全國流感-禽流感監(jiān)測方案

1、PAGE PAGE 1全國流感/人禽流感監(jiān)測實(shí)施方案（20052010年度）征求意見稿第一部分 正 文 TOC o 1-3 h z u HYPERLINK l _Toc112156713 一、背景 PAGEREF _Toc112156713 h 2 HYPERLINK l _Toc112156714 二、監(jiān)測目的 PAGEREF _Toc112156714 h 3 HYPERLINK l _Toc112156715 三、監(jiān)測病例定義和診斷標(biāo)準(zhǔn) PAGEREF _Toc112156715 h 4 HYPERLINK l _Toc112156716 四、全國流感/人禽流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò) PAGEREF

2、_Toc112156716 h 4 HYPERLINK l _Toc112156717 五、法定傳染病疫情報告 PAGEREF _Toc112156717 h 5 HYPERLINK l _Toc112156718 六、流感樣病例監(jiān)測 PAGEREF _Toc112156718 h 5 HYPERLINK l _Toc112156719 七、流感暴發(fā)疫情監(jiān)測 PAGEREF _Toc112156719 h 12 HYPERLINK l _Toc112156720 八、人禽流感監(jiān)測 PAGEREF _Toc112156720 h 17 HYPERLINK l _Toc112156721 九、工作

3、職責(zé) PAGEREF _Toc112156721 h 23PAGE PAGE 26一、背景流行性感冒（Influenza）簡稱流感，是一種由流感病毒引起的急性呼吸道傳染病，臨床表現(xiàn)為起病急、高熱、肌痛、頭痛伴有嚴(yán)重不適、干咳、咽喉痛或鼻炎，多數(shù)患者可在一到兩周內(nèi)恢復(fù)。流感潛伏期短、經(jīng)呼吸道飛沫傳播，傳播迅速，抗原易變異，人群對變異株普遍易感，控制難度大。流感流行呈一定季節(jié)性，但大流行可發(fā)生在任何季節(jié)，并且可以迅速蔓延至全球。我國流感南北方流行季節(jié)不同，北方地區(qū)一般在冬春季流行，南方四季都有病例發(fā)生，發(fā)病高峰在夏季和冬季。流感病毒分A、B、C三型，A型和B型流感對人類威脅較大，其中A型流感抗原變

4、異頻繁，可引起世界性大流行，對人類威脅最大。流感被列為我國丙類法定傳染病。對于兒童、老年人和有心肺疾病、糖尿病、癌癥等慢性病患者，流感會造成嚴(yán)重后果，甚至死亡。流感流行期間，流感和流感相關(guān)肺炎可引起超額死亡率。美國估計每年流感流行造成的損失高達(dá)7101670億美元，每年流感流行會導(dǎo)致515的人群患上呼吸道感染，住院和死亡者主要是高危人群（老年人、慢性病患者）。流感流行造成全球每年出現(xiàn)300500萬個嚴(yán)重病例，并導(dǎo)致2550萬人死亡。禽流感（Avian Influenza, AI or bird Flu）主要是由A型禽流感病毒H5和H7亞型中具有高致病性毒株所引起的一種禽烈性傳染病。主要表現(xiàn)為禽

5、全身系統(tǒng)中毒癥狀或嚴(yán)重呼吸道綜合征，發(fā)病突然，迅速蔓延，發(fā)病率和病死率高，對工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)尤其對畜牧和養(yǎng)禽業(yè)會造成嚴(yán)重的損失。禽流感已被國際獸醫(yī)局列為甲類傳染病，我國農(nóng)業(yè)部列為甲類監(jiān)測傳染病。人禽流感是禽流感的一種，是指由禽流感病毒H5N1、H9N2、H7亞型中某些毒株在人群所引起的一種急性呼吸道傳染病。它所表現(xiàn)出的臨床癥狀隨病原的亞型不同而異：從輕微的上呼吸道卡他癥狀至出現(xiàn)急性呼吸窘迫綜合征和多器官功能衰竭，最終導(dǎo)致死亡。人感染高致病性禽流感被列為我國乙類法定傳染病。自從人流感病毒被發(fā)現(xiàn)以來，A型流感曾引起了四次世界性大流行，即1918年西班牙流感A (H1N1)，1957年A（H2N2）亞型，

6、1968年A（H3N2）亞型和1977年重現(xiàn)的A（H1N1）亞型流感，事實(shí)表明后三次出現(xiàn)的新亞型流感病毒均首發(fā)于我國。二十世紀(jì)八十年代以來，我國大陸還先后從動物中分離出C型、禽源馬2亞型（H3N8）和對水禽具有致病性的H5N1亞型流感病毒，并發(fā)現(xiàn)禽流感（H9N2）能直接感染人。1988年以來，大多數(shù)流感病毒的新變種也首發(fā)于我國，世界衛(wèi)生組織（WHO）每年公布的流感疫苗病毒株大多數(shù)來自我國，因此我國被全世界公認(rèn)為流感的多發(fā)地，許多流感專家推測下次流感大流行首發(fā)地最大可能在我國。2003年底以來，我國大陸及亞洲多個國家和地區(qū)先后暴發(fā)了H5N1、H5N2和H7N7亞型高致病性動物禽流感，并且H5N1

7、毒株在泰國、越南和柬埔寨發(fā)生多起人感染疫情，引起了國際社會的高度關(guān)注。流感為第一個實(shí)行全球性監(jiān)測的傳染病，目前已有80多個國家、110余個國家/地區(qū)流感中心組成了全球流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)。我國于1952年開展流感工作，1957年成立了國家流感中心，1981年恢復(fù)參加WHO組織的國際流感監(jiān)測網(wǎng)。自2000年，中國衛(wèi)生部與WHO合作，開展了為期五年的流感監(jiān)測合作項(xiàng)目，建立了覆蓋23個省，以流感樣病例報告和病毒分離為主的流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)。通過該合作項(xiàng)目的順利實(shí)施，我國流感監(jiān)測的整體水平有了顯著提高。監(jiān)測是預(yù)防控制流感的關(guān)鍵策略和措施之一，也是每年確定流感流行株、推薦疫苗組份、及早發(fā)現(xiàn)變異株、對流感疫情預(yù)測和預(yù)警

8、的基礎(chǔ)。目前我國各地流感的監(jiān)測水平發(fā)展極不平衡，難以應(yīng)對流感大流行的發(fā)生，因此加強(qiáng)和完善我國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)已刻不容緩。為提高我國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)的整體水平，指導(dǎo)各級各類醫(yī)療機(jī)構(gòu)和疾控機(jī)構(gòu)開展流感監(jiān)測工作，在全國流感監(jiān)測方案（試行）（衛(wèi)辦疾控發(fā)2003136號）的基礎(chǔ)上，制定本實(shí)施方案，在較長的一段時期內(nèi)，指導(dǎo)和規(guī)范全國流感和人禽流感的監(jiān)測工作，建立科學(xué)、規(guī)范、靈敏、高效覆蓋全國的流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)，培養(yǎng)一支我國流感監(jiān)測與防治的專業(yè)技術(shù)隊伍。二、監(jiān)測目的 1了解、掌握我國流感活動狀況及流行動態(tài)變化規(guī)律。2掌握我國流感每年的流行株及其構(gòu)成，了解其抗原性和基因特性變異情況，及早發(fā)現(xiàn)變異株，為流感流行，尤其是大流

