顯微鏡技術(shù)和顯微鏡在臨床檢驗中的應(yīng)用習(xí)題

第二章顯微鏡技術(shù)和顯微鏡首頁習(xí)題HYPERLINK習(xí)題參考答案習(xí)題名詞解釋選擇題簡答題一、名詞解釋1．光學(xué)顯微鏡2．熒光顯微鏡3、相襯顯微鏡4．暗視野顯微鏡5．偏光顯微鏡6．激光掃描共聚焦顯微鏡7．倒置顯微鏡8．紫外光顯微鏡9．電子顯微鏡10．透射電子顯微鏡11．掃描電子顯微鏡12．超高壓電子顯微鏡13．掃描隧道電子顯微鏡14．分辨率15．放大率16．數(shù)值孔徑17．顯微攝影術(shù)18．景深與焦長19．視野20.齊焦21．像差22．色差二、選擇題【A型題】在五個選項中選出一個最符合題意的答案（最佳答案）。1．在光學(xué)顯微鏡下所觀測到的細胞結(jié)構(gòu)稱為()A．顯微結(jié)構(gòu)B．超微結(jié)構(gòu)C．亞顯微結(jié)構(gòu)D．分子結(jié)構(gòu)E．微細結(jié)構(gòu)2．研究細胞的亞顯微結(jié)構(gòu)一般運用()A．顯微鏡技術(shù)B．電子顯微鏡技術(shù)C．放射自顯影技術(shù)D．離心技術(shù)E．共焦激光掃描顯微鏡技術(shù)3．研究組織或細胞顯微結(jié)構(gòu)的重要技術(shù)是()A．顯微鏡技術(shù)B．電鏡技術(shù)C．離心技術(shù)D．電泳技術(shù)E．放射自顯影技術(shù)4．分離細胞內(nèi)不同細胞器的重要技術(shù)是()A，顯微鏡技術(shù)B．電鏡技術(shù)C．離心技術(shù)D．電泳技術(shù)E．放射自顯影技術(shù)5．用顯微鏡觀測細胞時，應(yīng)選擇下列哪種目鏡和物鏡的組合在視野內(nèi)所看到的細胞數(shù)目最多()A．目鏡10×，物鏡4×B．目鏡10×，物鏡10×C．目鏡10×，物鏡20×D．目鏡10×，物鏡40×E．目鏡15×，物鏡40×6．在物鏡里增長一個相位板和在聚光鏡上增長一個環(huán)形光闌的顯微鏡是()A．透射電鏡B．掃描電鏡C．熒光顯微鏡D．暗視野顯微鏡E．相襯顯微鏡7．關(guān)于光學(xué)顯微鏡，下列有誤的是()A．是采用日光作光源，將微小物體形成放大影像的儀器B．細菌和線粒體是光鏡能清楚可見的最小物體C．由光學(xué)系統(tǒng)、機械裝置和照明系統(tǒng)三部分組成D．可用于觀測細胞的顯微結(jié)構(gòu)E．光學(xué)顯微鏡的分辨率由目鏡決定8．關(guān)于光學(xué)顯微鏡的使用，下列有誤的是()A．用顯微鏡觀測標本時，應(yīng)雙眼同睜B．按照從低倍鏡到高倍鏡再到油鏡的順序進行標本的觀測C．使用油鏡時，需在標本上滴上鏡油D．使用油鏡時，需將聚光器降至最低，光圈關(guān)至最小E．使用油鏡時，不可一邊在目鏡中觀測，一邊上升載物臺9．適于觀測細胞復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜系統(tǒng)、細胞骨架系統(tǒng)的三維結(jié)構(gòu)的顯微鏡是()A．普通光學(xué)顯微鏡B．熒光顯微鏡C．相襯顯微鏡D．激光掃描共聚焦顯微鏡E．暗視野顯微鏡10．關(guān)于激光掃描共聚焦顯微鏡，下列有誤的是()A．以單色激光作為光源B．激光變成點光源后聚焦到標本成為點照明C．點光源激光束在標本的整個焦平面進行光點掃描后在熒光屏上成像D．圖像信息要經(jīng)電腦三維重建解決E．所用標本須經(jīng)超薄切片11．下面對透射電鏡描述不對的的是()A．運用泛光式電子束和透射電子成像B．觀測細胞內(nèi)部超微結(jié)構(gòu)C．