教學(xué)培訓(xùn)-試驗(yàn)十一抗心肌缺血藥物作用研究課件

1、教學(xué)培訓(xùn)_試驗(yàn)十一抗心肌缺血藥物作用研究課件試驗(yàn)十一、抗心肌缺血藥物作用研究 試驗(yàn)十一、抗心肌缺血藥物作用研究 一、目的了解抗心肌缺血新藥的評價原則。學(xué)習(xí)心肌缺血動物模型建立方法及評價指標(biāo)。觀察受試化合物對心肌缺血大鼠的影響，判斷其是否具有抗大鼠心肌失常的作用。 一、目的了解抗心肌缺血新藥的評價原則。教學(xué)培訓(xùn)_試驗(yàn)十一抗心肌缺血藥物作用研究課件二、與試驗(yàn)相關(guān)的理論知識要點(diǎn) 心肌缺血觀察指標(biāo)與方法 心肌缺血，是指心臟的血液灌注減少，導(dǎo)致心臟的供氧減少，心肌能量代謝不正常，不能支持心臟正常工作的一種病理狀態(tài)。（1）心電圖指標(biāo)觀察： 皮下放置心電圖肢體導(dǎo)聯(lián)電極，測標(biāo)準(zhǔn)導(dǎo)心電圖觀察藥物對S-T段、T波

2、幅度的影響。二、與試驗(yàn)相關(guān)的理論知識要點(diǎn) （2）形態(tài)學(xué)觀察：1.摘取心臟，用生理鹽水沖洗，除去血污，剔除血管脂肪等非心肌組織，用吸水紙吸去水分，稱全心濕重。2.沿冠狀溝切除右心房和右心室，留下室間隔和左心室，稱重。順房室溝從心尖到心基部平行將狗心室切成1cm厚的心肌片，用生理鹽水沖洗干凈。（2）形態(tài)學(xué)觀察：1.摘取心臟，用生理鹽水沖洗，除去血污，剔3.將心肌片放在1%的氯化三苯基四氮唑（TTC,用的配制）溶液中，在37溫孵7min染色,染色過程中不時攪拌染色液使之與心肌有充分接觸。4.染色后立即用生理鹽水沖洗多余的染料。 梗死區(qū)不著色，非梗死區(qū)被TTC染為紅色。5.剪去各心肌片被染色的非梗死區(qū)

3、心肌，把未染色的梗死心肌稱重，除以左心室重即得梗死范圍占左心室重的%。3.將心肌片放在1%的氯化三苯基四氮唑（TTC,用的配制）（3）酶學(xué)測定： 測定血液、心肌組織中的肌酸激酶（CK）、乳酸脫氫酶（LDH）、脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）等指標(biāo)反應(yīng)心肌缺血情況。（3）酶學(xué)測定：（4）心臟功能及血流動力學(xué)試驗(yàn) 觀測指標(biāo)應(yīng)包括冠脈流量，心輸出量、左室作功左室內(nèi)壓、左室舒張末期壓、左室內(nèi)壓最大變化速率、動脈血壓、外周阻力等，進(jìn)行連續(xù)動態(tài)觀測。（4）心臟功能及血流動力學(xué)試驗(yàn) 觀測指標(biāo)應(yīng)包括冠脈流量，（5）心肌耗氧量試驗(yàn) 心肌代謝、特別是氧的供需矛盾，是冠心病的重要病理生理變化

4、，而多數(shù)中藥常通過降低心肌耗氧量、改善心肌代謝而達(dá)到治療目的。因此，新藥對心肌耗氧量的影響，應(yīng)列為必做項(xiàng)目?？晒┻x擇的試驗(yàn)方法如下 1.直接測定：心肌耗氧量測定，心肌組織氧分壓 測定（可多部位、多層次測定），離體心臟、心肌片或心肌細(xì)胞耗氧量測定。 2.間接測定：張力時間指數(shù)，心肌耗氧指數(shù)，正性肌力作用。 3.耐缺氧試驗(yàn)：離體心臟或心肺灌流耐缺氧試驗(yàn)，心肌細(xì)胞培養(yǎng)耐缺氧試驗(yàn)及其他。 （5）心肌耗氧量試驗(yàn) 心肌代謝、特別是氧的供需矛盾，是冠心三、教學(xué)試驗(yàn)安排及內(nèi)容（一）教學(xué)分組 在一個教學(xué)單元內(nèi)，根據(jù)學(xué)生人數(shù)，將學(xué)生分為8組，每組25人，并分成上下兩班，4組/班。（二）試驗(yàn)方案全班均采用異丙腎上腺