9、行的預(yù)警提供依據(jù)。3分析我國流感代表株與WHO年度推薦疫苗株的抗原相關(guān)性，為我國每年公布流感代表株、推薦疫苗組份和制定流感疫苗的免疫策略提供科學(xué)依據(jù)。4及時發(fā)現(xiàn)人禽流感疫情，防范動物中禽流感疫情向人間傳播，為制定人禽流感防治策略和措施提供科學(xué)依據(jù)。三、監(jiān)測病例定義和診斷標(biāo)準(zhǔn)（一）流感1流感樣病例 發(fā)熱（體溫38），伴咳嗽或咽痛之一者，缺乏其它實(shí)驗(yàn)室確定診斷依據(jù)2臨床診斷病例3確診病例（二）人禽流感（H5、H7、H9等亞型）1待查病例2臨床診斷病例3確診病例4排除病例四、全國流感/人禽流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)全國流感/人禽流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)由各級各類醫(yī)療機(jī)構(gòu)、流感樣病例監(jiān)測哨點(diǎn)醫(yī)院和各級疾病預(yù)防控制中心組成。（一

10、）各級各類醫(yī)療機(jī)構(gòu)根據(jù)中華人民共和國傳染病防治法，診斷并報告流感臨床診斷病例和確診病例及人禽流感臨床診斷病例和確診病例。（二）流感樣病例監(jiān)測哨點(diǎn)醫(yī)院按照哨點(diǎn)醫(yī)院的選擇原則，在全國31個?。ㄗ灾螀^(qū)、直轄市）選擇185家醫(yī)院組成國家級流感樣病例監(jiān)測哨點(diǎn)醫(yī)院，同時各省根據(jù)現(xiàn)有工作基礎(chǔ)和條件，設(shè)立155家非國家級流感樣病例監(jiān)測哨點(diǎn)醫(yī)院，所有哨點(diǎn)醫(yī)院具體名單見附件1。（三）全國流感/人禽流感流行病學(xué)和實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測網(wǎng)絡(luò) 由國家、省、市、縣四級疾病預(yù)防控制中心組成，并根據(jù)“流感監(jiān)測實(shí)驗(yàn)室生物安全分級及生物安全管理規(guī)定要求”（見附件2），經(jīng)中國疾控中心考核認(rèn)定，實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)由具備資質(zhì)的各級疾病預(yù)防控制中心流感

11、實(shí)驗(yàn)室，共63家組成，具體名單見附件3。五、法定傳染病疫情報告1報告內(nèi)容根據(jù)中華人民共和國傳染病防治法，流行性感冒和人感染高致病性禽流感分別為丙類和乙類法定傳染病，其中流行性感冒報告流感臨床診斷和確診病例，人感染高致病性禽流感報告臨床診斷和確診病例。2責(zé)任報告人各級疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)、醫(yī)療機(jī)構(gòu)和采供血機(jī)構(gòu)及其執(zhí)行職務(wù)的人員為法定傳染病疫情責(zé)任報告人。3報告程序、方式和時限法定傳染病疫情責(zé)任報告人按照流感臨床診斷和確診病例，人禽流感臨床診斷和確診病例的診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行診斷，并根據(jù)衛(wèi)生部頒布的傳染病信息報告工作管理規(guī)范中規(guī)定的報告程序、方式和時限，通過“疾病監(jiān)測信息報告管理系統(tǒng)”進(jìn)行報告。六、流感樣病例

12、監(jiān)測（一）監(jiān)測時間1北方16?。罕本?、天津、河北、山西、內(nèi)蒙古、遼寧、吉林、黑龍江、山東、河南、西藏、陜西、甘肅、青海、寧夏、新疆。2南方15?。荷虾?、江蘇、浙江、安徽、福建、江西、湖北、湖南、廣東、廣西、海南、重慶、四川、貴州、云南。3每年的4月至次年的3月為一個流感監(jiān)測年度。北方省每年自10月1日所在周開始監(jiān)測，至次年3月31日所在周結(jié)束；北方省中的遼寧、天津和甘肅及南方省全年開展監(jiān)測。周歷按照公歷的每周一到每周日編排（見附件4）。（二）哨點(diǎn)醫(yī)院的選擇按照以下原則，在全國選擇185家哨點(diǎn)醫(yī)院，組成國家級流感樣病例監(jiān)測哨點(diǎn)醫(yī)院網(wǎng)絡(luò)，開展流感樣病例的監(jiān)測。此外各省還可根據(jù)現(xiàn)有工作基礎(chǔ)和條件，設(shè)

13、立非國家級流感樣病例監(jiān)測哨點(diǎn)醫(yī)院。1選擇原則（1）在各省會城市選擇呼吸道病人就診較多的綜合醫(yī)院和兒童醫(yī)院各一家。（2）各省在另一人口密度較高、具備一定工作基礎(chǔ)，距當(dāng)?shù)亓鞲斜O(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室較近的地級市，選擇呼吸道病人就診較多的城市綜合醫(yī)院和兒童醫(yī)院各一家。（3）在曾發(fā)生過動物禽流感疫情或流感暴發(fā)疫情較多的農(nóng)村縣選擇縣中心（人民）醫(yī)院一家。（4）遼寧、山東、浙江、福建和廣東省，另在大連、青島、寧波、廈門、深圳5個計劃單列市，選擇呼吸道病人就診較多的綜合醫(yī)院和兒童醫(yī)院各一家。（5）各省優(yōu)先選擇現(xiàn)已開展流感樣病例監(jiān)測的哨點(diǎn)醫(yī)院。（6）工作基礎(chǔ)較好的省可適當(dāng)增加哨點(diǎn)醫(yī)院數(shù)量。2監(jiān)測診室的設(shè)置（1）城市綜合

14、醫(yī)院在內(nèi)科門診和內(nèi)科急診開展流感樣病例的監(jiān)測。（2）城市兒童醫(yī)院在兒內(nèi)科門診和兒內(nèi)科急診開展流感樣病例的監(jiān)測。（3）農(nóng)村縣中心（人民）醫(yī)院在內(nèi)科門診、內(nèi)科急診和兒內(nèi)科門診、兒內(nèi)科急診同時開展流感樣病例的監(jiān)測。（三）流感樣病例的報告1報告內(nèi)容和程序（1）哨點(diǎn)醫(yī)院設(shè)置監(jiān)測診室的醫(yī)務(wù)人員，按照流感樣病例的定義，對每天在內(nèi)科門診、內(nèi)科急診、兒內(nèi)科門診、兒內(nèi)科急診所有診室就診的病例進(jìn)行診斷，每天登記分年齡組的流感樣病例數(shù)和門急診病例就診總數(shù)，填寫“ 醫(yī)院 科門（急）診流感樣病例數(shù)和門急診病例就診總數(shù)原始登記表”（見表1），報醫(yī)院主管科室。原始登記表中“流感樣病例數(shù)”和“門急診病例就診總數(shù)”可分科室、診室

