執(zhí)業(yè)藥師復(fù)習(xí)資料5課件

第五章分光(fēnɡuānɡ)光度法藥物(yàowù)分析課件西安交通大學(xué)藥學(xué)院傅強(qiáng)

第一頁，共二十四頁。執(zhí)業(yè)藥師復(fù)習(xí)資料-5

第五章分光(fēnɡuānɡ)光度法

考試(kǎoshì)大綱要求掌握紫外—可見分光光度法的基本原理和測定方法以及在藥物鑒別、檢查和含量測定中的應(yīng)用。熟悉儀器的校正和檢定方法及紫外吸收光譜與物質(zhì)結(jié)構(gòu)的關(guān)系。熟悉紅外分光光度法的基本原理以及在藥物鑒別、檢查中的應(yīng)用。了解紫外分光光度計(jì)、熒光光度計(jì)和紅外光譜儀的基本結(jié)構(gòu)。了解熒光分析法的基本原理和應(yīng)用。第二頁，共二十四頁。執(zhí)業(yè)藥師復(fù)習(xí)資料-5一、紫外—可見(kějiàn)分光光度法1．原理當(dāng)物質(zhì)分子吸收一定波長的光能，分子外層電子或分子軌道電子由基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài)，產(chǎn)生的吸收光譜(xīshōuɡuānɡpǔ)一般在紫外–可見光區(qū)，稱為紫外–可見光譜(ultraviolet/visiblespectrum,UV/VIS)。紫外–可見光譜為一種分子吸收光譜，吸收波長在200～760nm范圍內(nèi)。第三頁，共二十四頁。執(zhí)業(yè)藥師復(fù)習(xí)資料-5波長范圍：200～400nm稱為紫外光區(qū)，400～760nm稱為可見光區(qū)。光譜產(chǎn)生：是由分子外層價(jià)電子躍遷產(chǎn)生的。條件是所提供的輻射能量恰好滿足該吸收(xīshōu)物質(zhì)兩能級間躍遷所需的能量。定量基礎(chǔ)：Lambert-Beer定律式中A為吸收度，T為透光率，C為溶液(róngyè)濃度，L為液層厚度，E為吸收系數(shù)）。

第四頁，共二十四頁。執(zhí)業(yè)藥師復(fù)習(xí)資料-52．儀器(yíqì)基本(jīběn)組成：光源→單色器→吸收池→檢測器→數(shù)據(jù)記錄和處理第五頁，共二十四頁。執(zhí)業(yè)藥師復(fù)習(xí)資料-5第六頁，共二十四頁。執(zhí)業(yè)藥師復(fù)習(xí)資料-5波長校正：常以汞燈中幾根較強(qiáng)譜線或用氘燈的特定(tèdìng)譜線為參照進(jìn)行校正。吸收度檢定：用K2Cr2O7的H2SO4溶液進(jìn)行檢定，在規(guī)定波長處測吸收度。計(jì)算與規(guī)定值比較，相對偏差應(yīng)在±1%以內(nèi)。雜散光檢查：配制一定濃度的NaI和NaNO2溶液，在雜散光影響較顯著的波長處測定透光率，不得大于規(guī)定值。第七頁，共二十四頁。執(zhí)業(yè)藥師復(fù)習(xí)資料-53．吸收光譜與物質(zhì)(wùzhì)結(jié)構(gòu)的關(guān)系光譜(guāngpǔ)的特征參數(shù)：λmax、λmin、λmax處的吸收系數(shù)、末端吸收。第八頁，共二十四頁。執(zhí)業(yè)藥師復(fù)習(xí)資料-5表5-1電子(diànzǐ)躍遷的類型躍遷類型波長（nm）吸收強(qiáng)度對應(yīng)結(jié)構(gòu)σ→σ*躍遷<200飽和脂肪鍵n→σ*躍遷～200弱～中等吸收含－OH、－NH2、－X、－S等結(jié)構(gòu)π→π*躍遷～200強(qiáng)吸收孤立雙鍵、共軛雙鍵n→π*躍遷200～400弱吸收含雜原子的不飽和基團(tuán)C=O、C=S、－N=N－等第九頁，共二十四頁。執(zhí)業(yè)藥師復(fù)習(xí)資料-54．應(yīng)用(yìngyòng)ChP對吸收度測定要求:(1)對溶劑的要求(2)空白對照試驗(yàn)(3)測定波長(bōcháng)確證（在規(guī)定的±2nm以內(nèi)）(4)供試品溶液的濃度（使A在0.3～0.7）(5)儀器的狹縫寬度

第十頁，共二十四頁。執(zhí)業(yè)藥師復(fù)習(xí)資料-5UV-ViS的應(yīng)用(yìngyòng)

鑒別:對比吸收光譜特征參數(shù):核對供試品溶液的λmax、Ｅ、A是否(shìfǒu)符合規(guī)定。如鹽酸氯丙嗪的鑒別。比較吸收度比值的一致性:吸收峰較多時(shí)，可規(guī)定幾個(gè)波長處的吸收度比值作為鑒別標(biāo)準(zhǔn)。如兩性霉素B的鑒別。對比吸收光譜的一致性:與對照品溶液比較。如已烯雌酚注射液的鑒別。第十一頁，共二十四頁。執(zhí)業(yè)藥師復(fù)習(xí)資料-5雜質(zhì)(zázhì)檢查

