毒理學(xué)第六章 一般毒性作用

Template

公共衛(wèi)生學(xué)院衛(wèi)生毒理教研室

第六章

一般毒性作用

(Generaltoxicity)【本章內(nèi)容】第一節(jié)概述※第二節(jié)急性毒性作用

第三節(jié)局部毒性作用△第四節(jié)短期、亞慢性和慢性毒性作用目的與要求掌握經(jīng)典急性毒性試驗(yàn)的方法了解急性毒性替代試驗(yàn)了解局部毒性作用第一節(jié)概述一、一般毒性作用的概念和意義亦稱基礎(chǔ)毒性，是與特殊毒性相對應(yīng)的概念。二、分類（按接觸毒物的時(shí)間長短）

急性、亞急性、亞慢性、慢性毒性作用。

案例6-1※第二節(jié)急性毒性作用

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

接觸或

多次接觸一定劑量的某種

化學(xué)物

內(nèi)所產(chǎn)生的健康作用和效應(yīng)。一、急性毒性（acutetoxicity）的概念接觸時(shí)間效應(yīng)類型觀察時(shí)間：14天※第二節(jié)急性毒性一次24小時(shí)內(nèi)外源短期損害致死二、急性毒性試驗(yàn)的目的確定受試物的一系列急性毒性參數(shù)（如LD50LD100）初步評價(jià)受試物對動(dòng)物的毒性和對人體產(chǎn)生損害的危險(xiǎn)性大小、毒效應(yīng)的特征、靶器官和劑量-反應(yīng)關(guān)系

為其他毒理研究染毒劑量和觀察指標(biāo)選擇提供依據(jù)為毒理學(xué)機(jī)制研究提供初步線索總體原則三、急性毒性試驗(yàn)方法要點(diǎn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物染毒途徑染毒劑量觀察指標(biāo)觀察周期計(jì)算方法1.根據(jù)接觸途徑選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物急性經(jīng)口和吸入毒性試驗(yàn)大鼠、小鼠急性經(jīng)皮毒性試驗(yàn)成年大鼠、豚鼠、家兔（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇和要求2.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的年齡和體重成年、健康、未曾交配和受孕的動(dòng)物小動(dòng)物根據(jù)體重同一次試驗(yàn)同一批實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重變異范圍不應(yīng)超過平均體重的20%實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇和要求3.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的性別雌雄各半如雌、雄動(dòng)物毒效應(yīng)有明顯差異，應(yīng)分別并求出雌性和雄性動(dòng)物的LD50值特殊的試驗(yàn)研究可僅作單一性別的急性毒性試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇和要求4.生理與健康狀況實(shí)驗(yàn)開始前觀察:

大、小鼠、兔、豚鼠5-7天，犬、猴2-3周適應(yīng)新環(huán)境，減少環(huán)境和生理?xiàng)l件變化可能對試驗(yàn)結(jié)果的影響篩檢健康狀況不符合試驗(yàn)要求的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇和要求5.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組與數(shù)量組數(shù)、每組數(shù)量：不同的試驗(yàn)方法要求不同方法：Bliss法、改良寇氏法和霍恩法等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇和要求6.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的給藥前禁食處理經(jīng)口途徑染毒，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物胃腸道內(nèi)食物存留量對化學(xué)毒物的毒性可產(chǎn)生較明顯的干擾大、小鼠隔夜禁食，染毒2h后提供飼料經(jīng)口多次染毒可不禁食實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇和要求(二)染毒途徑染毒途徑的選擇應(yīng)考慮的因素模擬人實(shí)際接觸的途徑和方式受試物毒性評價(jià)程序的要求

工業(yè)毒物：經(jīng)呼吸道、皮膚農(nóng)用化學(xué)物：經(jīng)口、皮膚、呼吸道藥品：經(jīng)口、注射、皮膚食品：經(jīng)口環(huán)境污染物：經(jīng)口、呼吸道、皮膚