15、，由各科室確定專人，每日進(jìn)行登記。（2）哨點(diǎn)醫(yī)院主管科室，每周一負(fù)責(zé)將本院各監(jiān)測診室上周的“ 醫(yī)院 科門（急）診流感樣病例數(shù)和門急診病例就診總數(shù)原始登記表”（表1），分診室錄入“中國流感/人禽流感監(jiān)測信息系統(tǒng)”。2注意事項(xiàng)流感樣病例數(shù)和門急診病例就診總數(shù)在每家監(jiān)測哨點(diǎn)醫(yī)院的產(chǎn)生來源必須一致。（1）流感樣病例數(shù)是指當(dāng)天在內(nèi)科門急診和/或兒內(nèi)科門急診所有診室診斷的流感樣病例，而不僅是某一診室（如呼吸內(nèi)科和/或小兒呼吸內(nèi)科）的流感樣病例。（2）門急診病例就診總數(shù)是指當(dāng)天在內(nèi)科門急診和/或兒科門急診所有診室就診的全部門急診病例總數(shù)，而不僅是某一診室（如呼吸內(nèi)科和/或小兒呼吸內(nèi)科）的就診的門急診病例數(shù)。

16、（四）流感樣病例病原學(xué)監(jiān)測1實(shí)驗(yàn)室條件及生物安全操作要求流感病原學(xué)監(jiān)測在生物安全級實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。（1）流感病毒分離必須在生物安全級實(shí)驗(yàn)室的生物安全柜里操作，并遵守相關(guān)的生物安全管理規(guī)定。（2）紅細(xì)胞凝集和紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)在生物安全級實(shí)驗(yàn)室里操作，并遵守相關(guān)的生物安全管理規(guī)定。（3）實(shí)驗(yàn)室基本條件：具備進(jìn)行流感病毒分離鑒定所需要的生物安全柜、離心機(jī)、CO2培養(yǎng)箱、恒溫培養(yǎng)箱、液氮罐、-70低溫冰箱以及常規(guī)冰箱等配套設(shè)備。2標(biāo)本采集哨點(diǎn)醫(yī)院監(jiān)測診室的醫(yī)護(hù)人員負(fù)責(zé)采集，或協(xié)助當(dāng)?shù)丶部刂行膶I(yè)人員采集流感樣病例的鼻咽拭子等標(biāo)本，采集人員填寫“流感/人禽流感監(jiān)測病例標(biāo)本原始登記送檢表”（表2），隨同所采

17、集標(biāo)本送全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室。（1）采樣對象：發(fā)病3天內(nèi)的流感樣病例，且沒有服用過抗病毒藥物。根據(jù)就診ILI病例數(shù)的多少，每家哨點(diǎn)醫(yī)院每周至少采集515份流感樣病例的標(biāo)本。（2）標(biāo)本采集種類包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液和鼻洗液，其中咽拭子、鼻拭子采集后，放入含采樣液4ml的采樣管中；鼻咽抽取物采集5ml；咽漱液和鼻洗液采集10ml。采集方法詳見附件5。（3）標(biāo)本的運(yùn)輸：標(biāo)本采集后應(yīng)在4條件下，盡快（24小時內(nèi)）運(yùn)送至全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室，未能24小時內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室的，應(yīng)置-70或以下保存，標(biāo)本運(yùn)輸方法詳見在縣中心（人民）醫(yī)院采集的流感樣病例標(biāo)本，每日送縣級疾控中心，置-70或以下保

18、存?？h疾控中心根據(jù)標(biāo)本采集的數(shù)量，每兩周在凍存條件下，24小時內(nèi)送至距離較近的流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室。（4）全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室的工作人員接到標(biāo)本后，24小時內(nèi)將“流感/人禽流感監(jiān)測病例標(biāo)本原始登記送檢表”（表2）錄入到“中國流感/人禽流感監(jiān)測信息系統(tǒng)”的“流感/人禽流感監(jiān)測病例標(biāo)本登記一覽表”（見表3） 中。3病毒分離病毒分離培養(yǎng)是流感病原學(xué)監(jiān)測的基礎(chǔ)，目前多采用雞胚和MDCK細(xì)胞并用進(jìn)行流感病毒分離。近年來隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，發(fā)現(xiàn)通過雞胚所分離的流感病毒，其抗原性與原始標(biāo)本有所不同，而通過MDCK細(xì)胞所分離的流感病毒，其抗原性與原始標(biāo)本相似。另外由于“O”相毒株的重現(xiàn)，MDCK細(xì)胞對“

19、O”相毒株的敏感性遠(yuǎn)高于雞胚，所以MDCK細(xì)胞已成為流感病毒分離不可缺少的一種宿主系統(tǒng)。但MDCK細(xì)胞分離的病毒不能用于疫苗生產(chǎn)。為減少工作量，可先用MDCK細(xì)胞進(jìn)行篩選，陽性后，再將另外一份70或以下凍存的全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室收到標(biāo)本后，應(yīng)在24小時內(nèi)進(jìn)行標(biāo)本處理和病毒接種，不能及時接種的應(yīng)置70或以下凍存。（1）標(biāo)本的處理：標(biāo)本送至實(shí)驗(yàn)室后，立即進(jìn)行處理。將原始標(biāo)本一分為三份，一份（40）用于雞胚接種，一份（30）用于MDCK細(xì)胞接種，一份（30）保存待復(fù)核。處理方法詳見附件5。（2）MDCK細(xì)胞的接種和收獲將處理后的標(biāo)本接種于已長單層的MDCK細(xì)胞上，每日觀察細(xì)胞病變，一般為7天。當(dāng)C

20、PE出現(xiàn)“+”“+”時，即75-100細(xì)胞出現(xiàn)病變時進(jìn)行收獲，收獲之前可將細(xì)胞凍融12次，以提高收獲標(biāo)本的病毒滴度。即使無細(xì)胞病變也應(yīng)于第7天收獲。CPE出現(xiàn)時間隨感染病毒的型別、毒株的差異、感染量的大小和MDCK細(xì)胞的代數(shù)而異，一般標(biāo)本接種后7天還未出現(xiàn)CPE，維持液經(jīng)HA試驗(yàn)陰性者，繼續(xù)盲傳12代后，HA試驗(yàn)仍為陰性者，則MDCK細(xì)胞病毒分離為陰性，標(biāo)本可棄去。隨MDCK細(xì)胞傳代數(shù)的增加，其對流感病毒的敏感性下降。MDCK細(xì)胞復(fù)蘇后連續(xù)傳15-20代，在間隔期可以用已知滴度的病毒來檢驗(yàn)MDCK細(xì)胞系的敏感性（具體方法見附件5），若敏感性下降，即可棄去，復(fù)蘇新細(xì)胞。（3）雞胚的接種和收獲將處

