血漿凝血酶原時間測定

1、血漿凝血酶原時間測定【摘要】目的總結(jié)血漿凝血酶原時間測定的操作和臨床意義，為臨床治療提供根據(jù)。方法6研究近年來我科進(jìn)展的血漿凝血酶原時間測定報(bào)告。結(jié)論測定中操作及報(bào)告方式必須標(biāo)準(zhǔn)化，才能正確指導(dǎo)臨床用藥?！娟P(guān)鍵詞】血漿凝血酶原時間測定血漿凝血酶原時間測定(prthrbintie，PT)，是在體外模擬外源性凝血途徑的全部條件，測定血漿凝固所需的時間，用以反映外源凝血途徑有關(guān)因子是否異常，是篩檢凝血功能最根本，最常用的試驗(yàn)之一。1原理在抗凝血漿中，參加足夠量的組織凝血活酶(組織因子，TF)和適量的鈣離子，即可滿足外源凝血的全部條件。從參加鈣離子到血漿凝固所需要的時間即稱為血漿凝血酶原時間。PT的長

2、短反映了血漿中凝血酶原、纖維蛋白原和因子V、X的程度。2試劑(1)抗凝劑：109lL枸櫞酸鈉液(相當(dāng)于含2個分子結(jié)晶水的枸櫞酸鈉32gL)。(2)凝血活酶試劑：市售商品，應(yīng)標(biāo)有ISI、批號及有效期。凍干者應(yīng)按說明書指定的溶液復(fù)溶。(3)氯化鈣(al2)溶液：濃度為25lL(目前大局部商品試劑已將凝血活酶、緩沖液與氯化鈣液事先混合好，可不必另配al2液)。(4)質(zhì)控物(正常及異常對照血漿)：有商品供給。3儀器(1)手工法：秒表，保持365385的恒溫水浴箱。(2)儀器法：各種自動或半自動凝血儀，嚴(yán)格按各自的說明書操作。儀器法依測定原理主要有三種：光學(xué)法即比濁法、電流法即鉤方法和黏度法即磁珠法。4

3、血液標(biāo)本的采集、運(yùn)送及貯存(1)用一次性塑料采血器或硅化玻璃注射器，采靜脈血液。采血技術(shù)要純熟，不可過多損傷血管及周圍組織，致使組織液混入血液中。采血時止血帶不可束縛過緊，并不應(yīng)超過2分鐘。針筒內(nèi)見到回血即應(yīng)解開止血帶，否那么某些凝血及纖溶因子會活化，并可使血細(xì)胞比容(Ht)升高。(2)靜脈采血18l，參加含有109lL枸櫞酸鈉溶02l的試管中，充分混勻。最好用已加有定量枸櫞酸鈉液的專用硅化真空采血管采血，以保證血與枸櫞酸鈉液比例準(zhǔn)確，防止凝血因子活化，并保持清潔，防止不潔的試管和不合格橡皮塞的污染。(3)貯血應(yīng)用清潔塑料管或硅化玻璃管或其他不沾濕的容器，防止接觸活化凝血因子。獲得血液后應(yīng)盡快

4、送到血液檢驗(yàn)室。在運(yùn)送中應(yīng)防止劇烈振動和日光直射。一般要求自采血到測定不得超過4小時，不可久貯。如在室溫中貯存過久，V因子會破壞；另一方面，在4貯存過久，會導(dǎo)致第因子活化。實(shí)驗(yàn)室在獲得血樣后應(yīng)盡快別離血漿并盡快測定。血液如發(fā)現(xiàn)凝固，應(yīng)棄去不用。5標(biāo)本制備PT和AFTT試驗(yàn)都必須用乏血小板血漿(PPP)，以3000轉(zhuǎn)分鐘，離心30分鐘。用濁度法測定終點(diǎn)的自動化凝血儀，溶血和較明顯的黃疸及脂血均會影響測定結(jié)果，此時可改用手工法或電子機(jī)械式(非比濁法)凝血儀測定。6測定步驟(1)手工法按上述方法制備乏血小板血漿。將氯化鈣凝血活酶溶液，安康人混合凍于血漿和待測血漿，置37水浴中預(yù)溫5分鐘。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)

5、盟.ll.取試管2支，分別參加待測血漿、安康人混合凍干血漿01l，37水浴預(yù)溫30秒，再參加預(yù)溫的25lL氯化鈣凝血活酶溶液02l，混勻，開動秒表計(jì)時。不斷地傾斜試管至液體流動緩慢趨于停頓時，終止計(jì)時，記錄所需時間。重復(fù)以上測定23次，取其平均值。安康人混合凍干血漿的測定值應(yīng)在1113秒范圍，待測血漿PT值取23次的平均值報(bào)告。(2)儀器法：凝血測定儀一般均供給配套試劑，備有詳細(xì)說明書，應(yīng)嚴(yán)格按說明書操作。7考前須知(1)整個操作所用器具應(yīng)使用對凝血因子無激活作用的塑料制品或硅化的玻璃器皿。(2)采血要順利，抗凝要充分，采血后應(yīng)仔細(xì)檢查標(biāo)本有無溶血，黃疸和凝血塊，任何微小的凝塊都會影響測定結(jié)果

6、，必須重新采血。(3)采血后宜在1小時內(nèi)完成測定，4冰箱內(nèi)保存不應(yīng)超過4小時。(4)水浴溫度要控制在(37005)，溫度過高或過低都可影響測定結(jié)果。(5)血細(xì)胞比容(Ht)02或05時，抗凝劑的用量應(yīng)做適當(dāng)?shù)恼{(diào)整，抗凝劑(l)=(100-Ht)血液(l)000185。(6)由于每次使用的氯化鈣凝血活酶活性不盡一樣，測定的條件也有變動，故每次測定均需有正常對照，氯化鈣凝血活酶必須注明國際敏感指數(shù)(ISI)。8報(bào)告格式和參考值(1)以直接測定的時間(PT)報(bào)告：參考值PT為1113秒，超過正常對照3秒有意義。(2)以PT比值(PTR)報(bào)告：PTR=待測血漿的PT安康人混合凍干血漿的PT。參考值PT

7、R為085115。(3)以國際標(biāo)準(zhǔn)化比值(INR)報(bào)告：INR=PTRISI(ISI為氯化鈣凝血活酶試劑國際敏感指數(shù))；參考值INR：0815。由于PT和PTR測定值存在的偏向較大，對臨床上指導(dǎo)口服抗凝藥物治療用量有一定危險(xiǎn)性，因此在報(bào)告PT、PTR時，一定要報(bào)告INR。(4)凝血酶原時間活動度(PTA)：即先以不同稀釋度的血漿制成校正曲線，然后從曲線上讀齲參考值為PTA80。9臨床意義(1)PT延長：PT超過正常對照3秒以上或凝血酶原比值超過正常范圍即為延長，主要見于：先天性因子、V、X減少及纖維蛋白原的缺乏(低或無纖維蛋白血癥)；獲得性凝血因子缺乏，如DI、原發(fā)性纖溶亢進(jìn)癥、肝并阻塞性黃疸、維生素K缺乏、血循環(huán)中抗凝物質(zhì)增多等。(2)PT縮短：先天性因子V增多；DI早期(高凝狀態(tài))；口服避孕藥、其他血栓前狀態(tài)及血栓性疾病(凝血因子和血小板活性增高，血管損傷等)。參考