色譜技術在中藥白芷研究中的應用進展

色譜技術在中藥白芷研究中的應用進展【關鍵詞】色譜摘要：中藥白芷具有廣泛的藥理作用，其主要有效成分香豆素類化合物的別離提取和構造鑒定已有了長足開展。現(xiàn)代色譜技術在中藥白芷研究中的廣泛運用，使白芷的定量分析方法體系、質量指標體系和提取工藝優(yōu)化等研究有了新的進展，文章對近5年的有關文獻作了綜述。關鍵詞：色譜法；白芷；化學成分；質量；鑒定ResearhDevelpentfAngeliadahuriabyhratgraphyAbstrat:TheAngeliadahuriahasbeenlaiedtbeeffetivenanydiseases，andalstherearegreatdevelpentfrtheislatinandinstruentalanalysesfitsaineffetivepnents.TheappliatinfhratgraphytehnlgygreatlyadvanedandaeleratedtheresearhfAngeliadahuria.Keyrds:hratgraphy；Angeliadahuria；Develpentresearh白芷為傘形科植物白芷Angeliadahuria〔Fish.exHff.〕Benth.etHk.f.或杭白芷Angeliadahuria〔Fish.exHff.〕Benth.etHk.f.var.frsana〔Biss.〕ShanetYuan的枯燥根。性溫，味辛。具有散風除濕、通竅止痛、消腫排膿的成效?？捎糜谥委煾忻邦^痛、眉棱骨痛、燒傷等癥。色譜法〔hratgraphy〕或稱層析法，其原理是利用不同組分在兩相中的吸附才能、分配系數(shù)、離子交換才能或分子大小等性質的微小差異，經(jīng)過連續(xù)屢次在兩相間的質量交換，使不同的組分得到別離，是別離分析多組混合物的分析方法，在各個學科領域中的應用日益普遍［1］。從經(jīng)典的平板色譜到柱色譜，氣相色譜技術〔G〕、高效液相色譜法〔HPL〕、超臨界流體色譜法〔SF〕到毛細管電泳法〔E〕、色譜-光譜連用等現(xiàn)代色譜技術已廣泛運用于中藥白芷的研究。1白芷中化學成分的提取別離1.1化學成分的別離結合現(xiàn)代光譜技術，近年陸續(xù)從白芷中發(fā)現(xiàn)了新構造的香豆素類化合物，如從日本白芷中別離得到七種新的bifuranuarins［2］，從韓國白芷的莖部首次發(fā)現(xiàn)6［〔1S〕，2〔R〕2，3二羥基1甲氧基3甲基丁酸］7甲氧基香豆素［3］，從根部得到兩種新的呋喃香豆素化合物［4］。國內(nèi)游小琳等［5］首次發(fā)現(xiàn)白芷水溶性成分中丁二酸，葡萄糖，蔗糖等6個化學成分。聶紅等［6］運用氣質聯(lián)用〔GS〕技術發(fā)現(xiàn)白芷的水蒸氣蒸餾所得的油狀物的主要成分為甲基環(huán)癸烷〔22.4%〕、1十二烷醇〔8.6％〕等。1.2有效成分的提取劉文等［7］認為采用超臨界流體2萃取白芷中歐前胡素速度快，HPL法測定精度高。劉紅梅等運用GS技術對白芷中香豆素類成分的最正確超臨界流體2萃取工藝〔萃取溫度50℃，萃取壓力21Pa、萃取時間3.0ｈ，別離壓力6.5Pa，粉碎度20目〕的超臨界樣品進展了分析鑒定，主要成分氧化前胡素、歐前胡素、異歐前胡素的相對含量分別到達42.40％，22.14％和12.12％［8，9］。高速逆流色譜法［10］〔HighSpeedunterurrenthratgraphy〕是一種可以在短時間內(nèi)實現(xiàn)高效別離和分析的方法，具有無固體載體，可以防止別離樣品與固體載體外表產(chǎn)生化學反響而變性和不可逆吸附等優(yōu)點，已廣泛應用于天然藥物研究。Liu等［11］用該法成功別離測定了白芷中的歐前胡素、異歐前胡素和氧化前胡內(nèi)酯，其上相固定相為正己烷甲醇水〔5∶5∶5，V/V〕，下相流動相前150in正己烷甲醇水〔5∶5∶5，V/V〕，后150in正己烷甲醇水〔5∶7∶3，V/V〕體積以線性遞增，鑒定各峰別離物，純度到達了98％以上。