量的3%的高錳酸鉀溶液，使CN-氧化分解。含氟廢液：加入石灰使

8、生成氟化鈣沉淀。可燃有機(jī)物：焚燒爐焚燒。（五）、化驗(yàn)室用電安全化驗(yàn)室用電要根據(jù)設(shè)備及房間用電總功率配備電源?；?yàn)室電源電壓要穩(wěn)定?；?yàn)室照明和設(shè)備用電要分開各項(xiàng)電源要匹配好。精密儀器需要有穩(wěn)壓?；?yàn)室電源要和生產(chǎn)車間用電量大的設(shè)備電源分開。化驗(yàn)室電源要有地線.三相五線制。第二部分 基本常識(shí)第一章 允許差一、準(zhǔn)確度和誤差 1.準(zhǔn)確度 系指測(cè)得結(jié)果與真實(shí)值接近的程度。 2.誤差 系指測(cè)得結(jié)果與真實(shí)值之差。二、精密度和偏差 1.精密度 系指在同一實(shí)驗(yàn)中，每次測(cè)得的結(jié)果與它們的平均值接近的程度。 2.偏差 系指測(cè)得的結(jié)果與平均值之差。三、誤差和偏差 由于“真實(shí)值”無法準(zhǔn)確知道，因此無法計(jì)算誤差。在實(shí)際

9、工作中，通常是計(jì)算偏差（或用平均值代替真實(shí)值計(jì)算誤差，其結(jié)果仍然是偏差）。四、絕對(duì)偏差和相對(duì)偏差 絕對(duì)偏差 = 測(cè)得值平均值 絕對(duì)偏差 相對(duì)偏差 = -100% 平均值若兩份平行操作，設(shè)A、B為兩次測(cè)得值，則其相對(duì)偏差如下式計(jì)算： A平均值 A(AB)/2 AB 相對(duì)偏差（%）= - 100% = -100% =-100% 平均值 (AB)/2 AB五、標(biāo)準(zhǔn)偏差和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差 1.標(biāo)準(zhǔn)偏差 是反映一組供試品測(cè)定值的離散的統(tǒng)計(jì)指標(biāo)。 若設(shè)供試品的測(cè)定值為Xi，則其平均值為X，且有n個(gè)測(cè)定值，那么標(biāo)準(zhǔn)偏差為：1.標(biāo)準(zhǔn)偏差（SD）SX = 2.相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）SX RSD = 100%六、最大

10、相對(duì)偏差 相對(duì)偏差 是用來表示測(cè)定結(jié)果的精密度，根據(jù)對(duì)分析工作的要求不同而制定的最大值（也稱允許差）。七、誤差限度 誤差限度 系指根據(jù)生產(chǎn)需要和實(shí)際情況，通過大量實(shí)踐而制定的測(cè)定結(jié)果的最大允許相對(duì)偏差。第二章 有效數(shù)字的處理一、有效數(shù)字1.在分析工作中實(shí)際能測(cè)量到的數(shù)字就稱為有效數(shù)字。2.在記錄有效數(shù)字時(shí)，規(guī)定只允許數(shù)的末位欠準(zhǔn)，而且只能上下差1。二、有效數(shù)字修約規(guī)則用“四舍六入五成雙”規(guī)則舍去過多的數(shù)字。即當(dāng)尾數(shù)4時(shí)，則舍；尾數(shù)6時(shí)，則入；尾數(shù)等于5時(shí)，若5前面為偶數(shù)則舍，為奇數(shù)時(shí)則入。當(dāng)5后面還有不是零的任何數(shù)時(shí)，無論5前面是偶或奇皆入。 例如：將下面左邊的數(shù)字修約為三位有效數(shù)字 2.32

11、42.32 2.3252.32 2.3262.33 2.3352.34 2.325012.33三、有效數(shù)字運(yùn)算法則 1.在加減法運(yùn)算中，每數(shù)及它們的和或差的有效數(shù)字的保留，以小數(shù)點(diǎn)后面有效數(shù)字位數(shù)最少的為標(biāo)準(zhǔn)。在加減法中，因是各數(shù)值絕對(duì)誤差的傳遞，所以結(jié)果的絕對(duì)誤差必須與各數(shù)中絕對(duì)誤差最大的那個(gè)相當(dāng)。 例如：2.03750.074539.54 = ？39.54是小數(shù)點(diǎn)后位數(shù)最少的，在這三個(gè)數(shù)據(jù)中，它的絕對(duì)誤差最大，為0.01，所以應(yīng)以39.54為準(zhǔn)，其它兩個(gè)數(shù)字亦要保留小數(shù)點(diǎn)后第二位，因此三數(shù)計(jì)算應(yīng)為：2.040.0739.54 = 41.65 2.在乘除法運(yùn)算中，每數(shù)及它們的積或商的有效數(shù)字

12、的保留，以每數(shù)中有效數(shù)字位數(shù)最少的為標(biāo)準(zhǔn)。在乘除法中，因是各數(shù)值相對(duì)誤差的傳遞，所以結(jié)果的相對(duì)誤差必須與各數(shù)中相對(duì)誤差最大的那個(gè)相當(dāng)。 例如：13.920.01121.9723 = ？ 0.0112是三位有效數(shù)字，位數(shù)最少，它的相對(duì)誤差最大，所以應(yīng)以0.0112的位數(shù)為準(zhǔn)，即： 13.90.01121.97 = 0.307 3.分析結(jié)果小數(shù)點(diǎn)后的位數(shù)，應(yīng)與分析方法精密度小數(shù)點(diǎn)后的位數(shù)一致。 4.檢驗(yàn)結(jié)果的寫法應(yīng)與藥典規(guī)定相一致。第三章 藥典、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中有關(guān)概念及規(guī)定一、試驗(yàn)溫度1.水浴溫度 除另有規(guī)定外，均指98100；2.熱水 系指7080；3.微溫或溫水 系指4050；4.室溫 系指103

13、0；5.冷水 系指210；6.冰浴 系指約0；7.放冷 系指放冷至室溫。二、取樣量的準(zhǔn)確度 1.試驗(yàn)中供試品與試藥等“稱量”或“量取”的量，均以阿拉伯?dāng)?shù)碼表示，其精確度可根據(jù)數(shù)值的有效數(shù)位來確定，如稱取“0.1g”，系指稱取重量可為0.060.14g；稱取“2g”，系指稱取重量可為1.52.5g；稱取“2.0g”，系指稱取重量可為1.952.05g；稱取“2.00g”，系指稱取重量可為1.9952.005g。 2.“精密稱定”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。 3.“稱定”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的百分之一。 4.“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精密度

14、要求。 5.“量取”系指可用量筒或按照量取體積的有效位數(shù)選用量具。 6.取用量為“約”若干時(shí)，系指取用量不得超過規(guī)定量的10%。三、試驗(yàn)精密度 1.恒重 除另有規(guī)定外，系指供試品連續(xù)兩次干燥或熾灼后的重量差異在0.3mg以下的重量；干燥至恒重的第二次及以后各次稱重均應(yīng)在規(guī)定條件下繼續(xù)干燥1小時(shí)后進(jìn)行；熾灼至恒重的第二次稱重應(yīng)在繼續(xù)熾灼30分鐘后進(jìn)行。 2.試驗(yàn)中規(guī)定“按干燥品（或無水物，或無溶劑）計(jì)算”時(shí)，除另有規(guī)定外，應(yīng)取未經(jīng)干燥（或未去水，或未去溶劑）的供試品進(jìn)行試驗(yàn)，并將計(jì)算中的取用量按檢查項(xiàng)下測(cè)得的干燥失重（或水分，或溶劑）扣除。 3.試驗(yàn)中的“空白試驗(yàn)”，系指在不加供試品或以等量溶劑

