微生物學實驗理論及思考題

1、實驗一 顯微的使用微生物大小定的方二、基本原理現(xiàn)代普通光學顯微鏡利用目鏡和物鏡兩組透鏡系統(tǒng)來放大成像們由機 械裝置和光學系統(tǒng)兩大部分組成物鏡的性能最為關鍵它直接影響著顯微鏡的 分辨率。其中油鏡的放大倍數(shù)最大，對微生物學最為重要。微生物細胞的大小是微生物基本的形態(tài)特征也是分類鑒定的依據(jù)之一微生物 大小的測定需要在顯微鏡下借助于特殊的測量工具測微尺包括目鏡測微 尺和鏡臺測微尺。其中鏡臺測微尺并不直接用來測量細胞大小 ，而是用于校正 目鏡測微尺每格的相對長度鏡測微尺每小格所代表的實際長度因顯微鏡的不 同放大倍數(shù)而異因此用目鏡測微尺測量微生物大小時必須先用鏡臺測微尺進 行校正以求出該顯微鏡在一定放大倍

2、數(shù)下目鏡測微尺每小格所代表的相對長 度，然后根據(jù)微生物細胞相當于目鏡測微格數(shù)，即可計算出細胞的實際大小兩重合線間鏡臺測微尺格數(shù)目鏡測微尺每格長度=兩重合線間目鏡測微尺格數(shù)思考題1、用油鏡觀察時應注意哪些問題？在載玻片和鏡頭之間加滴什么油？起什么作 用？答（1）應先用摖鏡紙將鏡頭摖干凈，以防止實驗的污染。使用油鏡時，應先用 低倍鏡再用高倍鏡，然后再是油鏡，用完之后也要用摖鏡紙將油鏡摖掉。（2）滴加香柏油（3）作用是增加折射率，即增加了顯微鏡的分辨率，油的折射率和分辨率成 反比，同時與波長成正比。2、影響顯微鏡分辨率的因素有哪些？答顯微鏡的分辨率指顯微鏡能辨別兩點之間的最小距離的能力最小分辨距離

3、越小分辨率越高最小可分辨率距離2NA 且 NA=n.sin,所以分辨率由物 鏡的 NA 值與照明光源的波長兩個因素決定，當然還有介質的折射率。3、為什么要換不同放大倍數(shù)的目鏡或物鏡時，必須用鏡臺測微尺重新對目鏡測 微尺進行校正？答不同放大倍數(shù)目鏡測微尺每小隔所代表實際長度不一樣必須用鏡臺測微 尺進行重新校正，這樣目鏡測微尺測量的長度才是目前狀態(tài)的準備長度。 4、在不改變目鏡和目鏡測微尺，而改用不同放大倍數(shù)的物鏡來測定同一微生物 的大小時，其測定的結果是否相同？為什么？答：相同的，不同的放大倍數(shù)，目鏡測微尺每小格所代表實際長度不一樣，必須 重新校正，才能得到目前狀態(tài)的準確長度。實驗二 顯微直接計

4、法二、基本原理顯微鏡直接計數(shù)法是將小量待測樣品的懸浮液置于一種特別的具有確定 面積和容積的載玻片上（又稱計菌器其優(yōu)點是直觀、快速、操作簡單。目前 國內外常用的計菌器有：血細胞計數(shù)板 Peteroff-Hauser 計菌器及 Hawksley 計菌器等。利用血細胞計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù)是一種常用的微生物計數(shù)方 法此法是將單細胞微生物的懸液或孢子懸液注入血球計數(shù)板載玻片與蓋玻片之間的計數(shù)室中在顯微鏡下進行計數(shù)的由于加蓋蓋玻片之后的血球計數(shù)板的 計數(shù)室的容積是一定的（ ，萬分之一毫升所以可根據(jù)在顯微鏡下觀察 到的微生物數(shù)目來計算單位體積內的微生物總數(shù)目，包括死菌和活菌。六、思考題根據(jù)你的體會明用血

