生地黃多糖的微波提取及含量測(cè)定

1、生地黃多糖的微波提取及含量測(cè)定【摘要】目的從生地黃中提取多糖，并測(cè)定其含量。方法運(yùn)用微波技術(shù)用水提醇沉法提取生地黃多糖，用酚-硫酸比色法測(cè)定多糖含量。結(jié)果測(cè)得生地黃多糖含量13.4186%，平均回收率為98.94%，RSD=1.34%n=5。結(jié)論運(yùn)用微波技術(shù)從生地黃中提取出多糖，反響速度加快，實(shí)驗(yàn)結(jié)果令人滿(mǎn)意?！娟P(guān)鍵詞】微波技術(shù)；生地黃；多糖；提?。缓繙y(cè)定iravetehniqueextratinandntentdeterinatinfplysaharidefrehanniaglutinsalibshrt【Abstrat】bjetiveTheextratinandntentdeterinat

2、insplysaharidesfRehanniaglutinsaLibshrt.ethdsiravetehniqueappliedinplysaharidesfRehanniaglutinsaLibshrterebtainedbyhtaterextratinandethanlpreipitatin，ntentdeterinatinithphenl-vitrililrietry.ResultsTheplysaharidesntentfRehanniaglutinsaLibshrtis13.418%，reveryrateis98.94%.nlusiniravetehniqueappliedinth

3、eplysaharidesfRehanniaglutinsaLibshrthasbeenbtainedfrthefirsttie.【Keyrds】iravetehnique；rehanniaglutinsalibshrt；plysaharide；extratin；ntentdeterinatin生地黃為玄參科植物地黃RehanniaglutinsaLibsh.的枯燥塊根，別名地髓、生地、干地黃等，地黃根莖主要含梓醇、地黃素、糖類(lèi)、氨基酸、維生素A等成分。生地黃有敗毒抗癌、清熱涼血、養(yǎng)陰生津、醫(yī)瘡消腫、促進(jìn)免疫、降壓、抑制皮膚癬菌等作用，可用于治療傳染性肝炎、功能性子宮出血等。微波技術(shù)的應(yīng)用，近

4、年來(lái)得到很大開(kāi)展。微波具有穿透力強(qiáng)、選擇性高、加熱效率高等特點(diǎn)。微波輻射I可以大大加快反響速度最高達(dá)1240倍，反響時(shí)間以分、秒計(jì)3。微波技術(shù)應(yīng)用于植物細(xì)胞破壁，有效地進(jìn)步了收率4，亦獲得了令人可喜的進(jìn)展。本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用微波技術(shù)對(duì)生地黃用石油醚、乙醚除去脂溶性雜質(zhì)，用80%乙醇提取除去所含單糖、低聚糖及甙類(lèi)等干擾性成分后，再運(yùn)用微波技術(shù)用水提純沉淀法制得生地黃粗多糖，并采用酚-硫酸比色法對(duì)其多糖含量進(jìn)展測(cè)定5，獲得了令人滿(mǎn)意的結(jié)果。1儀器、試劑及樣品UV-2401P紫外分光光度計(jì)日本島津，L-3型連續(xù)微波反響器四川大學(xué)無(wú)線(xiàn)電系。葡萄糖AR105枯燥恒重，苯酚AR，硫酸AR。生地黃：購(gòu)置于石河子市藥

5、店，枯燥品，粉碎待用。2標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制2.1標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液的配制準(zhǔn)確稱(chēng)取枯燥恒重的葡萄糖25.2g，加適量水溶解，轉(zhuǎn)移至250l容量瓶中，加水至刻度，搖勻，配成濃度為100.8g/l標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液備用。2.25%苯酚試劑的配制取苯酚100g，加鋁片0.1g和NaH30.05g，蒸餾，搜集182餾份，稱(chēng)取7.5g，加水150l溶解，置棕色瓶?jī)?nèi)放冰箱備用。2.3標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制準(zhǔn)確量取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7l置枯燥試管中，分別加水使成1.0l，再分別參加5%苯酚溶液1.6l，搖勻，然后加濃H2S47.0l，充分搖勻，室溫放置25in，在400600n處測(cè)定