染毒途徑消化道、呼吸道、皮膚、注射染毒途徑1.經(jīng)消化道染毒灌胃：溶液或混懸液，以注射器經(jīng)導(dǎo)管注入胃內(nèi)，等體積灌胃法（大、小鼠）吞咽膠囊：將受試物裝入膠囊中，放至舌后部，迫使動(dòng)物咽下（犬、猴）染毒途徑2.經(jīng)呼吸道染毒吸入染毒靜式吸入染毒動(dòng)式吸入染毒氣管注入染毒途徑優(yōu)點(diǎn)：可準(zhǔn)確定量缺點(diǎn)：不易折算為吸入濃度3.經(jīng)皮膚染毒農(nóng)藥、化妝品、工業(yè)、環(huán)境、外用藥物常用大鼠染毒方式：化學(xué)或機(jī)械法脫毛（體表面積的10%）局部涂敷或大鼠、小鼠浸尾法染毒方法4.注射染毒染毒方法——灌胃、腹腔注射（三）劑量選擇參考新化學(xué)物的理化性質(zhì)參考相關(guān)資料先用少量動(dòng)物，以較大的劑量間隔染毒，找出10%-90%（或0%-100%）的致死劑量范圍，然后設(shè)計(jì)正式實(shí)驗(yàn)的劑量和分組根據(jù)試驗(yàn)所選的LD50計(jì)算方法確定劑量組數(shù)全面觀察動(dòng)物的各種反應(yīng)和變化，仔細(xì)分析實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在染毒后出現(xiàn)的中毒表現(xiàn)、劑量效應(yīng)、時(shí)間分布。觀察記錄的內(nèi)容：中毒體征及發(fā)生過程死亡情況和時(shí)間分布體重病理形態(tài)學(xué)變化（四）毒性作用觀察毒性作用觀察1.中毒體征及發(fā)生過程詳細(xì)觀察和記錄動(dòng)物出現(xiàn)的中毒體征發(fā)生時(shí)間體征發(fā)展的經(jīng)過各個(gè)系統(tǒng)的特征初步確定急性毒性靶器官不同表現(xiàn)提供毒性機(jī)制的信息

續(xù)表6-1嚙齒類動(dòng)物急性中毒表現(xiàn)

心電圖的波形和意義S-T段下移、上移常見于心肌缺血活或心肌梗塞等。T波低平或倒置，常見于心肌缺血等。Q-T間期延長見于心動(dòng)過緩、心肌損害、心力衰竭、冠心病。心血管毒性作用觀察2.中毒癥狀、死亡情況和時(shí)間分布實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的死亡數(shù)對LD50值產(chǎn)生明顯影響分析中毒死亡時(shí)間的分布規(guī)律可以提供重要信息：原形、代謝毒性作用觀察3.體重反映動(dòng)物中毒后綜合性整體變化，比較客觀簡便的量化指標(biāo)應(yīng)定期多次稱量動(dòng)物的體重變化，至少1次/2-3天對體重指標(biāo)的變化要仔細(xì)觀察和分析體重變化的原因：影響食欲或消化系統(tǒng)的功能影響食物的吸收和利用影響水的攝取腎功能急性損傷毒性作用觀察4.病理檢查死亡動(dòng)物：大體病理變化存活動(dòng)物：觀察期結(jié)束時(shí)亦應(yīng)進(jìn)行解剖檢查，必要時(shí)做組織病理學(xué)檢查毒性作用觀察圖

大鼠肺組織HE染色（200×）（五）觀察時(shí)間和周期染毒以后應(yīng)即刻開始觀察動(dòng)物中毒表現(xiàn)和死亡情況染毒當(dāng)天應(yīng)連續(xù)或多次觀察，以后可根據(jù)情況，每天2次或多次觀察直至試驗(yàn)周期結(jié)束觀察周期一般為14天LD50(LC50)計(jì)算時(shí)以觀察周期內(nèi)各組動(dòng)物的總死亡數(shù)為依據(jù)（六）計(jì)算方法急性毒性試驗(yàn)求出LD50(LC50)值，通過LD50值進(jìn)行急性毒性分級(jí)(acutetoxicityclassification)，評價(jià)毒物的急性毒性強(qiáng)弱，比較毒物的急性毒性大小。四、急性毒性分級(jí)急性毒性分級(jí)

-7-213579111315每日檢查死亡數(shù)和發(fā)病數(shù)，對觀察到死亡的動(dòng)物進(jìn)行大體解剖觀察結(jié)束，大體解剖研究天數(shù)經(jīng)常并多方面的觀察試驗(yàn)動(dòng)物情況劑量（mg/kg）02006002000試驗(yàn)組5/性別5/性別5/性別5/性別適應(yīng)期稱重，劑量稱重稱重稱重稱重總結(jié)經(jīng)典急性毒性試驗(yàn)設(shè)計(jì)流程圖圖

不同藥物毒效應(yīng)量-效關(guān)系比較斜率的大小在比較同系列化合物時(shí)顯得更為重要：兩個(gè)藥物可能有一個(gè)完全相同或相近的LD50值，但斜率卻可以不同，因此，在相同的劑量范圍內(nèi)，表現(xiàn)出不同的毒理學(xué)特征具平行量-效曲線的兩藥盡管LD50不同，但卻可能表現(xiàn)出相近的毒性作用機(jī)制、藥動(dòng)學(xué)特征和相似的預(yù)后LD50的優(yōu)缺點(diǎn)總結(jié)：優(yōu)點(diǎn)：①LD50是用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法計(jì)算得出的數(shù)值，與其他急性毒性參數(shù)（如LD01，LD0