5、細胞計數(shù)板計數(shù)的誤差主要來自哪些方面？應如何 盡量減少誤差，力求準確？答操作時沒有先蓋蓋玻片再加懸液導致體積不準確避免先蓋蓋玻片再滴 加懸液細胞：多稀釋溶液溶液不均勻避免：滴加溶液前混勻懸液實驗三二、基原理微生物學實驗所用的器皿，大多要進行消毒、滅菌和用來培養(yǎng)微生物，因此 對其質量洗滌和包裝方法均有一定的要求玻璃器皿的形狀和包裝方法要求能 防止污染雜菌為準玻璃器皿的洗滌方法根據(jù)實驗目的器皿的種類所盛的物 品洗滌劑的類別和沾污程度等的不同而有所不同清洗后的玻璃器皿經(jīng)包裝 后即可進行干熱滅菌。干熱滅菌有火焰燒灼滅菌和熱空氣滅菌兩（P59火焰燒灼滅菌適用于載 玻片、試管口、玻棒、接種工具和金屬用具如

6、鑷子等的滅菌。通常所說的干熱滅 菌是在電烘箱內利用高溫干燥空氣使微生物細胞內的蛋白質凝固變性而達到滅 菌的目的 而細內蛋白質固與其身含水有，在菌受時， 當境和細內水量大則蛋質固變越，反之之滅菌相 比，干熱滅菌所需溫度高160170間長1-2h但干熱滅菌溫度不能 超過 180，否則，包器皿的紙或棉塞就會燒焦，甚至引起燃燒。此法適用于玻 璃器皿如吸管和培養(yǎng)皿等的滅菌。培養(yǎng)基、橡膠制品、塑料制品、衣物等不能用 干熱滅菌。思考題1、為什么在吸管的包裝時要在其粗端吸管口塞上一小段棉花？答：以免使用時將殺菌吹入其中或不甚將微生物吸出管外。2、在干熱滅菌操作過程中應注意哪些問題，為什么？答物品不要擺的太擁擠

7、以免妨礙空氣流通滅菌物品不要直接觸電熱干燥 箱內壁的鐵板，以防包裝紙烤焦起火。干熱滅菌的過程中嚴防恒溫調節(jié)的自動控制失靈而造成安全事故電熱干燥 箱具有可以觀察的窗口，滅菌的過程中玻璃溫度較高，注意避免燙傷。電熱干燥箱內溫度內的溫度未降到 70以前，切勿自行打開箱門，以免驟然 降溫導致玻璃器皿炸裂。3、為什么干熱滅菌比濕熱滅菌所需要的溫度高，時間長？答：細胞內的蛋白質凝固性與其本身的含水量有關在菌體受熱時環(huán)境和細胞 水的含量越大，則蛋白質凝固就越快，反之，含水量越少，凝固就越慢。所以干 熱滅菌比濕熱滅菌所需要的溫度更高，時間更長。實驗四二、基原理牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是一種應用最廣泛和最普通的細菌基

8、礎培養(yǎng)基有時又 稱為普通培養(yǎng)基配方為肉膏 3g白胨 10g 5g 1000ml， pH 。中牛肉為生物供源、能、磷酸和維生，白胨 主提供氮，而 提供無鹽在配制固體培養(yǎng)基時還要加入一定量的瓊 脂作凝固劑。瓊脂常用濃下 96時溶化一實際用在沸水中或下 面以石棉煮溶化以瓊脂焦瓊脂時固通常不微物 分利用。任何一種培養(yǎng)基，一經(jīng)制成就應及時徹底滅菌，以備培養(yǎng)微生物使用，一般 培養(yǎng)基的滅菌采用高壓蒸汽滅菌法壓蒸汽滅菌是將待滅菌的物品放在一個密 閉的加壓滅菌鍋內通過加熱使滅菌鍋隔套間的水沸騰而產(chǎn)生蒸汽待水蒸氣 急劇地將鍋內的冷空氣從排氣閥中驅盡然后關閉排氣閥繼續(xù)加熱此時由于 蒸汽不能逸出，滅菌鍋內的壓力增加，

9、使沸點增高，得到高 100的溫度。導 致菌體蛋白質凝固變性而達到滅菌的目的。注意點節(jié) （4）升壓、保壓和降壓：關閉排所閥后，鍋內壓力開始上升。當壓力升到所 需壓力（一般培養(yǎng)基和器皿滅菌控制 121 分鐘）時，控制熱源，維持壓力 到所需時間后，停止加熱，待壓力降至接 ”，打開排氣閥排氣。注意不能 過急地排氣則會由于鍋內壓力突然下降而造成鍋內的培養(yǎng)基由于內外壓力不 平衡而沖出燒瓶口或試管口，和使棉塞沾染培養(yǎng)基而發(fā)生污染。（5）無菌檢查：將滅菌的培養(yǎng)基放入 的溫室中培養(yǎng) 2448 小時，經(jīng)檢 查無菌生長，可保存?zhèn)溆?。思考題1、培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基應具備哪些條件？為什么？答：碳源：提供微生物營養(yǎng)碳素（碳

