動物細胞融合和單克隆和抗體

1、人獸混合胚胎合成示意圖 人獸混合胚胎是指利用即克隆技術,將人體細胞的細胞核，放入已經去核的動物卵細胞，使融合后的細胞發(fā)育到囊胚階段，并提取到胚胎干細胞。 導入新課如果放行“人獸胚胎”能否出現(xiàn)人猿戰(zhàn)士把人類細胞注入到動物大腦 “引起倫理界最大關注的事件” 在陽光普照的美國圣路易斯加勒比海岸的實驗室里，耶魯大學研究人員正在把數(shù)百萬人類腦細胞注入深受帕金森病折磨的猴子大腦中。 很多不同種類的動物細胞之間或動物與人的細胞之間都能進行融合，形成雜種細胞，例如人鼠、人兔、人雞、人蛙、鼠雞、鼠兔、鼠猴等的細胞都能進行融合。在中國的一家農場里也飼養(yǎng)了29只體內被注入人類細胞的山羊，科學家在這群山羊的胚胎中注入

2、了人類血細胞。 人與動物的細胞融合 引起外界眾說紛紜 從事該項研究的科學家堅持認為，倫理學所控訴的實驗有助于他們更好地了解疾病，且更有希望治愈一些病癥。 社會保守派抗議“任何形式的人類克隆實驗”和“人類與動物的混合接種實驗”，并將其列為“醫(yī)學研究濫用最惡劣的行為”。專題2 細胞工程 2.2.2 動物細胞融合與單克隆抗體2.2動物細胞工程1、簡述動物細胞融合和植物體細胞雜交的區(qū)別。1、培養(yǎng)學生知識遷移能力、思維能力。知識目標能力目標教學目標2、簡述單克隆抗體的制備及應用。 2、提高獨立獲取知識的能力、邏輯思維能力、分析問題和解決問題的能力。情感態(tài)度與價值觀 1、初步培養(yǎng)學生勇于探索，不斷創(chuàng)新的精

3、神和合作精神。 2、明確人們對生命奧秘的揭示愈加廣泛和深入，知識不斷更新并向前發(fā)展。認識到學無止境，形成終生學習的意識。用動物體細胞核移植技術克隆動物的過程。重點難點教學重難點動物細胞培養(yǎng)的過程及條件。用動物體細胞核移植技術克隆動物的過程。你能回憶出植物體細胞雜交的過程嗎？能否采用類似的方法將不同動物的細胞進行在雜交呢？如人鼠融合細胞：雜交細胞細胞融合人細胞小鼠細胞紅色熒光燃料標記的膜蛋白綠色熒光燃料標記的膜蛋白兩個細胞正在融合 受精作用1、動物細胞融合1.1概念： 動物細胞融合也稱細胞雜交，是指兩個或多個動物細胞形成一個細胞的過程。雜交細胞 融合后形成的具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的單核細

4、胞，成為雜交細胞。1.2單個動物細胞的獲得： 動物細胞雖然沒有細胞壁，但細胞間的連接方式多樣而復雜，在進行有效的細胞融合之前，也必需獲得單個分散的細胞。組織的獲得 采用各種適宜的方法處死動物，取出組織塊放入小燒杯中，用剪刀將組織塊剪碎。組織的消化 利用生物化學的方法將剪碎的組織塊分散成細胞團或單細胞。膠原酶消化 是一種由細菌中提取的酶，對膠原和細胞間質有較強的消化作用。單個動物細胞的獲取方法細胞核病毒顆粒細胞核滅活的病毒顆粒黏附于細胞表面細胞膜連接細胞膜被病毒顆粒穿通細胞融合，形成雜種細胞1.3動物細胞融合的過程：為什么用滅活的病毒？ 病毒一般對生物體是有傷害的。滅活使病毒或細菌失去感染能力，

5、但并不破壞這些病毒的抗原結構。仙臺病毒物理或化學方法喪失感染活性保留融合活性滅活病毒誘導細胞融合的原理是什么？ 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細胞互相凝聚，細胞膜上的蛋白質分子和脂質分子重新排布，細胞膜打開，細胞發(fā)生融合。誘導方式物理法：化學法：生物法：1.4誘導融合的方法：電激法、電穿孔、電融合技術、 聚乙二醇等誘導因素法滅活的病毒細胞A細胞B雜種細胞太空細胞融合“神舟”四號：細胞“太空婚禮” 空間細胞融合試驗，為空間制藥和培育生物新品種探索新的方法。 空間細胞融合儀1.4動物細胞融合的意義： 突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能。至今，種間、屬間、

