金銀花的鑒別及含量測(cè)定

1、金銀花金銀花是忍冬科的植物忍冬LonicerajaponicaThunb.的干燥花蕾或帶初開的花。忍冬是一種中藥，它的使用歷史較為悠久，很早以前就被用來(lái)治病。金銀花作為38種常用的中藥材之一，具有清熱解毒、涼散風(fēng)熱的功效，被廣泛使用到醫(yī)療中。金銀花的主要成分有綠原酸、異綠原酸、黃酮類化合物、芳樟醇和雙花醇等，對(duì)于腫瘤、病菌、病毒等有很好的抵抗作用。忍冬半常綠藤本；幼枝暗紅褐色，密被黃褐色、開展的硬直糙毛、腺毛和短柔毛，下部常無(wú)毛。葉紙質(zhì)，卵形至矩圓狀卵形，有時(shí)卵狀披針形，稀圓卵形或倒卵形，極少有1至數(shù)個(gè)鈍缺刻，長(zhǎng)35(9.5)厘米，頂端尖或漸尖，少有鈍、圓或微凹缺，基部圓或近心形，有糙緣毛，上

2、面深綠色，下面淡綠色，小枝上部葉通常兩面均密被短糙毛，下部葉常平滑無(wú)毛而下面多少帶青灰色；葉柄長(zhǎng)48毫米，密被短柔毛。總花梗通常單生于小枝上部葉腋，與葉柄等長(zhǎng)或稍較短，下方者則長(zhǎng)達(dá)24厘米，密被短柔后，并夾雜腺毛；苞片大，葉狀，卵形至橢圓形，長(zhǎng)達(dá)23厘米，兩面均有短柔毛或有時(shí)近無(wú)毛；小苞片頂端圓形或截形，長(zhǎng)約1毫米，為萼筒的1/24/5,有短糙毛和腺毛；萼筒長(zhǎng)約2毫米，無(wú)毛，萼齒卵狀三角形或長(zhǎng)三角形，頂端尖而有長(zhǎng)毛，外面和邊緣都有密毛；花冠白色，有時(shí)基部向陽(yáng)面呈微紅，后變黃色，長(zhǎng)(2)34.5(6)厘米，唇形，筒稍長(zhǎng)于唇瓣，很少近等長(zhǎng)，外被多少倒生的開展或半開展糙毛和長(zhǎng)腺毛，上唇裂片頂端鈍形，

3、下唇帶狀而反曲；雄蕊和花柱均高出花冠。果實(shí)圓形，直徑67毫米，熟時(shí)藍(lán)黑色，有光澤；種子卵圓形或橢圓形，褐色，長(zhǎng)約3毫米，中部有1凸起的脊，兩側(cè)有淺的橫溝紋?；ㄆ?6月(秋季亦常開花)，果熟期1011月。華南忍冬半常綠藤本；幼枝、葉柄、總花梗、苞片、小苞片和萼筒均密被灰黃色卷曲短柔毛，并疏生微腺毛；小枝淡紅褐色或近褐色。葉紙質(zhì)，卵形至卵狀矩圓形，長(zhǎng)36(7)厘米，頂端尖或稍鈍而具小短尖頭，基部圓形、截形或帶心形，幼時(shí)兩面有短糙毛，老時(shí)上面變無(wú)毛；葉柄長(zhǎng)510毫米?；ㄓ邢阄叮p花腋生或于小枝或側(cè)生短枝頂集合成具24節(jié)的短總狀花序，有明顯的總苞葉；總花梗長(zhǎng)28毫米；苞片披針形，長(zhǎng)12毫米；小苞片圓卵