發(fā)展最早D．性能最完善E．景深長、圖像立體感強12．重要用于觀測活細胞中有規(guī)則的纖維結(jié)構(gòu)如紡錘絲、染色體以及纖維絲等構(gòu)造的光學(xué)顯微鏡是()A．熒光顯微鏡B．相襯顯微鏡C．普通顯微鏡D．暗視野顯微鏡E．偏振光顯微鏡13．關(guān)于相襯顯微鏡，下列有誤的是()A．運用了光的衍射和干涉特性B．可使相位差變成振幅差C．所觀測的標本要經(jīng)固定解決D．一般使用高壓汞燈作光源E．裝有環(huán)形光闌、相位板等部件14．光學(xué)顯微鏡的分辨率(最小分辨距離)是()A．0.1μmB．0.2μmC．0.3μmD．0.4μmE．0.5μm15．關(guān)于光學(xué)顯微鏡的分辨率，下列有誤的是()A．是光學(xué)顯微鏡的重要性能指標B．也可稱為分辨本領(lǐng)C．與照明光的波長成反比D．指分辨出標本上兩點間最小距離的能力E．顯微鏡的分辨率由物鏡決定16．分別使用光鏡的低倍鏡和高倍鏡觀測同一細胞標本相，可發(fā)現(xiàn)在低倍鏡下()A．相較小、視野較暗B．相較小、視野較亮C．相較大、視野較暗D．相較大、視野較亮E．相及視野的亮度均不改變17．適于觀測小細胞或細胞群體復(fù)雜而精細的表面或斷面的立體形態(tài)與結(jié)構(gòu)的顯微鏡是()A．普通光學(xué)顯微鏡B．熒光顯微鏡C．相差顯微鏡D．掃描電子顯微鏡E．透射電鏡18．適于觀測細胞內(nèi)超微結(jié)構(gòu)的顯微鏡是()A．透射電鏡B．普通光學(xué)顯微鏡C．熒光顯微鏡D．相差顯微鏡E．暗視野顯微鏡19．關(guān)于熒光顯微鏡，下列哪項有誤()A．其光源通常為高壓汞燈或氙燈B．必需裝備為激發(fā)濾片和壓制濾片C．根據(jù)光化熒光的原理設(shè)計制造的D．可用于觀測固定細胞和活細胞E．使用時應(yīng)在較明亮的環(huán)境中進行20．關(guān)于電子顯微鏡，下列哪項有誤()A．組織或細胞觀測前均需經(jīng)超薄切片B．分為透射式和掃描式兩大類C．分辨率可達0.3nmD．運用電子束作照明源E．在熒光屏上成像21．下列哪種顯微鏡需將標本進行超薄切片并經(jīng)醋酸鈾等染料染色后才干觀測()A．掃描式電子顯微鏡B．透射式電子顯微鏡C．掃描隧道顯微鏡D．熒光顯微鏡E．相差顯微鏡22．電子散射少、對樣品損傷小、可用于觀測活細胞的電子顯微鏡是()A．普通透射電鏡B．普通掃描電鏡C．超高壓電鏡D．掃描透射電鏡E．掃描隧道顯微鏡23．關(guān)于透射式電鏡，下列哪項敘述是錯誤的()A．由德國科學(xué)家Ruska等發(fā)明B．以電子束作為光源C．電子透過標本后在熒光屏上成像D．分辨率較高E．適于觀測細胞的外觀形貌24．關(guān)于掃描式電鏡，下列哪項有誤()A．20世紀60年代才正式問世B．景深長，成像具有強烈立體感C．電子掃描標本使之產(chǎn)生二次電子，經(jīng)收集放大后成像D．標本無需經(jīng)超薄切片即可觀測E．適于觀測細胞的內(nèi)部構(gòu)造25．適于觀測細胞表面及斷面超微結(jié)構(gòu)三維圖像的儀器是()A．普通光鏡B．熒光顯微鏡C．相差光鏡D．掃描電鏡E．透射電鏡26．適于觀測培養(yǎng)瓶中活細胞的顯微鏡是()A．透射電鏡B．掃描電鏡C．熒光顯微鏡D．倒置顯微鏡E．相差顯微鏡27．要將視野內(nèi)的物像從右側(cè)移到中央，應(yīng)向哪個方向移動標本()A．左側(cè)B．右側(cè)C．上方D．下方E．以上都可以28．當顯微鏡的目鏡為10X，物鏡為10X時，在視野直徑范圍內(nèi)看到一行相連的8個細胞。若目鏡不變，物鏡換成40X時，則在視野中可看到這行細胞中的()A．