6、科間甚至動物與植物細胞之間的融合已經取得了成功。1.5動物細胞融合的應用： 成為研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段特別是利用雜交瘤技術制造單克隆抗體.2.1什么叫抗體： 抗體是機體受抗原刺激后產生的、并能與該抗原發(fā)生特異性結合的具有免疫功能的球蛋白。 抗體是由B淋巴細胞分化形成的漿細胞合成、分泌的。2、單克隆抗體2.2抗體的傳統(tǒng)生產方法：再從動物血清中分離抗體輸入漿細胞動物體內 某抗體 某抗原 產量低、純度低，且抗體的特異性差、靈敏度低。如何獲得大量化學性質單一、特異性強的抗體？該法制備抗體的特點：思考與探究一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體小鼠骨髓瘤細胞能無限增殖雜交瘤

7、細胞既能分泌一種特異性抗體又能無限增殖1975年英國科學家米爾斯坦和柯勒設想：2.3單克隆抗體的概念： 由一個效應B淋巴細胞經過無性繁殖形成的一個細胞群產生的化學性質單一，特異性強的抗體，即單克隆抗體。單個細胞無性繁殖化學性質單一，特異性強單：克?。嚎贵w：單克隆抗體的特點：特異性強、靈敏度高、產量大B淋巴細胞與抗體的關系：每一個淋巴細胞只能產生一種抗體。B淋巴細胞受抗原刺激后，可以產生抗體。動物體內的B淋巴細胞可以產生百萬種以上的抗體，每種抗體對特定的抗原具有特異性免疫作用。想一想2.4單克隆抗體的制備過程： 單克隆抗體制備過程 注射抗原B淋巴細胞骨髓瘤細胞細胞融合、篩選雜交瘤細胞細胞培養(yǎng)篩選

8、，繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產生特定抗體的細胞群體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔單克隆抗體細胞水平的克隆2.5單克隆抗體的應用：作為診斷試劑：準確識別各種抗原物質，并與特異性結合。用于運載藥物：制成生物導彈治療疾?。褐饕糜诎┌Y治療對比多莉羊和課本高產奶牛的克隆過程，找出操作過程的不同點？ 多莉克隆過程的受體細胞是去核卵細胞，而高產奶牛的克隆過程的受體細胞是去核卵母細胞；多莉克隆過程是將供體細胞核注入受體細胞，而高產奶牛的克隆過程是將供體細胞注入受體細胞。想一想 卵母細胞當中的細胞周期蛋白含量、活性比卵細胞高，用它作受體更容易成功. 將供體細胞注入受體細胞，使克隆動物更像供體動物，操作也方便.討論分析上述哪

9、一種措施更科學？并說明理由？想一想課堂小結兩個過程動物細胞融合過程單克隆抗體制備過程三個“一”一個誘導細胞融合的新方法滅活病毒一個新細胞雜交瘤細胞一個優(yōu)勢單克隆抗體特異性強、靈敏度高的優(yōu)勢課堂練習1.單克隆抗體制備的原理: 利用_產生特異性抗體的功能。 利用_無限增殖的特性。 利用_技術將兩種細胞融合獲得 雜交瘤細胞。 利用_技術大量培養(yǎng)雜交瘤細胞。B淋巴細胞骨髓瘤細胞動物細胞融合動物細胞培養(yǎng)2.在動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較中，正確的是 （）A.結果是相同的B.雜種細胞的形成過程基本相同C.操作過程中酶的作用相同D.誘導融合的手段相同3.科學家用小鼠骨髓瘤細胞與某種細胞融合，得到雜交細

10、胞，經培養(yǎng)可產生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細胞融合的是 （ ） AA.經過免疫的B淋巴細胞B.沒經過免疫的T淋巴細胞 D.沒經過免疫的淋巴細胞 C.經過免疫的T淋巴細胞4. 單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細胞和B淋巴細胞誘導融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細胞是 （ ） 淋巴細胞小鼠骨髓瘤細胞B淋巴細胞自身融合細胞小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞雜交瘤細胞A BC. DC主要用于制備單克隆抗體獲得雜種植株主要用途物理、化學方法（同左）滅活的病毒物理（離心、振動、電刺激）化學（聚乙二醇）誘導方法使細胞分散后誘導細胞融合導原生質體融合 細胞融合的 方法細胞膜的流動性細胞膜的流動性植物細胞全能性細胞融合的 原理動物細胞融合植物體細胞雜交比較項目去除細胞壁后誘5.簡述植物體細胞雜交與動物細胞融