15、替代供試液的情況下，按同法操作所得的結(jié)果；含量測(cè)定中的“并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正”，系指按供試品所耗滴定液的量（ml）與空白試驗(yàn)中所耗滴定液量（ml）之差進(jìn)行計(jì)算。 4.試驗(yàn)時(shí)的溫度，未注明者，系指在室溫下進(jìn)行；溫度高低對(duì)試驗(yàn)結(jié)果有顯著影響者，除另有規(guī)定外，應(yīng)以252為準(zhǔn)。四、試驗(yàn)用水，除另有規(guī)定外，均系指純化水。酸堿度檢查所用的水，均系指新沸并放冷至室溫的水。五、酸堿性試驗(yàn)時(shí)，如未指明用何種指示劑，均系指石蕊試紙。六、液體的滴，系在20時(shí)，以1.0ml水為20滴進(jìn)行換算。七、本版藥典使用的滴定液和試液的濃度，以mol/L（摩爾/升）表示者，其濃度要求精密標(biāo)定的滴定液用“XXX滴定液（YY

16、Ymol/L）”表示；作其他用途不需精密標(biāo)定其濃度時(shí)，用“YYYmol/L XXX溶液”表示，以示區(qū)別。八、限度 1.標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的各種純度和限度數(shù)值以及制劑的重（裝）量差異，系包括上限和下限兩個(gè)數(shù)值本身及中間數(shù)值。規(guī)定的這些數(shù)值不論是百分?jǐn)?shù)還是絕對(duì)數(shù)字，其最后一位數(shù)字都是有效位。 試驗(yàn)結(jié)果在運(yùn)算過程中，可比規(guī)定的有效數(shù)字多保留一位數(shù)，而后根據(jù)有效數(shù)字的修約規(guī)則進(jìn)舍至規(guī)定有效位。計(jì)算所得的最后數(shù)值或測(cè)定讀數(shù)值均可按修約規(guī)則進(jìn)舍至規(guī)定的有效位，取此數(shù)值與標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的限度數(shù)值比較，以判斷是否符合規(guī)定的限度。 2.原料藥的含量（%），除另有注明者外，均按重量計(jì)。如規(guī)定上限為100%以上時(shí)，系指用本藥典

17、規(guī)定的分析方法測(cè)定時(shí)可能達(dá)到的數(shù)值，它為藥典規(guī)定的限度或允許偏差，并非真實(shí)含有量；如未規(guī)定上限時(shí)，系指不超過101.0%。九、溶解度試驗(yàn)法： 除另有規(guī)定外，稱取研成細(xì)粉的供試品或量取液體供試品，置于252一定容量的溶劑中，每隔5分鐘強(qiáng)力振搖30秒鐘；觀察30分鐘內(nèi)的溶解情況，如看不見溶質(zhì)顆?；蛞旱螘r(shí)，即視為完全溶解。十、含量測(cè)定必須平行測(cè)定兩份，其結(jié)果應(yīng)在允許相對(duì)偏差限度之內(nèi)，以算術(shù)平均值為測(cè)定結(jié)果，如一份合格，另一份不合格，不得平均計(jì)算，應(yīng)重新測(cè)定。十一、記錄復(fù)核 檢驗(yàn)記錄完成后，應(yīng)有第二人對(duì)記錄內(nèi)容、計(jì)算結(jié)果進(jìn)行復(fù)核。復(fù)核后的記錄，屬內(nèi)容、計(jì)算錯(cuò)誤，復(fù)核人要負(fù)責(zé)；屬檢驗(yàn)錯(cuò)誤復(fù)核人無責(zé)任。第

18、四章 取樣方法一、進(jìn)廠原料取樣對(duì)進(jìn)廠原料按批（或件數(shù)）取樣。若設(shè)進(jìn)廠總件數(shù)為n，則當(dāng)n3時(shí)，每件取樣；當(dāng)3n300時(shí)，按1取樣量隨機(jī)取樣；當(dāng)n300時(shí)，按1取樣量隨機(jī)取樣。二、對(duì)中間體（半成品）按批（包裝單位：桶、鍋等）取樣。若設(shè)總包裝單位為n，則當(dāng)n3時(shí)，按包裝單位取樣；當(dāng)3n300時(shí)，按1取樣量隨機(jī)取樣；當(dāng)n300時(shí)，按1取樣量隨機(jī)取樣。三、對(duì)成品按批取樣。若設(shè)總件數(shù)（包裝單位：箱、袋、盒、筒等）為n，則當(dāng)n3時(shí)，逐件取樣；當(dāng)3n300時(shí)，按1取樣量隨機(jī)取樣；當(dāng)n300時(shí)，按1取樣量隨機(jī)取樣。第三部分 基礎(chǔ)專業(yè)知識(shí)及操作技能第一章 化驗(yàn)室常用玻璃儀器一、 常用玻璃儀器的主要用途、使用注意事

19、項(xiàng)一覽表名 稱主要用途使用注意事項(xiàng)燒杯配制溶液、溶解樣品等加熱時(shí)應(yīng)置于石棉網(wǎng)上，使其受熱均勻，一般不可燒干錐形瓶加熱處理試樣和容量分析滴定除有與上相同的要求外，磨口錐形瓶加熱時(shí)要打開塞，非標(biāo)準(zhǔn)磨口要保持原配塞碘瓶碘量法或其它生成揮發(fā)性物質(zhì)的定量分析同上圓（平）底燒瓶加熱及蒸餾液體一般避免直火加熱，隔石棉網(wǎng)或各種加熱浴加熱圓底蒸餾燒瓶蒸餾；也可作少量氣體發(fā)生反應(yīng)器同上凱氏燒瓶消解有機(jī)物質(zhì)置石棉網(wǎng)上加熱，瓶口方向勿對(duì)向自己及他人洗瓶裝純化水洗滌儀器或裝洗滌液洗滌沉淀量筒、量杯粗略地量取一定體積的液體用不能加熱，不能在其中配制溶液，不能在烘箱中烘烤，操作時(shí)要沿壁加入或倒出溶液量瓶配制準(zhǔn)確體積的標(biāo)準(zhǔn)溶

20、液或被測(cè)溶液非標(biāo)準(zhǔn)的磨口塞要保持原配；漏水的不能用；不能在烘箱內(nèi)烘烤，不能用直火加熱，可水浴加熱滴定管（25 50 100ml）容量分析滴定操作；分酸式、堿式活塞要原配；漏水的不能使用；不能加熱；不能長(zhǎng)期存放堿液；堿式管不能放與橡皮作用的滴定液微量滴定管1 2 3 4 5 10ml微量或半微量分析滴定操作只有活塞式；其余注意事項(xiàng)同上自動(dòng)滴定管自動(dòng)滴定；可用于滴定液需隔絕空氣的操作除有與一般的滴定管相同的要求外，注意成套保管，另外，要配打氣用雙連球移液管準(zhǔn)確地移取一定量的液體不能加熱；上端和尖端不可磕破刻度吸管準(zhǔn)確地移取各種不同量的液體同上稱量瓶矮形用作測(cè)定干燥失重或在烘箱中烘干基準(zhǔn)物；高形用于

