地黃的生藥學研究

1、地黃的綜述周阿龍 龍嘉地黃為玄參科植物地黃Rehmannia glutinosa Libosch. 的新鮮或干燥塊根，始載于神農(nóng)本草經(jīng),列為上品,為常用中藥之一。地黃入藥分為:鮮地黃、干地黃、熟地黃、生地黃炭、熟地黃炭等。地黃經(jīng)過不同的炮制方法加工后,其性味、功效亦發(fā)生相應(yīng)的改變。鮮地黃性寒、味甘苦,以清熱生津、涼血止血為主。鮮地黃經(jīng)產(chǎn)地加工焙干后名干地黃或生地黃,其性寒、味甘,以清熱涼血、養(yǎng)陰生津為主。干地黃經(jīng)蒸制后名熟地黃,其性由寒轉(zhuǎn)溫,其味由苦轉(zhuǎn)甘,其功效由清轉(zhuǎn)補,以滋陰補血,益精填髓為主1。、一、地黃種質(zhì)資源及歷史沿革地黃藥用歷史早于神農(nóng)本草經(jīng)600 多年, 在先秦的詩經(jīng)中就有記載:

2、“薄言采芑, 于彼新田”。據(jù)考證發(fā)現(xiàn)原產(chǎn)陜西咸陽,名醫(yī)別錄說“ 地黃生咸陽川澤黃土地者佳”。地黃應(yīng)用歷史悠久,明代永樂三年開始運銷國外, 是國內(nèi)藥材市場上的重要大宗藥材品種之一, 據(jù)業(yè)內(nèi)人士統(tǒng)計認為, 生地年銷量在2萬噸左右, 用藥量僅居甘草之后。地黃野生家種均有。地黃的野生資源十分豐富,許多地方的山區(qū)林緣、道路旁和農(nóng)田邊等都有分布。地黃由野生變栽培大約開始于周朝, 漢代,神農(nóng)本草經(jīng): 干地黃, 味甘, 寒生者尤良一名地髓。生川澤?！蔽簳x時期,名醫(yī)別錄:“生地黃生咸陽(即今陜西長安縣之渭城故城) 川澤黃土者佳。”南北朝, 梁代陶弘景。本草經(jīng)集注:“咸陽即長安也。生渭城者,乃有子實如小麥。今一彭

3、城(即今江蘇徐州) 干地黃最好, 次歷陽(即今安徽和縣) , 近用江寧板橋(即今南京板橋鎮(zhèn)) 者為勝?！彼翁K頌圖經(jīng)本草:“地黃, 生咸陽川澤黃土地者佳, 今處處有之, 以同州(即今陜西大荔)者為上種之甚易, 根入土即生。一說古稱種地黃宜黃土, 今不然, 大宜肥壤虛地, 則根大而多汁熟、干地黃最上出同州, 光潤而甘美?！泵鲃⑽奶┑茸嫳静萜穮R精要中云:“生地黃: 道地今懷慶者為勝。用根肥大者為好?！北静菝审?“江浙壤地種者, 受南方陽氣, 質(zhì)雖光潤而力微; 懷慶山產(chǎn)者, 稟北方純陰, 皮有疙瘩而力大。”本草綱目:“今人以懷慶地黃為上,亦各處隨時興廢不同爾?！蔽侦`本草:“地黃處處有之, 今人以懷慶

4、者為上?！北静輳男?“以懷慶肥大而短, 糯體細皮, 菊花心者佳。”近代以河南新鄉(xiāng)地區(qū)主產(chǎn)者產(chǎn)量大, 質(zhì)量優(yōu)2?？梢? 不同時期地黃的道地產(chǎn)區(qū)不同, 陜西長安、江蘇徐州、安徽和縣、南京板橋鎮(zhèn)、陜西大荔都曾是地黃的道地。其中咸陽(陜西長安) 之道地歷史最為悠久, 自漢代至宋代本草書都有提及咸陽川澤之地黃為佳。自明以后才提及懷慶道地產(chǎn)地, 第一次提出懷慶地黃的是明劉文泰等撰輯本草品匯精要, 此為一本官修本草學, 有一定影響, 對后世影響較大的本草綱目亦認為“今人以懷慶地黃為上”, 此后才一致認為懷慶地黃為道地藥材。后世的大多數(shù)中醫(yī)藥著作都將懷慶地黃作專條列出,中藥大辭典更將懷地黃作為地黃的變種予以強