10、架）氮源：提供微生物生長、繁殖所需氮元素無機鹽大量元素細胞內的成分滲透壓成分定 PH的激活劑 ； 微量元素：酶的激活劑，特殊分子或結構生長因子一種微生物正常代謝必不可少且不能由簡單碳源氮源合成的 有機物，一般需要量很少，在微生物體能的功能主要是輔酶或輔基水：在生命過程中必不可少2、在配制培養(yǎng)基的操作過程中應注意些什么問題？答：1、當然是注意濃度配比不要搞錯2、很多培養(yǎng)基的加料順序有講究，否則會有沉淀產(chǎn)生3、有些培養(yǎng)基會有不溶物質，分裝前應搖勻4、不要忘了調節(jié) 值（一般細菌都需要，酵母可能自然 就行，不 過不一定）5、加熱溶解時盡量不要煮沸，會損失營養(yǎng)物質3、培養(yǎng)基配制完后，為什么要及時滅菌？若

11、不能及時滅菌，應如何處理？ 答：培養(yǎng)基里含有豐富的氮源，碳源，微量元素等等。如果不立即滅菌，那么，就會長菌。你可能會認為再滅菌不就可以了？！但是，很多的微生物，特別 是真核微生物在生長的時候會改變溶液的 PH同時滅菌后細胞破碎，帶入新的 氨基酸，蛋白等，這些都是試驗不穩(wěn)定的因素。如果不能立刻滅菌，應該在配置 培養(yǎng)基的時候直接稱取粉末不加入水溶解可在室溫保存如果加入的是液體 的，已經(jīng)配置好的培養(yǎng)基，應該在 4 度并保存，但時間不宜過長。4、高壓蒸汽滅菌中為什么要把冷空氣排凈，為什么在滅菌后不能驟然快速降 壓？答：在使用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌時，滅菌鍋內冷空氣的排除是否完全是極為重 要的因為空氣的膨脹

12、壓大于水蒸氣的膨脹壓所以水蒸氣中含有空氣時， 在同一壓力下，含空氣蒸汽的溫度低于飽和蒸汽的溫度。如果驟然快速降壓，就會因鍋內壓力突然下降，使容器內的培養(yǎng)基由于內外壓 力不平衡而沖出燒瓶口或試管口，造成棉塞沾染培養(yǎng)基而發(fā)生污染。實驗五二、基原理將微生物的培養(yǎng)物或含有微生物的樣品移植到培養(yǎng)基上的操作技術稱為接 種接種是微生物實驗及科學研究中的一項最基本的操作技術無論微生物的分 離、培養(yǎng)、純化或鑒定經(jīng)及有關微生物的形態(tài)觀察及生理研究都必須進行接種。 接種的關鍵是要嚴格的進行無菌操作如操作不慎引起污染則實驗結果就不可 靠。影響下一步工作的進行。微生物的培養(yǎng)特征是指微生物在固體半固體和液體培養(yǎng)基中生長后

13、所表現(xiàn) 出的群體生長特征不同的微生物有其固有的培養(yǎng)特征這些特征可以作為不同 種類微生物的鑒別特征之一并能為識別純培養(yǎng)是否被污染作為參考了解它們 的培養(yǎng)征、掌握其長規(guī)律識別、控制利用微物具有重要值。固體培基又分平板斜面兩形式在平板主要察菌落面結構形 態(tài)及邊狀況（如 P75 ）斜面主要察菌苔形態(tài)。思考題1、用斜面檢測微生物的培養(yǎng)特征接種時，為什么不要劃多條線或蛇形，而只要 劃一條直線？答用斜面接種微生物是為了能挑去微生物培養(yǎng)的單菌落若劃多條線或蛇形容 易形成菌苔，失去斜面的培養(yǎng)意義。2、接種環(huán)針)接種前后灼燒的目的是什么？為什么在接種前一定要將其冷卻？ 如何判斷燒過的接種環(huán)已冷卻？答：為了消毒滅菌