21、稱量基準(zhǔn)物、樣品不可蓋緊磨口塞烘烤，磨口塞要原配試劑瓶：細(xì)口瓶、廣口瓶、下口瓶細(xì)口瓶用于存放液體試劑；廣口瓶用于裝固體試劑；棕色瓶用于存放見光易分解的試劑不能加熱；不能在瓶?jī)?nèi)配制在操作過程放出大量熱量的溶液；磨口塞要保持原配；放堿液的瓶子應(yīng)使用橡皮塞，以免日久打不開滴瓶裝需滴加的試劑同上漏斗長(zhǎng)頸漏斗用于定量分析，過濾沉淀；短頸漏斗用作一般過濾分液漏斗：滴液 球形 梨形 筒形分開兩種互不相溶的液體；用于萃取分離和富集（多用梨形）；制備反應(yīng)中加液體（多用球形及滴液漏斗）磨口旋塞必須原配，漏水的漏斗不能使用。試管：普通試管、離心試管定性分析檢驗(yàn)離子；離心試管可在離心機(jī)中借離心作用分離溶液和沉淀硬質(zhì)玻

22、璃制的試管可直接在火焰上加熱，但不能聚冷；離心管只能水浴加熱（納氏）比色管比色、比濁分析不可直火加熱；非標(biāo)準(zhǔn)磨口塞必須原配；注意保持管壁透明，不可用去污粉刷洗冷凝管：直形 球形 蛇形 空氣冷凝管用于冷卻蒸餾出的液體，蛇形管適用于冷凝低沸點(diǎn)液體蒸汽，空氣冷凝管用于冷凝沸點(diǎn)150以上的液體蒸汽不可聚冷聚熱；注意從下口進(jìn)冷卻水，上口出水抽濾瓶抽濾時(shí)接受濾液屬于厚壁容器，能耐負(fù)壓；不可加熱表面皿蓋燒杯及漏斗等不可直火加熱，直徑要略大于所蓋容器研缽研磨固體試劑及試樣等用；不能研磨與玻璃作用的物質(zhì)不能撞擊；不能烘烤干燥器保持烘干或灼燒過的物質(zhì)的干燥；也可干燥少量制備的產(chǎn)品底部放變色硅膠或其它干燥劑，蓋磨口

23、處涂適量凡士林；不可將紅熱的 物體放入，放入熱的物體后要時(shí)時(shí)開蓋以免蓋子跳起或冷卻后打不開蓋子垂熔玻璃漏斗過濾必須抽濾；不能聚冷聚熱；不能過濾氫氟酸、堿等；用畢立即洗凈垂熔玻璃坩堝重量分析中烘干需稱量的沉淀同上標(biāo)準(zhǔn)磨口組合儀器有機(jī)化學(xué)及有機(jī)半微量分析中制備及分離磨口處勿需涂潤(rùn)滑劑；安裝時(shí)不可受歪斜壓力；要按所需裝置配齊購(gòu)置二、 玻璃儀器的洗滌方法1.潔凈劑及其使用范圍 最常用的潔凈劑有肥皂、合成洗滌劑（如洗衣粉）、洗液（清潔液）、有機(jī)溶劑等。 肥皂、合成洗滌劑等一般用于可以用毛刷直接刷洗的儀器，如燒瓶、燒杯、試劑瓶等非計(jì)量及非光學(xué)要求的玻璃儀器。 肥皂、合成洗滌劑也可用于滴定管、移液管、量瓶等

24、計(jì)量玻璃儀器的洗滌，但不能用毛刷刷洗。 洗液多用于不能用毛刷刷洗的玻璃儀器，如滴定管、移液管、量瓶、比色管、玻璃垂熔漏斗、凱氏燒瓶等特殊要求與形狀的玻璃儀器；也用于洗滌長(zhǎng)久不用的玻璃儀器和毛刷刷不下的污垢。 2.洗滌玻璃儀器的方法與要求 （1）一般的玻璃儀器（如燒瓶、燒杯等）：先用自來水沖洗一下，然后用肥皂、洗衣粉用毛刷刷洗，再用自來水清洗，最后用純化水沖洗3次（應(yīng)順壁沖洗并充分震蕩，以提高沖洗效果）。 計(jì)量玻璃儀器（如滴定管、移液管、量瓶等）：也可用肥皂、洗衣粉的洗滌，但不能用毛刷刷洗。 （2）精密或難洗的玻璃儀器（滴定管、移液管、量瓶、比色管、玻璃垂熔漏斗等）：先用自來水沖洗后，瀝干，再用

25、鉻酸清潔液處理一段時(shí)間（一般放置過夜），然后用自來水清洗，最后用純化水沖洗3次。 （3）洗刷儀器時(shí)，應(yīng)首先將手用肥皂洗凈，免得手上的油污物沾附在儀器壁上，增加洗刷的困難。 （4）一個(gè)洗凈的玻璃儀器應(yīng)該不掛水珠（洗凈的儀器倒置時(shí)，水流出后器壁不掛水珠）。二、玻璃儀器的干燥 （1）晾干 不急等用的儀器，可放在儀器架上在無塵處自然干燥。 （2）急等用的儀器可用玻璃儀器氣流烘干器干燥（溫度在6070為宜）。 （3）計(jì)量玻璃儀器應(yīng)自然瀝干，不能在烘箱中烘烤。三、玻璃儀器的保管要分門別類存放在試驗(yàn)柜中，要放置穩(wěn)妥，高的、大的儀器放在里面。需長(zhǎng)期保存的磨口儀器要在塞間墊一張紙片，以免日久粘住。 第三章化學(xué)試

26、劑等級(jí) 1.一級(jí)品 即優(yōu)級(jí)純，又稱保證試劑（符號(hào)G.R.），我國(guó)產(chǎn)品用綠色標(biāo)簽作為標(biāo)志，這種試劑純度很高，適用于精密分析，亦可作基準(zhǔn)物質(zhì)用。 2.二級(jí)品 即分析純，又稱分析試劑（符號(hào)A.R.），我國(guó)產(chǎn)品用紅色標(biāo)簽作為標(biāo)志，純度較一級(jí)品略差，適用于多數(shù)分析，如配制滴定液，用于鑒別及雜質(zhì)檢查等。 3.三級(jí)品 即化學(xué)純，（符號(hào)C.P.），我國(guó)產(chǎn)品用藍(lán)色標(biāo)簽作為標(biāo)志，純度較二級(jí)品相差較多，適用于工礦日常生產(chǎn)分析。 4.四級(jí)品 即實(shí)驗(yàn)試劑（符號(hào)L.R.），雜質(zhì)含量較高，純度較低，在分析工作常用輔助試劑（如發(fā)生或吸收氣體，配制洗液等）。 5.基準(zhǔn)試劑 它的純度相當(dāng)于或高于保證試劑，通常專用作容量分析的基準(zhǔn)