2個B．4個C．16個D．32個E．64個29．收集轟擊樣品所產(chǎn)生的二次電子經(jīng)轉(zhuǎn)換放大后在熒屏上成像的顯微鏡是()A．透射電鏡B．掃描電鏡C．熒光顯微鏡D．倒置顯微鏡E．相差顯微鏡30．下列哪種組成不是熒光顯微鏡的結(jié)構(gòu)元件()A．激發(fā)光源B．二組濾光片C．二色鏡D．聚光鏡E．環(huán)形光闌31．用于透射電鏡的超薄切片厚度通常為()A．50nm～100nmB．0.2μmC．10μmD．2nmE．100μm32．人們需要觀測立體感很強的細胞內(nèi)的三度（維）空間的微細結(jié)構(gòu)，需要()技術(shù)A．光鏡技術(shù)B．透射電鏡C．掃描電鏡D．超高壓透射電鏡E．免疫熒光鏡技術(shù)33．用熒光染料標記的抗體解決細胞后在熒光顯微鏡下對細胞中特殊分子進行定位屬于()A．放射自顯影技術(shù)B．免疫熒光顯微鏡技術(shù)C．免疫電鏡技術(shù)D．液相雜交技術(shù)E．原位雜交技術(shù)34．關(guān)于超薄切片，下列()有誤A．厚度在50nm～100nm的切片稱為超薄切片B．通過超薄切片可將一個細胞切成100片～200片C．制備超薄切片需使用專門的器械——超薄切片機D．超薄切片常用玻璃制成的刀切成E．組織細胞樣品被切片之前常需雙重固定但無需包埋35．關(guān)于掃描隧道顯微鏡(STM)，下列()敘述錯誤A．STM是IBM蘇黎世實驗室的Binnig等人在1981年發(fā)明的B．為掃描探針顯微鏡的一種，具有高分辨本領(lǐng)C．僅可在真空條件下工作D．依靠一極細的金屬針尖在標本表面掃描來探測標本的形貌E．可直接觀測到DNA、RNA和蛋白等生物大分子36．落射式熒光顯微鏡的吸取濾片應(yīng)安裝在()A．激發(fā)濾片與分色鏡之間B．物鏡與分色鏡之間C．光源與激發(fā)濾片之間D．分色鏡與目鏡之間E．物鏡與載玻片之間37．下面哪一種措施與提高顯微鏡分辨能力無關(guān)()A．使用波長較短的光源B．使用折射率高的介質(zhì)C．擴大物鏡直徑D．使用放大倍率較高的目鏡E．提高分辨本領(lǐng)38.透射電鏡的反差取決于樣品對()的散射能力A．二次電子B．入射電子C．樣品質(zhì)量厚度D．樣品重量E．樣品性質(zhì)39．某學(xué)生在顯微鏡下觀測標本切片，當轉(zhuǎn)動細調(diào)節(jié)螺旋時，有一部分細胞看得清楚，另一部分細胞較模糊，這是由于()A．反光鏡未調(diào)節(jié)好B．標本切得厚薄不均C．細調(diào)節(jié)螺旋未調(diào)節(jié)好D．顯微鏡物鏡損壞E．聚光鏡光圈大小不適合40．僅僅反映固體樣品表面形貌信息的物理信號是()A．背散射電子B．二次電子C．吸取電子D．透射電子E．俄歇電子41．如圖所示，1、2為物鏡長度，3、4為目鏡長度，5、6為觀測時物鏡與標本切片間距離，哪種組合情況下，顯微鏡的放大倍數(shù)最大()123456A．1、3、5B．2、4、6C．2、3、5D．2、4、5E．2、3、442．在光學(xué)顯微鏡下，觀測透明的、染色較淺的細胞時，必須注意做到()A．把光圈縮小一些，使視野暗一些B．把光圈開大一些，使視野暗一些C．把光圈縮小一些，使視野亮一些D．把光圈開大一些，使視野亮一些E．以上全不是43．在普通光學(xué)顯微鏡下，一個細小物體若被顯微鏡放大50倍，這里“被放大50倍”是指該細小物體的()A．體積B．表面積C．像的面積D．長度或?qū)挾菶．像的長度或?qū)挾?4．電子槍產(chǎn)生的電子是()A．入射電子B．透射電子C．彈性散射電子D．二次電子E．