在某波長處,雜質(zhì)有最大吸收,而藥物幾乎無吸收。如地蒽酚中二羥基(qiǎngjī)蒽醌的檢查、腎上腺素中腎上腺酮的檢查等。在某波長處，藥物有吸收，而雜質(zhì)吸收弱或無吸收。如頭孢噻吩鈉中噻吩乙酸的檢查。第十二頁，共二十四頁。執(zhí)業(yè)藥師復(fù)習(xí)資料-5含量(hánliàng)測定

對照品比較法A1/A2=C1/C2吸收系數(shù)法A=ECL計(jì)算(jìsuàn)分光光度法第十三頁，共二十四頁。執(zhí)業(yè)藥師復(fù)習(xí)資料-5二、熒光(yíngguāng)分析法1．原理熒光（fluorescence）當(dāng)物質(zhì)分子吸收了一定波長(bōcháng)的紫外光能之后，基態(tài)電子躍遷到第一激發(fā)態(tài)，處于激發(fā)態(tài)的電子首先以無輻射的方式下降到第一激發(fā)態(tài)的低能級，而后再回到基態(tài)時(shí)，所發(fā)射出的光稱為熒光。由此可見，熒光是一種以光能為激發(fā)源的發(fā)射光，且波長(bōcháng)比激發(fā)光波長(bōcháng)更長，一般處于可見光區(qū)。熒光現(xiàn)象是物質(zhì)的屬性之一，并非能吸收激發(fā)光的物質(zhì)都能產(chǎn)生熒光現(xiàn)象。第十四頁，共二十四頁。執(zhí)業(yè)藥師復(fù)習(xí)資料-5第十五頁，共二十四頁。執(zhí)業(yè)藥師復(fù)習(xí)資料-5激發(fā)光譜是熒光強(qiáng)度對激發(fā)波長的關(guān)系曲線。發(fā)射光譜也稱熒光光譜，是熒光強(qiáng)度對發(fā)射波長的關(guān)系曲線。熒光光譜的形狀與激發(fā)波長無關(guān)。熒光光譜與激發(fā)光譜存在鏡像對稱“關(guān)系”。定量依據(jù)當(dāng)激發(fā)光的波長、強(qiáng)度、測定用溶劑、溫度等條件(tiáojiàn)一定時(shí)，物質(zhì)在低濃度范圍內(nèi)的熒光強(qiáng)度與溶液中該物質(zhì)的濃度成正比。第十六頁，共二十四頁。執(zhí)業(yè)藥師復(fù)習(xí)資料-5第十七頁，共二十四頁。執(zhí)業(yè)藥師復(fù)習(xí)資料-53．應(yīng)用(yìngyòng)

鑒別利用藥物顯熒光的特點(diǎn)進(jìn)行鑒別，如馬來酸麥角新堿的鑒別利用藥物本身無熒光，但處理后顯熒光的性質(zhì)(xìngzhì)進(jìn)行鑒別，如VB1的鑒別

含量測定對照品比較法，如地高辛片的含量測定第十八頁，共二十四頁。執(zhí)業(yè)藥師復(fù)習(xí)資料-5三、紅外分光(fēnɡuānɡ)光度法1．原理當(dāng)物質(zhì)分子吸收一定波長的光能，能引起分子振動(dòng)和轉(zhuǎn)動(dòng)能級躍遷，產(chǎn)生的吸收光譜一般在2.5μm～25μm或4000cm-1～400cm-1的中紅外光區(qū)，稱為紅外分子吸收光譜簡稱(jiǎnchēng)紅外光譜（infraredspectrum，IR）。利用紅外光譜對物質(zhì)進(jìn)行定性分析或定量測定的方法稱紅外分光光度法。第十九頁，共二十四頁。執(zhí)業(yè)藥師復(fù)習(xí)資料-5波數(shù)范圍：4000～400cm－1光譜產(chǎn)生(chǎnshēng)：是由分子的振動(dòng)、轉(zhuǎn)動(dòng)能級躍遷產(chǎn)生(chǎnshēng)。第二十頁，共二十四頁。執(zhí)業(yè)藥師復(fù)習(xí)資料-52．儀器(yíqì)基本組成光源→吸收池→單色器→檢測器→數(shù)據(jù)(shùjù)記錄和處理ChP規(guī)定對儀器波數(shù)的校正用聚苯乙烯薄膜為測試樣品，繪制紅外譜圖；對儀器分辨率有一定的要求。第二十一頁，共二十四頁。執(zhí)業(yè)藥師復(fù)習(xí)資料-53．紅外光譜(guāngpǔ)與結(jié)構(gòu)的關(guān)系特征區(qū)：4000～1300cm－1；指紋區(qū)：1300～400cm－1。注意：特征峰、相關(guān)(xiāngguān)峰概念及典型的紅外特征吸收峰位。第二十二頁，共二十四頁。執(zhí)業(yè)藥師復(fù)習(xí)資料-54．應(yīng)用(yìngyòng)鑒別按《藥品紅外光譜集》中收載的制備(zhìbèi)方法制備(zhìbèi)樣品，再與該品種的對照圖譜比較，應(yīng)一致。檢查主要用于無效或低效晶型的檢查，如甲苯咪唑中A晶型的檢查。第二十三頁，共二十四頁。執(zhí)業(yè)藥師復(fù)習(xí)資料-5內(nèi)容(nèiróng)總結(jié)第五章分光光度法。光譜產(chǎn)生：是由分子外