羅氏試劑盒說明書 Digitoxin

1、Digitoxin洋地黃毒苷診斷試劑盒03002659 122100測(cè)試主要用途用于體外定量檢測(cè)人體血清、血漿中洋地黃毒苷。該檢測(cè)用于診斷與治療洋地黃毒苷過量以及監(jiān)測(cè)洋地黃毒苷的療效，以確保合理的治療。Elecsys及cobas e系列免疫分析儀工作原理是電化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定法“ECLIA”。臨床應(yīng)用洋地黃毒苷是一種作用于心臟的糖苷類藥物。其確切作用機(jī)理仍不完全清楚。洋地黃毒苷使細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度升高，鈣離子對(duì)心機(jī)功能而言極其重要。最后，心臟收縮能力增強(qiáng)，收縮幅度增大，從而使心臟每次搏動(dòng)輸出的血量增加。洋地黃毒苷常用于治療心功能不全。其他治療指征包括老年患者明顯動(dòng)脈高血壓治療，伴有冠狀動(dòng)脈功能不全

2、的高血壓患者的外科術(shù)前治療，以及伴有心臟肥大和心室舒張壓有升高趨勢(shì)的心絞痛患者的治療。洋地黃毒苷治療不當(dāng)患者會(huì)引起嚴(yán)重的室性心律不齊和某些特定類型的心包炎。洋地黃毒苷治療濃度范圍約為13-39 nmoll/L(10-30 ng/mL)3。這種情況下，洋地黃毒苷較地高辛有更強(qiáng)的蛋白質(zhì)結(jié)合力。由于洋地黃作用與多種因素有關(guān)，故治療和中毒范圍會(huì)發(fā)生重疊2。因此，血清值必須結(jié)合整個(gè)臨床表現(xiàn)進(jìn)行解釋。洋地黃毒苷半衰期為6-8天，主要在肝臟代謝。在這過程中，產(chǎn)生大約10給予劑量的地高辛。約30%給予的洋地黃毒苷被真正清除。下列情況需確定其血清濃度：監(jiān)測(cè)患者攝入劑量，確定患者中毒可能，患者藥物動(dòng)力學(xué)改變或術(shù)前

3、用藥未知，以及ECG（心電圖）中未觀察洋地黃反應(yīng)的患者。檢測(cè)原理競(jìng)爭(zhēng)原理?？倻y(cè)定時(shí)間：18分鐘第一次孵育：15L標(biāo)本和一份生物素抗洋地黃毒苷特異性單克隆抗體一起孵育，反應(yīng)形成復(fù)合體，復(fù)合體量取決于標(biāo)本中反應(yīng)物濃度。第二次孵育：添加釕復(fù)合體a標(biāo)記洋地黃毒苷和鏈酶親和素包被的微粒后，生物素抗體空閑位點(diǎn)結(jié)合抗原，反應(yīng)生成一“抗體半抗原”樣復(fù)合體，并在生物素和鏈酶親和素的相互作用下結(jié)合到固相載體上。將反應(yīng)液吸入檢測(cè)池中，檢測(cè)池中的微粒通過電磁作用吸附在電極表面。未結(jié)合的物質(zhì)通過ProCell 除去。在電極上加以一定的電壓，使復(fù)合體化學(xué)發(fā)光，用光電倍增器檢測(cè)發(fā)光的強(qiáng)度。通過檢測(cè)儀的定標(biāo)曲線得到最后的檢測(cè)