21、理后的標(biāo)本接種于9日齡雞胚的羊膜腔和尿囊腔，3335培養(yǎng)72小時。分別收獲雞胚尿囊液和羊水。經(jīng)HA試驗(yàn)陰性者，將羊水和尿囊液混合，繼續(xù)盲傳1代（72小時），如仍為陰性，則雞胚病毒分離為陰性，標(biāo)本可棄去。（4）結(jié)果錄入流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室的工作人員在完成病毒分離后，24小時內(nèi)將病毒分離結(jié)果錄入“中國流感/人禽流感監(jiān)測信息系統(tǒng)”中的“ 流感/人禽流感監(jiān)測病毒分離、鑒定結(jié)果登記一覽表”（見表4）中。4病毒鑒定（1）紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)（HA）MDCK細(xì)胞或雞胚收獲的標(biāo)本首先用雞、豚鼠或人紅細(xì)胞進(jìn)行紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)（HA），確定病毒滴度，“O”相毒株采用豚鼠或人紅細(xì)胞進(jìn)行HA試驗(yàn)，具體方法見附件5。HA滴度8，

22、進(jìn)行紅細(xì)胞凝集抑制（HI）試驗(yàn)；HA滴度8者，繼續(xù)在敏感的MDCK細(xì)胞系或雞胚上進(jìn)行傳代培養(yǎng)，使其HA滴度8后，再進(jìn)行HI測定。若傳12代后，HA滴度仍8者，可應(yīng)用B型引物和能區(qū)分A型流感病毒不同亞型的引物進(jìn)行RTPCR鑒定。不具備RTPCR鑒定能力的送國家流感中心進(jìn)行分離鑒定。（2）紅細(xì)胞凝集抑制（HI）試驗(yàn)HA試驗(yàn)完成后，用國家流感中心每年提供的抗A（H1N1）、抗A（H3N2）、抗B（Victoria系）和抗B（Yamagata系）4種標(biāo)準(zhǔn)參照血清，進(jìn)行紅細(xì)胞凝集抑制（HI）試驗(yàn)，確定病毒的型別和亞型，進(jìn)行HI試驗(yàn)時，需同時進(jìn)行4種標(biāo)準(zhǔn)抗原對照。具體方法見附件5。（3）流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室

23、的工作人員在完成病毒鑒定后，當(dāng)天將鑒定結(jié)果錄入“中國流感/人禽流感監(jiān)測信息系統(tǒng)” 中“流感/人禽流感監(jiān)測病毒分離、鑒定結(jié)果登記一覽表”（見表4）。5毒株的管理和上送（1）毒株的保存管理包括國家流感中心在內(nèi)的全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)各實(shí)驗(yàn)室，要對所有流感毒株進(jìn)行登記，應(yīng)用“中國流感/人禽流感監(jiān)測信息系統(tǒng)”填寫“流感/人禽流感毒株保存記錄表”（見表5），以備復(fù)核。毒株鑒定完成后，液體毒株應(yīng)在70及以下保存3年，干燥管可以長期保存。分離毒株的原始標(biāo)本保存6個月，在收到國家流感中心復(fù)核鑒定報告后，方可棄去。（2）上送國家流感中心的毒株種類自國家級流感樣病例監(jiān)測哨點(diǎn)醫(yī)院網(wǎng)絡(luò)采樣，所分離的全部毒株；自非國家級流感

24、樣病例監(jiān)測哨點(diǎn)醫(yī)院采樣，所分離到的流感病毒，單向血凝抑制效價與國家流感中心提供的標(biāo)準(zhǔn)參照血清相比，有4倍或4倍以上差異的毒株；自非國家級流感樣病例監(jiān)測哨點(diǎn)醫(yī)院采樣，所分離到的流感病毒，HA滴度8，且不具備RTPCR鑒定能力的毒株。HA陽性，應(yīng)用當(dāng)年國家流感中心提供的標(biāo)準(zhǔn)參照血清進(jìn)行HI試驗(yàn)，4種血清的HI效價均20的毒株。（3）毒株上送的時限和要求HA陽性，應(yīng)用國家流感中心提供的標(biāo)準(zhǔn)參照血清進(jìn)行HI試驗(yàn)，4種血清的HI效價均20的毒株，應(yīng)在HI試驗(yàn)結(jié)束后24小時內(nèi)送達(dá)國家流感中心；其余毒株在HI試驗(yàn)完成后，每2周送至國家流感中心；全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)各實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)填寫“流感毒株送檢單”（見表6），將

25、毒株上送至國家流感中心。監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)中的市（縣）級實(shí)驗(yàn)室送檢毒株時，應(yīng)同時送各省級疾控中心流感實(shí)驗(yàn)室備份。所送毒株每份不少于3ml，并且無細(xì)菌污染。任何單位和個人，未經(jīng)衛(wèi)生部批準(zhǔn)，不得與境外直接進(jìn)行毒株交換。國家流感中心：電話傳真中國疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所流感室，北京宣武區(qū)迎新街100號，郵編：100052。6毒株的復(fù)核國家流感中心收到毒株后，進(jìn)行流感病毒型和亞型的復(fù)核鑒定。（1）經(jīng)HA復(fù)核，滴度8的，既可進(jìn)行HI試驗(yàn)，一般毒株2天內(nèi)完成復(fù)核鑒定，并將結(jié)果錄入“中國流感/人禽流感監(jiān)測信息系統(tǒng)”中的“國家流感中心流感/人禽流感毒株復(fù)核

26、、鑒定一覽表”（見表7），進(jìn)行反饋。用國家流感中心每年提供的抗A（H1N1）、抗A（H3N2）、抗B（Victoria系）和抗B（Yamagata系）4種標(biāo)準(zhǔn)參照血清無法鑒定的特殊毒株，應(yīng)盡快反饋鑒定結(jié)果。（2）經(jīng)HA復(fù)核，滴度8的，繼續(xù)在MDCK細(xì)胞或雞胚上培養(yǎng)2代，符合HA滴度8的，可進(jìn)行HI試驗(yàn)。并在完成當(dāng)天將復(fù)核結(jié)果錄入“中國流感/人禽流感監(jiān)測信息系統(tǒng)”中的“國家流感中心流感/人禽流感毒株復(fù)核、鑒定一覽表”（見表7），進(jìn)行反饋。（3）若經(jīng)病毒培養(yǎng)2代后，HA滴度仍8者，國家流感中心應(yīng)用B型引物和能區(qū)分A型流感病毒不同亞型的引物進(jìn)行RTPCR鑒定。（4）國家流感中心在復(fù)核、鑒定完成后，填

27、寫“國家流感中心流感/人禽流感毒株復(fù)核鑒定報告” （表8），向各省和/或送毒株的全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室反饋。7、流感病毒抗原性分析國家流感中心對所分離到的流感病毒，采用單向血凝抑制試驗(yàn)和交叉血凝抑制試驗(yàn)進(jìn)行抗原性分析。（1）單向血凝抑制試驗(yàn)選擇不同時間、不同地區(qū)分離的毒株，采用近幾年抗原性不同的國內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)參照血清及相關(guān)抗原和WHO提供的標(biāo)準(zhǔn)參照血清及相關(guān)抗原，進(jìn)行單向血凝抑制試驗(yàn)。具體方法見附件5。單向血凝抑制試驗(yàn)完成后，填寫“國家流感中心流感毒株單向血凝抑制試驗(yàn)報告”（見表9），及時向各省和/或送毒株的全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室反饋。（2）交叉血凝抑制試驗(yàn)國家流感中心選擇不同時間、不同地區(qū)分離的毒