，LD100

）比，重現(xiàn)性較好，相對穩(wěn)定。②LD50反應(yīng)受試動(dòng)物群體中大多數(shù)動(dòng)物感受的平均情況。從劑量-死亡曲線看，LD50處于曲線上升中段，是死亡率相對劑量變化最敏感的部位。缺點(diǎn)：①動(dòng)物消耗量大,獲得的信息有限②影響LD50值的因素較多，不同實(shí)驗(yàn)室對相同受試物所得到的LD50值可能有很大差異③從安全性評價(jià)角度來講，需要的不是精確的LD50值，而是更多的毒性信息五、急性毒性替代實(shí)驗(yàn)限量實(shí)驗(yàn)（limittest）

不是真正的替代法，而是傳統(tǒng)方法的一種特例。

適用條件：受試物的毒性很低-7-2148121416觀察期適應(yīng)期死亡（1）（天）動(dòng)物選擇，劑量10g/kg5只/性別結(jié)束結(jié)果：如動(dòng)物無死亡，則可認(rèn)為LD50大于此劑量

如動(dòng)物出現(xiàn)死亡，應(yīng)選擇其他方法進(jìn)一步測試固定劑量法（fixeddosemethod）特點(diǎn)：固定劑量（5、50、300或2000mg/kg）

觀察指標(biāo)是明顯毒性，而非死亡，故結(jié)果不是具體的LD50值。劑量mg/kg

試驗(yàn)結(jié)果存活數(shù)<100%100%存活,毒性表現(xiàn)明顯100%存活,無明顯中毒表現(xiàn)5高毒LD50<25mg/kg有毒用50mg/kg試驗(yàn)50有毒或高毒用5mg/kg試驗(yàn)有害LD50為200-2000mg/kg用300mg/kg試驗(yàn)300有毒或有害用50mg/kg試驗(yàn)LD50>2000mg/kg用2000mg/kg試驗(yàn)2000用300mg/kg試驗(yàn)該化學(xué)物無嚴(yán)重急性中毒的危險(xiǎn)性

注：歐共體（EEC）的急性經(jīng)口毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)為：高毒（verytoxic,LD50<25mg/kg）有毒（toxic,LD50為25~200mg/kg）

有害（harmful,LD50為200~2000mg/kg）

不分級(jí)（unclassified,LD50>2000mg/kg）急性毒性分級(jí)法（acutetoxicclassmethod）效應(yīng)終點(diǎn)：死亡分階段試驗(yàn)：每階段3只動(dòng)物，平均經(jīng)2~4階段即可判定急性毒性。具體方法：利用4個(gè)設(shè)定劑量（5、50、300或2000mg/kg）之一開始進(jìn)行試驗(yàn)，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷：①不需進(jìn)一步試驗(yàn)即可分級(jí)；②下一步試驗(yàn)降低一檔或升高一檔劑量進(jìn)行；③下一階段以相同劑量的另一種性別進(jìn)行試驗(yàn)。

根據(jù)在某一染毒劑量下發(fā)生死亡的數(shù)量來判定大致的LD50范圍，直接進(jìn)行毒性分級(jí)。優(yōu)點(diǎn)：所用動(dòng)物少，仍可得到可接受的結(jié)論上下法（up-and-downprocedure）終點(diǎn)觀察：通常為死亡，也可用于觀察其他的毒性終點(diǎn)具體方法：所需動(dòng)物數(shù)：僅需6-10只單性別動(dòng)物-7-21359111315171923（天）劑量：17.555175550175550175550mg/kg

①②③④⑤⑥⑦⑧適應(yīng)期第一部分第二部分觀察期結(jié)束死亡死亡死亡OOOXXXOO小結(jié)※一、急性毒性概念

二、目的※三、方法要點(diǎn)

（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

（二）染毒途徑

（三）染毒劑量

△（四）觀察指標(biāo)

（五）觀察周期

（六）計(jì)算方法

四、毒性分級(jí)

五、替代試驗(yàn)思考題以化學(xué)物CuSO4為例，設(shè)計(jì)一個(gè)完整的急性毒性試驗(yàn)。第三節(jié)局部毒性作用（localtoxiceffect）

亦稱局部刺激作用，指機(jī)體暴露于化學(xué)物后，在其接觸和暴露部分造成的局部毒性損傷、刺激（如眼刺激、皮膚刺激）和（或）變態(tài)反應(yīng)等。

類型：眼刺激試驗(yàn)、皮膚刺激/腐蝕性試驗(yàn)、皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)