5、素造模；上半班采用A受試物，建議受試物為丹參酮A磺酸鈉；下半班采用B受試物，建議受試物為丹參注射液。三、教學(xué)試驗(yàn)安排及內(nèi)容四、試驗(yàn)方法及步驟（一）試驗(yàn)材料試驗(yàn)藥品：烏拉坦（Urethane），生理鹽水配制成20%溶液； 0.5%異丙腎上腺素（Isoprenaline）；生理鹽水，5%葡萄糖注射液。陽性藥：0.2%維拉帕米。受試物：丹參酮A磺酸鈉，配制成1%、0.2%溶液； 丹參注射液，50%葡萄糖配制成含生藥 、0.3g%溶液。試驗(yàn)儀器：生物機(jī)能試驗(yàn)系統(tǒng)、紫外、動物秤、大鼠手術(shù)臺、眼科鑷、1ml、5ml注射器、4#、6#針頭。四、試驗(yàn)方法及步驟（一）試驗(yàn)材料（二）試驗(yàn)方法取大鼠，稱體重；腹腔注

6、射烏拉坦12g/kg（20%烏拉坦，56ml/kg）麻醉；仰臥位固定于手術(shù)臺上,針型電極插入大鼠皮下，打開生物機(jī)能試驗(yàn)系統(tǒng)，待心電圖穩(wěn)定后開始試驗(yàn)，先記錄一段正常的大鼠心電圖；分組及給藥方案如下：（二）試驗(yàn)方法上、下半班：第1組、第5組：靜脈注射生理鹽水1ml/kg；第2組、第6組：靜脈注射0.2%維拉帕米1ml/kg；第3組：靜脈注射0.2%丹參酮A磺酸鈉；第7組：靜脈注射丹參注射液1ml/kg，第4組：靜脈注射1%丹參酮A磺酸鈉；第8組：靜脈注射丹參注射液1ml/kg， 5min后，靜脈快速注射0.5%異丙腎上腺素溶液1ml/kg， 記錄大鼠心電圖。上、下半班：注射異丙腎上腺素后，以心電圖

7、出現(xiàn)S-T段改變或T波變化為缺血標(biāo)志。每次給完一種藥后，觀察并記錄正常、給Iso前和給Iso后1min、3min、5min、10min、15min、20min、30min和60min的T波和S-T段偏移。將試驗(yàn)結(jié)果記錄與表格中。注射異丙腎上腺素后，以心電圖出現(xiàn)S-T段改變或T波變化為缺血（三）試驗(yàn)結(jié)果的原始記錄 表1 受試化合物對大鼠T波幅度的影響（三）試驗(yàn)結(jié)果的原始記錄 表1 受試化合物對大鼠T波幅度的影表2 受試化合物對大鼠S-T波幅度的影響表2 受試化合物對大鼠S-T波幅度的影響表3 受試化合物對大鼠心率的影響 表3 受試化合物對大鼠心率的影響 （四）結(jié)果分析與討論綜合8個組的試驗(yàn)結(jié)果，

8、判斷受試物是否具有抗心肌缺血的作用 ；分析中藥單體與復(fù)方中藥在抗心肌缺血中的特點(diǎn)。（五）試驗(yàn)報告內(nèi)容及格式要求試驗(yàn)報告內(nèi)容及格式同前，試驗(yàn)題目由學(xué)生自定。（四）結(jié)果分析與討論綜合8個組的試驗(yàn)結(jié)果，判斷受試物是否具注意事項(xiàng)動物個體較小，固定大鼠時尤其兩前肢不宜過緊，以免影響呼吸；心電圖機(jī)的針型電極應(yīng)向心插入皮下，不可插入肌肉內(nèi)，以免肌電干擾，另外動物周圍不要放置金屬制品，以免干擾 。注意事項(xiàng)附：大鼠急性心肌缺血模型 （1）將動物注射20%烏拉坦（）麻醉后 固定在手術(shù)臺上（2）用筆型靜脈置留針進(jìn)行氣管插管(或切開氣管插管)，連接動物呼吸機(jī)，參數(shù)為：呼吸頻率85；呼吸比1：1；潮氣量為18ml。 附