俄歇電子45．用來顯示組織和細胞的內(nèi)部超微結(jié)構(gòu)像的電子為()A．入射電子B．透射電子C．彈性散射電子D．二次電子E．吸取電子46．下面哪種電鏡可以在觀測結(jié)構(gòu)的同時，對組織細胞內(nèi)的元素成分進行分析()A．透射電鏡B．掃描電鏡C．掃描隧道顯微鏡D．超高壓透射電鏡E．原子力顯微鏡47．下面哪項不是超高壓電子顯微鏡的優(yōu)點()A．可用于觀測厚切片B．可以提高分辨率C．可提高圖像質(zhì)量D．結(jié)構(gòu)復(fù)雜E．減少輻射損傷范圍48．電子槍由()組成A．陰極、陽極B．陰極、柵極C．陽極、柵極D．陰極、陽極、柵極E．正極、負極、柵極49．二次電子檢測系統(tǒng)不涉及()A．收集體B．顯像管C．閃爍體D．光電倍增管E．視頻放大器50．掃描電鏡的反差是由()決定的A．二次電子產(chǎn)率B．反射電子產(chǎn)率C．吸取電子產(chǎn)率D．俄歇電子產(chǎn)率E．特性X射線產(chǎn)率【X型題】每題的備選答案中有兩個或者兩個以上的對的答案。1．物象在低倍鏡（10×）下清楚可見，換高倍鏡（40×）后看不見了，這是由于()A．玻片放反了B．高倍物鏡故障C．物象不在視野正中央D．焦距沒調(diào)好E．低倍物鏡故障2．在普通光鏡上可用于調(diào)節(jié)視野內(nèi)光線強弱的裝置有()A．通光孔B．反光鏡C．光闌D．聚光鏡E．目鏡3．常用于觀測細胞超微結(jié)構(gòu)的儀器是()A．熒光顯微鏡B．相襯顯微鏡C．掃描電鏡D．透射電鏡E．暗視野顯微鏡4．普通光鏡上決定放大倍數(shù)的部件有()A．目鏡B．物鏡C．反光鏡D．聚光鏡E．光闌5．普通光鏡上的下列物鏡中哪些不能浸在香柏油中使用()A．4×物鏡B．10×物鏡C．40×物鏡D．45×物鏡E．100×物鏡6．透射電鏡所具有的特性有()A．分辨率高B．放大倍數(shù)高C．成像立體感強D．標本須超薄E．標本表面噴鍍金屬膜7．掃描電鏡的基本特性是()A．可見細胞表面的三維形態(tài)B．成像立體感強C．標本須超薄D．標本表面噴鍍金屬膜E．放大倍數(shù)高8．在電鏡下所觀測到的細胞結(jié)構(gòu)稱為()A．顯微結(jié)構(gòu)B．超微結(jié)構(gòu)C．亞顯微結(jié)構(gòu)D．微細結(jié)構(gòu)E．電鏡結(jié)構(gòu)9．電鏡標本制備時常用的固定劑()A．鋨酸B．戊二醛C．丙酮D．聯(lián)苯胺E．過碘酸10．熒光顯微鏡以紫外線為光源，通常采用落射式照明，是由于()A．如采用柯拉式照明，紫外線會傷害人的眼睛B．紫外線穿透能力較弱C．紫外線可通過鏡筒中安裝的雙向反光鏡D．視野背景很暗E．整個視場均勻照明11.適于觀測無色透明活細胞微細結(jié)構(gòu)的光學(xué)顯微鏡是()A．相襯顯微鏡B．暗視野顯微鏡C．熒光顯徽鏡D．偏振光顯微鏡E．普通顯微鏡三、簡答題1．簡述光學(xué)顯微鏡的工作原理。2．簡述光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)組成。3．物鏡和目鏡在工作條件和技術(shù)規(guī)定上有哪些不同？4．光學(xué)顯微鏡的性能參數(shù)有哪些？這些參數(shù)間的影響和制約關(guān)系如何？5．簡述醫(yī)學(xué)檢查中常用的熒光顯微鏡的原理、結(jié)構(gòu)及用途。6.簡述熒光顯微鏡的使用注意事項。7．簡述相襯顯微鏡的工作原理、結(jié)構(gòu)特點及其重要用途。8．簡述偏光顯微鏡的結(jié)構(gòu)特點、工作原理及其重要用途。9．