新冠病毒核酸10合1混采檢測(cè)技術(shù)規(guī)范

1、新冠病毒核酸10合1混采檢測(cè)技術(shù)規(guī)范新冠病毒核酸10合1混采檢測(cè)（10-in-1test）技術(shù)是指采集自10人的10支拭子集合于1個(gè)采樣管中進(jìn)行核酸檢測(cè)的方法。樣本采集耗材規(guī)格病毒采集管管帽和管體應(yīng)當(dāng)為聚丙烯材質(zhì)，螺旋口可密封，松緊適度，管體透明，可視度好。試管外徑（14.80.2）mm*（100.50.4）mm,管帽外徑（15.80.15）mm,高度（12.50.5）mm。容量企業(yè)定標(biāo)10ml,內(nèi)含6ml胍鹽或其他有效病毒滅活劑的保存液。保存液應(yīng)當(dāng)帶有易于觀察、辨識(shí)的顏色（如粉紅色），并保持一定的流動(dòng)性，方便取樣。（二）采樣拭子宜選用聚酯、尼龍等非棉質(zhì)、非藻酸鈣材質(zhì)的拭子，且柄部為非木質(zhì)材料

2、。折斷點(diǎn)位于距拭子頭頂端3cm左右，易于折斷。采樣地點(diǎn)要求選擇空曠、通風(fēng)良好的場(chǎng)地作為大規(guī)模人群篩查集中采集地點(diǎn)。根據(jù)原有場(chǎng)地條件，劃分為等候區(qū)、采集區(qū)、緩沖區(qū)和臨時(shí)隔離區(qū)，有效分散待檢人員密度，應(yīng)當(dāng)設(shè)置急救設(shè)備備用。等候區(qū)設(shè)置人行通道，同時(shí)設(shè)置一米線保證等候人員的防護(hù)安全。根據(jù)天氣條件配備保溫、降溫、遮陽、遮雨等設(shè)施。老年人、兒童、孕婦和其他行動(dòng)不便者優(yōu)先采集。采集區(qū)根據(jù)氣候條件，配備帳篷、冷/暖風(fēng)扇、適量桌椅，保證醫(yī)護(hù)人員在相對(duì)舒適環(huán)境下工作。配備采集用消毒用品、拭子、病毒采集管，并應(yīng)當(dāng)為受檢人員準(zhǔn)備紙巾、嘔吐袋和口罩備用。標(biāo)本如無法及時(shí)運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室，需準(zhǔn)備4冰箱或低溫保存箱暫存。應(yīng)當(dāng)制定

3、防止病原微生物擴(kuò)散和感染的應(yīng)急預(yù)案。緩沖區(qū)空間應(yīng)當(dāng)相對(duì)密封，可供采集人員更換個(gè)人防護(hù)裝備，放置與采樣點(diǎn)規(guī)模相匹配的防護(hù)用品、采集消毒用品、拭子和采集管，戶外消殺設(shè)備。臨時(shí)隔離區(qū)用于暫時(shí)隔離在采集過程中發(fā)現(xiàn)的疑似患者或高危人群。采集流程標(biāo)識(shí)及信息登記登記流程。工作人員在采集前分配10個(gè)受檢者為一組，采集前收集并登記受檢者相關(guān)信息（包括姓名、性別、身份證號(hào)、聯(lián)系電話、采集地點(diǎn)、采集日期和時(shí)間），按照組別進(jìn)行采集管編號(hào)。登記要求。推薦使用身份證讀卡器、二維碼條碼等信息化手段關(guān)聯(lián)受檢者信息，提高信息讀取效率和準(zhǔn)確性。如不具備信息化條件，應(yīng)當(dāng)提前登記新冠病毒核酸10合1混采檢測(cè)登記表（見附件，以下簡稱混

