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1、關(guān)于實驗血清甘油三酯含量測定第1頁,共8頁,2022年,5月20日,22點18分,星期三實 驗 目 的了解血清甘油三酯含量測定的 正常值與臨床意義掌握血清甘油三酯化學法測定的 基本原理及主要技術(shù)方法第2頁,共8頁,2022年,5月20日,22點18分,星期三甘油三酯KOH60-7020min鉀皂甘油+HIO4+NH4+甲醛乙酰丙酮3,5-二乙酰-1,4二氫-2,6 二甲基吡啶(黃色帶熒光)甘油甲醛皂化氧化顯色32實 驗 原 理第3頁,共8頁,2022年,5月20日,22點18分,星期三實 驗 步 驟取3(或4)只小試管,依次加入蒸餾水、標準液、樣品,抽提劑及硫酸,邊加邊搖,用力振搖10min,

2、靜置10min分層 注意:試管必須干燥吸取上層液體0.5ml,加入對應(yīng)的3 (或4)只大試管中,加入異丙醇、皂化試劑,充分混勻,65水浴5min注意:吸上層液時,務(wù)必當心,絕對不可吸入下層液體(分光光度計預(yù)熱)加入氧化試劑,充分混勻后,加入乙酰丙酮和氨的混合液,搖勻,65水浴15min取出試管,流水/室溫冷卻,測420nm的吸光度抽提皂化氧化顯色比色第4頁,共8頁,2022年,5月20日,22點18分,星期三拉桿,0-4檔樣品池讀數(shù)波長毛面1、分清光面、毛面。手應(yīng)接觸毛面,光從光面通過2、用溶液潤洗2-3次,裝至2/3至4/5體積3、粗紙吸水、柔紙擦亮光面比色杯的使用分光光度計的使用1. 打開

3、電源,調(diào)節(jié)旋鈕至需要的波長,預(yù)熱2030min2. 1檔(空白管),T模式調(diào)100%,顯示“Blank”、“100”3. 拉桿拉至1.5檔,T模式調(diào)0%,顯示“0.00”4. 換到A模式,拉至2、3、4檔,讀取各個樣品的吸光度光面第5頁,共8頁,2022年,5月20日,22點18分,星期三Lambert-Beer 定律正常參考值為0.301.7mmol/L mg/mlmmol/L國際單位 mg/ml 1000 摩爾質(zhì)量g/mol (885)實 驗 結(jié) 果 A1 c1 m1標準管法 = = (終體積相同時) A2 c2 m2 A樣品 m標準品 A標準品樣品TG濃度 = V樣品 A樣品 1mg/ml 0.2ml A標準品= 0.2ml第6頁,共8頁,2022年,5月20日,22點18分,星期三注 意 事 項抽提時搖勻靜置,待完全分層后才能吸取上層液,吸取上層液時不能吸入下層液;實驗完成后,試管和比色杯必須用皂粉洗干凈,不能有油污,將水甩干,倒置晾干;槍頭必須清洗干凈,甩干選用小試管時試管口徑不能太細;試管使用時必須要干燥;第7頁,共8頁,20

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