葛根對成骨細(xì)胞OPG、RANKL mRNA 表達(dá)的影響

1、葛根對成骨細(xì)胞OPG、RANKL mRNA 表達(dá)的影響吳乃中，李紅麗，崔淑云表1差異時間中藥血清對成骨細(xì)胞PGRNA表達(dá)環(huán)境的影響注：vsntrlP0.01表2差異時間中藥血清對成骨細(xì)胞RANKLRNA表達(dá)環(huán)境的影響注：vsntrlP0.01由表1可知大鼠用藥后2h采血的中藥血清組，PGRNA的相對表達(dá)量與比較組比力有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異，P0.01；1h和3h采血的中藥血清組PGRNA的相對表達(dá)量與比較組比力無統(tǒng)計學(xué)差異P0.05。由表2可知2h采血的中藥血清組RANKLRNA的相對表達(dá)量與比較組RANKLRNA的相對表達(dá)量比力明顯低落，P0.01；1h和3h采血的中藥血清組RANKLRNA的相

2、對表達(dá)量與比較組比力無統(tǒng)計學(xué)差異P0.05。說明末了一次用藥后2h采血的中藥血清可顯著上調(diào)成骨細(xì)胞PGRNA表達(dá)，且顯著下調(diào)成骨細(xì)胞RANKLRNA的表達(dá)。電泳效果見Fig.1，2，3。2.2差異濃度中藥血清對成骨細(xì)胞PG、RANKLRNA表達(dá)環(huán)境的影響見表3、表4。由表3可知在造就基中參加2h采血的差異濃度的葛根中藥血清，PGRNA的相對表達(dá)量與比較組PGRNA的相對表達(dá)量比力有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異，P0.01，而且10%與5%、20%與10%組間比力也有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異，P0.01。說明隨血清添加量的增長，對成骨細(xì)胞PGRNA表達(dá)上調(diào)作用越強，具有劑量依靠性。5%、10%、20%的血清添加量時

3、，RANKLRNA的相對表達(dá)量與比較組比力有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異，P0.01，但10%與5%，20%與5%組間RANKLRNA的相對表達(dá)量無統(tǒng)計學(xué)差異P0.05。說明增長血清添加量對成骨細(xì)胞RANKLRNA的表達(dá)無影響。電泳效果見Fig.4，5，6。Nte：lane1DNAarker；lane2ntrlf1hgrup；lane31hgrup；lane4ntrlf2hgrup；lane52hgrup；lane6ntrlf3hgrup；lane73hgrup表3差異濃度中藥血清對成骨細(xì)胞PGRNA表達(dá)環(huán)境的影響注：5%vsntrl，10%vs5%and20%vs10%P0.01表4差異濃度中藥血清對成

4、骨細(xì)胞RANKLRNA表達(dá)環(huán)境的影響注：5%vsntrlP0.01，10%vs5%and20%vs5%P0.05Nte：lane1DNAarker；lane2ntrlgrup；lane35%serufediinedsagegrup；lane410%serufediinedsagegrup；lane520%serufediinedsagegrup3討論骨質(zhì)疏松是常見的老年性疾病，多見于絕經(jīng)后婦女，即絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松，其以骨高轉(zhuǎn)化為特性。遺傳、雌激素、營養(yǎng)和生存方法與骨質(zhì)疏松發(fā)病嚴(yán)密相干，重要照舊因體內(nèi)雌激素缺乏導(dǎo)致骨汲取大于骨形成，從而骨構(gòu)造骨量舉行性喪失，造成骨質(zhì)有機物和無機物成比例地淘汰。但詳

5、細(xì)發(fā)病機制尚未分析6，多年來雌激素交換療法是如今防治本病的常用要領(lǐng)，而恒久應(yīng)用雌激素易出現(xiàn)乳腺痛、易怒、鈉水儲留，撤藥后子宮出血等副作用，乃至增長子宮內(nèi)膜癌及乳腺癌的傷害7。以是研究開拓新的、寧靜有用的防治絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松的藥物具有緊張的臨床意義。骨重修歷程重要由成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞配合到場，已經(jīng)證明破骨細(xì)胞泉源于骨髓中與單核巨噬細(xì)胞克隆形成單元G-FU差異的骨髓造血干細(xì)胞系，而成骨細(xì)胞泉源于骨膜下產(chǎn)生于基質(zhì)細(xì)胞的骨原細(xì)胞stegeniell，這兩種細(xì)胞劈頭的的明顯差異和埋伏的嚴(yán)密接洽不停為人們所存眷。以往研究創(chuàng)造，影響破骨細(xì)胞分化及成效的多種鈣調(diào)激素和局部因子，如甲狀旁腺激素parathyrin