9、：大鼠急性心肌缺血模型 （1）將動物注射20%烏拉坦（）剪開氣管插管 筆型靜脈置留針氣管插管 剪開氣管插管 筆型靜脈置留針氣管插管 （3）在胸部左側(cè)3-4肋間剪開皮膚（3）在胸部左側(cè)3-4肋間剪開皮膚 （4）分離肌肉露出肋骨 （4）分離肌肉露出肋骨 （5）在第三根肋骨下用止血鉗將肌肉分離開，然后左手用止血鉗挑住肋骨，右手持剪刀剪開第三根肋骨 （5）在第三根肋骨下用止血鉗將肌肉分離開，然后左手用止血鉗挑（6）用止血鉗將剪斷的肋骨夾住掰開，放入開瞼器，用止血鉗剝離心包膜 （6）用止血鉗將剪斷的肋骨夾住掰開，放入開瞼器，用止血鉗剝離（7）在左心耳與肺動脈圓錐間穿6-0號線，拉緊絲線，形成心肌缺血，觀

10、察線扎緊的部位上下大約2mm范圍的心肌發(fā)白。（7）在左心耳與肺動脈圓錐間穿6-0號線，拉緊絲線，形成心肌教學(xué)培訓(xùn)_試驗(yàn)十一抗心肌缺血藥物作用研究課件（8）結(jié)扎術(shù)后取下心臟進(jìn)行TTC染色 （8）結(jié)扎術(shù)后取下心臟進(jìn)行TTC染色 教學(xué)培訓(xùn)_試驗(yàn)十一抗心肌缺血藥物作用研究課件神經(jīng)系統(tǒng)X線診斷一、腦血管疾病的腦血管造影表現(xiàn) 神經(jīng)系統(tǒng)X線診斷一、腦血管疾病的腦血管造影表現(xiàn) 腦血管疾病包括腦血管瘤、腦血管畸形、腦血管狹窄及閉塞和腦血管意外等。 其中腦血管意外包括腦出血，蛛網(wǎng)膜下腔出血。而腦血管意外目前主要采用CT、MRI 診斷。 腦血管造影是介入治療的基礎(chǔ)。 腦血管疾病包括腦血管瘤、腦血管畸形、腦血管狹窄及

11、閉塞和腦腦動脈瘤 顱內(nèi)動脈瘤分為先天性和動脈硬化性兩類，以先天性多見，但在青少年期前很少見，是蛛網(wǎng)膜下腔出血原因之一。多發(fā)于顱底基底動脈環(huán)的血管分支處。腦動脈瘤 顱內(nèi)動脈瘤分為先天性和動脈硬化性兩類，以 病理： 動脈瘤多呈囊狀，瘤體可發(fā)展增大、破裂、出血、形成血腫、偶爾鈣化，血栓形成。 病理： 動脈瘤多呈囊狀，瘤體可發(fā)展增大、破裂、出血、 臨床： 無癥狀。 破裂出血時出現(xiàn)腦膜刺激癥狀，顱內(nèi)高壓，癲癇和顱神經(jīng)障礙等癥狀。 臨床： 無癥狀。 破裂出血時出現(xiàn)腦膜刺激癥狀，顱 造影表現(xiàn)： 可顯示動脈瘤本身及其位置，大小，形狀與腦血管的聯(lián)系和是否為多發(fā)性。 了解腦血循環(huán)情況。 還可用以判斷手術(shù)效果和隨診