簡述激光掃描共聚焦顯微鏡的工作原理。10．簡述激光掃描共聚焦顯微鏡的結(jié)構(gòu)特點在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的重要用途。11.電鏡的基本類型有哪些？各有什么特點？12．掃描電鏡有哪些特點？13．電鏡由哪幾個重要部分組成？對成像質(zhì)量影響較大的部件有哪些？14．光學(xué)顯微鏡與電子顯微鏡的重要區(qū)別是什么?15．掃描隧道顯微鏡是納米生物學(xué)研究工具，為什么能用來觀測活的生物樣品？習(xí)題參考答案一、名詞解釋1．光學(xué)顯微鏡：簡稱光鏡，是運用日光照明將小物形成放大影像的精密光學(xué)儀器，由光學(xué)系統(tǒng)、機械裝置和照明系統(tǒng)三部分組成。光學(xué)系統(tǒng)由物鏡和目鏡組成，其核心是物鏡和目鏡中的兩組透鏡，其放大成像的機理是先由物鏡形成放大的實像，再由目鏡進一步放大成虛像，最后在人眼中形成實像。2．熒光顯微鏡：熒光顯微鏡是以紫外線為光源來激發(fā)生物標本中的熒光物質(zhì)，產(chǎn)生能觀測到的各種顏色熒光的一種光學(xué)顯微鏡。3．相襯顯微鏡：是把透過標本的可見光的光程差變成振幅差，從而提高了各種結(jié)構(gòu)間的對比度，用于觀測活細胞和未染色的標本的一種特殊顯微鏡。4．暗視野顯微鏡：是運用特殊的聚光鏡使照明光線斜射而不能直接進入物鏡，形成暗視野，那些通過標本散射的光線才干進入物鏡放大，在黑暗的背景中呈現(xiàn)標本明亮的輪廓的顯微鏡。5．偏光顯微鏡：是運用光的偏掁特性，對具有雙折射性(即可以使一束入射光經(jīng)折射后提成兩束折射光)的晶態(tài)、液晶態(tài)物質(zhì)進行觀測和研究的重要光學(xué)儀器。6．激光掃描共聚焦顯微鏡：以單色激光作為光源的一種特殊光學(xué)顯微鏡。其物鏡和聚光鏡互相共焦點，使得只有從標本焦面發(fā)出的光線聚焦成像，而焦面以外的漫射光不參與成像，改變焦平面，可獲得細胞或原標本不同層次的圖像，從而得到樣品的三維結(jié)構(gòu)圖像。7．倒置顯微鏡：當觀測活體標本時，需要把照明系統(tǒng)放在載物臺及標本之上，而把物鏡組放在載物臺器皿下進行放大成像的顯微鏡，又稱生物培養(yǎng)顯微鏡。8．紫外光顯微鏡：使用紫外光源進行照明的顯微鏡。9．電子顯微鏡：簡稱電鏡，是運用波長很短的電子束作為照明光源，通過電子流對細胞樣品的透射或反射及電磁透鏡的多級放大而在熒光屏上成像的大型精密儀器。10．透射電子顯微鏡：簡稱透射電鏡，是運用電子槍發(fā)出的高速電子束照射超薄的生物樣品，收集透射電子流經(jīng)電磁透鏡的多級放大后成像的儀器。11．掃描電子顯微鏡：簡稱掃描電鏡，是一種重要用于觀測組織細胞表面或細胞內(nèi)斷面的電鏡。其工作原理是從電子槍發(fā)出的電子束經(jīng)電磁聚光鏡匯聚成極細的電子探針，并在細胞樣品表面逐點掃描，收集樣品表面產(chǎn)生的二次電子再經(jīng)轉(zhuǎn)換、放大，最終在熒光屏同步掃描成像。12．超高壓電子顯微鏡：生成電子束的電壓超過500kV的電子顯微鏡。13．掃描隧道電子顯微鏡：當原子尺度的針尖在不到一個納米的高度上掃描樣品時，此處電子云重疊，外加電壓（2mV～2V），針尖與樣品之間產(chǎn)生隧道效應(yīng)而有電子逸出，形成隧道電流，通過隧道電流獲取顯微圖像的電子顯微鏡。14．分辨率：也稱分辨本領(lǐng)，指分辨物體細微結(jié)構(gòu)的的能力。15．放大率：或稱放大倍數(shù)是指顯微鏡經(jīng)多次成像后最終所成(放大的)像的大小相對于原物體大小的比值。16．