4、形或卵形，長(zhǎng)約1毫米，頂端鈍，有緣毛；萼筒長(zhǎng)1.52毫米，被短糙毛；萼齒披針形或卵狀三角形，長(zhǎng)1毫米，外密被短柔毛；花冠白色，后變黃色，長(zhǎng)3.25厘米，唇形，筒直或有時(shí)稍彎曲，外面被多少開展的倒糙毛和長(zhǎng)、短兩種腺毛，內(nèi)面有柔毛，唇瓣略短于筒；雄蕊和花柱均伸出，比唇瓣稍長(zhǎng)，花絲無(wú)毛。果實(shí)黑色，橢圓形或近圓形，長(zhǎng)610毫米?；ㄆ?5月，有時(shí)910月開第二次花，果熟期10月。菰腺忍冬落葉藤本；幼枝、葉柄、葉下面和上面中脈及總花梗均密被上端彎曲的淡黃褐色短柔毛，有時(shí)還有糙毛。葉紙質(zhì)，卵形至卵狀矩圓形，長(zhǎng)69(11.5)厘米，頂端漸尖或尖，基部近圓形或帶心形，下面有時(shí)粉綠色，有無(wú)柄或具極短柄的黃色至桔紅

5、色蘑菇形腺；葉柄長(zhǎng)512毫米。雙花單生至多朵集生于側(cè)生短枝上，或于小枝頂集合成總狀，總花梗比葉柄短或有時(shí)較長(zhǎng)；苞片條狀披針形，與萼筒幾等長(zhǎng)，外面有短糙毛和緣毛；小苞片圓卵形或卵形，頂端鈍，很少卵狀披針形而頂析尖，長(zhǎng)約為萼筒的1/3,有緣毛；萼筒無(wú)毛或有時(shí)略有毛，萼齒三角狀披針形，長(zhǎng)為筒的1/22/3,有緣毛；花冠白色，有時(shí)有淡紅暈，后變黃色，長(zhǎng)3.54厘米，唇形，筒比唇瓣稍長(zhǎng)，外面疏生倒微伏毛，并常具無(wú)柄或有短柄的腺；雄蕊與花柱均稍伸出，無(wú)毛。果實(shí)熟時(shí)黑色，近圓形，有時(shí)具白粉，直徑約78毫米；種子淡黑褐色，橢圓形，中部有凹槽及脊?fàn)钔蛊?，兩?cè)有橫溝紋，長(zhǎng)約4毫米。花期45(6)月，果熟期1011

6、月。黃褐毛忍冬藤本；幼枝、葉柄、葉下面、總花梗、苞片、小苞片和萼齒均密被開展或彎伏的黃褐色氈毛狀糙毛，幼枝和葉兩面還散生桔紅色短腺毛。冬芽約具4對(duì)鱗片。葉紙質(zhì)，卵狀矩圓形至矩圓狀披針形，長(zhǎng)38(11)厘米，頂端漸尖，基部圓形、淺心形或近截形，上面疏生短糙伏毛，中脈毛較密；葉柄長(zhǎng)57毫米。雙花排列成腋生或頂生的短總狀花序，花序梗長(zhǎng)達(dá)1厘米；總花梗長(zhǎng)約2毫米，下托以小形葉1對(duì)；苞片鉆形，長(zhǎng)57毫米；小苞片卵形至條狀披針形，長(zhǎng)為萼筒的1/2至略較長(zhǎng)；萼筒倒卵狀橢圓形，長(zhǎng)約2毫米，無(wú)毛，萼齒條狀披針形，長(zhǎng)23毫米；花冠先白色后變黃色，長(zhǎng)33.5厘米，唇形，筒略短于唇瓣，外面密被黃褐色倒伏毛和開展的短腺