5、調(diào)3。 齊民要術(shù)中詳細記述了地黃的種植方法。自民國6年（1917年）崔大毛就培育出“ 四齒毛” ,1920年李開壽培育“ 金狀元” 新品種后, 地黃品種也就逐漸多起來了。70年代相繼通過人工雜交選育出“ 北京-1、北京-2、北京-3” 等。目前, 由于品種繁殖技術(shù)的提高, 使得地黃品種繁多, 除以上外, 還有白狀元、小黑英、紅薯王、郭李貓、A-1、A-2系列、85-2、85-5、85-8系列、溫縣-1號、國林新-1號、晉紅-1號、沛育77-5、河南大紅袍、組培82-5、莖尖-16號等20余種4。地黃新品種的培育,一方面可以提高單一品種質(zhì)量, 豐富物種資源。但另一方面, 也造成了品種混亂, 質(zhì)量

6、不穩(wěn), 等級難定, 加工困難等不利因素。地黃主要分布在河南的武陟、溫縣, 習稱懷地黃, 但近幾年山西成為主產(chǎn)區(qū), 且產(chǎn)量約占全國的65%以上。地黃在我國也分布于山東、陜西、河北、遼寧、江蘇、浙江、安徽、福建、江西、湖北、湖南、廣東、廣西、四川、甘肅等18個省區(qū)。地黃喜溫暖氣候, 較耐寒, 以陽光充足, 土層深厚、疏松、肥沃, 中性或微堿性的砂質(zhì)壤土栽培為宜。地黃商品絕大部分來源于人工栽培, 20 世紀70 年代以前, 地黃原屬于國家二類計劃管理的中藥材,主要由河南溫縣、武陟、孟縣、沁陽提供商品。隨著我國醫(yī)療衛(wèi)生事業(yè)的發(fā)展, 藥用量不斷增加。70 年初,河南地黃一度供不應(yīng)求, 為緩解市場供應(yīng),

7、不斷擴大生產(chǎn)。山西、山東、河北等省已自給有余, 并能調(diào)出商品供應(yīng)全國; 甘肅、湖北等自給水平也有很大提高。40 年來, 生產(chǎn)發(fā)展很快, 購銷起伏增長, 市場供應(yīng)平穩(wěn), 屬于可以滿足國內(nèi)外市場需要的品種。 歷史上甘肅雖不是地黃的主產(chǎn)區(qū),但自20世紀60年代隴東試種以來,一直延續(xù)種植至今,近年,一些地區(qū)發(fā)展成新產(chǎn)區(qū),如永靖劉家峽、榆中等屬此類情況,現(xiàn)已有商品上市流通。趙建邦5等對甘肅各地家種地黃進行質(zhì)量考察,并與國內(nèi)其它主要產(chǎn)區(qū)比較,了解甘肅人工地黃的質(zhì)量狀況,除個別樣品水分、酸不溶性灰分偏高外,其余指標均符合中國藥典關(guān)于地黃的規(guī)定,研究表明：榆中、永靖劉家峽樣品中梓醇、腺苷含量較高。 二、地黃發(fā)

8、展前景地黃的葉、莖根、花、籽都有極高的藥用價值.它的發(fā)展前景非?？春? 因其具有多方面的優(yōu)勢氣候、土壤得天獨厚的自然條件優(yōu)勢、種質(zhì)資源優(yōu)勢、市場優(yōu)勢等等。但優(yōu)勢不能決定形勢, 只有抓住形勢, 才能發(fā)揮優(yōu)勢。當前, 國內(nèi)外新一輪中醫(yī)藥熱己經(jīng)掀起, 國家重視,當?shù)卣案鞑块T更應(yīng)該緊鑼密鼓抓住歷史機遇。一方面, 要有政策優(yōu)惠和資金扶持, 給藥農(nóng)創(chuàng)造積極、寬松的大環(huán)境。另一方面, 要抓好各個環(huán)節(jié)的具體工作。如建立地黃種質(zhì)資源庫, 保證優(yōu)良種苗的培育。加強種植技術(shù)和田間管理, 按照GAP規(guī)范化種植標準建立符合國家要求的種植基地, 提高質(zhì)量,降低農(nóng)殘走產(chǎn)、學、研相結(jié)合、強強聯(lián)合、傳統(tǒng)加工和新工藝相結(jié)合的