數(shù)值孔徑：又叫鏡口率，是物體與物鏡間媒質(zhì)的折射率n與物鏡孔徑角的一半(β)正弦值的乘積。17．顯微攝影術(shù)：是運用顯微照相裝置，把顯微鏡視野中所觀測到物件的細微結(jié)構(gòu)真實地記錄下來，以供進一步分析研究之用的一種技術(shù)。18．景深與焦長：在成一幅清楚像的前提下，像平面不變，景物沿光軸前后移動的距離稱“景深”。景物不動，像平面沿光軸前后移動的距離稱“焦長”。19．視野：視野又稱視場，是指通過顯微鏡所能看到的標本所在空間的范圍。20.齊焦：當某一物鏡調(diào)焦清楚后，變換其它物鏡時，也能基本保證焦距適當、成像清楚。21.像差：光學(xué)儀器不也許使物點發(fā)出而進入系統(tǒng)的所有光線都是沿著高斯光學(xué)的抱負光路成像，從而導(dǎo)致成像在形狀方面的缺陷，稱之為像差。22.色差:是一種由白光或復(fù)色光在即使嚴格滿足高斯條件下也存在的特殊類型的成像缺陷。當用白光或復(fù)色光經(jīng)透鏡成像時，會因各種色光存在著光程差而導(dǎo)致顏色不同、位置不重合、大小不一致的不同成像效果，從而導(dǎo)致像和物體的較大失真。二、選擇題【A型題】1．A2．B3．A4．C5．A6．E7．E8．D9．D10．E11．E12．E13．C14．B15．C16．B17．D18．A19．E20．A21．B22．C23．E24．E25．D26．D27．B28．A29．B30．E31．A32．D33．B34．E35．C36．D37．D38．B39．B40．B41．C42．A43．D44．A45.B46.C47.D48.D49.A50.A【X型題】1．ABCD2．BCD3．CD4．AB5．ABCD6．ABD7．ABD8．BC9．AB10．BE11.ACD三、簡答題1．簡述光學(xué)顯微鏡的工作原理。答：顯微鏡是由兩組會聚透鏡組成的光學(xué)折射成像系統(tǒng)，是運用光學(xué)原理，把人眼所不能分辨的微小物體放大成像，供人們提取物質(zhì)微細結(jié)構(gòu)信息的光學(xué)儀器。把焦距較短、靠近觀測物、成實像的透鏡組稱為物鏡，而焦距較長，靠近眼睛、成虛像的透鏡組稱為目鏡。被觀測物體位于物鏡的前方，被物鏡作第一級放大后成一倒立的實像，然后此實像再被目鏡作第二級放大，得到最大放大效果的倒立的虛像，位于人眼的明視距離處。2．簡述光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)組成。答：基本結(jié)構(gòu)涉及光學(xué)系統(tǒng)和機械系統(tǒng)兩大部分。光學(xué)系統(tǒng)是顯微鏡的主體部分，涉及物鏡、目鏡、聚光鏡及反光鏡等組成的照明裝置。機械系統(tǒng)是為了保證光學(xué)系統(tǒng)的成像而配置的，涉及調(diào)焦系統(tǒng)、載物臺和物鏡轉(zhuǎn)換器等運動夾持部件以及底座、鏡臂、鏡筒等支持部件。照明設(shè)立的重要部件有光源、濾光器、聚光鏡和玻片等。3．物鏡和目鏡在工作條件和技術(shù)規(guī)定上有哪些不同？答：顯微鏡的物鏡、目鏡各由數(shù)只組成一套，物鏡和目鏡間的不同組合構(gòu)成不同的放大倍率。物鏡采用轉(zhuǎn)換器調(diào)換，顯微鏡的物鏡應(yīng)滿足齊焦規(guī)定，即調(diào)換物鏡后，不需要重新調(diào)焦就能看到物體的像。為此，不同倍率物鏡的共軛距應(yīng)為常數(shù)。目鏡采用插入式調(diào)換，目鏡的相對孔徑很小，一般為1/20～1/40。顯微鏡的目鏡是在窄光束、大視場的條件下工作的。4．光學(xué)顯微鏡的性能參數(shù)有哪些？