7、毛，上唇裂片長(zhǎng)圓形，長(zhǎng)約8毫米，下唇長(zhǎng)約1.8厘米；雄蕊和花柱均高出花冠，無(wú)毛；柱頭近圓形，直徑約1毫米。果實(shí)不詳?；ㄆ?7月。(1)本品粉末淺黃棕色或黃綠色。腺毛較多，頭部倒圓錐形、類圓形或略扁圓形，433細(xì)胞，排成24層，直徑3064108，柄部15細(xì)胞，長(zhǎng)可達(dá)700。非腺毛有兩種：一種為厚壁非腺毛，單細(xì)胞，長(zhǎng)可達(dá)900,表面有微細(xì)疣狀或泡狀突起，有的具螺紋；另一種為薄壁非腺毛，單細(xì)胞，甚長(zhǎng)，彎曲或皺縮，表面有微細(xì)疣狀突起。草酸鈣簇晶直徑645m。花粉粒類圓形或三角形，表面具細(xì)密短刺及細(xì)顆粒狀雕紋，具3孔溝。（2）取本品粉末0.2g,加甲醇5ml,放置12小時(shí)，濾過，取濾液作為供試品溶液。

8、另取綠原酸對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法（通則0502）試驗(yàn)，吸取供試品溶液10201、對(duì)照品溶液101,分別點(diǎn)于同一硅膠H薄層板上，以乙酸丁酯-甲酸-水（7:2.5:2.5）的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)?！咎卣鲌D譜】照高效液相色譜法（通則0512）測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)除檢測(cè)波長(zhǎng)為240nm外，其他同含量測(cè)定酚酸類項(xiàng)下。參照物溶液的制備取綠原酸對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含0.40mg的溶液，即得。供試品溶液的制備同含量測(cè)定酚酸類

9、項(xiàng)下。測(cè)定法分別精密吸取參照物溶液與供試品溶液各21,注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。供試品特征圖譜中應(yīng)呈現(xiàn)7個(gè)特征峰，與參照物峰相應(yīng)的峰為S峰，計(jì)算各特征峰與S峰的相對(duì)保留時(shí)間，應(yīng)在規(guī)定值的10%之內(nèi)，保留時(shí)間規(guī)定值為：0.91（峰1）、1.00峰2（S）、1.17（峰3）、138（峰4）、2.43（峰5）、281（峰6）、293（峰7）。綠原酸（Ota額ncaid），就是3咖啡?？鼘幩?，又被稱為咖啡鞣酸，是由奎寧酸（Quinicacid）與咖啡酸（Cficacid）結(jié)合而形成的帶有酯鍵的羥酚酸,它是由植物體在有氧呼吸的過程中經(jīng)過莽草酸這一途徑產(chǎn)生的一種苯丙素類的化合物。綠原酸的生物活性比較廣泛

10、,目前的科學(xué)水平對(duì)于綠原酸生物活性的研究已深入到保健、食品、日用化工和醫(yī)藥等多個(gè)領(lǐng)域中。綠原酸作為植物的一種次生代謝物,具有抗菌消炎、抗病毒、清除自由基、降糖、降血脂、保肝利膽等多種功效。綠原酸的提取方法對(duì)于提取綠原酸的方法，常用的有很多種，不過大體上可以分為以下幾種：水提法、醇提法、超聲波法和微波-超聲輔助法等。水提法水提法：之所以可以用水來(lái)提取綠原酸，顧名思義，原理是因?yàn)榫G原酸可以溶于水的特性，使用水作為溶劑，來(lái)提取植物中的綠原酸。陳嬡等考察了在常溫條件下使用水提法浸提山銀花中綠原酸的提取效果，在單個(gè)因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，選取提取時(shí)間、料液比、溶劑PH為自變量，通過正交試驗(yàn)的方法優(yōu)化該工藝條件