4、結(jié)果，定標(biāo)曲線是通過2點(diǎn)定標(biāo)點(diǎn)和試劑條形碼上獲得的主曲線生成的。*Tris(2,2-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (Ru(bpy)三聯(lián)吡啶釕試劑工作溶液M 鏈酶親和素包被的微粒（透明瓶蓋）每瓶6.5ml：鏈酶親和素包被的微粒，0.72mg/ml防腐劑。R1 生物素化洋地黃毒苷特異性抗體（灰色瓶蓋）每瓶9ml：生物素化多克隆抗洋地黃毒苷抗體（羊）：0.5 mg/L；磷酸鹽緩沖液：100 mmol/L，PH值6.8；防腐劑。R2 釕復(fù)合物標(biāo)記的洋地黃毒苷（黑色瓶蓋）每瓶9m：釕復(fù)合物標(biāo)記的洋地黃毒苷：4.0 g/L；磷酸鹽緩沖液：100 mmol/L，PH值6.8

5、；防腐劑。注意事項(xiàng)僅用于體外診斷。在使用本試劑盒時(shí)必需遵循所有試驗(yàn)室試劑操作的注意事項(xiàng)。所有廢棄物必需按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)進(jìn)行處置。避免與任何形式的試劑或任何形式的樣本（樣品、定標(biāo)品和質(zhì)控）形成泡沫。試劑處理本試劑盒的任何一種試劑只可與試劑盒的其它試劑聯(lián)合使用，不可單獨(dú)使用?？蓮脑噭l形碼讀取有關(guān)如何正確使用該試劑的所有信息。儲(chǔ)存及穩(wěn)定性存放于28。請(qǐng)垂直擺放Elecsys 洋地黃毒苷試劑盒，以確保使用前自動(dòng)混合過程中微粒完全有效。穩(wěn)定性：28（未開封）：有效期內(nèi)均可使用。開封后，28：可存放12周。在MODULAR ANALYTICE170分析儀及cobas e 601上：可保存4周。在Elecsy

6、s 2010及cobas e 411分析儀上：可保存4周。在Elecsys 1010分析儀上：保存4周（存放在冰箱內(nèi)或分析儀上，溫度2025）；徹底暴露情況下可保存20小時(shí)。標(biāo)本的采集和準(zhǔn)備洋地黃毒苷檢測(cè)的樣本須在用藥后824個(gè)小時(shí)內(nèi)收集。只有按如下方法收集的標(biāo)本才適合用本試劑盒檢測(cè)。血清必須用標(biāo)準(zhǔn)試管收集。內(nèi)有分離膠的試管不適用于治療藥物監(jiān)測(cè)。請(qǐng)注意廠商提供的數(shù)據(jù)。肝素鋰、肝素鈉、肝素胺、K3-EDTA、檸檬酸鈉血漿。（原則：回收率90110；斜率0.91.1；相關(guān)系數(shù)0.95；0.95）.穩(wěn)定性： 28C可保存一周；在-20C可保存6月，只可凍溶一次。選擇檢測(cè)時(shí)市場(chǎng)上能獲得的標(biāo)本收集試管收

7、集標(biāo)本和檢測(cè)，不是所有能獲得的廠商的試管均可用于檢測(cè)。不同廠商標(biāo)本收集系統(tǒng)可能含有不同材料，某些情況下會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。在使用原始試管處理標(biāo)本時(shí)，應(yīng)遵循試管生產(chǎn)商所提供的指導(dǎo)。如標(biāo)本中有沉淀出現(xiàn)，必須先作離心處理再進(jìn)行分析。已經(jīng)加熱失活的標(biāo)本無法分析。使用疊氮化物作為穩(wěn)定劑的標(biāo)本或質(zhì)控液無法分析。檢測(cè)前，請(qǐng)確?；颊邩?biāo)本、定標(biāo)液及質(zhì)控液放置在2025C的環(huán)境中。由于蒸發(fā)因素的影響，標(biāo)本、定標(biāo)液及質(zhì)控液在放入分析儀后請(qǐng)?jiān)?小時(shí)內(nèi)完成測(cè)定。提供的物品參閱“試劑工作溶液”章節(jié)。需要的物品（未提供）貨號(hào)03002667，Elecsys Digitoxin CalSet, 4 x 1 mL貨號(hào)0353047

