齊魯醫(yī)學(xué)臨床免疫學(xué)和免疫檢驗

1、 緒論陶 義 訓(xùn)臨床免疫學(xué)和免疫檢驗2021/9/30全國高等醫(yī)藥院校教材（供醫(yī)學(xué)檢驗專業(yè)用）臨床免疫學(xué)和免疫檢驗 第3版 2003免疫學(xué)和免疫學(xué)檢驗 第1版 1989 第2版 19972021/9/30醫(yī)學(xué)檢驗Medical Laboratory檢驗醫(yī)學(xué) Laboratory Medicine2021/9/30檢驗項目的發(fā)展對臨床有重要的意義 診斷 治療 預(yù)后 預(yù)防2021/9/30診斷 感染性疾病 HIV感染， HBV, HCV感染 SARS，禽流感 心血管疾病 急性心肌梗死 肌鈣蛋白 肌紅蛋白 CK-MB 心衰 BNP2021/9/30治療 預(yù)后 腫瘤標(biāo)志 C-反應(yīng)蛋白和炎癥2021/9

2、/30 CA 19-9（Cancer Antigen19-9,Carbohydrate Antigen 19-9） 0 2 4 6 8 10 101001,00010,000腫瘤進展穩(wěn)定狀態(tài)腫瘤緩解CA 19-9U/mlRx: 5 FU+MTX 5 FU+BCNU Mitomycin C化療中CA 19-9的監(jiān)控月份2021/9/30CRP 炎癥-抗生素治療2021/9/30預(yù)防（風(fēng)險因子）2021/9/30高敏C-反應(yīng)蛋白hs-CRP 初級風(fēng)險預(yù)測（高血脂，高血壓，糖尿病，吸煙史）心血管疾病風(fēng)險預(yù)測2021/9/30心梗風(fēng)險指標(biāo)PM Ridker, N Engl J Med 20002021

3、/9/30免疫檢驗免疫檢驗技術(shù)免疫檢驗的臨床應(yīng)用2021/9/30免疫檢驗技術(shù)細胞免疫檢驗技術(shù) 免疫細胞的檢測 細胞因子的測定體液免疫檢驗技術(shù) 抗原、抗體、補體的測定 免疫測定2021/9/30免疫測定IMMUNOASSAY( IA)抗原抗體 抗原抗體復(fù)合物 Ag Ab Ag-Ab 2021/9/30免疫測定分類 免疫濁度測定 Ag + Ab AgAb + Ab 標(biāo)記免疫測定 Ag + Ab* Ag Ab* + Ab* （B） （F）2021/9/30免疫測定分類 均相免疫測定 HOMOGENOUS IA 在測定中結(jié)合的反應(yīng)物(B)與游離的反應(yīng)物(F) 不需要分離 異相免疫測定 HETEROG

4、ENOUS IA 在測定中需要分離(B)和(F)2021/9/30免疫測定的敏感度 免疫濁度測定 gng 標(biāo)記免疫測定 ngpg2021/9/30 標(biāo)記免疫測定 放射免疫測定 1960 酶免疫測定 1970 熒光免疫測定 19801990 化學(xué)發(fā)光免疫測定 1990 膜固相免疫測定 1990 2021/9/30可測定項目 均相免疫測定-1-酸性糖蛋白-1-抗胰蛋白酶白蛋白（投射比濁）載脂蛋白A1載脂蛋白B抗O補體C3c補體C4銅藍蛋白C反應(yīng)蛋白鐵蛋白觸珠蛋白糖化血紅蛋白免疫球蛋白A免疫球蛋白G免疫球蛋白MKappa輕鏈Lambda輕鏈脂蛋白a肌紅蛋白前白蛋白類風(fēng)濕因子可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體轉(zhuǎn)鐵蛋白