27、物質(zhì)。稱取一定量基準(zhǔn)試劑稀釋至一定體積，一般可直接得到滴定液，不需標(biāo)定，基準(zhǔn)品如標(biāo)有實(shí)際含量，計(jì)算時(shí)應(yīng)加以校正。 6.光譜純?cè)噭ǚ?hào)S.P.） 雜質(zhì)用光譜分析法測(cè)不出或雜質(zhì)含量低于某一限度，這種試劑主要用于光譜分析中。 7.色譜純?cè)噭?用于色譜分析。 8.生物試劑 用于某些生物實(shí)驗(yàn)中。 9.超純?cè)噭?又稱高純?cè)噭?。第三?容量?jī)x器的使用方法 （一）量瓶的使用方法 1.量瓶具有細(xì)長(zhǎng)的頸和磨口玻塞（亦有塑料塞）的瓶子，塞與瓶應(yīng)編號(hào)配套或用繩子相連接，以免條錯(cuò)，在瓶頸上有環(huán)狀刻度。量瓶是用來精密配制一定體積的溶液的。 2.向量瓶中加入溶液時(shí)，必須注意彎月面最低處要恰與瓶頸上的刻度相切，觀察時(shí)眼睛位

28、置也應(yīng)與液面和刻度同水平面上，否則會(huì)引起測(cè)量體積不準(zhǔn)確。量瓶有無色、棕色兩種，應(yīng)注意選用。 3.量瓶是用來精密配制一定體積的溶液的，配好后的溶液如需保存，應(yīng)轉(zhuǎn)移到試劑瓶中，不要用于貯存溶液。量瓶不能在烘箱中烘烤。（二）移液管的使用方法 移液管有各種形狀，最普通的是中部吹成圓柱形，圓柱形以上及以下為較細(xì)的管頸，下部的管頸拉尖，上部的管頸刻有一環(huán)狀刻度。移液管為精密轉(zhuǎn)移一定體積溶液時(shí)用的。 1.使用時(shí)，應(yīng)先將移液管洗凈，自然瀝干，并用待量取的溶液少許蕩洗3次。 2.然后以右手拇指及中指捏住管頸標(biāo)線以上的地方，將移液管插入供試品溶液液面下約1cm，不應(yīng)伸入太多，以免管尖外壁粘有溶液過多，也不應(yīng)伸入太

29、少，以免液面下降后而吸空。這時(shí)，左手拿橡皮吸球（一般用60ml洗耳球）輕輕將溶液吸上，眼睛注意正在上升的液面位置，移液管應(yīng)隨容器內(nèi)液面下降而下降，當(dāng)液面上升到刻度標(biāo)線以上約1cm時(shí)，迅速用右手食指堵住管口，取出移液管，用濾紙條拭干移液管下端外壁，并使與地面垂直，稍微松開右手食指，使液面緩緩下降，此時(shí)視線應(yīng)平視標(biāo)線，直到彎月面與標(biāo)線相切，立即按緊食指，使液體不再流出，并使出口尖端接觸容器外壁，以除去尖端外殘留溶液。 3.再將移液管移入準(zhǔn)備接受溶液的容器中，使其出口尖端接觸器壁，使容器微傾斜，而使移液管直立，然后放松右手食指，使溶液自由地順壁流下，待溶液停止流出后，一般等待15秒鐘拿出。 4.注意

30、此時(shí)移液管尖端仍殘留有一滴液體，不可吹出。（三）刻度吸管的使用方法 1.刻度吸管是由上而下（或由下而上）刻有容量數(shù)字，下端拉尖的圓形玻璃管。用于量取體積不需要十分準(zhǔn)確的溶液。 2.刻度吸管有“吹”、“快”兩種形式。使用標(biāo)有“吹”字的刻度吸管時(shí)，溶液停止流出后，應(yīng)將管內(nèi)剩余的溶液吹出；使用標(biāo)有“快”字的刻度吸管時(shí)，待溶液停止流出后，一般等待15秒鐘拿出。 3.量取時(shí)，最好選用略大于量取量的刻度吸管，這樣溶液可以不放至尖端，而是放到一定的刻度（讀數(shù)的方法與移液管相同）。（四）容量?jī)x器使用的注意事項(xiàng) 1.移液管及刻度吸管一定用橡皮吸球（洗耳球）吸取溶液，不可用嘴吸取。 2.滴定管、量瓶、移液管及刻度

31、吸管均不可用毛刷或其他粗糙物品擦洗內(nèi)壁，以免造成內(nèi)壁劃痕，容量不準(zhǔn)而損壞。每次用畢應(yīng)及時(shí)用自來水沖洗，再用洗衣粉水洗滌（不能用毛刷刷洗），用自來水沖洗干凈，再用純化水沖洗3次，倒掛，自然瀝干，不能在烘箱中烘烤。如內(nèi)壁掛水珠，先用自來水沖洗，瀝干后，再用重鉻酸鉀洗液洗滌，用自來水沖洗干凈，再用純化水沖洗3次，倒掛，自然瀝干。 3.需精密量取5、10、20、25、50ml等整數(shù)體積的溶液，應(yīng)選用相應(yīng)大小的移液管，不能用兩個(gè)或多個(gè)移液管分取相加的方法來精密量取整數(shù)體積的溶液。 4.使用同一移液管量取不同濃度溶液時(shí)要充分注意蕩洗（3次），應(yīng)先量取較稀的一份，然后量取較濃的。在吸取第一份溶液時(shí)，高于標(biāo)線

32、的距離最好不超過1cm，這樣吸取第二份不同濃度的溶液時(shí)，可以吸得再高一些蕩洗管內(nèi)壁，以消除第一份的影響。5.容量?jī)x器（滴定管、量瓶、移液管及刻度吸管等）需校正后再使用，以確保測(cè)量體積的準(zhǔn)確性。 第四部分 儀器分析法第一章 紫外分光光度法一、原理 可見光、紫外線照射某些物質(zhì)，主要是由于物質(zhì)分子中價(jià)電子能級(jí)躍遷對(duì)輻射的吸收，而產(chǎn)生化合物的可見紫外吸收光譜?；谖镔|(zhì)對(duì)光的選擇性吸收的特性而建立分光光度法或稱吸收光譜法的分析方法。它是以朗伯比耳定律為基礎(chǔ)。 1 朗伯比耳定律 A = lg- = ECL T式中 A為吸收度； T為透光率； E為吸收系數(shù)，采用的表示方法是（E），其物理意義為當(dāng)溶液濃度為1

33、%（g/ml），液層厚度為1cm時(shí)的吸收度數(shù)值； C為100ml溶液中所含被測(cè)物質(zhì)的重量（按干燥品或無水物計(jì)算），g； L為液層厚度，cm。二、使用范圍 凡具有芳香環(huán)或共軛雙鍵結(jié)構(gòu)的有機(jī)化合物，根據(jù)在特定吸收波長(zhǎng)處所測(cè)得的吸收度，可用于藥品的鑒別、純度檢查及含量測(cè)定。三、儀器 可見-紫外分光光度計(jì)。其應(yīng)用波長(zhǎng)范圍為200400nm的紫外光區(qū)、400850nm的可見光區(qū)。主要由輻射源（光源）、色散系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)、吸收池、數(shù)據(jù)處理機(jī)、自動(dòng)記錄器及顯示器等部件組成。本儀器是根據(jù)相對(duì)測(cè)量的原理工作的，即先選定某一溶劑（或空氣、試樣）作為標(biāo)準(zhǔn)（空白或稱參比）溶液，并認(rèn)為它的透光率為100（或吸收度為0）

