寶寶樂口服液對(duì)瘦素調(diào)節(jié)VMN神經(jīng)元膜電位的影響

1、寶寶樂口服液對(duì)瘦素調(diào)節(jié)VMN神經(jīng)元膜電位的影響【摘要】目的研究寶寶樂口服液對(duì)瘦素調(diào)節(jié)下丘腦腹內(nèi)側(cè)核(VH)神經(jīng)元膜電位的影響。方法利用紅外可視腦片膜片鉗技術(shù)記錄對(duì)照組、厭食組和治療組三組模型動(dòng)物VN神經(jīng)元的膜電位，分析瘦素及寶寶樂口服液對(duì)VN神經(jīng)元膜電位的影響。結(jié)果瘦素使三組動(dòng)物大局部神經(jīng)元去極化，各組間比擬差異無(wú)顯著性。少數(shù)VN神經(jīng)元在瘦素作用下超極化，各組間比擬差異亦無(wú)顯著性。但模型組VN神經(jīng)元的膜電位被瘦素去極化而導(dǎo)致自發(fā)放電增加的細(xì)胞比例增多，被瘦素超極化而自發(fā)放電減少的細(xì)胞比例減少，對(duì)瘦素?zé)o反響的細(xì)胞比例也減少；而治療組去極化、超極化和無(wú)反響的細(xì)胞數(shù)與對(duì)照組差異無(wú)顯著性。結(jié)論寶寶樂口

2、服液可以通過(guò)影響降低VN對(duì)瘦素的整體敏感性，使VN發(fā)出適度的飽信號(hào)，從而恢復(fù)正常的食欲和攝食量?！娟P(guān)鍵詞】寶寶樂口服液下丘腦腹內(nèi)側(cè)核膜電位膜片鉗小兒厭食是常見的攝食行為異常，發(fā)生率約為12%34%，對(duì)兒童生長(zhǎng)發(fā)育影響較大，對(duì)小兒厭食發(fā)生開展及其特效療法的深化研究將有助于推動(dòng)人類對(duì)攝食生理調(diào)控機(jī)制的進(jìn)一步認(rèn)識(shí)和進(jìn)步兒童安康程度1。近20年來(lái)，國(guó)內(nèi)學(xué)者廣泛使用以恢復(fù)脾胃運(yùn)轉(zhuǎn)之機(jī)，使脾胃調(diào)和、脾運(yùn)復(fù)健為主要目的的運(yùn)脾法為治那么，治療小兒厭食獲得很好療效，并系統(tǒng)研究了運(yùn)脾法對(duì)消化吸收功能的影響，在外周程度上證實(shí)運(yùn)脾法對(duì)胃腸道的運(yùn)動(dòng)和分泌有顯著的調(diào)節(jié)作用2。在以往的研究中，我們采用病因模擬法成功制作了幼

3、齡大鼠厭食模型3，并就運(yùn)脾復(fù)方對(duì)該模型中樞和外周胃腸激素的調(diào)節(jié)作用4、對(duì)厭食大鼠下丘腦腹內(nèi)側(cè)核ventredialhypthalainului，VN神經(jīng)元外周攝食負(fù)反響信息的敏感性的影響進(jìn)展了研究，獲得了一些成果5。為進(jìn)一步討論小兒厭食癥的發(fā)病機(jī)制和運(yùn)脾復(fù)方的作用機(jī)制，觀察了運(yùn)脾復(fù)方寶寶樂口服液對(duì)瘦素調(diào)節(jié)VN神經(jīng)元膜電位的影響。1材料與方法1.2模型制備和藥物治療按文獻(xiàn)方法3制做厭食大鼠模型。即用正常鼠飼料喂養(yǎng)對(duì)照組大鼠，用特制飼料喂養(yǎng)模型組和治療組大鼠。1周后特制飼料喂養(yǎng)的大鼠日攝食量下降30%以上，體質(zhì)量下降15%以上，說(shuō)明模型制備成功。從實(shí)驗(yàn)第8天開場(chǎng)，治療組大鼠用運(yùn)脾復(fù)方寶寶樂口服液第

4、四軍醫(yī)大學(xué)科西京醫(yī)院藥劑科提供，藥物組成：蒼術(shù)、焦山楂、黃芪、黨參、陳皮各10g,白芍、決明子、煅龍骨、煅牡蠣各20g灌胃，每日1次，劑量為3.76g/100g(為臨床2倍等效量)，同時(shí)給予對(duì)照組和模型組大鼠等容積生理鹽水灌胃，連續(xù)3周。1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差(s)表示,采用t檢驗(yàn)和2檢驗(yàn),以P0.05為差異有顯著性。2結(jié)果在對(duì)照組n=15、模型組n=16和治療組n=14大鼠腦片上觀察了瘦素對(duì)VN神經(jīng)元膜電位的影響。瘦素使大局部神經(jīng)元去極化如圖1A示，膜電位改變?yōu)椋簩?duì)照組5.011.23Vn=8，模型組4.940.76Vn=13，治療組4.990.83Vn=6，各組間比擬差異無(wú)