11、，最終研究表明了最佳的提取條件是提取溶劑的PH為10、提取的時(shí)間為1個(gè)小時(shí)、料液比為1:30(g/mL)。醇提法醇提法的原理是根據(jù)了綠原酸屬于極性較強(qiáng)的有機(jī)酸，比較易溶于甲醇、乙醇、丙酮等極性有機(jī)溶劑的特性，進(jìn)而來(lái)提取植物中的綠原酸。梁丹等將綠原酸的提取量作為工藝指標(biāo),使用不同濃度的乙醇作為提取溶劑，以回流的時(shí)間、乙醇的濃度和溶劑使用量作為考察的因素,采用星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面優(yōu)化法優(yōu)選提取的工藝條件,并對(duì)其結(jié)果進(jìn)行預(yù)測(cè)分析.最終結(jié)果表明了最優(yōu)的提取工藝條件是在乙醇的濃度為65%、提取的時(shí)間為120分鐘、溶劑的使用量為12倍時(shí)，綠原酸的提取量達(dá)到最高值。超聲波法超聲波提取綠原酸法是利用超聲波的熱效應(yīng)

12、、機(jī)械效應(yīng)和空化作用等能夠加速胞內(nèi)物質(zhì)的釋放和擴(kuò)散進(jìn)而來(lái)提高綠原酸的提取率的一種提取方法。劉玉民等通過單一因素實(shí)驗(yàn)研究了固液比、超聲波功率、提取時(shí)間、超聲波頻率這四個(gè)主要因素對(duì)綠原酸提取率的影響。在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上采用L9(34)正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化山銀花中綠原酸的提取工藝的條件。最終的結(jié)果表明：在室溫下,使用的提取溶劑為體積分?jǐn)?shù)為50%的乙醇溶液,超聲波輔助提取山銀花中綠原酸的最佳提取工藝條件為使用超聲波提取時(shí)間為50分鐘、固液比為1:50（g/mL）、超聲波的功率為300W、超聲波的頻率為59kHz。微波-超聲輔助法微波-超聲輔助法是利用微波和超聲各自不同的特點(diǎn)來(lái)加快目標(biāo)物質(zhì)的溶出，從而能夠達(dá)到

13、更好的提取效果的一種提取方法。肖卓炳等以綠原酸的提取率作為考察的對(duì)象,研究了不同超聲溫度、不同的乙醇體積分?jǐn)?shù)、料液比、微波功率和輻射時(shí)間等因素對(duì)于金銀花中綠原酸的提取率的影響。最終的結(jié)果表明：采用超聲波法和微波法兩種方法輔助提取技術(shù)得到的綠原酸提取率與單獨(dú)采用超聲波或者是單獨(dú)使用微波輔助法得到的綠原酸提取率都高，由此可見兩種方法共同使用對(duì)于綠原酸的提取效果更佳。以體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇溶液為溶劑、料液比為1：15（g/mL）、超聲溫度設(shè)置為50，超聲處理30分鐘、再使用微波法，微波的功率為400W、微波的時(shí)間為5分鐘，得到的綠原酸提取率最高。關(guān)海寧等7考察了不同的微波時(shí)間、不同的乙醇體積分?jǐn)?shù)、

14、料液比、超聲功率、超聲溫度、超聲時(shí)間等因素，以綠原酸的提取率作為工藝的指標(biāo)，研究不同的變量之間交互作用對(duì)綠原酸提取率的影響。最終的結(jié)果表明：稻殼中綠原酸的最佳提取工藝條件為微波的時(shí)間為34S、乙醇的體積分?jǐn)?shù)為52%、料液比（w/v）為1:22、超聲的功率為160W、超聲的溫度為80、超聲的時(shí)間為20min，在此種條件下綠原酸的提取率可以達(dá)到3.94%?！竞繙y(cè)定】酚酸類照高效液相色譜法（通則0512）測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng)相A，0.1%磷酸溶液為流動(dòng)相B，按下表中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫；柱溫不高于25；流速為每分鐘0.7ml，檢測(cè)波長(zhǎng)為327nm

15、。理論板數(shù)按綠原酸峰計(jì)算應(yīng)不低于10000。富鼬相A（海幀前用BC留“TlE4“741S*3JKJ鈿34-3531-SO*109030對(duì)照品溶液的制備取綠原酸對(duì)照品、3,5-二-O-咖啡酰奎寧酸對(duì)照品和4,5-二-O-咖啡?？鼘幩釋?duì)照品適量，精密稱定，置棕色量瓶中，加75%甲醇制成每1ml含0.28mg、0.15mg、44g的溶液，即得。供試品溶液的制備取本品粉末（過四號(hào)篩）約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75%甲醇50ml，稱定重量，超聲處理（功率500W，頻率40kHz）30分鐘，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照