4、采登記表）。紙質(zhì)登記表隨標(biāo)本送檢前應(yīng)當(dāng)備份存檔于采集點(diǎn)所在社區(qū)，便于及時(shí)追溯受檢者。采集方法被采集人員頭部微仰，嘴張大，發(fā)“啊”音，露出兩側(cè)咽扁桃體，采集人員將拭子越過被采集人員舌根，在兩側(cè)咽扁桃體稍微用力來回擦拭至少3次，然后在咽后壁上下擦拭至少3次，操作完畢后，將拭子頭置于管中、拭子折斷點(diǎn)置于管口處，稍用力折斷使拭子頭落入采集管的液體中，棄去折斷后的拭子桿，旋緊管蓋，將采集管置于穩(wěn)定的置物架上，每例采集后采集人員均應(yīng)進(jìn)行手消毒?；旌鲜米右勒丈鲜霾杉椒ㄒ来尾杉溆?支拭子，將完成采集的拭子放入同一個(gè)采集管中，動(dòng)作輕柔，避免氣溶膠產(chǎn)生。連續(xù)采集10支拭子以后，旋緊管蓋，防止溢灑。如采集管內(nèi)拭

5、子不足10支，應(yīng)做好特殊標(biāo)記并記錄。標(biāo)本送檢核對(duì)信息核對(duì)采集管標(biāo)簽與混采登記表信息，確保準(zhǔn)確完整，編號(hào)一致。標(biāo)本放置要求將核對(duì)后的采集管放入透明塑料密封袋（一層容器）中并封嚴(yán)袋口，用75%乙醇噴灑密封袋外部。將密封袋放入二層容器（可選內(nèi)配適量吸濕材料的包裝盒或雙層醫(yī)用垃圾袋），密封后用75%乙醇噴灑消毒。將二層容器放入具有“生物危害”標(biāo)識(shí)的專用標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)箱（推薦使用符合危險(xiǎn)品航空安全運(yùn)輸技術(shù)細(xì)則A類物品運(yùn)輸U(kuò)N2814標(biāo)準(zhǔn)的轉(zhuǎn)運(yùn)箱），二層容器和轉(zhuǎn)運(yùn)箱之間應(yīng)當(dāng)放置降溫凝膠冰袋。二層容器應(yīng)當(dāng)固定在轉(zhuǎn)運(yùn)箱中，保持標(biāo)本直立。密封轉(zhuǎn)運(yùn)箱后，使用75%乙醇噴灑消毒，轉(zhuǎn)運(yùn)箱表面潔凈無污染。標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)要求。標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)

6、運(yùn)箱應(yīng)當(dāng)由專門標(biāo)本運(yùn)送人員負(fù)責(zé)運(yùn)送。標(biāo)本應(yīng)當(dāng)在采集后2-4小時(shí)內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室。混采登記表放入獨(dú)立密封袋，隨轉(zhuǎn)運(yùn)箱一同轉(zhuǎn)運(yùn)，不能立即送檢的，應(yīng)當(dāng)配備專門的冰箱或冷藏箱保存，并做好標(biāo)本接收、保存登記。標(biāo)本采集后24小時(shí)內(nèi)可置于4保存。實(shí)驗(yàn)室接收標(biāo)本簽收運(yùn)送和接收人員應(yīng)當(dāng)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行雙簽收，接收人員檢查混采登記表是否填寫完整，被檢者信息是否可追溯，轉(zhuǎn)運(yùn)箱、二層容器有無破損。標(biāo)本打開應(yīng)當(dāng)在生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室核心區(qū)打開轉(zhuǎn)運(yùn)箱，取出二層容器。在生物安全柜中打開二層容器，用75%乙醇噴灑或擦拭消毒后，取出密封袋，用75%乙醇試劑噴灑或擦拭消毒，并檢查是否密封完好。標(biāo)本檢查核對(duì)采集管標(biāo)簽與混采登記表信息是否一致。

7、取出采集管，檢查管壁是否有破損、管口滲漏等，確認(rèn)無破損、滲漏后用75%乙醇噴灑或擦拭消毒。如有破損、滲漏，應(yīng)當(dāng)立即停止操作，用吸水紙覆蓋后使用0.55%含氯消毒劑進(jìn)行消毒處理，做好不合格登記后銷毀。標(biāo)本保存不能及時(shí)檢測(cè)的標(biāo)本放入專用冰箱保存。24小時(shí)內(nèi)檢測(cè)的標(biāo)本可置于4保存。24小時(shí)內(nèi)無法檢測(cè)的標(biāo)本應(yīng)當(dāng)置于-70或以下溫度保存。如無-70保存條件，則于-20暫存。避免標(biāo)本反復(fù)凍融。設(shè)立專庫或?qū)９癖４鏄颖荆p人雙鎖管理。轉(zhuǎn)運(yùn)容器移出使用后的二層容器內(nèi)外壁經(jīng)75%乙醇擦拭消毒后移出生物安全柜，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后使用紫外燈照射消毒。標(biāo)本檢測(cè)與質(zhì)量控制標(biāo)本檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室接收標(biāo)本后，應(yīng)當(dāng)立即進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)前進(jìn)行充分