34、，而被測(cè)的試樣透光率（或吸收度）是相對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)溶液而言，實(shí)際上就是由出射狹縫射出的單色光，分別通過被測(cè)試樣和標(biāo)準(zhǔn)溶液，這兩個(gè)光能量之比值，就是在一定波長(zhǎng)下對(duì)于被測(cè)試樣的透光率（或吸收度）。本儀器可精密測(cè)定具有芳香環(huán)或共軛雙鍵結(jié)構(gòu)的有機(jī)化合物、有色物質(zhì)或在適當(dāng)條件下能與某些試劑作用生成有色物的物質(zhì)。四、測(cè)定方法 1.對(duì)照品比較法 （1）按各品種項(xiàng)下的方法，分別配制供試品溶液和對(duì)照品溶液，對(duì)照品溶液中所含被測(cè)成分的量應(yīng)為供試品溶液中被測(cè)成分標(biāo)示量的10010%，所用溶劑也應(yīng)完全一致，在規(guī)定的波長(zhǎng)測(cè)定供試品溶液和對(duì)照品溶液的吸收度后，按下式計(jì)算含量，即得。 （2）計(jì)算式 A樣G對(duì)/稀釋倍數(shù)1001 含

35、量（%）= 100% A對(duì)G樣/稀釋倍數(shù)1001 2.吸收系數(shù)法 （1）按各品種項(xiàng)下的方法配制供試品溶液，在規(guī)定的波長(zhǎng)處測(cè)定其吸收度，再以該品種在規(guī)定條件下的吸收系數(shù)計(jì)算含量。用本法測(cè)定時(shí)，應(yīng)注意儀器的校正和檢定。 （2）計(jì)算式 A樣 含量（%）= - 100% G樣/稀釋倍數(shù)(E)對(duì)1001 3.計(jì)算分光光度法 采用計(jì)算分光光度法應(yīng)慎重。本法有多種，使用時(shí)均應(yīng)按各品種項(xiàng)下規(guī)定的方法進(jìn)行。當(dāng)吸收度處在吸收曲線的陡然上升或下降的部位測(cè)定時(shí)，波長(zhǎng)的微小變化可能對(duì)測(cè)定結(jié)果造成顯著影響，故對(duì)照品和供試品測(cè)試條件應(yīng)盡可能一致。若測(cè)定時(shí)不用對(duì)照品，如維生素A測(cè)定法，則應(yīng)在測(cè)定時(shí)對(duì)儀器作仔細(xì)的校正和檢定。六

36、、注意事項(xiàng) 1.空白溶液與供試品溶液必須澄清，不得有渾濁。如有渾濁，應(yīng)預(yù)先過濾，并棄去初濾液。 2.測(cè)定時(shí)，除另有規(guī)定外，應(yīng)以配制供試品溶液的同瓶溶劑為空白對(duì)照，采用1cm的石英吸收池。 3.在規(guī)定的吸收峰波長(zhǎng)2nm以內(nèi)測(cè)試幾個(gè)點(diǎn)的吸收度，以核對(duì)供試品的吸收峰波長(zhǎng)位置是否正確，除另有規(guī)定外，吸收峰波長(zhǎng)應(yīng)在該品種項(xiàng)下規(guī)定的波長(zhǎng)2nm以內(nèi)；否則應(yīng)考慮該試樣的真?zhèn)?、純度以及儀器波長(zhǎng)的準(zhǔn)確度，并以吸收度最大的波長(zhǎng)作為測(cè)定波長(zhǎng)。 4.一般供試品溶液的吸收度讀數(shù)，以在0.30.7之間的誤差較小。 5.吸收池應(yīng)選擇配對(duì)，否則要引入測(cè)定誤差。在規(guī)定波長(zhǎng)下兩個(gè)吸收池的透光率相差小于0.5的吸收池作配對(duì)，在必要的

37、情況時(shí)，須在最終測(cè)量扣除吸收池間的誤差修正值。 6.由于吸收池和溶劑本身可能有空白吸收，因此測(cè)定供試品的吸收度后應(yīng)減去空白讀數(shù)，再計(jì)算含量。 7.儀器的接地必須良好，一切裸露的零件對(duì)地電位不得超過24伏（測(cè)電筆的氖管不得發(fā)亮）。 9.在測(cè)定時(shí)或改測(cè)其它檢品時(shí)，應(yīng)用待測(cè)溶液沖洗吸收池34次，用干凈綢布或擦鏡紙擦凈吸收池的透光面至不留斑痕（切忌把透光面磨損）。 10.取吸收池時(shí)，應(yīng)拿毛玻璃兩面，切忌用手拿捏透光面，以免粘上油污。使用完后及時(shí)用測(cè)定溶劑沖凈，再用純化水沖凈，用干凈綢布或擦鏡紙擦干，晾干后，放入吸收池盒中，防塵保存。 11.若吸收池內(nèi)外壁沾污，兩池差較大的處理。 （1）可用綢布纏在扁竹

38、條外或用脫脂棉纏在細(xì)玻璃棒上蘸上乙醇，輕輕摩擦，再用純化水沖凈。 （2）如上述方法處理不好，必要時(shí)可用重鉻酸鉀-硫酸洗液泡洗12分鐘，用自來水沖凈，再用純化水沖凈。 （3）不得用毛刷刷洗或硬物拭擦，以防止表面光潔度受損影響正常使用。 12.請(qǐng)務(wù)必注意經(jīng)常保持硅膠的干燥，目的是保護(hù)光學(xué)元件和光電放大器系統(tǒng)不致受潮損壞而影響儀器的正常工作，如發(fā)現(xiàn)有的硅膠由藍(lán)色變?yōu)榉奂t色，應(yīng)立即更換。該儀器干燥劑筒有兩個(gè)：一個(gè)是裝在放大器暗盒上，另一個(gè)裝在單色光器暗盒上。 13.在更換硅膠干燥劑時(shí)，應(yīng)關(guān)閉切斷電源。 14.在停止工作期間，主機(jī)試樣室內(nèi)應(yīng)放入袋裝或筒裝硅膠干燥劑。用防塵罩罩住整個(gè)儀器，并在防塵罩內(nèi)放數(shù)

39、袋防潮硅膠。 15.儀器在操作中，狹縫的寬度應(yīng)從小逐漸開大。若狹縫過大，由于進(jìn)入光電管的光能量強(qiáng)度過大，將會(huì)使放大器輸出信號(hào)達(dá)到飽和，以至數(shù)字顯示出溢出（即數(shù)字閃爍或示1不變）。這不是儀器有故障。 16.將波長(zhǎng)旋轉(zhuǎn)放在625nm，鋏縫關(guān)閉在0.02nm附近，選擇按鍵恢復(fù)在停止工作部位（即三個(gè)鍵均彈出）。 17.搬動(dòng)儀器時(shí)應(yīng)搬在主體端，不要搬在試樣室和光電管盒端以及光源燈室部位，以防止儀器狹縫或光路部件受力而發(fā)生變形。并在搬動(dòng)或運(yùn)輸時(shí)，應(yīng)將可動(dòng)部分固定，如各旋鈕可用膠布貼住，狹縫位置開大些，然后固定，不要關(guān)小狹縫，以免運(yùn)輸時(shí)振動(dòng)使狹縫刀口受損壞。 18.儀器的光柵、反射鏡絕對(duì)不能擦拭，否則將損壞