14、芽孢等，消滅可能引起污染的一切生物體；若沒有冷卻的話，接種的微生物也會被灼燒致死，所以一定要冷卻；一般用接種環(huán)在玻璃器皿的上蓋內側接觸一會（大約 5s后用接種環(huán)接觸 培養(yǎng)基，培養(yǎng)基沒有被燙壞，沒有冷熱物接觸而發(fā)出滋滋聲，就認為已冷卻，可 以接種了。3、試述如何在操作中貫徹無菌操作的原則？答在超凈工作臺中無菌操作或在酒精燈附近操作且接種前后接種環(huán)都需要過 火并灼燒成紅色。試管口（接種管）開關試管帽前后也需過火，若為平板培養(yǎng)則 倒平板過程前后培養(yǎng)基的開口處都要在火焰中過一下接種完畢后接種環(huán)仍需 要過火消毒。在個人操作時盡量挽起衣袖，雙手 70%酒精消毒，并戴上手套操 作。實驗六二、基原理革蘭氏染色

15、將細菌分為革蘭氏陽性和革蘭氏陰性由這兩類細菌細胞壁的 結構和組成不同決定的蘭氏陽性細菌細胞壁主要由肽聚糖形成的網(wǎng)狀結構組 成、壁厚、類脂質量低，用乙醇脫色時細胞壁脫水，使肽聚糖層的網(wǎng)狀結構孔徑 縮小透性降低從而使結晶紫碘的復合物不易被洗脫而保留在細胞內經(jīng) 脫色和復染后仍保留初染劑的藍紫色革蘭氏陰性不同由于細胞壁肽聚糖層較 薄，類脂含量高。所以當脫色處理時，類脂質被乙醇溶解，細胞壁透性增大，使 結晶紫碘的復合物比較容易被洗脫用復染劑復染后細胞被染上復染劑的 紅色。革蘭氏色反應是細重要的別特征，為證染色果的正確性采用 規(guī)范的色方法是十重要的2、初染滴加結晶紫（以剛好將菌膜覆蓋為宜）染色 水洗。3、

16、媒染用碘液沖去殘水，并用碘液覆蓋約 1min，水洗。4、脫色用濾紙吸去玻片上的殘水，將玻片傾斜，在白色背景下，用滴管流加 的乙醇脫色，直至流出的乙醇無紫色時，立即水洗。革蘭氏色結果是否確，乙脫色是革蘭染色操的關鍵環(huán)節(jié)脫色 不足，性菌被誤染陽性菌脫色過度，性菌被染成陰性菌脫色時 一般約 30s。5、復染用番紅液復染約 2min，水洗6、鏡檢干燥后，用油鏡觀察。菌體被染成藍紫色的是革蘭氏陽性菌，被染成紅色的是革蘭氏陰性菌。 思考題1 你認為哪些環(huán)節(jié)會影響革蘭氏染色結果的正確性？其中最關鍵的環(huán)節(jié)是什 么？涂片過程中涂片不宜過厚；初染；媒染；脫色；復染。最關鍵的環(huán)節(jié)是乙醇脫色。脫色不足，陰性菌被誤染成

17、陽性菌；脫色過度，陽性 菌被誤染成陰性菌，脫色時間一般約 2030s2、你的染色結果是否正確？如果不正確，請說明原因。答：染色結果正確。3、革蘭氏染色時，初染前加碘液嗎？乙醇脫色后復染之前，革蘭氏陽性菌和革 蘭氏陰性菌應分別是什么顏色？答：不加碘液。乙醇的脫色后復染前，革蘭氏陽性菌為淡紫色，革蘭氏陰性菌為 無色。實驗七二、基原理平板菌落計數(shù)法是將待測樣品經(jīng)適當稀釋后，其中的微生物充分分散成單個 細胞取一定量的稀釋樣液接種到平板上經(jīng)過培養(yǎng)由每個單細胞生長繁殖而 形成肉眼可見的菌落，即一個菌落應代表原樣品中的一個單細胞。統(tǒng)計菌落數(shù)， 根據(jù)其稀釋倍數(shù)和取樣接種量即可換算出樣品中的含菌數(shù)（平板菌計數(shù)法

18、 然操作繁，結果需培養(yǎng)一時間才能取，而且定結果易受種因素 影響，是，由于其大的優(yōu)是可以獲得菌的信，所以廣泛用于生 制品檢，食品、飲和水等含菌指數(shù)或染程度檢測）本實驗是用源水的平板菌落計數(shù)技術測定水中細菌總數(shù)。由于水中細菌種類 繁多它們對營養(yǎng)和其他生長條件的要求差別很大不可能找到一種培養(yǎng)基在一 種條件下使水中所有的細菌均能生長繁殖因此以一定的培養(yǎng)基平板上生長 出來的菌落計算出來的水中細菌總數(shù)僅是一種近似值目前一般是采用普通肉 膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基。思考題1、要使平板菌落計數(shù)準確，需要掌握哪幾個關鍵？為什么？答板菌落計數(shù)法是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的一個菌落是由一個單 細胞繁殖而成的現(xiàn)象進行的