9、道路, 注重品牌藥材的二次開發(fā), 提高新產(chǎn)品科技含量加強品牌及新開發(fā)產(chǎn)品的注冊保護, 強化品牌意識,多方聯(lián)動打造名牌敢于承認不足, 積極向他人學習, 力爭達到育繁銷一體化、加工機械化、質(zhì)量標準化、經(jīng)營集團化、管理規(guī)范化4。三、地黃的生物學性狀李先恩等6對收集到的地黃種質(zhì)資源在北京試驗地中種植,進行了形態(tài)特征觀察和描述。地黃的葉片形態(tài)有卵圓形、長橢圓形和狹長形。人工選育的栽培品種葉形以卵圓形和長橢圓形居多,葉片比較寬大,而野生品種葉片較小、狹長;塊根的形狀主要有薯狀和紡錘狀。從塊根的大小來看,不同地黃品種之間有明顯的差別,人工選育的品種塊根較大,產(chǎn)量較高,而野生種塊根較小,細長,產(chǎn)量低,商品規(guī)格

10、低。從花色來看,大部分為紫紅色,只有X2的花色為淡黃色,但開紫紅色花的花色深淺也有所不同,有一定的區(qū)別。從花的結(jié)構(gòu)來看野生品種與栽培品種沒有明顯的差異(表1) 。表1地黃栽培與野生品種生物學性狀類型品種葉形塊根形狀花色栽培93-2長橢圓薯狀紫紅85-5長橢圓薯狀紫紅金狀元卵圓薯狀淡紫小黑英長橢圓細長條紫紅紅薯王卵圓薯狀、疙瘩淡紫獅子頭卵圓紡錘狀紫紅金狀元-2長橢圓薯狀紫紅829橢圓紡錘狀淡黃郭里貓長橢圓薯狀、疙瘩紫紅國林新一代長橢圓紡錘狀淡紫93-2-2卵圓薯狀淡紫北京1號長橢圓紡錘狀淡紫H8卵圓薯狀、疙瘩淡紫野生H1長橢圓紡錘狀淡紫H2長卵圓薯狀紫紅H3長橢圓薯狀紫紅H6狹長薯狀紫紅H9卵圓

11、細長條淡紫H11狹長薯狀紫紅H12狹長細長條紫紅X2長橢圓紡錘狀淡黃X3長橢圓紡錘狀淡紫X4卵圓紡錘狀淡紫85-0狹長薯狀紫紅似無名卵圓紡錘狀紫紅北1-1長橢圓薯狀紫紅四、地黃的形態(tài)解剖學地黃的藥用部分是地黃植物的地下器官, 有“塊根”、“塊莖”“根狀莖”等不同名稱7-8。通過對其形態(tài)發(fā)生和發(fā)育解剖學研究, 發(fā)現(xiàn)其藥用部分具有初生木質(zhì)部與初生韌皮部相間排列, 沒有髓, 有內(nèi)皮層和中柱鞘, 維管形成層起源于初生韌皮部內(nèi)側(cè)的薄壁細胞等根的典型結(jié)構(gòu)特征, 證明其藥用部分應(yīng)為塊根。地黃的藥材性狀, 多呈圓柱狀或紡錘狀, 外皮薄, 表面淺紅黃色、黃褐色或棕色, 具彎曲的皺紋、橫長皮孔及不規(guī)則的疤痕, 直

12、徑2 6 cm , 長可達20cm , 由于栽培品種的變異而有所差異。橫切面觀, 由周皮和次生維管組織構(gòu)成, 木栓層為數(shù)列細胞, 細胞排列疏松, 散有多數(shù)分泌細胞, 含橘黃色油滴, 偶有石細胞, 韌皮部分泌細胞較少, 形成層成環(huán); 木射線寬廣, 導管稀疏, 呈放射狀排列9-10。王太霞、肖玲等對地黃根的形態(tài)發(fā)生和發(fā)育解剖學進行了研究, 用地黃的傳統(tǒng)栽培方法, 即用上一年的塊根作母根進行繁殖, 分別從母根和不定芽的莖基部發(fā)生不定根。地黃不定根的初生結(jié)構(gòu)和維管形成層的發(fā)生與一般雙子葉植物相同, 但其次生生長卻有兩種方式, 即正常次生生長和異常次生生長。一類不定根的形成層產(chǎn)生的次生結(jié)構(gòu)與一般雙子葉植