8、7, Elecsys PreciControl Cardiac, 2 x 2 mL各含 PreciControl Cardiac 1和2貨號(hào)11732277, Elecsys Diluent Universal, 2 x 18 mL樣品稀釋液或貨號(hào)03183971, Elecsys Diluent Universal, 2 x 40 mL常規(guī)實(shí)驗(yàn)設(shè)備Elecsys 1010/2010 或MODULAR ANALYTICS E170 免疫分析儀 Elecsys 1010 和 2010分析儀所需材料: 貨號(hào)11662988122, Elecsys ProCell, 6 x 380 mL ,系統(tǒng)緩沖

9、液貨號(hào)11662970122, Elecsys CleanCell, 6 x 380 mL,檢測(cè)池洗液 貨號(hào)11930346122, Elecsys SysWash, 1 x 500 mL 附加洗液 貨號(hào)11933159001, SysClean 適配器 貨號(hào)11706829001, Elecsys 1010 分析杯, 12 x 32 反應(yīng)管，或貨號(hào)11706802001, Elecsys 2010分析杯,60 x 60反應(yīng)管 貨號(hào)11706799001, Elecsys 2010 分吸吸頭, 30 x 120 移液管吸頭 Modular Analytics E170免疫分析儀所需材料: 貨號(hào)

10、12135019190, ProCell M, 1 x 2 L 系統(tǒng)緩沖液 貨號(hào)12135027190, CleanCell M, 1 x 2 L 檢測(cè)池洗液貨號(hào)03023141001, PC/CC杯, 50杯用于在測(cè)定前預(yù)熱Procell M及Cleancell M。貨號(hào)03005712190,ProbeWash M, 12 x 70 mL 清洗液，用于在檢測(cè)完畢后或更換試劑時(shí)清洗系統(tǒng)。貨號(hào)12102137001,分析杯/分析吸頭 組合裝 M, 48 分析杯x 84 反應(yīng)管或加液器吸頭,廢物袋 貨號(hào)03023150001, WasteLiner,廢物袋 貨號(hào)03027651001, SysC

11、lean 適配器 M 三種分析儀均需要的材料: 貨號(hào)11298500316, Elecsys SysClean, 5 x 100 mL 系統(tǒng)清洗液 檢測(cè)要獲得最佳的測(cè)定結(jié)果，請(qǐng)遵照本說明書中有關(guān)分析儀的相關(guān)指導(dǎo)，并參照分析儀特定檢測(cè)的操作手冊(cè)。在使用前分析儀自動(dòng)使微粒處于懸浮狀態(tài)。通過各試劑條形碼可讀取其詳細(xì)實(shí)驗(yàn)參數(shù)。在少數(shù)情況下，分析儀無法自動(dòng)讀取信息時(shí)，請(qǐng)輸入標(biāo)簽上的15位數(shù)字序列。E170，Elecsys2010及cobas e系列分析儀：將各試劑降溫至20C左右，放到分析儀的試劑盤（20C）上，避免泡沫產(chǎn)生。分析儀將自動(dòng)調(diào)節(jié)反應(yīng)溫度及各試劑瓶瓶蓋的開關(guān)狀態(tài)。Elecsys 1010分析

12、儀：將各試劑降溫至2025C左右，放到分析儀的試劑盤上（環(huán)境溫度2025C），避免泡沫產(chǎn)生。在測(cè)定過程中需手動(dòng)開關(guān)各試劑瓶的瓶蓋。使用后儲(chǔ)存于28C。定標(biāo)溯源性：本測(cè)定方法已按照參考標(biāo)準(zhǔn)定標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)化，即在無分析成分的人血清基質(zhì)中添加洋地黃毒苷。每批Elecsys洋地黃毒苷試劑都有條形碼標(biāo)記，條形碼含有特定批次試劑對(duì)應(yīng)的特定定標(biāo)信息。預(yù)先定義的主曲線適用于使用Elecsys Digoxin CalSet的分析儀。定校間隔：每批不同試劑須重新進(jìn)行定標(biāo)（例如在試劑盒被分析儀識(shí)別后的24小時(shí)內(nèi)）。除此之外，以下情況必須重新進(jìn)行定標(biāo)：Elecsys 2010，E170及cobas e系列分析儀：同一批號(hào)的