19、因此首先將待測樣品作一系列稀釋稀釋度的選擇 很重要，以三個稀釋度中的第二稀釋度倒平板所出現(xiàn)的平均菌落數(shù)在 個左右 為最好再取一定量的稀釋菌液接種到培養(yǎng)皿中使其均勻分布于平皿中的培養(yǎng) 基內那么平板的均勻程度也是很重要培養(yǎng)過程中的溫濕度控制也很關鍵經(jīng) 培養(yǎng)后由單個細胞生長繁殖形成菌落統(tǒng)計菌落數(shù)目即可換算出樣品中的含 菌數(shù)。2、你所測的水源的污穢程度如何？3、試比較平板菌落計數(shù)衍和顯微鏡直接計數(shù)法的優(yōu)缺點及應用。答平板計數(shù)能有效地檢出活菌但是時間長受到培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件等系列因素 的影響，而鏡檢雖然簡單快速，但是檢出的是總菌數(shù)，包括死活，另外由于其是 選擇其中一個區(qū)域來計數(shù)，存在一定的誤差。實驗八二、

20、基原理酵母菌是不運動的單細胞真核微生物大小通常比常見細菌大幾倍甚至十 幾倍大多數(shù)酵母菌以出芽方式進行無性繁殖有的分裂繁殖本實驗通過美藍 染液水浸片和水一碘液水浸片來觀察酵母菌的形態(tài)和出芽生殖方式。美藍是一種無毒性的染料它的氧化型呈藍色還原型無色用美藍對酵母 的活細胞進行染色時，由于細胞的新陳代謝作用，細胞內具有較強的還原能力， 能使美藍有藍色的氧化型變成無色的還原型因此具有還原能力的酵母活細胞 是無色的而死細胞或代謝作用微弱的衰老細胞呈藍色或淡藍色借此即可對酵 母菌的死細胞和活細胞進行鑒別。思考題1、呂式堿性美藍染液濃度和作用時間的不同，對酵母菌死細胞數(shù)量有何影響？ 試分析其原因。答式堿性美藍

21、染液濃度越高，作用時間越長，會導致死細胞越來越多。 （2）染色劑作用時間較慢，隨時間的增加，被染的死細胞數(shù)目增多。染色 劑逐漸導致菌體細胞脫水隨時間增加死亡數(shù)目增多隨染色時間增加更多 的代謝緩慢的老細胞被染色，從而觀察時被當成了死細胞。2、在顯微鏡下，酵母菌有哪些突出的特征區(qū)別與一般細菌？答通光學顯微鏡下首先是酵母菌要比細菌大的多酵母菌具有細胞核而細菌沒 有細胞核只有擬核也就是核區(qū)如果酵母菌在進行出牙繁殖可以清晰看到從菌 體出的芽有些細菌具有鞭毛，而酵母菌不具有鞭毛。酵母菌呈卵圓形、圓形、圓 柱形或檸蒙形,菌落形態(tài)與細菌相似但較大較厚呈乳白色或紅色表面濕潤、 粘稠。微生物學驗考試理論試題班級姓

22、名學號成績1. 革藍式染的基本操作步驟？細染色的部位？那一最關鍵，色過度或不足會出現(xiàn)什么問題 步驟：1制片。取活躍生長期菌種按常規(guī)方法涂片（不宜過厚燥和固定2初染。滴加草酸銨結晶紫染液覆蓋涂菌部位，染色 傾去染液，水洗至流出水無色；3媒染。先用盧戈氏碘液沖去殘留水跡，再用碘液覆蓋 去碘液，水洗至流出水無色；4脫色。將玻片上殘留水用吸水紙吸去，在白色背景下用滴管流加 乙醇色（一般 20-30s ）,流出 液無色時立即用水洗去乙醇；5復染。將玻片上殘留水用吸水紙吸去，用番紅復染液染色 水洗，吸去殘水晾干；6鏡檢。油鏡觀察。細胞壁革蘭氏染成敗的關鍵是精脫色。如脫色過度，革蘭氏陽性菌也可被脫色而染成陰