28、株，按照HI效價是否與標(biāo)準(zhǔn)參照血清存在4倍及以上差異進(jìn)行分組，每組各選擇一定比例的毒株，采用近幾年抗原性不同的國內(nèi)代表株和WHO公布的疫苗株及其標(biāo)準(zhǔn)參照血清，進(jìn)行交叉血凝抑制試驗(yàn)，測定抗原比。具體方法見附件5。交叉血凝抑制試驗(yàn)完成后，填寫“國家流感中心毒株交叉血凝抑制試驗(yàn)報告”（見表10），及時向各省和/或送毒株的全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室反饋。8、流感病毒基因特性分析國家流感中心選擇不同時間、不同地區(qū)分離的毒株，尤其是抗原比有差異的，按照HI效價是否與標(biāo)準(zhǔn)參照血清存在4倍及以上差異進(jìn)行分組，每組各選擇一定比例的毒株，進(jìn)行血凝素重鏈區(qū)（HA1）和N基因的核苷酸序列測定，并與當(dāng)年WHO推薦的疫苗株的

29、核苷酸和氨基酸序列進(jìn)行比較分析，完成后及時向各省和/或送毒株的全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室反饋。七、流感暴發(fā)疫情監(jiān)測（一）暴發(fā)疫情定義1流感樣病例暴發(fā)疫情定義：在某一相對集中的區(qū)域內(nèi)（如村莊、學(xué)校、幼托機(jī)構(gòu)、敬老院、工廠、公司、工地等集體單位），一周內(nèi)，出現(xiàn)30例及以上，或集體單位中10以上的聚集性流感樣病例。2流感暴發(fā)疫情：根據(jù)突發(fā)公共衛(wèi)生事件的分級分類標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判斷。（二）暴發(fā)疫情的發(fā)現(xiàn)與報告1疫情發(fā)現(xiàn)（1）各級醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)本地區(qū)在某一相對集中的區(qū)域內(nèi)（如村莊、學(xué)校、幼托機(jī)構(gòu)、工廠、公司等集體單位），短時間內(nèi)出現(xiàn)較多聚集性的流感或流感樣病例，要及時向當(dāng)?shù)丶膊☆A(yù)防控制機(jī)構(gòu)報告。（2）各級疾病預(yù)

30、防控制機(jī)構(gòu)，要主動和當(dāng)?shù)亟逃鞴懿块T聯(lián)系，建立學(xué)校、幼托機(jī)構(gòu)流感或流感樣病例聚集性發(fā)病的報告渠道。各級各類學(xué)校指定的負(fù)責(zé)本校傳染病疫情報告工作的專人或兼職教師一旦發(fā)現(xiàn)暴發(fā)疫情苗頭，應(yīng)主動向轄區(qū)內(nèi)疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)進(jìn)行報告，疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)應(yīng)及時進(jìn)行調(diào)查和處理。（3）在當(dāng)?shù)亓鞲辛餍屑竟?jié)，疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)應(yīng)定期開展主動監(jiān)測，以早期發(fā)現(xiàn)暴發(fā)疫情。2疫情報告（1）各級疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)，在接到流感或流感樣病例暴發(fā)疫情報告后，要及時進(jìn)行調(diào)查處理，并在接到疫情報告后盡快應(yīng)用“突發(fā)公共衛(wèi)生事件報告管理信息系統(tǒng)”，進(jìn)行首次報告。（2）在暴發(fā)疫情調(diào)查處理的過程中，根據(jù)疫情進(jìn)展情況，及時在首次報告的基礎(chǔ)上進(jìn)行進(jìn)程報告

31、，在暴發(fā)疫情結(jié)束后，盡快進(jìn)行結(jié)案報告。（3）符合全國突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急處理預(yù)案中規(guī)定的突發(fā)公共衛(wèi)生事件分級標(biāo)準(zhǔn)的流感暴發(fā)疫情，則按照相應(yīng)的規(guī)范進(jìn)行報告。3報告內(nèi)容報告內(nèi)容主要包括事件類別、事件名稱、報告單位、事件波及人口數(shù)、首次報告時間、疫情發(fā)生地、是否發(fā)生在集體單位（學(xué)校）、首例病例發(fā)病時間、末例病例發(fā)病時間、分年齡組發(fā)病和死亡數(shù)、標(biāo)本采集信息、疫情性質(zhì)等，具體見“流感或流感樣病例暴發(fā)疫情監(jiān)測報告表”（見表11）。（三）暴發(fā)疫情的調(diào)查處理各級疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)應(yīng)認(rèn)真做好現(xiàn)場流行病學(xué)調(diào)查，并根據(jù)本地實(shí)驗(yàn)室的能力，開展實(shí)驗(yàn)室檢測工作，盡快明確疫情性質(zhì)。不具備實(shí)驗(yàn)室檢測能力的疾控機(jī)構(gòu)，應(yīng)按規(guī)范積極

32、采集標(biāo)本，送具備相應(yīng)資質(zhì)的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測。在開展流行病學(xué)調(diào)查和實(shí)驗(yàn)室檢測的同時，應(yīng)采取積極有效的措施，控制疫情的進(jìn)一步蔓延。1流行病學(xué)調(diào)查 各級疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)，在接到流感或流感樣病例暴發(fā)疫情報告后，要及時進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查，調(diào)查內(nèi)容參考“流感或流感樣病例暴發(fā)疫情監(jiān)測報告表”（表11）。2標(biāo)本采集各級疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)暴發(fā)疫情病例標(biāo)本的采集。（1）標(biāo)本采集采集發(fā)病3天內(nèi)病例的咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液和鼻洗液標(biāo)本，且沒有服用過抗病毒藥物，具體采集方法見附件5。（2）標(biāo)本的運(yùn)送采集人員填寫“流感/人禽流感監(jiān)測病例標(biāo)本原始登記送檢表”（見表2），并將標(biāo)本送至能開展相應(yīng)檢測的實(shí)驗(yàn)室?？焖贆z測

33、的標(biāo)本，可在現(xiàn)場進(jìn)行檢測，或送至具有流感快速診斷試劑盒的疾控機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測。用于病毒分離和RTPCR檢測的標(biāo)本采集后應(yīng)在4條件下，24小時內(nèi)運(yùn)送至全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室，未能24小時內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室的，應(yīng)置-70或以下保存。標(biāo)本運(yùn)輸方法具體見（3）全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室的工作人員接到標(biāo)本后，24小時內(nèi)將“流感/人禽流感監(jiān)測病例標(biāo)本原始登記送檢表”（表2）錄入到“中國流感/人禽流感監(jiān)測信息系統(tǒng)”中的“流感/人禽流感監(jiān)測病例標(biāo)本登記一覽表”（見表3）中。3實(shí)驗(yàn)室檢測（1）實(shí)驗(yàn)室檢測的目的核實(shí)暴發(fā)疫情的實(shí)驗(yàn)室診斷，明確是否為流感暴發(fā)。自暴發(fā)疫情中分離到流感病毒，對其進(jìn)行抗原性和基因特性分析。（2）實(shí)