運用該技術還別離了丹參中的丹酚酸B［12］、川芎中的川芎嗪［13］，天麻中的天麻素［14］等多種化學成分。高效毛細管電泳法〔HighPerfraneapillaryEletrphresis〕為近年來開展最快的一種別離分析技術，具有別離效率高、分析速度快和樣品用量少等特點。毛細管膠束電動色譜〔iellarEletrkinetiapillaryhratgraphy〕為它的一個重要分支，具有別離效果好，速度快，操作簡單，費用低等優(yōu)點，已迅速進入藥物分析領域。其原理是向載體中參加外表活性劑，活性劑濃度大于臨界值時，那么在毛細管內(nèi)形成膠束，被分析物受到電滲流和膠束相與水相之間分配的雙重影響而實現(xiàn)別離。ang［15］等成功的采用該法簡單快速的從白芷中別離得到歐前胡素、異歐前胡素和東莨菪苷元〔7羥6甲氧香豆素〕。該技術還應用于測定西洋參中人參皂苷Rb1，Re的含量［16］，別離鑒定槐屬植物苦豆子、苦參、山豆根中喹嗪烷類生物堿［17］，最近聯(lián)用電化學檢測器首次別離測定木犀科植物女貞葉和果實中的D甘露糖、蔗糖、葡萄糖和果糖［18］。2白芷的質量控制及鑒定HPL被廣泛應用于白芷的質量控制和鑒定：人工四倍體白芷主要有效成分歐前胡素的含量較原二倍體白芷成倍進步［19］；不同產(chǎn)地白芷中2種香豆素總量存在較大差異［20］；提取揮發(fā)油后歐前胡素損失較大［21］；建立了白芷藥材質量的控制方法，其色譜條件：流動相甲醇水〔70∶30〕，檢測波長254n，歐前胡素在0.974～3.896μg，異歐前胡素在0.360～2.640μg范圍內(nèi)線性關系良好［22］。或同時檢定出歐前胡素、異歐前胡素、比克白芷素及水化氧化前胡素，且其中的歐前胡素和異歐前胡素含量分別不得低于0.1%和0.04%［23］。王夢月等［24］證實白芷果實中總香豆素含量最高，莖中最低；以曬干法的含量最高。抽苔白芷中香豆素的含量不及白芷含量的50%，不能作白芷藥用。3體內(nèi)白芷有效成分的測定白芷的活性成分白當歸素，是一種醛糖復原酶抑制劑，可用于治療糖尿病性白內(nèi)障。Kn等［25］研究分析它的腎代謝產(chǎn)物。尿樣經(jīng)液液提取，GS、HPLDAD以及H1核磁共振波譜等分析，發(fā)現(xiàn)兩種主要代謝物分別是白當歸素側鏈經(jīng)脫甲基或脫烷而產(chǎn)生，另一代謝物認為可能是由白當歸素被羥基化而產(chǎn)生。Kazuhisa等［26］利用柱切換HPL法快速檢測大鼠血漿中的白當歸素和水化氧化前胡素。血漿樣品用過氯酸脫蛋白，離心后上清液制備成供試品。流動相為乙睛水〔20∶80〕，流速1l/in，檢測波長260n，柱溫40℃。龔志南等［27,28］用HPL測大鼠胃液、腸液、血液和腦組織中香豆素類化合物的含量，以考察其藥動學參數(shù)，評價提取工藝指標和最正確劑型。轉貼于論文聯(lián)盟.ll.4結語綜上所述，現(xiàn)代色譜技術應用于白芷的研究，可以快速、高效地別離純化有效成分［11，15］，優(yōu)化提取工藝［7～9］，建立準確、重復性好的質量標準［19～24］等，但在指紋圖譜方面的研究還未見報道?？梢娚V技術以其別離效能高、分析速度快、定量結果準、易于自動化等優(yōu)點，成為中藥與天然藥物有效成分確實定、鑒定等定性與定量工作以及別離純化過程中最有效的方法?？梢灶A見色譜技術必然會更廣泛地應用于中藥的制備和質量控制過程中，加速中藥消費工藝的現(xiàn)代化進程。目前色譜技術應用于白芷等中藥研究存在的問題有：一方面中藥成分復雜、質量影響因素多，單用一種色譜技術研究中藥捉襟見肘，如G不適用于分析熱不穩(wěn)定性和不能氣化的成分；HPL那么對強極性組分別離效果不好，色譜柱容易受污染，儀器運轉費用高；新興的高速逆流色譜法和高效毛細管電泳法，可以很好的為中藥藥效學評價及定性定量分析等提供技術支持，但在國內(nèi)尚未普及和系統(tǒng)化。