23、性菌；如脫色時 間過短，革蘭氏陰性菌也會被染成革蘭氏陽性菌。脫色時間的長短還受涂片厚薄及乙醇用量多少等因素的 影響，難以嚴格規(guī)定。2. 為什么濕滅菌比干式滅菌溫度？在同一溫度下，濕熱的殺菌效力比干熱大。原因有三：一是濕熱中細菌菌體吸收水分，蛋白質較易凝 固，因蛋白質含水量增加，所需凝固溫度降低；二是濕熱的穿透力比干熱大；三是濕熱的蒸汽有潛熱存在。 1g 水 100時，由氣態(tài)變?yōu)橐簯B(tài)時可放 2.26kj 的熱量這種潛熱，能迅速提高被滅菌物體的溫度，從 而增加滅菌效力。3. 大腸菌群測定時常采用什么方法，分那幾步？該方法與菌落總數(shù)測定的原理有何不同？常用多管發(fā)酵法，包括初發(fā)酵試驗、平板分離和復發(fā)酵

24、試驗三步。不同： 落總數(shù)：指在一定條件下（如需氧情況、營養(yǎng)條件 pH培養(yǎng)溫度和時間等）每克（每毫升）檢 樣所生長出來的細菌菌落總數(shù)，由于現(xiàn)有條件不能滿足其生理需求，故難以繁殖生長所有細菌，所以它并 不表示實際中的所有細菌總數(shù)，菌落總數(shù)并不能區(qū)分其中細菌的種類。大腸菌群：指一群能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌。該法可以確定大腸 菌群的存在和菌群近似值。4. 高壓蒸汽菌開始前為什么要排？舉例（ ）說明用的高壓菌條件？冷空氣的熱膨脹系數(shù)大，若無菌鍋內留有冷空氣，當滅菌鍋密閉加熱時，冷空氣受熱很快膨脹，使壓 力上升，造成滅菌鍋內壓力與溫度不一致，產(chǎn)生假性蒸汽壓，鍋內溫度低于蒸

25、汽壓表示的相應的溫度，致 使滅菌不能徹底。特別是使用只裝有壓力表，沒有溫度表的滅菌鍋時，尤應注意。如：0.1MPa, 115 ，30min 0,1MPa,121 ,20min5. 劃線培養(yǎng)可分曲線和分段法，述各自適用對象？何確定平上單個菌落是否為純培養(yǎng)？6. 平板法菌總數(shù)測定時主要的注事項有哪些？7. 九管法測腸菌群時，取樣品 加入 225ml 生理鹽水中，然后分別取 釋液， 添加到相稀釋度的乳糖膽鹽培基中。 37培養(yǎng) ，產(chǎn)氣數(shù)管數(shù)分別為 2，2經(jīng)分離、驗證 試驗發(fā)現(xiàn)倍乳糖發(fā)酵管（ 10ml 組） 1 管產(chǎn)氣，1ml 組有 2 管產(chǎn)氣， 組無產(chǎn)氣。請報告其大 腸桿菌數(shù)1108. 根據(jù)下表報告樣

26、的菌落總：稀釋倍數(shù)101010菌落總數(shù)平板 1平板 2多不可計多不可計19230528389. 紫外線殺原理？最佳殺菌波長多少？細菌營養(yǎng)體芽孢對紫線的抵抗能力一樣嗎？紫外線殺菌機制主要是因為它誘導了胸腺嘧啶二聚體的形成和 DNA 的交聯(lián)而抑制 DNA 的復制， 另一方面，由于輻射能使空氣中的氧電離成O ，再使 氧化成臭氧或使水氧化成過氧化氫，臭氧和過氧 化氫均有殺菌作用。最佳殺菌波長為 右。不一樣。芽孢抵抗能力大于細菌營養(yǎng)體10. 常用的平板分離方法有那三種？各有什么優(yōu)缺點？11. 油鏡觀察的注意事項？滴加什么油？起什么作用？將高倍鏡轉離工作位置，在待觀察的樣品區(qū)域滴上一滴香柏油，將油鏡轉到工作位置，油鏡鏡頭此時 正好浸泡在鏡油中。注意： 不可將高倍鏡轉動經(jīng)過加有鏡油的區(qū)域。香柏油，為了增加顯微鏡的分辨率。12. 簡述革蘭染色的基本原理？根據(jù)所學知識判斷沙門氏桿菌乳酸鏈球是陽性還是陰性菌？P82.沙門氏為陰性，乳酸鏈球菌為陽性13. 細菌芽胞為什么抵抗不良