34、驗(yàn)室檢測方法的選擇原則流感樣病例暴發(fā)疫情中常用的檢測方法有流感快速診斷試劑盒檢測、RTPCR檢測和病毒分離培養(yǎng)。其中流感快速檢測和RTPCR檢測可用于早期、快速的實(shí)驗(yàn)室檢測。具備流感快速檢測和RTPCR檢測條件的地區(qū)，可選擇這兩種快速檢測方法，盡快明確疫情性質(zhì)。不具備流感快速檢測和RTPCR檢測條件的地區(qū)，應(yīng)盡量采集標(biāo)本，送全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行流感病毒分離鑒定。無論是否進(jìn)行流感快速診斷試劑盒檢測和RTPCR檢測，都應(yīng)進(jìn)行常規(guī)的流感病毒分離鑒定。尤其是流感快速檢測和RTPCR檢測陽性的標(biāo)本，應(yīng)盡量分離到流感病毒。（3）流感快速診斷試劑盒檢測流感快速診斷試劑盒可檢測流感病毒的NP抗原和M1抗

35、原，用于暴發(fā)疫情中病例咽、鼻拭子或含漱液標(biāo)本的快速檢測?？稍?0分鐘內(nèi)提供檢測結(jié)果，初步判斷疫情性質(zhì)，可在現(xiàn)場中使用，操作簡便，具體方法見附件5。但是這種快速檢測比病毒分離培養(yǎng)或RT-PCR的敏感性低，無法確定流感病毒的亞型，部分試劑盒不能區(qū)分A型或B型流感病毒的感染，無法獲得毒株及其分子生物學(xué)和抗原特征的信息。（4）RTPCR法和Real-time PCR法檢測病毒核酸RTPCR法和Real-time PCR法是檢測流感病毒核酸的方法，能檢測出非常低水平的流感病毒的核酸，不管病毒是否具有活性均可進(jìn)行測定?？蛇x擇區(qū)分流感病毒的A型通用引物、B型引物和能區(qū)分A型流感病毒不同亞型的引物同時進(jìn)行試驗(yàn)

36、，具體方法見附件5。（5）病毒分離鑒定病毒分離鑒定是流感實(shí)驗(yàn)室診斷中最常用、高度敏感、最準(zhǔn)確的方法之一，所分離到的病毒可長期保存，并進(jìn)行抗原性分析。因此在暴發(fā)疫情中，常規(guī)用于實(shí)驗(yàn)室檢測，具體內(nèi)容同流感樣病例的病原學(xué)監(jiān)測。（6）檢測結(jié)果的報告各級疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)流感實(shí)驗(yàn)室，接到標(biāo)本后，進(jìn)行相應(yīng)的流感快速檢測、RTPCR和Real-time PCR檢測，完成試驗(yàn)后，24小時內(nèi)分別將檢測結(jié)果錄入到“中國流感/人禽流感監(jiān)測信息系統(tǒng)”中的“流感暴發(fā)疫情快診試劑盒檢測結(jié)果一覽表” （見表12）和“流感暴發(fā)疫情核酸檢測結(jié)果一覽表”（見表13）中。病毒分離鑒定的結(jié)果錄入到“流感/人禽流感監(jiān)測病毒分離鑒定結(jié)果登

37、記一覽表”（見表4）。 （7）毒株的保存管理包括國家流感中心在內(nèi)的全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)各實(shí)驗(yàn)室，要對所有自暴發(fā)疫情中分離的流感毒株進(jìn)行登記，填寫“流感毒株保存記錄表”（表5），以備復(fù)核。（8）毒株的上送全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)各實(shí)驗(yàn)室在完成HI試驗(yàn)后，填寫“流感/人禽流感毒株送檢單”，每2周將所有自流感樣病例暴發(fā)疫情中分離到的毒株送至國家流感中心，監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)中的市級實(shí)驗(yàn)室送檢毒株時，同時送各省級疾控中心流感實(shí)驗(yàn)室備份。其中紅細(xì)胞凝集陽性，而用國家流感中心提供的標(biāo)準(zhǔn)參照血清，HI效價均20的毒株，應(yīng)在HI試驗(yàn)結(jié)束后24小時內(nèi)送達(dá)國家流感中心。所送毒株每份不少于3ml，血凝滴度8，并且無細(xì)菌污染。（9）毒株的復(fù)

38、核鑒定、抗原性和基因特性分析國家流感中心收到毒株后，進(jìn)行復(fù)核鑒定、抗原性分析，并在完成后及時錄入到“中國流感/人禽流感監(jiān)測信息系統(tǒng)”中，并向各省和/或送毒株的全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室反饋。具體內(nèi)容同流感樣病例病原學(xué)監(jiān)測。4疫情控制（1）隔離病人發(fā)現(xiàn)疫情后，應(yīng)早期對病人采取居家休息、單獨(dú)呼吸道病房治療等方式進(jìn)行隔離，因地制宜，就地適當(dāng)隔離。（2）對癥治療和防并發(fā)癥對病人治療一般采用對癥療法，發(fā)病早期(48小時內(nèi))可服用抗流感病毒藥物，嚴(yán)重患者如嚴(yán)重肺炎,呼吸極度困難,高熱不退等需住院治療。防治并發(fā)癥主要應(yīng)防止流感病毒性肺炎和細(xì)菌性肺炎,尤其對年邁體衰者或伴有心血管,糖尿病,慢性呼吸道疾病者或嬰幼兒

39、等流感高危人群，因他們由于流感或其它合并癥可造成死亡,故應(yīng)特別注意加強(qiáng)治療護(hù)理。（3）其它控制措施一般采用綜合性措施，保持室內(nèi)空氣流通，對易感人群進(jìn)行健康宣傳教育，講究衛(wèi)生，注意體格鍛煉和營養(yǎng)，避免接觸病人，盡量不去公共場所等。對尚未暴露的年邁和健康狀態(tài)差，尤其患慢性病的病人，必要時可采用流感疫苗接種，但疫苗接種在2周后才能產(chǎn)生保護(hù)性抗體，而且存在暴發(fā)毒株與疫苗株是否匹配的問題。因此在暴發(fā)初期，對這部分高危人群，尤其是對疫苗過敏者或可能已被感染（如密切接觸病人）者，應(yīng)及時(48小時內(nèi))服用抗流感病毒藥物。（4）停課、停業(yè)根據(jù)疫情規(guī)模，必要時縣級以上地方人民政府報經(jīng)上一級人民政府決定，可以采取停

40、工、停業(yè)、停課等緊急措施，控制疫情的進(jìn)一步擴(kuò)散蔓延。5疫情性質(zhì)的判斷原則（1）暴發(fā)疫情的性質(zhì)應(yīng)結(jié)合病例的臨床表現(xiàn)、病例間的流行病學(xué)聯(lián)系和實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果進(jìn)行綜合分析、判斷。（2）單個病例按照流感診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行診斷。（3）僅有單個或少數(shù)病例的實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果陽性，對暴發(fā)疫情的性質(zhì)判定應(yīng)慎重。（4）多數(shù)或較大比例病例的實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果均陽性，且病毒型和亞型結(jié)果一致，可明確暴發(fā)疫情的性質(zhì)。八、人禽流感監(jiān)測禽流感作為一個新發(fā)傳染病，目前人類對其認(rèn)識有限，隨著認(rèn)識的不斷深入進(jìn)展，人禽流感診斷標(biāo)準(zhǔn)、監(jiān)測內(nèi)容、方法、時間和范圍將做進(jìn)一步修改、完善。正是由于目前人類對人禽流感認(rèn)識有限，而且我國每起動物禽流感疫情的確認(rèn)