40、儀器光學(xué)表面，增加雜散光。 19.儀器經(jīng)過搬動(dòng)請(qǐng)及時(shí)檢查并糾正波長(zhǎng)精度，為保證測(cè)定的準(zhǔn)確性請(qǐng)經(jīng)常校準(zhǔn)波長(zhǎng)精度。如有異常，應(yīng)立即報(bào)告質(zhì)量保證部，但不得擅自調(diào)整，并及時(shí)做好記錄。七、結(jié)果計(jì)算 A E（供試品） = CL E（供試品） 含量（%）= - 100% E（標(biāo)準(zhǔn)值或?qū)φ掌罚┌?、允許差 儀器分析方法的誤差限度，除另有規(guī)定外，其相對(duì)偏差應(yīng)在(2.03.0)%。高效液相色譜法一、原理 高效液相色譜法是用高壓輸液泵將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相，壓入裝有固定相的色譜柱，經(jīng)進(jìn)樣閥注入供試品，由流動(dòng)相帶入柱內(nèi)，在柱內(nèi)各成分被分離后，依次進(jìn)入檢測(cè)器，色譜信號(hào)由記錄儀或積分儀

41、記錄。二基本概念和術(shù)語(yǔ)1色譜圖和峰參數(shù)色譜圖(chromatogram)樣品流經(jīng)色譜柱和檢測(cè)器，所得到的信號(hào)-時(shí)間曲線，又稱色譜流出曲線(elution profile)?；€(base line)經(jīng)流動(dòng)相沖洗，柱與流動(dòng)相達(dá)到平衡后，檢測(cè)器測(cè)出一段時(shí)間的流出曲線。一般應(yīng)平行于時(shí)間軸。噪音(noise)基線信號(hào)的波動(dòng)。通常因電源接觸不良或瞬時(shí)過載、檢測(cè)器不穩(wěn)定、流動(dòng)相含有氣泡或色譜柱被污染所致。漂移(drift)基線隨時(shí)間的緩緩變化。主要由于操作條件如電壓、溫度、流動(dòng)相及流量的不穩(wěn)定所引起，柱內(nèi)的污染物或固定相不斷被洗脫下來也會(huì)產(chǎn)生漂移。色譜峰(peak)組分流經(jīng)檢測(cè)器時(shí)響應(yīng)的連續(xù)信號(hào)產(chǎn)生的曲線

42、。流出曲線上的突起部分。正常色譜峰近似于對(duì)稱形正態(tài)分布曲線（高斯Gauss曲線）。不對(duì)稱色譜峰有兩種：前延峰(leading peak)和拖尾峰(tailing peak)。前者少見。拖尾因子(tailing factor，T)T EQ F(W0.05h,2d1) ，用以衡量色譜峰的對(duì)稱性。也稱為對(duì)稱因子(symmetry factor)或不對(duì)稱因子(asymmetry factor)。中國(guó)藥典規(guī)定T應(yīng)為0.951.05。T0.95為前延峰，T1.05為拖尾峰。峰底基線上峰的起點(diǎn)至終點(diǎn)的距離。峰高(peak height，h)峰的最高點(diǎn)至峰底的距離。峰寬(peak width，W)峰兩側(cè)拐點(diǎn)處

43、所作兩條切線與基線的兩個(gè)交點(diǎn)間的距離。W4半峰寬(peak width at half-height，Wh/2)峰高一半處的峰寬。Wh/22.355標(biāo)準(zhǔn)偏差(standard deviation，)正態(tài)分布曲線x1時(shí)（拐點(diǎn)）的峰寬之半。正常峰的拐點(diǎn)在峰高的0.607倍處。標(biāo)準(zhǔn)偏差的大小說明組分在流出色譜柱過程中的分散程度。小，分散程度小、極點(diǎn)濃度高、峰形瘦、柱效高；反之，大，峰形胖、柱效低。峰面積(peak area，A)峰與峰底所包圍的面積。A EQ R(,2)h2.507 h1.064 Wh/2 h2定性參數(shù)（保留值）死時(shí)間(dead time，t0)不保留組分的保留時(shí)間。即流動(dòng)相（溶劑）

44、通過色譜柱的時(shí)間。在反相HPLC中可用苯磺酸鈉來測(cè)定死時(shí)間。死體積(dead volume，V0)由進(jìn)樣器進(jìn)樣口到檢測(cè)器流動(dòng)池未被固定相所占據(jù)的空間。它包括4部分：進(jìn)樣器至色譜柱管路體積、柱內(nèi)固定相顆粒間隙（被流動(dòng)相占據(jù)，Vm）、柱出口管路體積、檢測(cè)器流動(dòng)池體積。其中只有Vm參與色譜平衡過程，其它3部分只起峰擴(kuò)展作用。為防止峰擴(kuò)展，這3部分體積應(yīng)盡量減小。V0Ft0（F為流速）保留時(shí)間(retention time，tR)從進(jìn)樣開始到某個(gè)組分在柱后出現(xiàn)濃度極大值的時(shí)間。保留體積(retention volume，VR)從進(jìn)樣開始到某組分在柱后出現(xiàn)濃度極大值時(shí)流出溶劑的體積。又稱洗脫體積。VRF

45、tR調(diào)整保留時(shí)間(adjusted retention time，tR)扣除死時(shí)間后的保留時(shí)間。也稱折合保留時(shí)間(reduced retention time)。在實(shí)驗(yàn)條件（溫度、固定相等）一定時(shí)，tR只決定于組分的性質(zhì)，因此，tR（或tR）可用于定性。tRtRt0調(diào)整保留體積(adjusted retention volume，VR)扣除死體積后的保留體積。VRVRV0或VRFtR3柱效參數(shù)理論塔板數(shù)(theoretical plate number，N)用于定量表示色譜柱的分離效率（簡(jiǎn)稱柱效）。N取決于固定相的種類、性質(zhì)（粒度、粒徑分布等）、填充狀況、柱長(zhǎng)、流動(dòng)相的種類和流速及測(cè)定柱效所用

46、物質(zhì)的性質(zhì)。如果峰形對(duì)稱并符合正態(tài)分布，N可近似表示為：N( EQ F(tR,)216( EQ F(tR,W)25.54( EQ F(tR,Wh/2)2N為常量時(shí)，W隨tR成正比例變化。在一張多組分色譜圖上，如果各組分含量相當(dāng)，則后洗脫的峰比前面的峰要逐漸加寬，峰高則逐漸降低。用半峰寬計(jì)算理論塔數(shù)比用峰寬計(jì)算更為方便和常用，因?yàn)榘敕鍖捀诇?zhǔn)確測(cè)定，尤其是對(duì)稍有拖尾的峰。N與柱長(zhǎng)成正比，柱越長(zhǎng)，N越大。用N表示柱效時(shí)應(yīng)注明柱長(zhǎng)，如果未注明，則表示柱長(zhǎng)為1米時(shí)的理論塔板數(shù)。（一般HPLC柱的N在1000以上。）若用調(diào)整保留時(shí)間(tR)計(jì)算理論塔板數(shù)，所得值稱為有效理論塔板數(shù)(N有效或Neff)。理