這些參數(shù)間的影響和制約關(guān)系如何？答：顯微鏡的性能參數(shù)重要有放大率、數(shù)值孔徑、分辨率、視場、景深、鏡像亮度、鏡像清楚度、工作距離和機械筒長。顯微鏡的數(shù)值孔徑與其放大率成正比，與分辨率、景深成反比，它的平方與圖像亮度成正比。因此，使用較大數(shù)值孔徑的物鏡，其放大率和分辨本領(lǐng)較高，但視場、景深、工作距離較小。5．簡述醫(yī)學(xué)檢查中常用的熒光顯微鏡的原理、結(jié)構(gòu)及用途。答：熒光顯微鏡是以紫外線為光源來激發(fā)生物標本中的熒光物質(zhì)，產(chǎn)生能觀測到的各種顏色熒光的一種光學(xué)顯微鏡。熒光顯微鏡是由光源、濾色系統(tǒng)和光學(xué)系統(tǒng)等重要部件組成。熒光顯微鏡與普通光學(xué)顯微鏡重要區(qū)別在于光源和濾光片不同。通常用高壓汞燈作為光源，可發(fā)出紫外線和短波長的可見光；濾光片有二組，第一組稱激發(fā)濾片，位于光源和標本之間，僅允許能激發(fā)標本產(chǎn)生熒光的光通過(如紫外線)；第二組是阻斷濾片，位于標本與目鏡之間，可把剩余的紫外線吸取掉，只讓激發(fā)出的熒光通過，這樣既有助于增強反差，又可保護眼睛免受紫外線的損傷。光學(xué)系統(tǒng)重要有反光鏡、聚光鏡、目鏡、物鏡、照明系統(tǒng)等組成。熒光顯微鏡可用于觀測檢測細胞中能與熒光染料特異結(jié)合的特殊蛋白、核酸等，其標本染色簡便、熒光圖像色彩鮮亮，并且敏感度較高。6.簡述熒光顯微鏡的使用注意事項。答：使用熒光顯微鏡時應(yīng)注意以下事項：①觀測對象必須是可自發(fā)熒光或已被熒光染料染色的標本；②載玻片、蓋玻片及鏡油應(yīng)不含自發(fā)熒光雜質(zhì)；③選用最佳的濾片組；④熒光標本一般不能長期保存，若連續(xù)長霎時間照射(特別是紫外線)易不久褪色。因此，如有條件則應(yīng)先照相存檔，再仔細觀測標本；⑤啟動高壓汞燈后，不得在15分鐘內(nèi)將其關(guān)閉，一經(jīng)關(guān)閉，必須待汞燈冷卻后方可再啟動。嚴禁頻繁開閉，否則，會大大減少汞燈的壽命；⑥若暫不觀測標本時，可拉過阻光光簾阻擋光線。這樣，即可避免對標本不必要的長時間照射，又減少了開閉汞燈的頻率和次數(shù)；⑦較長時間觀測熒光標本時，最佳戴能阻擋紫外光的護目鏡，加強對眼睛的保護。7．簡述相襯顯微鏡的工作原理、結(jié)構(gòu)特點及其重要用途。答：相襯顯微鏡的基本原理是把透過標本的可見光的光程差變成振幅差，從而提高了各種結(jié)構(gòu)間的對比度，使各種結(jié)構(gòu)變得清楚可見。光線透過標本后發(fā)生折射，偏離了本來的光路，同時被延遲了1/4λ（波長），假如再增長或減少1/4λ，則光程差變?yōu)?/2λ，兩束光合軸后干涉加強，振幅增大或減小，提高反差。相襯顯微鏡的結(jié)構(gòu)特點：①環(huán)形光闌（annular

diaphragm）位于光源與聚光鏡之間，作用是使透過聚光鏡的光線形成空心光錐，聚焦到標本上；②相位板（annularphaseplate）在物鏡中加了涂有氟化鎂的相位板，可將直射光或衍射光的相位推遲1/4λ，并能吸取直射光(背景光)的光強，使直射光與衍射光的光強趨于一致，能更好地突出干涉的效果。相襯顯微鏡重要用于觀測活細胞和未染色的標本。8．簡述偏光顯微鏡的結(jié)構(gòu)特點、工作原理及其重要用途。答：是運用光的偏掁特性，對具有雙折射性(即可以使一束入射光經(jīng)折射后提成兩束折射光)的晶態(tài)、液晶態(tài)物質(zhì)進行觀測和研究的重要光學(xué)儀器。