41、需要一個時間過程，因此以下人禽流感監(jiān)測的啟動條件、監(jiān)測范圍和時限僅作為指導(dǎo)原則推薦給各省參考，各省衛(wèi)生行政部門可以根據(jù)當(dāng)?shù)貏游锔咧虏⌒郧萘鞲幸咔橐?guī)模和人禽流感疫情的波及范圍，結(jié)合各地實(shí)際情況和防治措施的需要，確定監(jiān)測范圍和時限。（一）人禽流感監(jiān)測啟動1啟動條件發(fā)生以下三種情況之一，相關(guān)地區(qū)應(yīng)立即啟動人禽流感監(jiān)測工作。（1）發(fā)生動物高致病性禽流感疫情。（2）出現(xiàn)人禽流感待查病例、臨床診斷或確診病例。（3）與我國接壤的其它國家或地區(qū)在邊境地區(qū)發(fā)生動物高致病性禽流感疫情或人禽流感疫情。2當(dāng)人感染高致病性禽流感疫情規(guī)模符合突發(fā)公共衛(wèi)生事件相關(guān)分級標(biāo)準(zhǔn)時，按照國家突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急預(yù)案，啟動相應(yīng)的應(yīng)急

42、反應(yīng)。（二）監(jiān)測范圍確定的原則1發(fā)生動物高致病性禽流感疫情后，在當(dāng)?shù)剞r(nóng)業(yè)部門劃定的動物疫區(qū)范圍所涉及縣（市、區(qū)）開展監(jiān)測工作。動物疫點(diǎn)：將病禽所在禽場（戶）或其他有關(guān)屠宰、經(jīng)營單位劃為疫點(diǎn)；散養(yǎng)的，將病禽所在自然村劃為疫點(diǎn)。動物疫區(qū)：以疫點(diǎn)為中心，將半徑3公里內(nèi)的區(qū)域劃為疫區(qū)。2人禽流感待查病例、臨床診斷或確診病例與動物高致病性禽流感疫情有明確聯(lián)系，同樣在動物疫區(qū)范圍所涉及的縣（市、區(qū)）開展監(jiān)測工作。3出現(xiàn)2例及以上人禽流感待查病例、臨床診斷或確診病例，經(jīng)調(diào)查病例間有流行病學(xué)聯(lián)系、存在可能的人傳人證據(jù)時，在病例發(fā)病前10天至隔離治療（或死亡）期間，曾經(jīng)居住、工作、生活、學(xué)習(xí)、診治所涉及的縣（市

43、、區(qū)）開展監(jiān)測工作。4與我國接壤的其它國家或地區(qū)在邊境地區(qū)發(fā)生動物高致病性禽流感疫情或人禽流感疫情，相關(guān)省可在與其相鄰的邊境縣（區(qū)）開展人禽流感監(jiān)測工作。（三）監(jiān)測時限1發(fā)生動物高致病性禽流感疫情后，監(jiān)測工作自當(dāng)?shù)剞r(nóng)業(yè)部門處理完動物疫情、所有密切接觸者解除醫(yī)學(xué)觀察后，持續(xù)10天。2出現(xiàn)人禽流感待查病例、臨床診斷或確診病例后，監(jiān)測工作自最后一例病例被隔離治療（或死亡）、所有密切接觸者解除醫(yī)學(xué)觀察、疫區(qū)處理結(jié)束后，持續(xù)10天。3與我國接壤的其它國家或地區(qū)在邊境地區(qū)發(fā)生動物高致病性禽流感疫情或人禽流感疫情，相關(guān)省的人禽流感監(jiān)測工作可在境外疫情平息后持續(xù)1個月。（四）監(jiān)測對象1密切接觸者飼養(yǎng)、販賣、屠

44、宰、加工、診治病死禽的人員；捕殺、處理病、死禽，未按相應(yīng)規(guī)范采取防護(hù)措施的人員；接觸病、死禽及其排泄物、分泌物，或其排泄物、分泌物污染的環(huán)境的其他相關(guān)人員。與隔離治療前的人禽流感待查病例、臨床診斷或確診病例共同生活、居住，護(hù)理過病例，或接觸過病例的呼吸道分泌物、排泄物和體液的人員。2人禽流感待查病例、臨床診斷或確診病例按照人禽流感診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行診斷。（五）密切接觸者的醫(yī)學(xué)觀察1對密切接觸者醫(yī)學(xué)觀察7天，觀察期間不限制其活動。2告知其禽流感的臨床特點(diǎn)、傳播途徑及相關(guān)防治知識。3觀察期間，由當(dāng)?shù)匦l(wèi)生行政部門指定醫(yī)療衛(wèi)生人員每日對密切接觸者測試1次體溫，了解其身體健康狀況，每日填寫“禽流感密切接觸者醫(yī)

45、學(xué)觀察原始登記表”（見表14），并按“禽流感密切接觸者醫(yī)學(xué)觀察每日統(tǒng)計匯總表”（見表15），上報到轄區(qū)縣級疾控機(jī)構(gòu)。由縣級疾控機(jī)構(gòu)每日錄入到“中國流感/人禽流感監(jiān)測信息系統(tǒng)”中。4 對密切接觸者中出現(xiàn)異常臨床表現(xiàn)（發(fā)熱，或咳嗽、咽痛等癥狀）的，按照人禽流感診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行診斷治療。5當(dāng)出現(xiàn)人禽流感待查病例、可能或?qū)嶒?yàn)室確診病例，且流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果提示病例之間存在流行病學(xué)聯(lián)系或人傳人的可能時，對其密切接觸者應(yīng)進(jìn)行隔離醫(yī)學(xué)觀察。（六）人禽流感待查病例的監(jiān)測1病例報告（1）人禽流感監(jiān)測啟動后，監(jiān)測范圍內(nèi)的各級各類醫(yī)療機(jī)構(gòu)醫(yī)務(wù)人員接診流感樣病例和肺炎病例時，要詳細(xì)詢問病例的流行病學(xué)史，嚴(yán)格按照人禽流感診斷

46、標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行診斷。（2）一旦診斷為人禽流感待查病例后，具備網(wǎng)絡(luò)直報條件的醫(yī)療機(jī)構(gòu)，立即登陸“中國流感/人禽流感監(jiān)測信息系統(tǒng)”進(jìn)行報告，報告內(nèi)容見“人禽流感待查病例調(diào)查表”（見表16）。沒有條件實(shí)行網(wǎng)絡(luò)直報的，應(yīng)以最快方式報告本行政區(qū)域內(nèi)縣級疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)。（3）各級各類醫(yī)療機(jī)構(gòu)醫(yī)務(wù)人員接診流感樣病例和肺炎病例時，一旦病例具備相應(yīng)的流行病學(xué)史，診斷為人禽流感待查病例，無論是否在監(jiān)測范圍或時限內(nèi)，都應(yīng)立即報告。2隔離治療人禽流感待查病例診斷后，立即送當(dāng)?shù)囟c(diǎn)收治醫(yī)院，置單間治療，并采取相應(yīng)的醫(yī)院內(nèi)感染控制措施，直至病例被排除。3流行病學(xué)調(diào)查縣級疾病預(yù)防控制中心接到人禽流感待查病例后，立即開展現(xiàn)場流行