47、論塔板高度(theoretical plate height，H)每單位柱長(zhǎng)的方差。H EQ F(2,L)。實(shí)際應(yīng)用時(shí)往往用柱長(zhǎng)L和理論塔板數(shù)計(jì)算：H EQ F(L,N) ，H有效 EQ F(L,N有效) 。4相平衡參數(shù)分配系數(shù)(distribution coefficient，K)在一定溫度下，化合物在兩相間達(dá)到分配平衡時(shí)，在固定相與流動(dòng)相中的濃度之比。K EQ F(Cs,Cm)。分配系數(shù)與組分、流動(dòng)相和固定相的熱力學(xué)性質(zhì)有關(guān)，也與溫度、壓力有關(guān)。在不同的色譜分離機(jī)制中，K有不同的概念：吸附色譜法為吸附系數(shù)，離子交換色譜法為選擇性系數(shù)（或稱交換系數(shù)），凝膠色譜法為滲透參數(shù)。但一般情況可用分配

48、系數(shù)來表示。在條件（流動(dòng)相、固定相、溫度和壓力等）一定，樣品濃度很低時(shí)（Cs、Cm很?。r(shí)，K只取決于組分的性質(zhì)，而與濃度無關(guān)。這只是理想狀態(tài)下的色譜條件，在這種條件下，得到的色譜峰為正常峰；在許多情況下，隨著濃度的增大，K減小，這時(shí)色譜峰為拖尾峰；而有時(shí)隨著溶質(zhì)濃度增大，K也增大，這時(shí)色譜峰為前延峰。因此，只有盡可能減少進(jìn)樣量，使組分在柱內(nèi)濃度降低，K恒定時(shí)，才能獲得正常峰。在同一色譜條件下，樣品中K值大的組分在固定相中滯留時(shí)間長(zhǎng)，后流出色譜柱；K值小的組分則滯留時(shí)間短，先流出色譜柱?；旌衔镏懈鹘M分的分配系數(shù)相差越大，越容易分離，因此混合物中各組分的分配系數(shù)不同是色譜分離的前提。在HPLC中

49、，固定相確定后，K主要受流動(dòng)相的性質(zhì)影響。實(shí)踐中主要靠調(diào)整流動(dòng)相的組成配比及pH值，以獲得組分間的分配系數(shù)差異及適宜的保留時(shí)間，達(dá)到分離的目的。容量因子(capacity factor，k)化合物在兩相間達(dá)到分配平衡時(shí)，在固定相與流動(dòng)相中的量之比。k EQ F(Ms,Mm)。因此容量因子也稱質(zhì)量分配系數(shù)。分配系數(shù)、容量因子與保留時(shí)間之間有如下關(guān)系：k EQ F(Ms,Mm) EQ F(Cs Vs,CmVm)K EQ F(Vs,Vm) EQ F(tR,t0)，tRk t0。上式說明容量因子的物理意義：表示一個(gè)組分在固定相中停留的時(shí)間（tR）是不保留組分保留時(shí)間（t0）的幾倍。k0時(shí)，化合物全部存

50、在于流動(dòng)相中，在固定相中不保留，tR0；k越大，說明固定相對(duì)此組分的容量越大，出柱慢，保留時(shí)間越長(zhǎng)。容量因子與分配系數(shù)的不同點(diǎn)是：K取決于組分、流動(dòng)相、固定相的性質(zhì)及溫度，而與體積Vs、Vm無關(guān)；k除了與性質(zhì)及溫度有關(guān)外，還與Vs、Vm有關(guān)。由于tR、t0較Vs、Vm易于測(cè)定，所以容量因子比分配系數(shù)應(yīng)用更廣泛。選擇性因子(selectivity factor，)相鄰兩組分的分配系數(shù)或容量因子之比。 EQ F(K2,K1) EQ F(k2,k1) （設(shè)k2k1）。因ktR/t0，則 EQ F(tR2,tR1)，所以又稱為相對(duì)保留時(shí)間（美國(guó)藥典）。要使兩組分得到分離，必須使1。與化合物在固定相和流

51、動(dòng)相中的分配性質(zhì)、柱溫有關(guān)，與柱尺寸、流速、填充情況無關(guān)。從本質(zhì)上來說，的大小表示兩組分在兩相間的平衡分配熱力學(xué)性質(zhì)的差異，即分子間相互作用力的差異。5分離參數(shù)分離度(resolution，R)相鄰兩峰的保留時(shí)間之差與平均峰寬的比值。也叫分辨率，表示相鄰兩峰的分離程度。R EQ F(2(tR2tR1),W1W2)。當(dāng)W1W2時(shí)，R EQ F(tR2tR1,4)。當(dāng)R1時(shí)，稱為4分離，兩峰基本分離，裸露峰面積為95.4%，內(nèi)側(cè)峰基重疊約2%。R1.5時(shí)，稱為6分離，裸露峰面積為99.7%。R1.5稱為完全分離。中國(guó)藥典規(guī)定R應(yīng)大于1.5?；痉蛛x方程分離度與三個(gè)色譜基本參數(shù)有如下關(guān)系：R EQ

52、F( EQ R(,N2),4) EQ F( 1,) EQ F(k2,1k2)其中 EQ F( EQ R(,N2),4)稱為柱效項(xiàng)， EQ F(1,)為柱選擇性項(xiàng)， EQ F(k2,1k2)為柱容量項(xiàng)。柱效項(xiàng)與色譜過程動(dòng)力學(xué)特性有關(guān)，后兩項(xiàng)與色譜過程熱力學(xué)因素有關(guān)。從基本分離方程可看出，提高分離度有三種途徑：增加塔板數(shù)。方法之一是增加柱長(zhǎng)，但這樣會(huì)延長(zhǎng)保留時(shí)間、增加柱壓。更好的方法是降低塔板高度，提高柱效。增加選擇性。當(dāng)1時(shí)，R0，無論柱效有多高，組分也不可能分離。一般可以采取以下措施來改變選擇性：a. 改變流動(dòng)相的組成及pH值；b. 改變柱溫；c. 改變固定相。改變?nèi)萘恳蜃印＿@常常是提高分離度

53、的最容易方法，可以通過調(diào)節(jié)流動(dòng)相的組成來實(shí)現(xiàn)。k2趨于0時(shí)，R也趨于0；k2增大，R也增大。但k2不能太大，否則不但分離時(shí)間延長(zhǎng)，而且峰形變寬，會(huì)影響分離度和檢測(cè)靈敏度。一般k2在110范圍內(nèi)，最好為25，窄徑柱可更小些。三、適用范圍 高效液相色譜法是一種分離分析方法，適用于揮發(fā)性低、熱穩(wěn)定性差、分子量大的高分子化合物以及離子型化合物等的定性、定量分析。中國(guó)藥典主要用于藥品的含量測(cè)定、有關(guān)物質(zhì)檢查、雜質(zhì)限度檢查和鑒別等。四、儀器 高效液相色譜儀主要由輸液泵系統(tǒng)、進(jìn)樣器系統(tǒng)、色譜柱、檢測(cè)器、記錄器、顯示器及數(shù)據(jù)處理機(jī)（或兼有組分收集系統(tǒng)）等組成。使用時(shí)應(yīng)按儀器的說明書及操作規(guī)程進(jìn)行操作。五、儀器

