2019屆福建省高三下學(xué)期質(zhì)量檢查測(cè)試?yán)砜凭C合生物試題(解析版)

---【點(diǎn)睛】本題主要考查微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)、纖維素分解菌的鑒別等知識(shí)，意在考查學(xué)生把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力，能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)分析問題，并具備一定的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和完善能力。12.在基因工程的操作過程中，有多種方法可檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體菌?；卮鹣铝袉栴}：（1）PCR僉測(cè)法：根據(jù)一段已知目的基因的核甘酸序列設(shè)計(jì),對(duì)受體菌DNA?行擴(kuò)增，經(jīng)過解鏈、、延伸三個(gè)步驟的循環(huán)，檢測(cè) PCN"物的長(zhǎng)度是否與目的基因一致。（2）熒光蛋白基因篩選法：某種熒光蛋白（GFP在紫外線照射下會(huì)發(fā)出綠色熒光。用酶將目的基因和GFP基因拼接成融合基因，并與重組后導(dǎo)入受體菌，經(jīng)培養(yǎng)篩選能發(fā)出綠色熒光的菌落。（3）環(huán)絲氨酸輔助篩選法：四環(huán)素能使細(xì)菌停止生長(zhǎng)但不致死； 環(huán)絲氨酸能使正常生長(zhǎng)的細(xì)菌致死， 而對(duì)停止生長(zhǎng)的細(xì)菌不致死。某質(zhì)粒如圖所示（Am昧示氨茉青霉素抗性基因， Tetr表示四環(huán)素抗性基因），Tetr中插入目的基因后失活。用此質(zhì)粒構(gòu)建表達(dá)載體，轉(zhuǎn)化細(xì)菌后，結(jié)果有3種：未轉(zhuǎn)化的細(xì)菌、含質(zhì)粒的細(xì)菌、含重組質(zhì)粒的細(xì)菌。目的基因幅入位點(diǎn)復(fù)制原點(diǎn)①用含有和的培養(yǎng)基對(duì)上述3種細(xì)菌進(jìn)行篩選，只有含質(zhì)粒的細(xì)菌被淘汰，理由②在上述篩選的基礎(chǔ)上，若要篩選出含重組質(zhì)粒的細(xì)菌，還需使用含有的培養(yǎng)基。【答案】（1）.引物（2）.復(fù)性（退火）（3）. DNA1接（4）.運(yùn)載體（5）.四環(huán)素（6）.環(huán)絲氨酸（7）. 含質(zhì)粒的細(xì)菌有Tetr,四環(huán)素對(duì)其不起作用，環(huán)絲氨酸使其致死 （8）. 氨節(jié)青霉素【解析】【分析】PCR原理：在解旋酶彳用下，打開 DNAM鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核甘酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNAm合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的，DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNAm合酶只能從3'端延伸DNA鏈，PCRq應(yīng)過程是：變性一復(fù)性一延伸?；蚬こ滩僮髦幸玫较拗泼?、 DNA連接酶、載體，限制酶能夠識(shí)別雙鏈 DNA分子的特定核甘酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核甘酸之間的磷酸二酯鍵斷裂， DNA連接酶用于連接目的基因和載體；根據(jù)質(zhì)粒圖顯示，質(zhì)粒中含有 Amp和Tetr,目的基因的插入位點(diǎn)位于Tetr中，轉(zhuǎn)化細(xì)菌后有3種結(jié)果：未轉(zhuǎn)化的細(xì)菌、含質(zhì)粒的細(xì)菌、含重組質(zhì)粒的細(xì)菌，其中未轉(zhuǎn)化的細(xì)菌在含四環(huán)素的培養(yǎng)基

上停止生長(zhǎng)，含質(zhì)粒的細(xì)菌在四環(huán)素和氨芐青霉素培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)，含重組質(zhì)粒的細(xì)菌在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上停止生長(zhǎng)，但在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)?！驹斀狻浚?）PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定的 DNA片段的核酸合成技術(shù)，前提是要有一段已知目的基因的核甘酸序列， 以便根據(jù)這一序列合成引物； 對(duì)受體菌DNAS行擴(kuò)增，經(jīng)過解鏈、復(fù)性、延伸三個(gè)步驟的循環(huán)，檢測(cè) PCRT物的長(zhǎng)度是否與目的基因一致。（2）熒光蛋白基因篩選法：某種熒光蛋白（GFP在紫外線照射下會(huì)發(fā)出綠色熒光。用 DNA連接酶將目的基因和GFP基因拼接成融合基因，并與運(yùn)載體重組后導(dǎo)入受體菌，經(jīng)培養(yǎng)篩選能發(fā)出綠色熒光的菌落。（3）①用含有四環(huán)素和環(huán)絲氨酸的培養(yǎng)基對(duì)上述3種細(xì)菌進(jìn)行篩選，只有含質(zhì)粒的細(xì)菌被淘汰，原因是含質(zhì)粒的細(xì)菌有 Tetr，四環(huán)素對(duì)其不起作用，能正常生長(zhǎng)，而環(huán)絲氨酸能使其致死。②四環(huán)素能使細(xì)菌停止生長(zhǎng)但不致死，環(huán)絲氨酸能使正常生長(zhǎng)的細(xì)菌致死，而對(duì)停止生長(zhǎng)的細(xì)菌不致死，先在含有四環(huán)素和環(huán)絲氨酸的培養(yǎng)基上篩選出未轉(zhuǎn)化的細(xì)菌和含重組質(zhì)粒的細(xì)菌，未轉(zhuǎn)化的細(xì)菌在含四環(huán)素培養(yǎng)基上停止生長(zhǎng)，環(huán)絲氨酸不使其致死，含重組質(zhì)粒的細(xì)菌由于四環(huán)素抗性基因被破壞，故在含四環(huán)素培養(yǎng)基上停止生長(zhǎng)，而環(huán)絲氨酸對(duì)其不致死，重組質(zhì)粒在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)，若要篩選出含重組質(zhì)粒的細(xì)菌，還需使用含有的