5、顯著性。少數(shù)VN神經(jīng)元在瘦素作用下超極化如圖1B示，膜電位改變?yōu)椋簩?duì)照組4.160.72Vn=3，模型組4.85Vn=1，治療組3.880.94Vn=3，各組間比擬差異亦無(wú)顯著性。然而，模型組VN神經(jīng)元的膜電位被瘦素去激化而導(dǎo)致自發(fā)放電增加的細(xì)胞比例增多，被瘦素超極化而自發(fā)放電減少的細(xì)胞比例減少，對(duì)瘦素?zé)o反響的細(xì)胞比例也減少。這些結(jié)果與瘦素對(duì)VN神經(jīng)元IPS的影響一致，進(jìn)一步說(shuō)明瘦素使模型大鼠VN神經(jīng)元的興奮性增強(qiáng)。而治療組去極化、超極化和無(wú)反響的細(xì)胞數(shù)與對(duì)照組差異無(wú)顯著性圖1，提示寶寶樂口服液能降低瘦素對(duì)模型大鼠VN神經(jīng)元的去極化作用。與對(duì)照組比擬:*P0.05A示瘦素使一個(gè)VN神經(jīng)元去極化

6、，自發(fā)放電顯著增加，停頓灌流瘦素后膜電位未恢復(fù)；B示瘦素使另一個(gè)VN神經(jīng)元超極化，自發(fā)放電消失，停頓灌流瘦素后膜電位根本恢復(fù)。示三組大鼠VN被灌流瘦素去極化、超極化和無(wú)反響的神經(jīng)元構(gòu)成比。圖1瘦素對(duì)三組大鼠VN神經(jīng)元膜電位的影響略Figure1EffetsfleptinnebraneptentialfVNneurns轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.3討論目前，厭食已經(jīng)成為兒科臨床的常見疾病之一，對(duì)兒童的生長(zhǎng)發(fā)育影響較大，發(fā)病機(jī)制尚不明確，西醫(yī)至今仍未發(fā)現(xiàn)特效的療法。國(guó)外流行病學(xué)調(diào)查提示，嬰兒和學(xué)齡前兒童進(jìn)食問題包括拒食和偏食的發(fā)生率約為12%34，治療多以合理喂養(yǎng)和心理引導(dǎo)為主6。國(guó)內(nèi)研究集中在消化功能

7、紊亂、微量元素缺乏和免疫功能低下等方面，獲得了一些成果1,2。中醫(yī)藥治療本病有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，其中運(yùn)脾法7經(jīng)過(guò)20多年大量的臨床觀察，證實(shí)該法在治療小兒厭食癥方面有著可靠的療效。近年來(lái)，我們采用病因模擬法成功建立了幼齡大鼠厭食模型3，發(fā)現(xiàn)該模型下丘腦和外周K等多種與攝食控制相關(guān)的腦腸肽程度異常4，食欲中樞下丘腦外側(cè)區(qū)和下丘腦腹內(nèi)側(cè)區(qū)神經(jīng)元自發(fā)放電頻率改變5；臨床治療小兒厭食有可靠療效的運(yùn)脾復(fù)方不僅可調(diào)節(jié)外周血中攝食相關(guān)肽類激素程度,而且能調(diào)節(jié)下丘腦食欲中樞神經(jīng)元的自發(fā)放電頻率4,5。提示該造模因素可能使VN發(fā)出過(guò)度的飽信號(hào)，從而引起動(dòng)物攝食量下降，運(yùn)脾復(fù)方能降低單個(gè)神經(jīng)元的自發(fā)放電頻率，從而抑制V

8、N發(fā)出的飽信號(hào)。VN是攝食控制環(huán)路中的一個(gè)重要核團(tuán)，刺激VN終止動(dòng)物攝食，而毀損VN導(dǎo)致動(dòng)物過(guò)食而肥胖，因此VN被稱為飽中樞8。瘦素是由脂肪細(xì)胞釋放入血液的一種激素，直接作用于下丘腦神經(jīng)元參與攝食調(diào)節(jié)，瘦素程度升高抑制攝食行為，瘦素程度降低刺激攝食行為9。據(jù)此，推測(cè)厭食大鼠VN神經(jīng)元興奮性的改變及運(yùn)脾復(fù)方的調(diào)節(jié)作用可能與瘦素的影響有關(guān)。研究說(shuō)明10，膜電位的變化直接影響神經(jīng)元?jiǎng)幼麟娢坏陌l(fā)放。本研究結(jié)果顯示，瘦素對(duì)VN神經(jīng)元膜電位的影響存在3種情況去極化、超極化和無(wú)反響。去極化的VN神經(jīng)元比例在模型組顯著增加，超級(jí)化的VN神經(jīng)元在模型組顯著減少，表現(xiàn)出對(duì)瘦素的敏感性增強(qiáng)。模型組VN神經(jīng)元對(duì)瘦素的敏感性并不表如今單個(gè)神經(jīng)元對(duì)瘦素反響的強(qiáng)烈程度上，如膜電位去極化的幅度，而是表現(xiàn)為瘦素引起去極化的細(xì)胞數(shù)量的增加，同時(shí)使相反反響和無(wú)反響的細(xì)胞數(shù)減少，似乎是VN神經(jīng)元群對(duì)瘦素反響的不同形式在模型組進(jìn)展了重新組合。而治療組VN神經(jīng)元對(duì)瘦素的不同反響的比例恢復(fù)正常。這說(shuō)明大鼠VN神經(jīng)元對(duì)瘦素的不同反響存在著合理的比例關(guān)系，雖然大局部神經(jīng)元在瘦素作用下電活動(dòng)變得活潑起來(lái)，但卻有一小局部神經(jīng)元的電活動(dòng)反而被抑制了，即使是那局部對(duì)瘦素?zé)o反響的神經(jīng)元