葛根素對去卵巢大鼠機體骨代謝影響的觀察

1、葛根素對去卵巢大鼠機體骨代謝影響的觀察【關(guān)鍵詞】葛根素;去卵巢大鼠;骨代謝【Keyrds】Puerarin;varietizedrats;Bneetablis一般認為，婦女進入更年期后由于卵巢功能減退，雌激素分泌降低，影響鈣代謝，鈣過多的從骨骼中游離出來，最終導致骨量喪失而形成骨質(zhì)疏松13。因此雌激素替代療法曾經(jīng)是預防和治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松(P)的首選方法，但由于雌激素有一定的副作用4，5，使雌激素替代治療療法具有爭議。葛根素是異黃酮類化合物，具有與雌激素相似的化學構(gòu)造6，屬于植物雌激素，具有一定的雌激素活性7。本實驗采用國內(nèi)外公認的雌性大鼠去卵巢建立P模型，觀察葛根素對去卵巢大鼠骨代謝的影響，

2、旨在開發(fā)新的治療P的藥物。1材料與方法1.1實驗動物與儀器3月齡清潔級(SpragueDaley，SD)雌性大鼠60只，體重240310g。由中國科學院上海實驗動物中心提供。葛根素(Puerarin)本實驗室自提純化，高效液相色譜法測定含葛根素89.69%。己烯雌酚(Diethylstilbestrl)片劑，0.5g/片，合肥九聯(lián)制藥消費。飼料：參照AIN93飼料配方配制半成品飼料，用菜粕交換飼料中的大豆餅，以防止大豆異黃酮等植物雌激素對實驗結(jié)果的干擾。見表1。儀器：Avanta型原子吸收分光光度計：澳大利亞GB公司;lypulsAU640型全自動生化分析儀。1.2方法1.2.2血清生化指標的

3、測定采用lypuls全自動生化分析儀測定血清鈣(a)、磷(P)含量及血清堿性磷酸酶(ALP)活性。1.2.3脛骨干重、灰重及骨礦含量(B)的測定取大鼠右側(cè)脛骨，烘至恒重，記錄干骨重量。將烘干的脛骨在電爐上炭化至無煙后，置于550馬福爐中68hs灰化，稱量灰重，脛骨灰重與骨干重之比為骨礦含量(g/g)。1.2.4脛骨鈣磷含量測定準確稱取上述所得脛骨灰分0.1g，11鹽酸溶解后用雙蒸水定容至50l，再取1l于100l容量瓶中，雙蒸水定容后即為待測溶液。鈣含量測定采用Avanta型原子吸收分光光度計，磷含量測定采用無機磷液體試劑盒上lypuls全自動生化分析儀。1.3統(tǒng)計學處理所有實驗數(shù)據(jù)以xs表示

4、,采用SPSS10.0軟件進展方差分析和差異顯著性檢驗。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2結(jié)果2.1葛根素對去卵巢大鼠血清生化指標的影響去卵巢后，VX組大鼠血清鈣磷濃度比Sha組降低，差異不顯著;ALP活性增加了151.1%，差異極顯著(P0.01)。見表2。表1實驗日糧組成及營養(yǎng)程度表2葛根素對去卵巢大鼠血清鈣磷含量及堿性磷酸酶活性的影與VX組相比：1)P0.05,2)P0.01;與Sha組相比：3)P0.05,4)P0.01;下表同2.2葛根素對去卵巢大鼠脛骨a、P含量的影響切除卵巢后，大鼠的脛骨鈣含量顯著下降了46.5%(P0.01);磷含量變化差異不顯著。見表3。2.3葛根素對去卵巢大鼠脛骨干重

5、、灰重及礦物質(zhì)含量的影響切除卵巢后，VX組大鼠脛骨干重降低，灰重增加，但差異不顯著;脛骨礦物質(zhì)含量顯著下降(P0.01)。見表4。2.4葛根素對去卵巢大鼠體重的影響實驗前，各組大鼠的體重沒有顯著差異。經(jīng)過3個月的喂養(yǎng)后，各組大鼠體重均隨時間增長。VX組、葛根素各處理組體重的增長顯著大于Sha組(P0.01)。葛根素各處理組大鼠的體重增長與VX組相比都沒有顯著差異。E組大鼠的體重顯著低于Sha組和VX組。見表5。表3葛根素對去卵巢大鼠脛骨鈣、磷含量的影響表4葛根素對去卵巢大鼠脛骨干重、灰重及礦物質(zhì)含量的影響表5葛根素對去卵巢大鼠體重的影響3討論大量資料說明，主要的食物異黃酮大豆異黃酮對P有較好的

6、預防和治療效果811，葛根中總異黃酮含量可達8%10%，是大豆的幾十倍甚至上百倍，而且提取純化非常方便12。a,P為骨骼中主要的無機元素，是骨基質(zhì)的根本原料。骨中a維持著骨骼的強度。a流失過多，骨的顯微構(gòu)造發(fā)生改變，那么骨強度減弱。a代謝受多種因素影響，其中之一就是雌激素的程度。雌激素作用于成骨細胞，拮抗了糖皮質(zhì)激素對成骨細胞生長的抑制，阻滯了a過多的從骨骼中游離出來2。本實驗中，大鼠去卵巢后，a含量顯著降低，提示去卵巢能影響鈣代謝，使骨骼中鈣流失過多。服用己烯雌酚和葛根素3個月后，鈣含量顯著增加，提示鈣代謝得到了改善。測定骨代謝生化指標可以直接理解骨骼的生理代謝變化。一般說來，更年期P表現(xiàn)為

7、骨形成和骨吸收的生化指標都增高。另外，通過測定骨代謝生化指標可以有效評價藥物對骨代謝的影響和對P的治療效果，能使骨吸收指標得到控制或骨形成指標增加的藥物可以防止骨質(zhì)的進一步流失從而治療P。血清ALP是最常見的評價骨形成和骨轉(zhuǎn)換的生化指標，血清ALP的活性可以反映骨形成的活潑程度。血清中約50%的ALP來源于骨，50%來源于肝，極少數(shù)來源于小腸和胎盤。在絕經(jīng)后10年內(nèi)血清中骨ALP的含量可高達77%。更年期P是高轉(zhuǎn)換型P，即表現(xiàn)為骨形成和骨吸收的生化指標都增高。本實驗中卵巢摘除3個月后骨量喪失和ALP活性明顯升高，即表現(xiàn)出典型的P病癥并伴有骨轉(zhuǎn)換的增加，這與相關(guān)文獻報道的結(jié)果相似13。一般認為這種ALP活性的升高是伴隨著骨吸收亢進而出現(xiàn)的代償性骨形成增加引起的。服用葛根素或己烯雌酚3個月后，與VX組相比擬，ALP活性都得到了有效的控制，可以推測己烯雌酚和葛根素可以抑制ALP活性升高的趨勢，