甘草酸銨標準文本（食品安全國家標準）

PAGEPAGE8食品安全國家標準食品添加劑甘草酸銨范圍本標準適用于原料為甘草（豆科植物甘草GlycyrrhizauralensisFisch.、脹果甘草GlycyrrhizainflataBat.及光果甘草GlycyrrhizaglabraL.），經水浸提、硫酸（或鹽酸）酸化沉淀、乙醇浸提、氨化、結晶等工藝制得的食品添加劑甘草酸銨。化學名稱、結構式、分子式、相對分子質量化學名稱甘草酸銨結構式分子式C42H61O16NH4相對分子質量 839.96（按2007年國際相對原子質量）技術要求感官要求：應符合表1的規(guī)定。感官要求項目要求檢驗方法色澤白色、黃白色或淺黃色取適量試樣置于清潔、干燥的白瓷盤中，在自然光線下，觀察其色澤和狀態(tài)狀態(tài)粉末狀細小顆粒理化指標：應符合表2的規(guī)定。理化指標項目指標檢驗方法甘草酸銨含量（以18β-甘草酸銨計，以干基計），w/%65.0附錄A中A.4干燥減量，w/%7.0附錄A中A.3比旋光度/[（°）·mL·dm-1·g-1]+45～+53附錄A中A.5灰分，w/%0.5附錄A中A.6鉛（Pb）/（mg/kg）2GB5009.12總砷（以As計）/（mg/kg）2GB/T5009.11甘草酸銨甘草酸銨甘草酸銨甘草酸銨

附錄A檢驗方法一般規(guī)定本標準所用試劑和水，在沒有注明其他要求時，均指分析純試劑和GB/T6682-2008規(guī)定的三級水。實驗中所用溶液在未注明用何種溶劑配制時，均指水溶液。鑒別試驗方法提要銨鹽遇強堿后產生氨，利用氨的揮發(fā)性和堿性能使試管上方濕潤的pH試紙顯堿性顏色的特性，鑒別銨鹽的存在。試劑和材料氫氧化鈉溶液：40g/L。pH試紙。鑒別方法取約0.2g甘草酸銨試樣于10mL試管中，加入約1mL氫氧化鈉溶液（A.2.2.1），振搖，迅速將已用水濕潤的pH試紙放入試管口，產生并揮發(fā)出的氨能使?jié)駶櫟膒H試紙顯堿性顏色。注：如加熱溶液，顯色反應更加明顯。干燥減量的測定儀器和設備天平：感量0.1mg。真空干燥箱。稱量瓶。干燥器。操作步驟將稱量瓶放入真空干燥箱內，78℃±0.5℃，20mmHg條件下干燥30min，取出后放入干燥器內，冷至室溫，稱重。稱取1g試樣，精確至0.0001g，蓋好瓶塞，稱重。輕輕地水平橫向搖動稱量瓶，盡可能均勻分布試樣層，厚度不超過5mm。將鋪好試樣的稱量瓶放入真空干燥箱內，打開瓶塞，在78℃±0.5℃，20mmHg條件下，減壓干燥6h，取出放入干燥器內，蓋好瓶塞，冷至室溫，稱重。結果計算干燥減量的質量分數w1按公式（A.1）計算：……（A.1）式中：m1——減壓干燥前試樣加稱量瓶的質量，單位為克（g）m2——減壓干燥后試樣加稱量瓶的質量，單位為克（g）；m——試樣質量的數值，單位為克（g）。實驗結果以平行測XX果的算術平均值為準（保留一位小數）。在重復性條件下獲得的兩次獨立測XX果的絕對差值不大于1.0％。甘草酸銨含量測定方法提要試樣經乙腈-水溶液溶解，過濾，用液相色譜儀（紫外檢測器）測定，外標法定量。計算結果時，試樣質量為試樣稱量重量減去試樣中水分質量，結果為以干基（C42H65NO16）計的甘草酸銨百分含量。試劑和材料乙腈：色譜級。冰乙酸：優(yōu)級純。0.45μm濾膜（有機相）。甘草酸銨標準品：純度90%（或有HPLC標識）。注1：本方法使用的甘草酸銨標準品為18β-甘草酸銨單一組分的標準品。注2：非水滴定法（NT）或其他非HPLC含量測定方法標識的標準品，其含量值不能直接用于液相色譜法計算含量。乙腈-水溶液：乙腈和水等體積混合。 