DB13-T812-2006大豆及其制品蛋白質(zhì)溶解度的測定

1、B 46DB13河北省地方標(biāo)準(zhǔn)DB13/T 8122006大豆及其制品蛋白質(zhì)溶解度的測定2006-11-11 發(fā)布2006-11-20 實施河北省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布DB13/T 8122006I前言本標(biāo)準(zhǔn)由河北省畜牧獸醫(yī)局提出。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)、河北省飼料工業(yè)辦公室、河北省飼料產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗站。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：趙國先、王鈴、師校軍、米振杰、武英利、黃仁錄、李艷琴。DB13/T 8122006 PAGE 2大豆及其制品蛋白質(zhì)溶解度的測定范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了大豆及其制品中蛋白質(zhì)溶解度測定的原理、試劑、儀器設(shè)備和測定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于飼料檢測單位、飼料企業(yè)、養(yǎng)殖場（戶）、大中專院校對大豆

2、及其制品加工質(zhì)量的檢測和監(jiān)控。規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。GB/T 6012002 化學(xué)試劑 標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的制備GB/T 64321994 飼料粗蛋白測定方法術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。蛋白質(zhì)溶解度在一定的氫氧化鉀溶液中溶解的蛋白質(zhì)質(zhì)量占試樣中總蛋白質(zhì)量的百分?jǐn)?shù)。通常采用氮溶解指數(shù)（NSI）和蛋白質(zhì)分散指數(shù)（PDI）來表示。原理用一定濃度的氫氧化

3、鉀溶液提取試樣中的可溶性蛋白質(zhì)，在催化劑作用下用濃硫酸將提取液中可溶性蛋白質(zhì)的氮轉(zhuǎn)化為硫酸銨。加入強(qiáng)堿進(jìn)行蒸餾使氨逸出，用硼酸吸收后，再用鹽酸滴定測出試樣中可溶性蛋白質(zhì)含量；同時，測定原始試樣中粗蛋白質(zhì)含量，計算出試樣的蛋白溶解度。試劑氫氧化鉀（分析純），無水硫酸鉀、五水硫酸銅、氫氧化鈉、硼酸、甲基紅、溴甲酚綠、硫酸銨；濃硫酸、鹽酸（分析純）、95%乙醇、蒸餾水。儀器和設(shè)備感量為 0.0001 g 分析天平；磁力攪拌器；離心機(jī)；樣品粉碎機(jī)；60 目分析篩；電爐；100 ml 或 250 ml 凱氏燒瓶；凱氏蒸餾裝置；250 ml 錐形瓶；1 000 ml 容量瓶；微量滴定管。分析步驟試劑0.0

4、42 mol/L 氫氧化鉀溶液稱取 2.360 g 氫氧化鉀，加水溶解后，轉(zhuǎn)移至 1 000 ml 容量瓶中，用水定容至刻度。混合催化劑稱取 6 g 硫酸鉀和 0.4 g 硫酸銅，磨碎混勻。氫氧化鈉溶液稱取 400 g 氫氧化鈉，加水溶解后，轉(zhuǎn)移至 1 000 ml 容量瓶中，用水定容至刻度。硼酸溶液稱取 20 g 硼酸，加水溶解后，轉(zhuǎn)移至 1 000 ml 容量瓶中，用水定容至刻度。0.1 mol/L 鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液量取 8.3 ml 濃鹽酸，注入 1 000 ml 水中混勻，按 GB/T 6012002 要求進(jìn)行標(biāo)定即可?；旌现甘緞┓Q取 1 g 甲基紅和 5 g 溴甲酚綠，加入乙醇溶解后，轉(zhuǎn)

5、移至 1 000 ml 容量瓶中，用乙醇定容至刻度。樣品制備取具有代表性的試樣用四分法縮減至 200 g，粉碎至 60 目，裝入密封容器中。操作步驟試樣處理稱取試樣 1.5 g（準(zhǔn)確至 0.0002 g）置于 250 m 燒杯中，準(zhǔn)確移入 0.042 M 氫氧化鉀溶液 75 m，磁力攪拌 20 min，然后將試樣轉(zhuǎn)移至離心管中，以 2700 r/min 的速度離心 10 min。測定吸取上清液 15 ml, 放入消化管中, 按照 GB/T 64321994 凱氏定氮法測定試樣中可溶性蛋白質(zhì)的含量。同時，按照 GB/T 64321994 凱氏定氮法測定試樣中粗蛋白質(zhì)的含量。分析結(jié)果計算試樣中蛋白質(zhì)溶解度按照（1）式進(jìn)行計算：式中：p試樣中蛋白質(zhì)溶解度，%；p (%) P 100 M（1）P試樣中可溶性蛋白質(zhì)的含量； M試樣中粗蛋白質(zhì)的含量。重復(fù)性