13、物相同, 即次生木質(zhì)部中主要是導管, 而薄壁細胞較少這類不定根其次生生長為正常次生生長, 是擔負吸收和固著作用的正常根。另一種類型的不定根, 其形成層產(chǎn)生的次生木質(zhì)部含有大量的薄壁細胞, 此類薄壁細胞通常是經(jīng)過其細胞增殖增加數(shù)量, 少量的導管分散在薄壁細胞之間。這種次生長為異常次生生長, 從而使不定根膨大, 形成塊根。因此,地黃的藥用部分在起源和結(jié)構(gòu)上都屬于根的性質(zhì), 其藥用部分應(yīng)稱為塊根。塊根膨大的過程為不定根的前端先膨大成小球狀, 之后整個前端膨大為柱狀肉質(zhì)根, 以后其中部生長較快, 兩端生長較慢, 從而發(fā)育成近紡錘狀塊根。組織化學研究表明, 地黃的主要藥用成分梓醇分布在薄壁組織細胞中11

14、-12。在超微結(jié)構(gòu)方面, 做的工作較少, 僅見方瑾12對地黃的花藥進行了研究。通過對地黃花藥超微結(jié)構(gòu)的研究發(fā)現(xiàn), 花藥絨氈層具有二型性。來源于初生壁細胞的p 2絨氈層, 細胞較小, 為分泌型絨氈層, 在小孢子階段產(chǎn)生烏氏體, 于兩細胞花粉階段解體; 來源于藥隔的c2絨氈層細胞較大, 解體的時間早于p2絨氈層, 不同藥室的p2絨氈層解體的起始時間不一致, 可始于小孢子母細胞減數(shù)分裂、四分體或小孢子階段, 其徑向壁與面向藥室外的壁也較早地開始解體, 細胞質(zhì)碎片與細胞器流入藥室, 分散在小孢子之間, 較早解體的c2絨氈層細胞不產(chǎn)生原烏氏體與烏氏體, 部分解體較晚的c2絨氈層細胞壁產(chǎn)生原烏氏體, 但很

15、少形成烏氏體。五、地黃化學研究進展自20 世紀80 年代以來, 對地黃的化學成分進行了系列研究。已知地黃的主要成分為苷類、糖類及氨基酸等成分。1.環(huán)烯醚萜及其苷類地黃含有環(huán)烯醚萜、單萜及其苷類成分13-17 ,目前地黃中已分得的環(huán)烯醚萜類化合物共32個, 其中以梓醇含量最高。梓醇: 梓醇為地黃的主要有效成分, 是環(huán)烯醚萜單糖苷, 具有降血糖、利尿和緩瀉作用; 其水溶性成分主要有抗炎、保肝等作用; 脂溶性成分有耐缺氧作用; 其水、醇提取物有調(diào)節(jié)免疫功能的作用18。通過對不同產(chǎn)區(qū)地黃中梓醇含量的測定發(fā)現(xiàn), 道地藥材懷地黃梓醇含量高于其他產(chǎn)區(qū)地黃, 地黃道地產(chǎn)區(qū)河南溫縣出產(chǎn)的地黃梓醇含量最高5.95

16、 mg/g, 而山東嘉祥、山東濟寧、山西襄汾所產(chǎn)地黃梓醇含量較低, 分別為: 0.143, 0.85,0.285 mg/g, 說明制劑中使用道地藥材的必要性18-19。梓醇在鮮地黃、生地黃、熟地黃中的含量也有明顯差異,鮮地黃梓醇含量最高, 為5.33% , 生地黃次之, 為0.611% ,熟地黃含量最低。在熟地黃中酒制品梓醇的含量為0.203% , 水制品為0.182%。因此, 從梓醇含量上也可證明鮮地黃、生地黃、熟地黃作用的不同, 為中醫(yī)臨床使用提供了科學依據(jù)。目前在臨床上常用鮮地黃, 但鮮地黃的貯藏較困難, 對砂埋、冷藏、冷凍的地黃中梓醇含量進行測定, 結(jié)果表明, 砂埋后梓醇含量沒有明顯下