乙腈-冰乙酸-水溶液：乙腈-冰乙酸-水（38+1+61），混勻，并經0.45μm濾膜（有機相）過濾，充分脫氣。儀器 高效液相色譜儀，配有紫外檢測器。天平，感量0.01mg。真空干燥箱。分析步驟標準溶液配制稱取12.5mg甘草酸銨標準品，精確至0.01mg，置于25mL容量瓶中，用乙腈-水溶液（A.4.2.5）溶解，并定容至刻度。經0.45μm濾膜（有機相）過濾?，F用現配。試樣溶液制備稱取50.0mg甘草酸銨試樣，精確至0.01mg，置于100mL容量瓶中，用乙腈-水溶液（A.4.2.5）溶解，定容至刻度，經0.45μm濾膜（有機相）過濾，待測。色譜條件a）色譜柱：C18柱，長150mm，內徑4.6mm，粒徑5μm，或其他等效柱。b）流動相：乙腈-乙酸-水溶液（A.4.2.6）。c）流速：1.0mL/min。d）柱溫：室溫。 e）進樣量：10μL。測定依次注射甘草酸銨標準溶液和試樣溶液，在波長254nm處測定，外標法定量。甘草酸銨保留時間約為7.6min。甘草酸銨高效液相色譜圖見附錄B。結果計算甘草酸銨含量（以18β-甘草酸銨計，以干基計）的質量分數w2按公式（A.2）計算：………（A.2）式中：V——試樣定容體積，單位為毫升（mL）； cs——甘草酸銨標準溶液濃度，單位為毫克每毫升（mg/mL）；A——試樣溶液色譜圖中甘草酸銨的峰面積；m3——試樣質量的數值，單位為毫克（mg）；w1——試樣干燥減量的質量分數，％；AS——標準溶液色譜圖中甘草酸銨的峰面積。實驗結果以平行測XX果的算術平均值為準（保留一位小數）。在重復性條件下獲得的兩次獨立測XX果的絕對差值，不大于算術平均值的5%。比旋光度的測定試劑和材料無水乙醇。40%乙醇-水溶液：取2份乙醇和3份水混合。儀器和設備旋光光度計，測量最小分度值0.05°。分析步驟試樣溶液制備：稱取1.5g（精確至0.01g）未干燥處理的試樣，溶于100mL乙醇-水溶液（A.5.1.2）中，待測。儀器條件a）測量波長：鈉光燈D線（589.3nm）。b）測量溫度：20℃±0.5℃。測定開機待儀器穩(wěn)定后，用乙醇-水溶液（A.5.1.2）作空白溶液，校正儀器零點（不能自動調零的儀器，需測定溶液空白值，減扣空白），將試液充滿潔凈、干燥的旋光管中，小心排除氣泡，將蓋旋緊后按儀器說明書操作、測定，在試樣溶液溫度20℃±0.5℃條件下，讀取旋光度值。左旋以負號“-”表示，右旋以正號“+”表示。結果計算比旋光度以表示，數值以“（°）·mL·dm-1·g-1”計，按式（A.3）計算?！ˋ.3）式中：α——試樣溶液測得的旋光度，單位為度（°）；l——旋光管長度，單位為分米（dm）；c——試液中甘草酸銨的質量濃度，單位為克每毫升（g/mL）；100——溶解甘草酸銨試樣的乙醇-水溶液的體積，單位為毫升（mL）；m4——100mL乙醇-水溶液中含有甘草酸銨的質量，單位為克（g）；m5——稱取甘草酸銨試樣的質量，單位為克（g）；——試樣干燥減量的質量分數，％。取三次平行測XX果的算術平均值為測XX果，保留至整數位?；曳值臏y定儀器和設備高溫爐。分析步驟稱取3g試樣（精確至0.0001g），置于已恒重的100mL瓷坩堝中，小火炭化至無煙。移至550℃±25℃高溫爐中灼燒，直到試樣完全灰化（約3h），干燥器中冷至室溫，稱重，重復灼燒直至恒重（前后兩次稱量之差不超過0.5mg）。結果計算灰分的以質量分數w3按公式（A.4）計算：…………（A.4）式中：m6——灼燒后坩堝加灰分的質量，單位為克（g）；m7——坩堝的質量，單位為克（g）；m8——試樣的質量，單位為克（g）。實驗結果以平行測XX果的算術平均值為準（保留兩位小數）。在重復性條件下獲得的兩次獨立測XX果的絕對差值不大于0.1％。鉛的測定鉛含量按GB5009.