免疫學(xué)檢驗(yàn)第十三章凝集反應(yīng)課件

1、第十三章 凝集反應(yīng)制作人：和燕 早在1896年，Widal就利用傷寒病人的血清與傷寒桿菌發(fā)生特異性凝集的現(xiàn)象，有效地診斷傷寒病。-肥達(dá)試驗(yàn) 至1903年，Landsteiner在特異性血凝現(xiàn)象的基礎(chǔ)上發(fā)現(xiàn)了人類ABO血型，并于1930年獲得了諾貝爾醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。 -血型鑒定凝集反應(yīng)的發(fā)現(xiàn)凝集反應(yīng)的定義凝集反應(yīng)： 顆粒性抗原（細(xì)菌、紅細(xì)胞等）與相應(yīng)抗體特異性結(jié)合，或可溶性抗原（或抗體）與載體顆粒結(jié)合成致敏顆粒（紅細(xì)胞、聚苯乙烯乳膠顆粒、炭粒）后，它們與相應(yīng)抗體（或抗原）發(fā)生特異性反應(yīng)，在適當(dāng)電解質(zhì)存在下，形成肉眼可見的凝集現(xiàn)象。可見反應(yīng)形成陰性？陽性？第一節(jié) 直接凝集反應(yīng)直接凝集反應(yīng)： 顆粒性抗原直接

2、與抗體結(jié)合，在電解質(zhì)的作用下，出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。凝集原(agglutinogen)：凝集反應(yīng)中的抗原。凝集素(agglutinin)：凝集參與反應(yīng)的抗體方法評(píng)價(jià):定性試驗(yàn)簡便和快速敏感度低應(yīng)用:菌種鑒定血清學(xué)分型血型鑒定 在試管內(nèi)顆粒性抗原直接與抗體結(jié)合，在電解質(zhì)的作用下，出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。（二）試管凝集試驗(yàn)0.50.50.50.50.5棄掉0.5 試管凝集試驗(yàn)原理結(jié)果 1 2 3 4 5 6 7菌液管底沉淀凝集程度方法評(píng)價(jià)：半定量試驗(yàn)簡便、快速敏感度低可有假陽性臨床應(yīng)用：肥達(dá)試驗(yàn)外斐試驗(yàn)交叉配血試驗(yàn)載體可溶性抗原致敏致敏顆粒NS凝集顆粒 間接凝集試驗(yàn)示意圖常用載體紅細(xì)胞-間接血凝

3、試驗(yàn)聚苯乙烯乳膠-膠乳凝集試驗(yàn)1、正向間接凝集試驗(yàn)2、反向間接凝集試驗(yàn)3、間接凝集抑制試驗(yàn) 4、協(xié)同凝集試驗(yàn)間接凝集反應(yīng)的類型用抗原致敏載體-檢測(cè)抗體正向間接凝集試驗(yàn)反向間接凝集試驗(yàn)用抗體致敏載體-檢測(cè)抗原間接凝集抑制試驗(yàn)用抗原致敏載體-檢測(cè)抗原間接凝集抑制試驗(yàn)待測(cè)抗原已知抗體無結(jié)合抗原抗體分散NS致敏顆粒有凝集顆粒陰性SPA:SPA-IgG Fc;SPA抗體致敏-測(cè)抗原協(xié)同凝集試驗(yàn)間接凝集反應(yīng)的應(yīng)用抗原的檢測(cè) 反向間接凝集試驗(yàn)可用于檢測(cè)病原體的可溶性抗原，也可用于檢測(cè)各種蛋白質(zhì)成分。抗體的檢測(cè)檢測(cè)細(xì)菌、病毒、寄生蟲等感染后產(chǎn)生的抗體。 抗球蛋白試驗(yàn)又稱Coombs試驗(yàn)第三節(jié) 抗球蛋白試驗(yàn)（一

4、）直接Coombs試驗(yàn)不完全抗體檢測(cè)紅細(xì)胞上抗體（二）間接Coombs試驗(yàn)檢測(cè)血清中的抗紅細(xì)胞抗體臨床應(yīng)用：在輸血上的應(yīng)用血型抗原抗體的檢查對(duì)新生兒溶血性貧血性疾病的診斷對(duì)溶血性貧血的研究對(duì)細(xì)菌或立克次體的不完全抗體檢查 冷凝集試驗(yàn)原理抗原決定簇隱含，不能與抗體結(jié)合混合暴露的抗原決定簇與抗體結(jié)合混合37437膠乳凝集試驗(yàn)-類風(fēng)濕因子檢測(cè)抗自身變性IgG抗體，屬于IgM類，主要存在于血清中。約90%類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）患者的RF呈陽性。某些自身免疫病，如冷球蛋白血癥、進(jìn)行性全身性硬化癥、干燥綜合征、SLE等患者都有較高的陽性率；一些其他疾病如血管炎、肝病、慢性感染也可出現(xiàn)RF。類風(fēng)濕因子RF其

5、病因及發(fā)病機(jī)制仍不完全明了, 機(jī)體出現(xiàn)免疫系統(tǒng)紊亂, 進(jìn)而引起關(guān)節(jié)滑膜、軟骨組織慢性炎癥和破壞的自身免疫性疾病。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎R(shí)ARF可與IgG的Fc段結(jié)合。將變性IgG包被于聚苯乙烯膠乳顆粒上，此致敏膠乳在與待測(cè)血清中的RF相遇時(shí)，即可發(fā)生肉眼可見的凝集。乳膠凝集試驗(yàn)類風(fēng)濕膠乳診斷試劑RF陰性對(duì)照RF陽性對(duì)照反應(yīng)板攪拌棒主要的試劑和器材取陽性血清、陰性血清各1滴于反應(yīng)板上，然后分別加類風(fēng)濕膠乳診斷試劑1滴。用攪拌棒充分混勻后，輕輕搖動(dòng)反應(yīng)板23min，觀察結(jié)果。步驟在室內(nèi)的光線下觀察，有清晰的凝集顆粒出現(xiàn)，且液體澄清者為RF陽性結(jié)果觀察和判斷1、凝集反應(yīng)是指細(xì)菌和紅細(xì)胞等_或載體表面包被_與相應(yīng)抗體/抗原結(jié)合后，可出現(xiàn)肉眼可見的_現(xiàn)象2、凝集反應(yīng)的分類？3、直接凝集反應(yīng)包括哪兩類？4、間接凝集反應(yīng)的分類？原理？復(fù)習(xí)題小結(jié) 凝集反應(yīng)是指細(xì)菌和紅細(xì)胞等顆粒性抗原或表面包被抗原/抗體的顆粒性載體與相應(yīng)抗體/抗原結(jié)合后，可出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。 可以分為直接凝集反應(yīng)、間接凝集反應(yīng)和抗球蛋白試驗(yàn)。直接凝集反應(yīng)主要有玻片法和試管法。間接凝集反應(yīng)主要有正向間接凝集試驗(yàn)、反向間接