17、降, 因此, 從梓醇含量分析, 砂埋是貯藏地黃的較好的方法20。梓醇的含量與地黃塊根的外形也有一定相關(guān)性, 形狀大的梓醇含量高, 小的含量低19。梓醇含量與塊根的直徑長度比有較強的正相關(guān)性, 因此, 在地黃栽培過程中應(yīng)促使其塊根向短粗的方向發(fā)展。地黃入藥時往往用較粗的塊根, 較細的根和母根均被丟棄, 通過測定發(fā)現(xiàn), 地黃較細的根和母根都含有一定量的梓醇, 從資源利用分析看被舍棄的部分占總梓醇量的16%-27% , 這部分資源可進行綜合利用21-22。地黃苷A: 地黃中另一重要的環(huán)烯醚萜苷類化合物為地黃苷A , 是環(huán)烯醚萜雙糖苷, 地黃苷A 比梓醇穩(wěn)定。用薄層掃描法測定干燥地黃中地黃苷A 含量一

18、般不低于110mgg , 從而為控制地黃的質(zhì)量提供了另一可行的測定方法23。腺苷: 腺苷也是地黃主要有效成分之一, 具有降低血壓、減慢心律等作用24通過高效液相色譜法測定不同產(chǎn)地地黃中腺苷含量存在較大的差異; 對不同生長時期地黃腺苷含量的測定表明, 地黃腺苷的含量10 月份明顯高于8, 9 月份; 而同一塊根不同組織部位腺苷的含量無明顯的差異。通過比較同一株地黃母根及塊根中腺苷的含量, 母根也含較多的腺苷25 , 因此, 在利用藥材資源時應(yīng)考慮保留母根。麥角甾苷: 麥角甾苷也是地黃中有效成分之一。通過高效液相色譜法測得麥角甾苷的含量在鮮地黃、生地黃和熟地黃中也有差異, 鮮地黃含量為0.116%

19、 , 生地黃為0.093% ,熟地黃為0.04% , 與梓醇的變化趨勢一致26。2.糖、苷類從地黃中已分離鑒定出了8 種糖類:水蘇糖、棉子糖、葡萄糖、蔗糖、果糖、甘露三糖、毛蕊花糖及半乳糖27 。鮮地黃中水蘇糖含量高于干地黃,而六碳糖、蔗糖及三糖含量低于干地黃,干地黃中僅含少量還原糖,而熟地黃中含有大量還原糖,其苷類的結(jié)構(gòu)及含量有明顯變化。從地黃愈傷組織的甲醇提取物中分離鑒定了4 種酚性苷類:Acteoside、Forsythiaside、3 ,4 - 二羥基- - 苯基- O - D - 吡喃葡糖基- (1 3) - O - 咖啡酸基- - D - 吡喃葡糖苷及3 ,4 - 二羥基- 苯基-

20、 (1 6) - 4 - O - 咖啡酸基- D - 吡喃葡糖苷。此外,從地黃鮮葉中還分離鑒定了金圣草黃素、木樨草素及梓醇等。3.氨基酸倪慕云等報道28 ,地黃及其炮制品中水溶性游離氨基酸總含量分別為: 干地黃61. 533 mg/ g ; 熟地黃加酒燉為22. 244 mg/ g ,不加酒燉為5. 231 mg/ g。干地黃中含15 種游離氨基酸,按含量多少依次為丙氨酸、谷氨酸、纈氨酸、精氨酸、門冬氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、脯氨酸、酪氨酸、絲氨酸、甘氨酸、苯丙氨酸、蘇氨酸、胱氨酸、賴氨酸。其水溶性游離氨基酸的量與友田正司所報道基本一致。所含氨基酸的種類與龔躍新等報道基本一致29。只是不存在甲硫