16、品溶液與供試品溶液各21，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。本品按干燥品計(jì)算，含綠原酸（C16Hl809）不得少于1.5%，含酚酸類以綠原酸（C16Hl809）、3,5-二-O-咖啡?？鼘幩幔–25H24012）和4,5-二-O-咖啡酰奎寧酸（C25H24O12）的總量計(jì)，不得少于3.8%。照高效液相色譜法（通則0512）測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用苯基硅烷鍵合硅膠為填充劑（AgilentZORBAXSB-phenyl4.6mmx250mm，5m），以乙腈為流動(dòng)相A，以0.5%冰醋酸溶液為流動(dòng)相B，按下表中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫；檢測(cè)波長(zhǎng)為350nm。理論板數(shù)按木犀草苷峰計(jì)算應(yīng)不低于20000。時(shí)同

17、t*仲，海同相A（乂17力對(duì)照品溶液的制備取木犀草苷對(duì)照品適量，精密稱定，加70%乙醇制成每1ml含40g的溶液，即得。供試品溶液的制備取本品粉末（過四號(hào)篩）約2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中,精密加入70%乙醇50ml,稱定重量，超聲處理（功率250W,頻率35kHz）1小時(shí)，放冷，再稱定重量，用70%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液10ml,回收溶劑至干，殘?jiān)?0%乙醇溶解，轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加70%乙醇至刻度，即得。測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各101,注入液相色譜儀，測(cè)定,即得。本品按干燥品計(jì)算，含木犀草苷（C21H2。）不得少于0.050%。相關(guān)配伍1、治

18、太陰溫病初起，邪在肺衛(wèi)，但發(fā)熱而不惡寒，且口渴者，連翹一兩，銀花一兩，苦桔梗六錢，薄荷六錢，竹葉四錢，生甘草五錢，芥穗四錢，淡豆豉五錢，牛蒡子六錢。上杵為散，每服六錢，鮮葦根湯煎服。（溫病條辨銀翹散）2、治太陰暑溫，汗后余邪未盡，頭感微脹，視物不清，鮮荷葉邊二錢，鮮銀花二錢，西瓜翠衣二錢，鮮扁豆花一枝，絲瓜皮二錢，鮮竹葉心二錢。上藥用水二杯，煮取一杯，一日二次分服。（溫病條辨清絡(luò)飲）3、治發(fā)背，惡瘡，托里，止痛，排膿，金銀花四兩，甘草一兩（炒）。上為粗末，每服四錢，水、酒各一盞，煎至一盞，去渣，稍熱服之。（衛(wèi)生寶鑒）4、治瘡瘍痛甚，色紫變黑者，金銀花連枝、葉（銼）二兩，黃芪四兩，甘草一兩。上細(xì)切，用酒一升，同入壺瓶?jī)?nèi)閉口，重湯內(nèi)煮三二時(shí)辰，取出去滓，頓服。（活法機(jī)要回瘡金銀花散）炮制采集加工移栽后34年開花，開花時(shí)間集中，應(yīng)及時(shí)分批采摘，一般在5月中、下旬采第一次花，6月中、下旬采第二次花。當(dāng)花蕾上部膨大、由綠變白、尚未開放時(shí)采收最適宜。金銀花采后應(yīng)立即晾干或烘干，防止?jié)a花發(fā)霉變質(zhì)。晾干時(shí)不宜任意翻動(dòng)，以防花發(fā)黑。烘干溫度應(yīng)控制，初烘3035,2h后升至40,烘510h,而后控制室溫保持4550烘10h后，升溫