12、現(xiàn)象。 造影表現(xiàn)： 可顯示動脈瘤本身及其位置，大小，形狀與 瘤體表現(xiàn)： 動脈瘤表現(xiàn)為基底動脈環(huán)分支處囊狀造影劑充填影。 較小、直徑多在cm以內(nèi)，有蒂與動脈相連，輪廓光滑，密度均勻。 瘤體表現(xiàn)： 動脈瘤表現(xiàn)為基底動脈環(huán)分支處囊狀造教學(xué)培訓(xùn)_試驗(yàn)十一抗心肌缺血藥物作用研究課件教學(xué)培訓(xùn)_試驗(yàn)十一抗心肌缺血藥物作用研究課件 出血征象： 直接征象： 表現(xiàn)是造影劑外溢，但不多見。 間接征象： 動脈瘤輪廓毛糙不平，瘤體不規(guī)則，有刺狀突起。 出血征象： 直接征象： 表現(xiàn)是造影劑外溢，但腦血管狹窄和閉塞 病因： 主要為血栓形成： 動脈硬化；引流靜脈靜脈竇 動靜脈同時出現(xiàn) 一般無占位改變。剪去各心肌片被染色的非梗

13、死區(qū)心肌，把未染色的梗死心肌稱重，除以左心室重即得梗死范圍占左心室重的%。病變多起自大腦的皮質(zhì)血管，特別是大腦前動脈大腦中動脈供血區(qū)，以中央溝附近為多見，多在皮質(zhì)表面。表2 受試化合物對大鼠S-T波幅度的影響心肌代謝、特別是氧的供需矛盾，是冠心病的重要病理生理變化，而多數(shù)中藥常通過降低心肌耗氧量、改善心肌代謝而達(dá)到治療目的。造影所見： 腫瘤造成蛛網(wǎng)膜下腔完全性或不完全性梗阻。完全梗阻者： 梗阻端造影劑形成橫貫椎管的大杯口或不規(guī)則邊緣。臨床： 突發(fā)偏癱、感覺障礙和失語等。椎管內(nèi)外占位性病變的線診斷第7組：靜脈注射丹參注射液1ml/kg，如瘤體完全為血栓占據(jù)，則不能顯示瘤體。血栓形成： 瘤內(nèi)充盈缺

14、損，也可呈網(wǎng)狀或密度不均。線平片：一般無陽性表現(xiàn)。造影表現(xiàn)： 可顯示動脈瘤本身及其位置，大小，形狀與腦血管的聯(lián)系和是否為多發(fā)性。腦血管狹窄和閉塞 病因： 主要為血栓形成： 動脈硬化； 占位改變： 造影上出現(xiàn)與瘤體大小不相稱的占位征象，提示有出血血腫存在。腦血管狹窄和閉塞 病因： 主要為血栓形成： 血栓形成： 瘤內(nèi)充盈缺損，也可呈網(wǎng)狀或密度不均。如瘤體完全為血栓占據(jù)，則不能顯示瘤體。 血栓形成： 瘤內(nèi)充盈缺損，也可呈網(wǎng)狀或密度不均。如介入治療介入治療 腦血管畸形 腦血管畸形又稱之先天性血管發(fā)育異?；蜓芰觥?病因：胚胎期血管叢形成動脈、靜脈和毛細(xì)血管的正常發(fā)育發(fā)生障礙，則引起本癥。 腦血管畸形

15、腦血管畸形又稱之先天性血管發(fā)育異?；?病理： 血管畸形是血管在生后仍維持胚胎期的狀態(tài)。 按血管結(jié)構(gòu)分為動脈、靜脈和動靜脈畸形幾種，以動靜脈畸形常見。 病理： 血管畸形是血管在生后仍維持胚胎期的狀態(tài)。 病理上是一支或幾支擴(kuò)張迂曲的動脈導(dǎo)入一團(tuán)發(fā)育異常的曲張血管，近似小動脈或毛細(xì)血管的血管團(tuán)，又借一支或幾支擴(kuò)張迂曲的靜脈從血管團(tuán)導(dǎo)出，進(jìn)入靜脈竇。 病變多起自大腦的皮質(zhì)血管，特別是大腦前動脈大腦中動脈供血區(qū)，以中央溝附近為多見，多在皮質(zhì)表面。 病理上是一支或幾支擴(kuò)張迂曲的動脈導(dǎo)入一團(tuán)發(fā)育異常的曲張血 臨床： 雖屬先天性病變，但青少年期少見。可無癥狀。 由于病變血管破裂出血，可突然發(fā)生偏癱、昏迷、嘔吐