21、氨酸與組氨酸,但存在脯氨酸與胱氨酸。4.微量元素鈴木章等報道30 ,生地黃中的無機離子及微量元素,按含量多少排列順序為: K Mg Ca Fe Mn Zn Cu。倪慕云等報道31 ,干地黃中微量元素含量順序為: K Mg Ca Na Fe Cu Zn Mn Sr Co Pb。其中前4 種含量大于500 ppm。Mg、Na、K、Ca 的含量與鈴木章報道基本一致,而Cu、Mn、Fe 的含量差別較大。熟地黃中微量元素含量順序為: K Ca Mg Na Fe Al Cu Zn Mn Sr Cr Co Pb。其中前4 種含量大于500 ppm。加酒與不加酒炮制的熟地黃,微量元素含量順序基本一致,干地黃與

22、熟地黃中Mg、Ca 的溶出率基本一致。但熟地黃中Sr 、Mn 的溶出率略降低,而Cu 稍升高,水燉較酒燉熟地黃中Zn、Al 、Fe 的溶出率稍高。此外從干地黃中還分離鑒定了系列脂肪酸、- 谷甾醇、棕櫚酸、丁二酸、S8 環(huán)狀化合物等32 。 六、理化鑒別 1、顯微鑒定33按照中國藥典規(guī)定：本品橫切面有木栓細胞數(shù)列。栓內(nèi)層薄壁細胞排列疏松；散有較多分泌細胞，含橘黃色為油滴；偶有石細胞。韌皮部較寬，分泌細胞較少。形成層成環(huán)。木質(zhì)部射線寬廣；導管稀疏，排列成放射狀。生地黃粉末深棕色。木栓細胞淡棕色。薄壁細胞類圓形，內(nèi)含類圓形細胞核。分泌細胞形狀與一般薄壁細胞類似，內(nèi)含橙黃色或橙紅色油滴狀物。具緣紋孔及

23、網(wǎng)紋導管直徑約至92m。2、薄層鑒別中國藥典33規(guī)定：取本品粉末2g，加甲醇20ml，加熱回流1 小時，放冷，濾過，濾液濃縮至約5ml，作為供試品溶液。另取梓醇對照品加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5l，分別點于同一硅膠薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(14:6:1) 為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茴香醛試液，在105 加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。劉明等34采用TLC法對熟地黃藥材進行定性鑒別，使用硅膠G薄層板，以三氯甲烷-甲醇-水（12：8：1）為展開劑，以地黃苷A和地黃苷D為對照品

24、，展開后以5%香草醛-濃硫酸為顯色劑。在此色譜系統(tǒng)中地黃苷A和地黃苷D分離效果良好。李軍等35采用硅膠G板對地黃中的果糖進行鑒別，以正丁醇-吡啶-水（16：15：4）為展開劑，選用苯胺-二苯胺-磷酸為顯色劑，斑點明顯，分離效果好。參考文獻1 葉定江,張世臣. 中藥炮制學M . 北京:人民衛(wèi)生出版社,1999.289 - 294.2 胡世林. 中國道地藥材M . 哈爾濱: 黑龍江科學技術(shù)出版社, 1989, 7: 10, 280.3 李衛(wèi)民，鄧中甲.探析地黃道地藥材的歷史變遷J.陜西中醫(yī),2009,30(4)：473.4 趙素霞,樊克峰,白雁.地黃資源狀況分析J.中藥研究與信息,2003,5(5

25、):25-26.5 趙建邦,宋平順，衛(wèi)玉玲.甘肅不同地區(qū)栽培地黃的質(zhì)量評價J,2009,26(5):45-47.6 李先恩,祁建軍,周麗莉等.地黃種質(zhì)資源生物形狀的比較研究J,2008,33(18):2033-2035.7 江蘇新醫(yī)學院.中藥大辭典M.上海：上海人民出版社，1975.8 L iu C H, Zhang L J , L i G S1Determination of rehmannioside A in root tuber of R ehmannia glutinosa Libosch. J .Ch in Trad it Herb Drugs (中草藥) , 2002, 33 (

26、8) : 706-707.9 Du H Q .Category and Quality Control of Common Chinese Herbs (常用中藥材品種整理與質(zhì)量研究) M .Fuzhou:Fujian Science Publishing House, 1997.10 Editorial Board of China Herbal, State Administration of Traditional Chinese Medicine1 Ch- ina Herbal ( 中華本草)M .Shanghai: Shanghai Scientific and Technical