5、對乙酰氨基酚氨甲酰氮卓地高辛洋地黃毒苷慶大霉素苯巴比妥苯妥因普魯卡因水楊酸鹽茶堿妥布拉霉素丙戊酸特定蛋白治療藥物監(jiān)控濫用藥物乏碳水化合物轉(zhuǎn)鐵蛋白苯丙胺巴比妥酸鹽苯二氮大麻可卡因乙醇美沙酮鴉片苯環(huán)利啶右丙氧芬2021/9/30可測定項目 異相免疫測定（一）乙型肝炎表面抗原乙型肝炎表面抗體乙型肝炎e抗原乙型肝炎核心抗體乙型肝炎核心抗體IgM甲型肝炎抗體甲型肝炎抗體IgM丙型肝炎抗體HIVcombi甲胎蛋白癌胚抗原總前列腺特異性抗原游離前列腺特異性抗原糖類抗原125糖類抗原15-3糖類抗原19-9糖類抗原72-4神經(jīng)元特異烯醇化酶細胞角蛋白片斷21-1傳染病腫瘤標(biāo)志物貧血鐵蛋白維生素B12血清葉酸紅

6、細胞葉酸骨質(zhì)疏松甲狀旁腺激素骨鈣素-膠原特殊序列25-(OH)2VitD2021/9/30可測定項目 異相免疫測定（二）促甲狀腺激素三碘甲腺原氨酸甲狀腺素游離甲狀腺素游離三碘甲腺原氨酸甲狀腺球蛋白抗甲狀腺球蛋白抗甲狀腺微粒體抗體甲狀腺吸收率肌鈣蛋白T肌酸激酶同工酶肌紅蛋白腦鈉素前體地高辛洋地黃毒苷甲狀腺心梗標(biāo)志糖尿病及其他胰島素免疫球蛋白E2021/9/30檢驗技術(shù)的進展 自動化 簡便化2021/9/30自動化分析 提高工作效率 提高精密度（CV%） 手工操作誤差 分析儀系統(tǒng)誤差2021/9/30自動分析系統(tǒng) 自動分析儀 配套的測定試劑 配套的校準(zhǔn)品2021/9/30檢測系統(tǒng)校準(zhǔn)品試劑儀器檢測

7、方法2021/9/30自動分析系統(tǒng)（ 儀 器 + 試 劑 ）校準(zhǔn)品2021/9/30生化自動分析系統(tǒng)生化測定分析物 試劑產(chǎn)物吸光度（化合物）（化合物）化學(xué)反應(yīng)溫度、時間（化合物）分光光度計波長(nm)(A)2021/9/30免疫自動分析系統(tǒng)免疫測定分析物 試劑產(chǎn)物（抗原）（抗體）化學(xué)反應(yīng)溫度、時間（抗原抗體復(fù)合物）均相免疫測定異相免疫測定2021/9/30免疫自動分析系統(tǒng)均相免疫測定（B，F(xiàn)不需分離）直接在生化自動分析儀中測定異相免疫測定（B，F(xiàn)需分離）Ag + Ab* AgAb* + Ab* (B) (F)分析儀中需加入B,F分離裝置免疫濁度測定均相酶免疫測定2021/9/30血清標(biāo)本可測定

8、的項目生化測定 標(biāo)記免疫測定 均相免疫測定肝功能甲狀腺功能 特定蛋白 藥物腎功能激素 免疫功能 鎮(zhèn)靜劑心血管疾病腫瘤標(biāo)志 心血管疾病 抗生素糖尿病心肌標(biāo)志 炎癥 心血管病藥電解質(zhì) 感染性疾病 營養(yǎng)監(jiān)測 毒品50項 50項 50項2021/9/30 模塊式自動分析儀 Modular 同類型的模塊可以整合在一起測定 生化模塊 P800 D2400 電解質(zhì)模塊 ISE900/1800 標(biāo)記免疫模塊 E170 2021/9/302 Core Unit 核心模塊 1 Control Unit 操作單位血清工作區(qū)Serum Work Area (SWA)生化，免疫聯(lián)合自動分析系統(tǒng)3ISE 900/1800