54、的校正 1.高效液相色譜儀的柱箱控溫精度、基線噪聲、基線漂移、靈敏度或檢測(cè)限、線性范圍的檢定均按儀器說明書的技術(shù)要求進(jìn)行校驗(yàn)，應(yīng)符合規(guī)定。 2.以紫外-可見光檢測(cè)器、熒光檢測(cè)器、差示折光檢測(cè)器為檢測(cè)器的實(shí)驗(yàn)室通用液相色譜儀的檢定，所用各種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)使用經(jīng)國(guó)家技術(shù)監(jiān)督部門批準(zhǔn)頒發(fā)的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。具體校正方法和主要技術(shù)指標(biāo)見“高效液相色譜儀檢測(cè)器的校驗(yàn)”。 3.泵的耐壓試驗(yàn) 4.泵流量設(shè)定值誤差、流量穩(wěn)定性誤差的試驗(yàn) 5.柱恒溫箱溫度設(shè)定值誤差和控溫穩(wěn)定性誤差的試驗(yàn) 6.梯度準(zhǔn)確度的試驗(yàn) 7.定性定量重現(xiàn)性的試驗(yàn)六、對(duì)儀器的一般要求 1.色譜柱的填充劑和流動(dòng)相的組分應(yīng)按各品種項(xiàng)下的規(guī)定。常用的色譜柱填

55、充劑有硅膠（正相色譜）和化學(xué)鍵合硅膠，后者以十八烷基硅烷鍵合硅膠（反相色譜）最為常用，辛基硅烷鍵合硅膠次之，氰基或氨基鍵合硅膠也有使用。離子交換填充劑用于離子交換色譜；凝膠或玻璃微球等填充劑用于分子排阻色譜等。除另有規(guī)定外，柱溫為室溫，檢測(cè)器為紫外吸收檢測(cè)器。 2.藥典正文中各品種項(xiàng)下規(guī)定的條件除固定相種類、流動(dòng)相組分、檢測(cè)器類型不得任意改變外，其余如色譜柱內(nèi)徑、長(zhǎng)度、固定相牌號(hào)、載體粒度、流動(dòng)相流速、混合流動(dòng)相各組分的比例、柱溫、進(jìn)樣量、檢測(cè)器的靈敏度等，均可適當(dāng)改變，以適應(yīng)具體品種并達(dá)到系統(tǒng)適用性試驗(yàn)的要求。 3.一般色譜圖約于20分鐘內(nèi)記錄完畢。六、系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 按各品種項(xiàng)下要求對(duì)儀器

56、進(jìn)行適用性試驗(yàn)，即用規(guī)定的對(duì)照品對(duì)儀器進(jìn)行試驗(yàn)和調(diào)整，應(yīng)達(dá)到規(guī)定的要求，或規(guī)定分析狀態(tài)下色譜柱的最小理論板數(shù)、分離度、重復(fù)性和拖尾因子。 1.色譜柱的理論板數(shù)（n） n = 5.54(tR/Wh/2)2式中 tR為保留時(shí)間（以分鐘或長(zhǎng)度計(jì)，下同，但應(yīng)取相同單位）； Wh/2為半峰高寬。 2.分離度（R） 除另有規(guī)定外，分離度應(yīng)大于1.5。 2(tR2tR1) R = - W1W2式中 tR2為相鄰兩峰中后一峰的保留時(shí)間； tR1為相鄰兩峰中前一峰的保留時(shí)間； W1及W2為此相鄰兩峰的峰寬。 3.重復(fù)性 取各品種項(xiàng)下的對(duì)照溶液，連續(xù)進(jìn)樣5次，除另有規(guī)定外，其峰面積測(cè)量值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于2.

57、0%。也可按各品種校正因子測(cè)定項(xiàng)下，配制相當(dāng)于80%、100%和120%的對(duì)照品溶液，加入規(guī)定量的內(nèi)標(biāo)溶液，配成3種不同濃度的溶液，分別進(jìn)樣3次，計(jì)算平均校正因子，其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差也應(yīng)不大于2.0%。 4.拖尾因子（T） 除另有規(guī)定外，T應(yīng)在0.951.05之間。 W0.05h T = - 2d1式中 W0.05h為0.05峰高處的峰寬； d1為峰極大至峰前沿之間的距離。七、測(cè)定法 定量測(cè)定時(shí)，可根據(jù)供試品的具體情況采用峰面積法或峰高法。測(cè)定雜質(zhì)含量時(shí)，須采用峰面積法。（一）內(nèi)標(biāo)法 加校正因子測(cè)定供試品中某個(gè)雜質(zhì)或主成分含量 1.按各品種項(xiàng)下的規(guī)定，精密稱（量）取對(duì)照品和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)，分別配成溶液，

58、精密量取各溶液，配成校正因子測(cè)定用的對(duì)照溶液。取一定量注入液相色譜儀，記錄色譜圖。測(cè)量對(duì)照品和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積或峰高，按下式計(jì)算校正因子： AS/CS 校正因子（f）= - AR/CR式中 AS為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積或峰高； AR為對(duì)照品的峰面積或峰高； CS為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的濃度； CR為對(duì)照品的濃度。 再取各品種項(xiàng)下含有內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的供試品溶液，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，測(cè)量供試品中待測(cè)成分（或其雜質(zhì)）和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積或峰高，按下式計(jì)算含量： AX 含量（CX）= f- AS/CS CX稀釋倍數(shù) 含量（%）= 100% GX(1干燥失重)式中 AX為供試品（或其雜質(zhì)）的峰面積或峰高； CX為供試品（

59、或其雜質(zhì)）的濃度； GX為供試品的稱樣量。 當(dāng)配制校正因子測(cè)定用的對(duì)照溶液和含有內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的供試品溶液使用同一份內(nèi)標(biāo)物質(zhì)溶液時(shí)，則配制內(nèi)標(biāo)物質(zhì)溶液不必精密稱（量）取。 2.內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的選擇 （1）內(nèi)標(biāo)物質(zhì)應(yīng)是樣品中不含有的組分，否則會(huì)使峰重疊而無法準(zhǔn)確測(cè)量?jī)?nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積。 （2）內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的保留時(shí)間應(yīng)與待測(cè)成分相近，并達(dá)到完全分離，分離度R1.5。 （3）內(nèi)標(biāo)物質(zhì)必須是純度符合要求的化合物，若非純品無干擾峰也可采用。已知含量的較純物質(zhì)也可用，但需扣除內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的重量。（二）外標(biāo)法 測(cè)定供試品中某個(gè)雜質(zhì)或主成分含量 1.按各品種項(xiàng)下的規(guī)定，精密稱（量）取對(duì)照品和供試品，配制成溶液，分別精密取一定量，注

60、入液相色譜儀，記錄色譜圖，測(cè)量對(duì)照品和供試品待測(cè)成分的峰面積（或峰高），按下式計(jì)算含量： AX 含量（CX）= CR- AR CX稀釋倍數(shù) 含量（%）= 100% GX(1干燥失重) 2.由于微量注射器不易精確控制進(jìn)樣量，當(dāng)采用外標(biāo)法測(cè)定供試品中某雜質(zhì)或主成分含量時(shí)，以定量環(huán)進(jìn)樣為好。（三）加校正因子的主成分自身對(duì)照法（四）不加校正因子的主成分自身對(duì)照法（五）面積歸一化法 由于峰面積歸一化法測(cè)定誤差大，因此，本法通常只能用于粗略考察供試品中的雜質(zhì)含量。除另有規(guī)定外，一般不宜用于微量雜質(zhì)的檢查。方法是測(cè)量各雜質(zhì)峰的面積和色譜圖上除溶劑峰以外的總色譜峰面積，計(jì)算各峰面積占總峰面積的百分率，即得。八