27、Publishers, 1993.11 Xiao L , Zhao X G, Chang S M. Developmental anatomy of the root tuber of R ehmannia glu -tinosa J . A cta B otB oreal Occident S in (西北植物學報) , 1996, 16 (5) : 44-47.12 Fan J , W ang J H, L u G Q .A n ultrastructural study on dimorphism of tapetum in Rehmannia glutinosa J J W uhan

28、B ot Res (武漢植物學研究) , 1994, 12 (4) : 289-294.13 黃泰康. 常用中藥成份與藥理手冊M . 北京:中國醫(yī)藥科技出版社,1994. 794.14 北川勛,西村正,古林安見子,等. 懷慶地黃根莖成分J . 藥學雜志,1971 ,91 (5) :593.15吳壽金,徐實枚,李雅臣,等. 懷慶地黃化學成分的研究J . 中草藥,1984 ,15 (7) :6-8.16 大鹽春治,松本憲親,佐伯任志. 地黃的梓醇、二氫梓醇及地黃甙的定量分析J . 日本生藥學雜志,1981 ,35 (4) :291.17 Tomoda M , koto S , Onuma M. W

29、ater - soluble constituents of Rehmanniae Radix. I. Carbohydrate and acids of Rehmannia glutinosa f .HueichingensisJ . Chem Pharm Bull ,1971 ,19 (7) :1455.18 Liu C H, Li G S, Huang Y X.Comparison on catalpol in Rehmannia glutinosa Libosch.of different producing areasJ.Trad it Chin Med Res (中醫(yī)研究) , 2

30、001, 14 (5) : 10-12.19L iu G C, Du H Q , L iang L . Determination of catalpol in Rehmannia glutinosa by HPLC J .Chin Trad it Herb Drugs(中草藥) , 1992, 23 (2) : 71-73. 20 L i J P, Zhou F J , J ia J W , et al.Influences of different storage condition on the content of catalpol of Rehmannia glutinosa J .

31、Ch in T rad it H erb Drugs (中草藥) , 2003, 34 (3) :2731.21Luo Y Y, Lu M , Li G H, et al.Correlation between the content of catalpol and the appearance of the fresh R ad ix Rehmanniae J .J Plant Res Environ (植物資源與環(huán)境) ,1994, 3 (2) : 27-30.22Luo Y Y, Zhang S Q , Hao J Z, et al.Determination of catalpol i

32、n root tuber of Rehm- annia glutinosa by HPLC J .Chin Pharm J (中國藥學雜志) , 1994, 29 (1) : 38-39.23L iu C H, Zhang L J , Li G S.Determ ination of rehmannio sideA in root tuber of R ehm annia g lu tinosa J 1 Ch in T rad itH erb D rug s (中草藥) , 2002, 33 (8) : 706-707.24Zhu Q , L uo Y Y, W ang Y, et al1 D

33、eterm ination of adeno2sine in R ehmannia glu- tinosa Libosch1 by HPLC J 1 China J Chin Mater M ed (中國中藥雜志) , 1998, 23 (12) : 7111.25Zhu Q , L uo Y Y, W ang Y, et al.The influence factors on adenosine content in the root tuber of Rehmannia glutinosa Libosch.J . J Plant Res Environ ( 植物資源與環(huán)境) ,1997,6

34、(1):58-59.26Bian B L , W ang H J , Shen X1Determination of ergosterin in fresh Dihuang and Raw D- ihuang of Rehmannia glutinosa J .Chin Trad it Pat Med (中成藥) , 1997, 19 (8) : 20-22.27 李軍，張麗萍，張振凌.地黃研究進展J.河南中醫(yī)學院學報,2005,20(6).28倪慕云,邊寶林,姜莉. 地黃及其炮制品中游離氨基酸的分析比較J.中國中藥雜志,1989 ,14 (3) :21 - 22.29龔躍新. 十味補益藥中游

35、離的氨基酸分析J . 中草藥,1987 ,18(11) :37.30鈴木章. 生藥中金屬的溶出J . 生藥學雜志(日) ,1982 ,36 (8) :192. 31倪慕云,邊寶林. 地黃及其炮制品微量元素的分析比較J . 中藥通報,1988 ,13 (4) :210 - 211.32倪慕云,邊寶林,王宏生. 干地黃化學成分研究J . 中國中藥雜志,1992 ,17 (5) :297 - 298.33國家藥典委員會.中華人民共和國藥典:一部S.北京:化學工業(yè)出版社,2005：82. 34劉明，李更生,王慧森.熟地黃藥材質(zhì)量標準的研究J.藥物分析雜志,2007,27(9):1311-1313.35