9、 module:電解質(zhì)測定模塊4D 2400 module: 生化測定模塊5P 800 module: 生化測定模塊6E170 module: 免疫測定模塊45232612021/9/30簡 便 化 簡便快速 單份測定 儀器小巧 試劑穩(wěn)定2021/9/30POCT檢驗醫(yī)學(xué)的新領(lǐng)域2021/9/30POCT名詞解釋 Point-of-care testing point 時間、地點 care 保健 testing 檢驗2021/9/30與POCT相關(guān)的名詞 醫(yī)師診所檢驗 家用檢驗 檢驗科外的檢驗 分散檢驗 床邊檢驗 病人身邊檢驗 就地檢驗 即時檢驗2021/9/30POCT與中央檢驗 在醫(yī)院檢驗

10、科集中進行的檢驗稱為中央檢驗（centralized testing）2021/9/30病人醫(yī)生結(jié)果解釋（11）（1）填寫檢驗申請傳送報告單（10）填寫檢驗報告單（9）（3）送至檢驗科（2）采取標(biāo)本確認(rèn)結(jié)果（8）（4）登記檢驗申請質(zhì)控檢查（7）（5）標(biāo)本準(zhǔn)備（6）分析標(biāo)本和質(zhì)控品中央檢驗工作環(huán)節(jié)2021/9/30檢驗周轉(zhuǎn)期 從采取標(biāo)本到送出檢驗報告所花的時間稱為檢驗周轉(zhuǎn)期（turnaround time，TAT）2021/9/30醫(yī)院內(nèi)和醫(yī)院外的POCT2021/9/30醫(yī)院內(nèi)的POCT 急診檢驗室 門診檢驗室 分科門診POCT 手術(shù)室POCT 監(jiān)護病房POCT 小兒科POCT 特殊病人的床邊

11、POCT2021/9/30醫(yī)院外的POCT 醫(yī)師診所 醫(yī)務(wù)室 救護車上 事故現(xiàn)場 出入境檢驗 家庭2021/9/30POCT技術(shù) 簡便快速 單份測定 儀器小巧 試劑穩(wěn)定2021/9/30金標(biāo)記膜固相免疫測定2021/9/30固相免疫測定(B)和(F)的分離（ELISA）AbAg +Ab*AbAgAb*Ab* Ab*2021/9/30膜固相免疫測定（Membrane based immunoassay）以微孔膜（硝酸纖維素膜）為固相以有色微粒（紅色的膠體金）為標(biāo)記物簡便快速測定2021/9/30固相微孔膜 硝酸纖維素膜 孔徑：0.20.6 m2021/9/302021/9/30硝酸纖維素膜與聚苯

12、乙烯微孔板的比較膜板對蛋白質(zhì)的吸附強弱表面積大（微孔）?。ㄆ矫妫┪阅芪晃礈爝^濾，移行沖洗2021/9/30膠體金標(biāo)記2021/9/30膠體金（Colloidal Gold）1560 nm優(yōu) 質(zhì)劣 質(zhì)2021/9/30膠體金結(jié)合物CONJUGATE2021/9/30膠體金結(jié)合物（Conjugate）2021/9/30膜固相免疫測定分類 免疫滲濾測定（IMMUNOFILTRATION ASSAY，IFA） 免疫層析測定（IMMUNOCHROMATOGRAPHIC ASSAY，ICA）2021/9/30IFA 穿流（FLOW TROUGH）ICA 橫流（LATERAL FLOW）2021/9/30免疫層析測定ICA2021/9/302021/9/30ICA 試劑條結(jié)構(gòu)示意圖樣品墊結(jié)合物墊NC膜吸水墊2021/9/30ICA 雙抗體夾心法測抗原2021/9/30ICA 間接法測抗體2021/9/30ICA 結(jié)果觀察陽性陰性無效2021/9/30膜固相免疫測定的特點優(yōu)點不足之處簡便，快速