16、?；蛘哂谐掷m(xù)性頭疼，局限性癲癇等。 臨床： 雖屬先天性病變，但青少年期少見。可無癥狀。 造影表現(xiàn)： 導(dǎo)入動脈 幾支擴(kuò)張迂曲的動脈，表現(xiàn)為排列不整的曲張或細(xì)小血管叢。 造影表現(xiàn)： 導(dǎo)入動脈 幾支擴(kuò)張迂曲的動脈，表現(xiàn)為 血管團(tuán) 血管粗，糾集松，狀如蚯蚓 邊緣清楚。 血管細(xì)，密集，狀如毛線團(tuán)邊緣欠清楚。 血管更細(xì)，分不清血管，表現(xiàn)為斑片狀，密度均勻 輪廓不清。 血管團(tuán) 血管粗，糾集松，狀如蚯蚓 邊緣清楚。教學(xué)培訓(xùn)_試驗(yàn)十一抗心肌缺血藥物作用研究課件 引流靜脈靜脈竇 動靜脈同時出現(xiàn) 一般無占位改變。 引流靜脈靜脈竇 動靜脈同時出現(xiàn) 一般教學(xué)培訓(xùn)_試驗(yàn)十一抗心肌缺血藥物作用研究課件教學(xué)培訓(xùn)_試驗(yàn)十一抗心

17、肌缺血藥物作用研究課件腦動靜脈瘺腦動靜脈瘺 腦血管狹窄和閉塞 病因： 主要為血栓形成： 動脈硬化； 動脈炎（感染性、非感染性）。 其次為栓子： 先天性心臟病 風(fēng)濕性心臟病 細(xì)菌性心內(nèi)膜炎 腦血管狹窄和閉塞 病因： 主要為血栓形成：病理： 好發(fā)于大腦中動脈和頸段頸內(nèi)動脈的狹窄和閉塞腦梗塞。臨床： 突發(fā)偏癱、感覺障礙和失語等。病理： 好發(fā)于大腦中動脈和頸段頸內(nèi)動脈的狹窄和閉塞 造影： 大腦中動脈、頸內(nèi)動脈頸段血管狹窄或中斷，側(cè)支循環(huán)形成，血流改道。 造影： 大腦中動脈、頸內(nèi)動脈頸段血管狹窄或中斷，側(cè) 直接征象： 血管狹窄、中斷呈筆尖狀。 直接征象： 血管狹窄、中斷呈筆尖狀。大腦前動脈閉塞大腦前動脈

18、閉塞 間接征象： 側(cè)支循環(huán) 基底動脈環(huán)之間（兩側(cè)大腦前交通支之間、前交通支與后交通支之間、椎動脈與頸動脈之間等） 大腦前、中、后動脈皮質(zhì)支末梢間交通 同側(cè)頸內(nèi)、外動脈之間交通。 間接征象： 側(cè)支循環(huán) 基底動脈環(huán)之間（兩側(cè) 血流改道： 頸內(nèi)動脈閉塞頸外動脈迂曲、擴(kuò)張 大腦中動脈閉塞大腦前動脈、后動脈擴(kuò)張、迂曲 血流改道： 頸內(nèi)動脈閉塞頸外動脈迂曲、擴(kuò)張 教學(xué)培訓(xùn)_試驗(yàn)十一抗心肌缺血藥物作用研究課件腦梗塞：CT MRI有特征性改變腦梗塞：CT MRI有特征性改變 二、椎管造影和正常表現(xiàn) 脊髓造影是將造影劑引人脊蛛網(wǎng)膜下腔中，通過改變患者體位，在透視下觀察其在椎管內(nèi)流動情況和形態(tài)，是椎管內(nèi)占位性病變

19、診斷的重要方法之一。 二、椎管造影和正常表現(xiàn) 脊髓造影是將造影劑引人脊 對比劑： 碘化油，碘苯脂（用量：3-5ml） 流動慢 非離子化有機(jī)碘造影劑如伊索顯、歐乃派克、碘必樂等（用量：10-15ml） 流動快 30分鐘即吸收 對比劑： 碘化油，碘苯脂（用量：3-5ml） 方法：上行性 下行性 體位：不斷改變體位達(dá)到顯影目的 正常造影表現(xiàn)： 造影劑在蛛網(wǎng)膜下腔流動通暢，分布均勻，可以襯托出脊髓、馬尾和神經(jīng)鞘袖輪廓。 方法：上行性 下行性 體位：不斷改變體位達(dá)到顯影目教學(xué)培訓(xùn)_試驗(yàn)十一抗心肌缺血藥物作用研究課件教學(xué)培訓(xùn)_試驗(yàn)十一抗心肌缺血藥物作用研究課件教學(xué)培訓(xùn)_試驗(yàn)十一抗心肌缺血藥物作用研究課件教