47、病學(xué)調(diào)查。并根據(jù)初步調(diào)查結(jié)束，對“人禽流感待查病例調(diào)查表”（表16）的內(nèi)容進(jìn)行審核。4標(biāo)本采集醫(yī)療機(jī)構(gòu)配合當(dāng)?shù)丶膊☆A(yù)防控制中心專業(yè)人員采集病例標(biāo)本，采集人員要按照禽流感職業(yè)暴露人員防護(hù)指導(dǎo)原則做好個人防護(hù)。在現(xiàn)場采集樣本的同時，填寫“流感/人禽流感監(jiān)測病例標(biāo)本原始登記送檢表”（表2）。（1）標(biāo)本采集種類病例的咽、鼻拭子或含漱液、血清以及死亡病例的尸檢肺組織、氣管分泌物。采集方法詳見附件5。（2）采集標(biāo)本時間咽、鼻拭子或含漱液在發(fā)病后17天采集；急性期血清在發(fā)病后7天內(nèi)采集，恢復(fù)期血清在發(fā)病后24周采集；尸檢標(biāo)本尸檢時采集。（3）標(biāo)本的運(yùn)送所有標(biāo)本應(yīng)在醫(yī)院采集，一式二份，其中一份單獨(dú)保存，以備復(fù)

48、核。標(biāo)本應(yīng)在4條件下，盡快（24小時內(nèi)）送至能開展相關(guān)檢測的實(shí)驗(yàn)室，用于病毒分離的標(biāo)本若不能在24小時內(nèi)送達(dá)，則應(yīng)盡快在70 以下保存。血清標(biāo)本可暫凍存在20 實(shí)驗(yàn)室工作人員接到標(biāo)本后，24小時內(nèi)將“流感/人禽流感監(jiān)測病例標(biāo)本原始登記送檢表”（表2）錄入到“中國流感/人禽流感監(jiān)測信息系統(tǒng)”中。5實(shí)驗(yàn)室檢測（1）RT-PCR和RealTime PCR具備相應(yīng)資質(zhì)疾控機(jī)構(gòu)的流感實(shí)驗(yàn)室，接到標(biāo)本后，首先應(yīng)用RT-PCR或RealTime PCR，對禽流感待查病例的咽、鼻拭子或含漱液，死亡病例的尸檢肺組織、氣管分泌物等標(biāo)本，進(jìn)行禽流感病毒核酸的快速檢測，具體方法見附件5。一般情況下, 實(shí)驗(yàn)室收到的樣本

49、立即進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，并于收到標(biāo)本后48小時內(nèi)出具RT-PCR檢測報告，并將檢測結(jié)果錄入到“中國流感/人禽流感監(jiān)測信息系統(tǒng)”中的“人禽流感監(jiān)測核酸檢測結(jié)果一覽表”（見表16，4.2）。（2）血清學(xué)檢測具備相應(yīng)資質(zhì)疾控機(jī)構(gòu)的流感實(shí)驗(yàn)室，接到血清標(biāo)本后，進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)：應(yīng)用禽流感滅活病毒，對患者急性期和恢復(fù)期的血清，進(jìn)行紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)。在生物安全三級實(shí)驗(yàn)室里，應(yīng)用禽流感活病毒，對患者急性期和恢復(fù)期的血清進(jìn)行微量中和試驗(yàn)。微量中和實(shí)驗(yàn)須5-10天內(nèi)完成。完成試驗(yàn)后，24小時內(nèi)將檢測結(jié)果錄入到“中國流感/人禽流感監(jiān)測信息系統(tǒng)”中的“人禽流感監(jiān)測血清學(xué)檢測結(jié)果登記一覽表” （見表16，4.3）。（3）病毒分離

50、、鑒定及復(fù)核具備相應(yīng)資質(zhì)疾控機(jī)構(gòu)的流感實(shí)驗(yàn)室在生物安全三級實(shí)驗(yàn)室中，應(yīng)用SPF雞胚，MDCK細(xì)胞，對病例的咽、鼻拭子或含漱液，死亡病例的尸檢肺組織、氣管分泌物等標(biāo)本進(jìn)行禽流感病毒的分離、鑒定及復(fù)核。一般情況下, 在收到樣本后7-10天出具病毒分離培養(yǎng)結(jié)果，于分離到病毒后的3-5天出具病毒鑒定結(jié)果，并將病毒分離、鑒定結(jié)果錄入“中國流感/人禽流感監(jiān)測信息系統(tǒng)”中的“人禽流感監(jiān)測病毒分離、鑒定和復(fù)核結(jié)果登記一覽表”中（見表16，4.4）。（4）標(biāo)本和分離物上送不具備相應(yīng)實(shí)驗(yàn)室檢測能力的省，須將原始標(biāo)本連同“流感/人禽流感監(jiān)測病例標(biāo)本原始登記送檢表”（表2）一起，24小時內(nèi)送中國疾控中心檢測。包括RT

51、-PCR、RealTime PCR、血清學(xué)檢測和病毒分離，任何一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果陽性的，需將原始標(biāo)本、可疑陽性標(biāo)本、血清、病毒分離物等，在低溫保存條件下，于24小時內(nèi)送至中國疾控中心進(jìn)行復(fù)核。原始標(biāo)本、可疑陽性標(biāo)本和血清須填寫“流感/人禽流感監(jiān)測病例標(biāo)本原始登記送檢表”（表2），病毒分離物須填寫“人禽流感毒株送檢單”（見表17）。（5）實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果的復(fù)核國家流感中心收到送檢標(biāo)本或病毒分離物后，立即應(yīng)用RTPCR、RealTime PCR法進(jìn)行禽流感病毒的核酸檢測和序列測定，同時接種SPF雞胚和MDCK細(xì)胞進(jìn)行病毒分離，對分離物采用HA、HI、NI等方法進(jìn)行亞型鑒定。對血清標(biāo)本進(jìn)行HI和微量中和試驗(yàn)。在檢測結(jié)果確認(rèn)后，立即錄入“中國流感/人禽流感監(jiān)測信息系統(tǒng)”中進(jìn)行反饋。6診斷與排除所有人禽流感確診病例、臨床診斷病例的排除由國家級專家組進(jìn)行診斷、判定。人禽流感待查病例的排除，及人禽流感待查診斷為臨床診斷病例時，由各省專家診斷組根據(jù)國家流感中心的復(fù)核結(jié)果進(jìn)行判斷。人禽流感待查病例診斷為臨床診斷或確診人禽流感病例后，按照衛(wèi)生部的有關(guān)要求開展防治工作。九、工作職責(zé)（一）全國各級衛(wèi)生行政部