6、其最大吸光度，同時(shí)做一空白。將上述實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)做回歸處理得回歸方程：A=0.0691+310-3R2=0.9981r=0.99905。3生地黃多糖的提取及精制生地黃破碎后，稱(chēng)取30g，置500l燒瓶中，將此燒瓶放入L-3型連續(xù)微波反響器中，依次用300l石油醚(6090)、乙醚和80%乙醇回流提取，調(diào)整功率560、500、400、350，反響時(shí)間20in。殘?jiān)鼡]干溶劑后，再放入L-3型連續(xù)微波反響器中，繼續(xù)以水回流提取20in，調(diào)整功率630、600、560、450。減壓濃縮至一半體積，參加0.1%活性炭，脫色，過(guò)濾，濾液參加95%乙醇使溶液含醇80%，靜置過(guò)夜，過(guò)濾，殘?jiān)靡颐?、無(wú)水乙醇反復(fù)洗滌

7、，得生地黃多糖。60烘干備用。4換算因素測(cè)定準(zhǔn)確稱(chēng)取60枯燥恒重的生地黃多糖20g，水溶解后定容到100l容量瓶中，搖勻，作為多糖儲(chǔ)藏液。準(zhǔn)確量取多糖儲(chǔ)藏液0.20l，加水至1.0l，按測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)同樣的方法測(cè)其吸光度值。按下式計(jì)算換算因素：f=/D式中：為多糖重量(g)，為多糖液中葡萄糖的重量g)，D為多糖的稀釋倍數(shù)。測(cè)得f=2.9115。5樣品測(cè)定分別準(zhǔn)確稱(chēng)取生地黃粉末0.200g、0.250g、0.203g，用80%乙醇浸泡過(guò)夜，再于L-3型連續(xù)微波反響器中用80%乙醇回流20in，調(diào)整功率560、500、400、350。殘?jiān)鼡]去溶劑后，再放入L-3型連續(xù)微波反響器中，繼續(xù)以水回流提取2

8、0in，調(diào)整功率630、600、560、450。反復(fù)洗至250l容量瓶中，定容，搖勻成為樣品液。測(cè)定時(shí)，準(zhǔn)確汲取樣品液1.0l，按測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)同樣方法測(cè)其吸光度值，按下式計(jì)算多糖含量:多糖含量%=Df/100式中：為樣品溶液的葡萄糖的重量g)，D為樣品溶液的稀釋倍數(shù)，f為換算因素，為樣品的重量(g)，測(cè)得平均結(jié)果為13.4186%，RSD=0.5097%n=5。6加樣回收率測(cè)定準(zhǔn)確稱(chēng)取生地黃粉末0.15g，精細(xì)參加生地黃多糖7g，再于L-3型連續(xù)微波反響器中用80%乙醇回流20in，調(diào)整功率560、500、400、350。殘?jiān)鼡]去溶劑后，再放入L-3型連續(xù)微波反響器中，繼續(xù)以水回流提取20in

9、，調(diào)整功率630、600、560、450。反復(fù)洗至250l容量瓶中定容。搖勻后，準(zhǔn)確移取1.0l，按測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)同樣方法測(cè)其吸光度值。計(jì)算多糖含量，平均回收率為98.94%，RSD=1.34%n=5。7討論多糖廣泛存在于自然界，是多種中草藥的有效成分之一，具有多種生物活性，是理想的免疫增強(qiáng)劑，它能促進(jìn)T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞、細(xì)胞等免疫細(xì)胞的功能，還能促進(jìn)白介素、干擾素、腫瘤壞死因子等細(xì)胞因子的產(chǎn)生。目前對(duì)多糖的研究方興未艾，多糖的作用機(jī)制以及生物功能與構(gòu)造的關(guān)系的研究不斷深化，而且不斷有新的多糖物質(zhì)被發(fā)現(xiàn)。微波技術(shù)應(yīng)用于植物細(xì)胞破壁，大大地加快了反響速度，有效地進(jìn)步了收率。本實(shí)驗(yàn)從生地黃中提取多糖，并對(duì)其含量進(jìn)展測(cè)定，反響時(shí)間縮短了12倍，多糖含量為13.4186%。生地黃多糖的提取方法、構(gòu)造組成、藥理作用及生物學(xué)功能有待進(jìn)一步研究?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1張翼伸.怎樣研究植物多糖.生命的化學(xué)，1999，6：296-297.2盧端萍,王勇地黃藥理作用及臨床應(yīng)用研究進(jìn)展.海峽藥學(xué)，2022，163