13、試劑盒在分析儀上使用超過1個(gè)月（28天）。同一試劑盒在分析儀上使用超過7天Elecsys 1010分析儀：每換一個(gè)試劑盒就要定標(biāo)一次。系統(tǒng)溫度在2025C時(shí)7天定標(biāo)一次。系統(tǒng)溫度在2532C時(shí)7天定標(biāo)一次。對(duì)于所有分析儀：根據(jù)需要定標(biāo)：如質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)超過額定的限度。質(zhì)控Elecsys PreciControl Cardiac,1和2試劑和其它適合的試劑均可作為測(cè)定時(shí)的質(zhì)控液。在測(cè)定時(shí)，對(duì)于不同濃度范圍的標(biāo)本，每24小時(shí)內(nèi)必須進(jìn)行一次質(zhì)控測(cè)試。每次更換試劑盒或進(jìn)行定標(biāo)后也須進(jìn)行質(zhì)控測(cè)試。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室須根據(jù)各自的情況確定合適的質(zhì)控間隔和范圍。測(cè)定值必須處于規(guī)定的范圍內(nèi)。若測(cè)定值不在規(guī)定的范圍內(nèi)，則每個(gè)試

14、驗(yàn)室必須建立相應(yīng)的矯正方法。計(jì)算分析儀自動(dòng)計(jì)算得出每份標(biāo)本的測(cè)定濃度（單位可為nmol/L 或 ng/mL).換算公式nmol/L x 0.76 = ng/mLng/mL x 1.31= nmol/L干擾因素下列情況不影響測(cè)定結(jié)果：黃疸（膽紅素濃度小于633umol/l或37 mg/dL），溶血（血紅蛋白小于0.683mmol/L 或1.1 g/dL），脂血（脂類乳劑小于1500 mg/dL），和生物素（小于205 nmol/L 或50ng/mL）。標(biāo)準(zhǔn)：回收率10初始值。對(duì)于因某些疾病需要而接受高劑量生物素治療的患者（ 5mg/天），必須在末次生物素治療8小時(shí)后采集標(biāo)本。濃度達(dá)1500IU/

15、ml的風(fēng)濕因子對(duì)測(cè)定無影響。體外對(duì)39種常用藥物進(jìn)行試驗(yàn)未發(fā)現(xiàn)有藥物影響檢測(cè)結(jié)果。烏扎拉可能會(huì)導(dǎo)致假性洋地黃毒苷結(jié)果偏高。由于存在1.1的交叉反應(yīng)，烏本苷會(huì)導(dǎo)致洋地黃毒苷測(cè)定結(jié)果偏高。某些情況下，糖苷濃度與藥物劑量所對(duì)應(yīng)的濃度值不相關(guān)。其原因可能是患者依從性不好，或者是沒有考慮以往用藥情況。腎衰、肝臟衰竭患者和懷孕晚期婦女血中存在地高辛類似免疫反應(yīng)物質(zhì)（DLIS）。研究發(fā)現(xiàn)使用商業(yè)免疫試劑測(cè)定地高辛?xí)r，標(biāo)本中DLIS會(huì)使地高辛檢測(cè)結(jié)果偏高。DLIS也會(huì)干擾洋地黃毒苷測(cè)定。檢測(cè)中通過添加合適的物質(zhì)盡量減小檢測(cè)成分和罕見血清之間出現(xiàn)的免疫交叉反應(yīng)的干擾。少數(shù)病例中極高濃度的鏈霉抗生物素蛋白和釕抗體