因此要求色譜技術在自身不斷完善的根底上，結合其他學科的高新技術，推陳出新，以便更好地為我國中藥現(xiàn)代化效勞。另一方面該技術在中藥活性成分挑選與作用機理研究方面期待打破性的進展。生物色譜法是生命科學和色譜別離技術結合形成的高新技術［29，30］，這種模型既具有很好的生物相關性又克制了成分別離與效應脫節(jié)的弊端，已成功應用于藥物活性成分的挑選和作用機理的研究［31～32］，假如聯(lián)用二極管列陣和高分辨率質譜等技術，將實現(xiàn)中藥中微量活性成分的別離純化和構造鑒定及活性測定的高度一體化。參考文獻：［1］黃志兵，李來生.色譜技術進展及應用［J］.江西化工，2002，〔3〕：14.［2］NianHeANG，KihirYSHIZAKI，KiiyeBABA.SevenNeBifuranuarins，DahuribirinAG，frJapaneseBaiZhi［J］.he.Phar.Bull，2001，49〔9〕：1085.［3］KnYS，ShinSJ，KiJ，et.AneuarinfrthestefAngeliadahuria［J］.ArhivesfPharaalresearh，2002，25〔1〕：53.［4］SeungHLee，GaLi，HyJinKi,etalTNeFuranuarinsfrtheRtsfAngeliadahuria，Bull.Kreanhe.S，2022，24〔11〕：1699.［5］游小琳，李麗，肖永慶.白芷水溶性局部化學成分研究［J］.中國中藥雜志，2002，27〔4〕：279.［6］聶紅，沈映君.白芷揮發(fā)油的GS分析［J］.貴陽中醫(yī)學院學報，2002，24〔2〕：58.［7］劉文，韓笑，王學勇.超臨界2萃取白芷中歐前胡素的研究［J］.中國藥學雜志，2022，38〔2〕：99.［8］劉紅梅，張明賢，劉楊平，等.超臨界2萃取白芷中香豆素類成分的工藝優(yōu)化研究［J］.中成藥，2022，26〔2〕：90.［9］劉紅梅，張明賢.白芷中香豆素類成分的超臨界流體萃取和GS分析［J］.中國中藥雜志，2022，29〔3〕：241.［10］姜寧，陳執(zhí)中.高速逆流色譜法及其在天然藥物研究中的應用進展［J］.中國民族民間醫(yī)藥雜志，2022，12〔4〕：188.［11］ReninLiu，AifengLi，AilingSun.PreparativeislatinandpurifiatinfuarinsfrAngeliadahuria〔Fish.exHff〕Benth，etHk.f〔hinesetraditinalediinalherb〕byhighspeedunterurrenthratgraphy［J］.JurnalfhratgraphyA，1052〔2022〕：223.［12］Li，HuaBin，Lai，JiaPing;Jiang，Yue.PreparativeislatinandpurifiatinfsalvianliaidBfrthehineseediinalplantSalviailtirrhizabyhighspeedunterurrenthratgraphy［J］.JurnalfhratgraphyA，2002，943〔2〕：235.［13］Li，HuaBin，hen，F(xiàn)eng.PreparativeislatinandpurifiatinfhuanxingzinefrtheediinalplantLigustiuhuanxingbyhighspeedunterurrenthratgraphy［J］.JurnalfhratgraphyA，2022，1047〔2〕：249.［14］Li，HuaBin，hen，F(xiàn)eng.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