偏光顯微鏡是在一般顯微鏡的基礎(chǔ)上增添了使普通光線轉(zhuǎn)變成偏振光和檢測偏振光的裝置或觀測干涉圖樣的特殊透鏡，即光源前有偏振片（起偏器），使進入顯微鏡的光線為偏振光，鏡筒中有檢偏器（一個偏振方向與起偏器垂直的起偏器），這種顯微鏡的載物臺是可以旋轉(zhuǎn)的。當載物臺無樣品時，無論如何旋轉(zhuǎn)載物臺，由于兩個偏振片是垂直的，顯微鏡里看不到光線。而放入旋光性物質(zhì)后，由于光線通過這類物質(zhì)時發(fā)生偏轉(zhuǎn)，因此旋轉(zhuǎn)載物臺便能檢測到這種物體。移相裝置是偏光顯微鏡在使用過程中不可缺少的附件。全波片、半波片及1/4波片可以使通過波片的偏振光分別延遲2π、π和π/2的相位。而補償器則可連續(xù)調(diào)節(jié)使通過的偏振光相位發(fā)生連續(xù)改變。移相裝置對觀測光的偏振性質(zhì)是十分必要的。運用偏光顯微鏡可以清楚地觀測到纖維絲、紡錘體、膠原、染色體、卵巢、骨骼、毛發(fā)、活細胞的結(jié)晶或液晶態(tài)的內(nèi)含物、神經(jīng)纖維、肌肉纖維等的細微結(jié)構(gòu)等。9．簡述激光掃描共聚焦顯微鏡的工作原理。答：激光掃描共聚焦顯微鏡運用單色激光掃描束通過照明針孔形成點光源，對標本內(nèi)焦平面上的每一點進行掃描，標本上的被照射點，在檢測器的檢測針孔處成像，由檢測針孔后的光電倍增管逐點或逐線接受，迅速在計算機監(jiān)視器屏幕上形成熒光圖像，照明針孔與檢測針孔相對于物鏡焦平面是共軛的。焦平面的點同時聚焦于照明針孔和檢測針孔，焦平面以外的點不會在檢測針孔處成像，這樣得到的共聚焦圖像是標本的光學(xué)橫斷面，克服了普通熒光顯微鏡圖像模糊的缺陷。此外在顯微鏡的載物臺上加一個微量步進馬達，可使載物臺沿著Z軸上下移動，將樣品各個層面移到照明針孔和檢測針孔的共焦面上，樣品的不同層面的圖像都能清楚地顯示，成為連續(xù)的光切圖像。10．簡述激光掃描共聚焦顯微鏡的結(jié)構(gòu)特點及其在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的重要用途。答：激光共聚焦顯微鏡是在熒光顯微鏡成像基礎(chǔ)上加裝了激光掃描裝置，運用計算機進行圖像解決，使用紫外或可見光激發(fā)熒光探針，從而得到細胞或組織內(nèi)部微細結(jié)構(gòu)的熒光圖像。此外在其載物臺上加一個微量步進馬達，可使載物臺沿著Z軸上下移動，將樣品各個層面移到照明針孔和檢測針孔的共焦面上，樣品的不同層面的圖像都能清楚地顯示，成為連續(xù)的光切圖像。激光掃描共聚焦顯微鏡(LaserScanningConfocalMicroscope，LSCM)具有高靈敏度、高分辨率、高放大率等特點。在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域重要用于細胞三維重建、細胞定量熒光測定、細胞內(nèi)鈣離子、pH值和其它離子的動態(tài)分析、細胞間通訊和膜的流動性等過程的研究。11.電鏡的基本類型有哪些？各有什么特點？答：電鏡的基本類型有透射電子顯微鏡與掃描電子顯微鏡。射電子顯微鏡與掃描電子顯微鏡都用于放大與分辨微小結(jié)構(gòu)，這兩種技術(shù)通過標本對電子束的影響來探測標本結(jié)構(gòu)。透射電子顯微鏡的電子束穿過標本，聚焦成像于屏幕或顯像屏上，掃描電子顯微鏡的電子束在標本表面進行掃描，反射的電子聚焦成像于屏幕或顯像屏。透射電子顯微鏡用于研究超薄切片標本，有極高分辨率，可給出細微的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)