36、李軍,張麗萍,游志恒等.薄層掃描法測定熟地黃中果糖的含量J.河南中醫(yī)學院學報,2009,24（140）:56-57.地黃的生藥學研究地黃為玄參科植物地黃(Rehmannia glutinosa Libosch. )的新鮮或干燥的塊根。秋季采挖，除去蘆頭、須根及泥沙，鮮用；或?qū)⒌攸S緩緩烘焙至約八成干。前者習稱“鮮地黃”，后者習稱“生地黃”1 ，如圖1所示。鮮地黃性寒、味甘苦,以清熱生津、涼血止血為主。鮮地黃經(jīng)產(chǎn)地加工焙干后名干地黃或生地黃,其性寒、味甘,以清熱涼血、養(yǎng)陰生津為主。A B圖1 A 塊根 B 原植物1 實驗材料、儀器與試劑1. 1實驗材料地黃塊根經(jīng)鑒定為參科植物地黃(Rehmanni

37、a glutinosa Libosch. )干燥的塊根2儀器與試劑旋轉(zhuǎn)切片機(上海醫(yī)療器械四廠)；儀器 Shimadzu LC-10ATVP高效液相色譜儀；Shimadzu SPD-10AVP紫外檢測器；MettlerM200電子分析天平(萬分之一,十萬分之一)；BX60 型OLYMPUS顯微鏡及圖象分析系統(tǒng)； XSZ3G生物顯微鏡(重慶光電生物儀器有限公司)；蒸餾水；水合氯醛液；稀甘油液；番紅染色液；固綠染色液；蛋清甘油；其他試劑均為分析純。2 性狀鑒別2.1 鮮地黃 呈紡錘形或條狀，長824cm，直徑29cm。外皮薄，表面淺紅黃色，具彎曲的縱皺紋、芽痕、橫長皮孔樣突起及不規(guī)則疤痕。肉質(zhì)，易

38、斷，表面皮部淡黃白色，可見橘紅色油點，木部黃白色，導管呈放射狀排列。氣微，味微甜、微苦。2.2 生地黃 呈不規(guī)則的團狀或長圓形，中間膨大，兩端細小。表面棕黑色或棕灰色，極皺縮，具不規(guī)則的橫曲紋。體重，質(zhì)較軟而韌，不易折斷，斷面棕黑色或烏黑色，有光澤，具黏性，氣微，味微甜。3 顯微鑒別3.1 橫切面 木栓細胞數(shù)列。栓內(nèi)層薄壁細胞排列疏松；散有較多分泌細胞，含橘黃色油滴；偶有石細胞。韌皮部較寬，分泌細胞較少。形成層成環(huán)。木質(zhì)部射線寬廣，導管稀疏，排列成放射狀。如圖2所示圖2 地黃的橫切面3.2 粉末 生地黃粉末呈深褐色。木栓細胞淡棕色。薄壁細胞，淡灰棕色，類圓形或形狀不規(guī)則，內(nèi)含有圓形核狀物。分泌

39、細胞形狀與一般薄壁細胞相似，內(nèi)含橙黃色或橙紅色油滴狀物。導管主為具緣紋孔導管及網(wǎng)紋導管，導管分子較短，直徑可至92m，具緣紋孔較密。如圖3 所示A B圖3 A分泌細胞 B導管4 薄層色譜鑒定取本品粉末2g，加甲醇20ml，加熱回流1小時，放冷，濾過，濾液濃縮至約5ml，作為供試品溶液。另取梓醇對照品加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5l，分別點于同一硅膠薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(14:6:1) 為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茴香醛試液，在105 加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。如圖4所示圖4 地黃的TLC圖5 含量測定5.1供試品溶液的制備 取本品（生地黃）切成約5mm的小塊，經(jīng)80減壓干燥24小時后，磨成粗粉約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，加熱回流提取1.5小時，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液10ml，濃縮至近干，殘渣用流動相溶解，轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中，并用流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。5.2對照品溶液的制備 精密稱量梓醇對照品5.92mg,置于5