20、學(xué)培訓(xùn)_試驗(yàn)十一抗心肌缺血藥物作用研究課件教學(xué)培訓(xùn)_試驗(yàn)十一抗心肌缺血藥物作用研究課件 椎管內(nèi)外占位性病變的線診斷 椎管內(nèi)外占位性病變的線診斷 髓外硬膜內(nèi)占位性病變： 約占全部椎管腫瘤的70。大多數(shù)為良性病變，以神經(jīng)鞘瘤和神經(jīng)纖維瘤最多。常位于蛛網(wǎng)膜下腔。 髓外硬膜內(nèi)占位性病變： 約占全部椎管腫瘤的70 線平片：一般無陽性表現(xiàn)。 造影所見： 腫瘤造成蛛網(wǎng)膜下腔完全性或不完全性梗阻。 梗阻端呈杯口狀或帽樣征。 脊髓推向健側(cè)，健側(cè)梗阻端造影劑窄而尖，且低于病側(cè)。 線平片：一般無陽性表現(xiàn)。 造影所見： 腫教學(xué)培訓(xùn)_試驗(yàn)十一抗心肌缺血藥物作用研究課件教學(xué)培訓(xùn)_試驗(yàn)十一抗心肌缺血藥物作用研究課件教學(xué)培訓(xùn)

21、_試驗(yàn)十一抗心肌缺血藥物作用研究課件 2.髓外硬膜外占位性病變： 約占全部椎管腫瘤的15%。大多為惡性腫瘤，其中50%為轉(zhuǎn)移瘤。多位于椎管的后、側(cè)方。 2.髓外硬膜外占位性病變： 約占全部椎管腫瘤的15平片表現(xiàn)： 椎體和相鄰骨骼侵蝕性破壞或壓迫性萎縮。平片表現(xiàn)： 椎體和相鄰骨骼侵蝕性破壞或壓迫性萎縮。造影表現(xiàn)： 可顯示動脈瘤本身及其位置，大小，形狀與腦血管的聯(lián)系和是否為多發(fā)性。第1組、第5組：靜脈注射生理鹽水1ml/kg；造影所見： 腫瘤造成蛛網(wǎng)膜下腔完全性或不完全性梗阻。三、教學(xué)試驗(yàn)安排及內(nèi)容多位于椎管的后、側(cè)方。間接征象： 動脈瘤輪廓毛糙不平，瘤體不規(guī)則，有刺狀突起。腦梗塞：CT MRI有

22、特征性改變第7組：靜脈注射丹參注射液1ml/kg，學(xué)習(xí)心肌缺血動物模型建立方法及評價指標(biāo)。如瘤體完全為血栓占據(jù)，則不能顯示瘤體。注射異丙腎上腺素后，以心電圖出現(xiàn)S-T段改變或T波變化為缺血標(biāo)志。對比劑： 碘化油，碘苯脂（用量：3-5ml） 流動慢 非離子化有機(jī)碘造影劑如伊索顯、歐乃派克、碘必樂等（用量：10-15ml） 流動快 30分鐘即吸收神經(jīng)鞘袖受壓、中斷。造影所見： 腫瘤造成蛛網(wǎng)膜下腔完全性或不完全性梗阻?；蛘哂谐掷m(xù)性頭疼，局限性癲癇等。心電圖機(jī)的針型電極應(yīng)向心插入皮下，不可插入肌肉內(nèi)，以免肌電干擾，另外動物周圍不要放置金屬制品，以免干擾 。而腦血管意外目前主要采用CT、MRI 診斷。髓內(nèi)占位性病變 占椎管內(nèi)腫瘤15%。 造影所見： 1.病側(cè)蛛網(wǎng)膜下腔造影劑于同側(cè)椎管距離增大（大于2-3mm）。 2