6、hrne，PTH、前線腺素E2prstaglandinE2，PGE2、IL-11、1，25(H)2D3等都不是直接作用于破骨細(xì)胞，而是起首作用于成骨細(xì)胞，再間接調(diào)控破骨細(xì)胞的形成和成效8。隨著PG、RANKL、RANK這些細(xì)胞因子的創(chuàng)造，對成骨細(xì)胞調(diào)控破骨細(xì)胞的形成及成效的分子機制有了深化的熟悉。PG、RANKL是成骨細(xì)胞正常的排泄分子，二者通過調(diào)治破骨細(xì)胞的天生、活化和凋亡而發(fā)揮調(diào)治骨代謝的作用。通過同源重組得到的PG無活性(PG-/-)小鼠，證明PG可阻斷破骨細(xì)胞形成和骨汲取。PG(-/-)小鼠早期即引發(fā)骨質(zhì)疏松癥，陪同破骨細(xì)胞的增長，骨強度和骨密度落落，骨折產(chǎn)生率增長，成年P(guān)G(-/-)

7、小鼠表示出一系列的脊椎抑制性骨折和股骨垢粉碎9。Sinet等在過分表達(dá)PG的轉(zhuǎn)基因鼠肝臟檢測此卵白的生物活性，且血中出現(xiàn)高程度的PG，此鼠表示出嚴(yán)峻的股骨和脊椎的骨質(zhì)硬化，而且破骨細(xì)胞數(shù)目的明顯淘汰，但并不陪同巨噬細(xì)胞的淘汰。厥后創(chuàng)造PG能與RANKL結(jié)合，很多促汲取因子和激素作用于PG以調(diào)治破骨細(xì)胞的天生和成效。RANKL具有多種生理作用，但對骨代謝的重要作用是刺激破骨細(xì)胞的分化，加強成熟破骨細(xì)胞的活性而且按捺其凋亡，從而導(dǎo)致骨汲取和骨喪失的增長。RANKL與破骨細(xì)胞及破骨細(xì)胞前體細(xì)胞上的成效性受體RANK結(jié)合，RANK通過信號轉(zhuǎn)導(dǎo)作用于破骨細(xì)胞，促進(jìn)破骨細(xì)胞的分化、交融、活化和保存并按捺其

8、凋亡10。RANKL是破骨細(xì)胞前體細(xì)胞分化的特異的，必須的因子。PG有2個的TNF家屬的配體，RANKL和TNF相干誘導(dǎo)凋亡配體TNF-relatedapptsis-induingligand，TRAIL。PG作為RANKL的誘騙受體競爭性按捺RANKL的作用，從而按捺破骨細(xì)胞的形成和成效，PG為骨汲取的負(fù)性調(diào)治因子。由此可見骨質(zhì)疏松的發(fā)病與PG、RANKL有著嚴(yán)密的接洽。葛根素為葛根有用身分之一異黃酮類的重要有用身分，有研究報道葛根素具有淘汰骨汲取，促骨形成，增長骨密度的作用11，而在刺激子宮構(gòu)造增生副作用方面又遠(yuǎn)較雌激素為輕，但葛根對破骨細(xì)胞是否產(chǎn)生作用及作用的機制尚未分析。通過本實行表白

9、葛根中藥血清，可進(jìn)步成骨細(xì)胞PGRNA的相對表達(dá)量。大鼠末了一次用藥后2h采血的中藥血清作用最強，與比較組比力有統(tǒng)計學(xué)差異；5%、10%及20%的中藥血清添加量作用依次加強，說明有劑量依靠性。同時對成骨細(xì)胞RANKLRNA的表達(dá)舉行不雅察，創(chuàng)造葛根中藥血清對其有按捺作用，且大鼠末了一次用藥后2h采血的血清作用最強，而5%、10%及20%的中藥血清添加量各組間作用無明顯性差異，說明無劑量依靠性。由此可見葛根大概通過上調(diào)PG的表達(dá)和下調(diào)RANKL的表達(dá)淘汰破骨細(xì)胞的天生，按捺破骨細(xì)胞的活化，從而低落破骨細(xì)胞的骨汲取成效。有研究報道雌激素可與成骨細(xì)胞膜上的-雌激素受體結(jié)合上調(diào)PG的表達(dá)，只管葛根的重要化學(xué)身分為黃酮類化合物，但至于葛根對PG與RANKL的表達(dá)的調(diào)治是否以激素的方法發(fā)揮作用，及其詳細(xì)調(diào)治的機制有待于進(jìn)一步研究證明。以上實行效果表白，葛根中藥血清可上調(diào)PG的表達(dá)，下調(diào)RANKL的表達(dá)，這很大概是團體程度葛根