16、會(huì)影響測(cè)定結(jié)果。必須結(jié)合患者病史，各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室檢查及其它臨床資料來綜合評(píng)估測(cè)定結(jié)果。檢測(cè)范圍2.62-105 nmol/L或 2.00-80.0 ng/mL（由系統(tǒng)主曲線的最低限和最高限決定）。洋地黃毒苷濃度低于檢測(cè)最低限則報(bào)告為2.62nmol/L或 105nmol/L或 80 ng/mL,或最多2倍稀釋210 nmol/L或 160 ng/mL。稀釋若標(biāo)本中洋地黃毒苷濃度超過測(cè)定范圍，則可使用Elecsys Diluent Universal稀釋標(biāo)本。推薦的稀釋倍數(shù)是1：2（MODULAR ANALYTICS E170，Elecsys 1010/2010及cobas e系列分析儀自動(dòng)或手動(dòng)稀

17、釋）。稀釋標(biāo)本的濃度必須大于2.5ng/mL 或3.2 nmol/L。手動(dòng)稀釋后，則結(jié)果需乘以稀釋倍數(shù)。使用分析儀自動(dòng)稀釋，則MODULAR ANALYTICS E170 ，Elecsys 1010/2010及cobas e系列分析儀計(jì)算標(biāo)本濃度時(shí)會(huì)自動(dòng)考慮稀釋因素。參考范圍文獻(xiàn)中洋地黃毒苷治療血清濃度為13-39 nmol/L或 10-30ng/mL3。由于治療和中毒血清濃度范圍存在重疊，因此必須考慮糖苷濃度監(jiān)測(cè)和臨床發(fā)現(xiàn)以判斷洋地黃中毒可能。參見“干擾因素”章節(jié)。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室必須調(diào)查各自患者群體的參考范圍變異性，必要時(shí)根據(jù)具體情況制訂自己的參考范圍。特殊的性能指標(biāo)10分析儀的代表性試驗(yàn)數(shù)據(jù)如

18、下。各實(shí)驗(yàn)室由于具體情況不同，所得出的數(shù)據(jù)可能會(huì)稍有差異。精密度根據(jù)NCCLS（全國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室規(guī)范化操作委員會(huì)）制訂的改良試驗(yàn)計(jì)劃(EP5-A)，應(yīng)用Elecsys試劑盒、人血液標(biāo)本和質(zhì)控液驗(yàn)證Elecsys 洋地黃毒苷試劑盒檢測(cè)重復(fù)性。每日測(cè)6 次共10 日（n60）；在E170 分析儀上的組間精密度（n21），得結(jié)果如下：分析靈敏度（低濃度檢測(cè)限）2.62 nmol/L (2.00 ng/mL )檢測(cè)限制定義為可以區(qū)別零濃度定標(biāo)液的最低可測(cè)濃度值，計(jì)算公式為定標(biāo)液最小濃度2SD（標(biāo)準(zhǔn)差）（系統(tǒng)定標(biāo)，定標(biāo)液最小濃度2SD，組間精密度范圍之內(nèi)，標(biāo)本數(shù)21）。方法學(xué)比較將Elecsys Digitoxin試劑（y）按照CEDIA（x）參考品和試劑舊版本進(jìn)行比較，檢測(cè)相同的臨床標(biāo)本，得到以下線性關(guān)系（ng/mL):標(biāo)本的濃度范圍為6.5 和 55 nmol/L。分析特異性單克隆的抗體具有高度特異性。與以下成分有交叉反應(yīng)。測(cè)定濃度ng/mL交叉反應(yīng)氫化可的松2000n.d.d腎上腺酮2000n.d.DHEA-S2000n.d.波尼松龍2000n.d.烏本苷20001.1強(qiáng)的松1000n.d.雌二醇200n.d.孕酮200n.d.前海蔥甙原50003.6K-毒毛旋花甙50040睪丸激素200n.d.洋地黃毒甙元一洋