8、震蕩洗脫，之后進(jìn)行核酸提取及擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)。推薦選用包含針對(duì)新冠病毒開放讀碼框1ab（ORF1ab）和殼蛋白（N）基因區(qū)域的試劑。若使用核酸提取儀，核酸提取試劑與核酸提取儀配套使用。擴(kuò)增試劑盒應(yīng)當(dāng)選用國家藥監(jiān)局批準(zhǔn)帶有注冊(cè)文號(hào)的試劑盒。建議選擇檢測(cè)限低、靈敏度高的檢測(cè)試劑盒。檢測(cè)質(zhì)控每批檢測(cè)至少有1份弱陽性質(zhì)控品（第三方質(zhì)控品，通常為檢出限的3倍左右）、2份陰性質(zhì)控品（試劑盒自帶陰性質(zhì)控品）和1份空白對(duì)照品（生理鹽水或焦碳酸二乙酯處理水）。空白對(duì)照品應(yīng)當(dāng)開蓋放置在提取儀或操作臺(tái)面上過夜，用于環(huán)境污染評(píng)估。質(zhì)控品隨機(jī)放在臨床標(biāo)本中，參與從提取到擴(kuò)增的全過程。質(zhì)控結(jié)果弱陽性質(zhì)控品測(cè)定為陽性，陰性質(zhì)控品全

9、部測(cè)定為陰性，視為在控。反之，則為失控，不可出具檢測(cè)報(bào)告，應(yīng)立即分析原因，必要時(shí)重新檢測(cè)標(biāo)本。檢測(cè)結(jié)果處理新冠病毒核酸定性檢測(cè)報(bào)告應(yīng)當(dāng)包括檢測(cè)結(jié)果（檢出/陽性、未檢出/陰性）、方法學(xué)、檢出限等。結(jié)果判斷依據(jù)所用擴(kuò)增試劑說明書，判斷檢測(cè)結(jié)果為未檢出/陰性或者檢出/陽性。若結(jié)果處于灰區(qū)，建議作為混采陽性結(jié)果進(jìn)行復(fù)核。陽性結(jié)果復(fù)核混采檢測(cè)結(jié)果為陽性、灰區(qū)或單個(gè)靶標(biāo)陽性，通知相關(guān)部門對(duì)該混采管的10個(gè)受試者暫時(shí)單獨(dú)隔離，并重新采集單管拭子進(jìn)行復(fù)核。2. 復(fù)核單管核酸檢測(cè)如均為陰性，則按照陰性結(jié)果回報(bào)。暫時(shí)隔離人員即解除隔離；如檢測(cè)結(jié)果陽性，按程序上報(bào)。檢測(cè)后樣本處理檢測(cè)后的標(biāo)本應(yīng)當(dāng)盡快就地銷毀，做好高壓滅菌質(zhì)量監(jiān)控和消毒、銷毀記錄。技術(shù)人員基本要求采樣人員和檢測(cè)人員要求應(yīng)滿足醫(yī)療機(jī)構(gòu)新型冠狀病毒核酸檢測(cè)工作手冊(cè)（試行）要求。生物安全防護(hù)（一）標(biāo)本采集和運(yùn)送人員對(duì)于采集低風(fēng)險(xiǎn)區(qū)域人群的采集者，采用二級(jí)生物安全防護(hù)，包括：一次性帽子、醫(yī)用防護(hù)口罩（N95）、手套（必要時(shí)雙層）、護(hù)目鏡/面屏、隔離衣，鞋套（必要時(shí)）。標(biāo)本運(yùn)送人員采用一級(jí)生物安全防護(hù)，包括：醫(yī)用外科口罩、乳膠手套、工作服，可戴醫(yī)用防護(hù)帽。標(biāo)本接收和檢測(cè)人員標(biāo)本接收人員應(yīng)當(dāng)為核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室經(jīng)生物安全防護(hù)培訓(xùn)的指定人員，采用二級(jí)以上生物安全防護(hù)。