目的：了解外援化學(xué)物對皮膚、眼睛的局部刺激性、腐蝕性和致敏性一、眼刺激試驗(yàn)（eyeirritationtest）

觀察終點(diǎn)為化學(xué)物導(dǎo)致的眼刺激和眼腐蝕性。眼刺激指眼球表面接觸受試物后所產(chǎn)生的可逆性炎性變化，而眼腐蝕性指眼球表面接觸受試物后引起的不可逆性組織損傷。（一）眼刺激試驗(yàn)的傳統(tǒng)方法家兔眼刺激試驗(yàn)（Draize試驗(yàn)）

受試物以一次劑量滴入每只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的一側(cè)眼結(jié)膜囊內(nèi)，以未作處理的另一側(cè)眼作為自身對照。在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)觀察對兔眼的刺激和腐蝕作用程度并按規(guī)定的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評分。

觀察指標(biāo)：結(jié)膜、角膜、虹膜觀察時(shí)間：一般為7天，必要時(shí)可延長至21天缺點(diǎn)：主觀判斷為主（二）眼刺激試驗(yàn)替代方法用非試驗(yàn)動(dòng)物組織替代兔眼檢測細(xì)胞膜損傷的溶血試驗(yàn)檢測血紅蛋白變性細(xì)胞毒性試驗(yàn)生物模型替代法和其他非生物試驗(yàn)法二、皮膚刺激試驗(yàn)（skinirritationtest）

包括單次和多次皮膚刺激試驗(yàn)、完整皮膚和破損皮膚刺激試驗(yàn)等，其觀察終點(diǎn)為皮膚刺激和皮膚腐蝕性。（一）經(jīng)典的皮膚刺激實(shí)驗(yàn)（

Draize

試驗(yàn)）將受試物一次或多次涂敷于受試物的皮膚上，在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)觀察皮膚反應(yīng)。試驗(yàn)動(dòng)物：家兔、豚鼠觀察期限：一般不超過14天，應(yīng)足以評價(jià)其作用的可逆性或不可逆性（一）經(jīng)典的皮膚刺激/腐蝕替代試驗(yàn)單層皮膚細(xì)胞培養(yǎng)模型表皮組織培養(yǎng)模型器官型人工皮膚模型三、皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)（skinsensitizationtest）

皮膚變態(tài)反應(yīng)又稱過敏性接觸皮炎或皮膚致敏反應(yīng)，是皮膚對化學(xué)物產(chǎn)生的免疫源性皮膚反應(yīng)。人體癥狀：瘙癢、紅斑、丘疹、水皰、融合水皰等動(dòng)物癥狀：皮膚紅斑、水腫（一）傳統(tǒng)皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)方法局部封閉涂皮法豚鼠最大值試驗(yàn)：誘導(dǎo)接觸和激發(fā)接觸局部淋巴結(jié)試驗(yàn)（locallymphnodeassay,LLNA）

（二）皮膚致敏體外替代方法

基于樹突狀細(xì)胞及T細(xì)胞等接觸性過敏性皮炎誘導(dǎo)相和激發(fā)相中的關(guān)鍵免疫細(xì)胞的“免疫識(shí)別”化學(xué)過敏原過程，發(fā)展利用細(xì)胞系建立相關(guān)模型建立化學(xué)物滲透表皮生發(fā)層/真皮層的皮膚模型角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)模型※第四節(jié)短期、亞慢性和慢性毒性作用一、概述（一）急性毒性試驗(yàn)的局限性

外源性化學(xué)物在長期重復(fù)染毒時(shí)可產(chǎn)生與急性毒性試驗(yàn)完全不同的毒作用。動(dòng)物的衰老可影響毒作用的性質(zhì)和程度許多重要疾病均與年齡增長有關(guān)（二）分類根據(jù)機(jī)體接觸外源化學(xué)物時(shí)間的長短：短期毒性作用（重復(fù)劑量、亞急性）亞慢性毒性慢性毒性（三）蓄積作用1.蓄積作用（accumulation）當(dāng)外源化學(xué)物連續(xù)、反復(fù)地進(jìn)入機(jī)體，且吸收速度/總量超過代謝轉(zhuǎn)化排出的速度/總量時(shí)，該物質(zhì)就有可能在體內(nèi)逐漸增加和蓄積，稱為化學(xué)物的蓄積作用。蓄積作用是發(fā)生亞慢性、慢性毒作用的前提2.儲(chǔ)存庫（depot）外源化學(xué)物或其代謝產(chǎn)物在機(jī)體內(nèi)蓄積的部位稱為儲(chǔ)存庫或蓄積器官。蓄積形式：原型

代謝產(chǎn)物結(jié)合形式3.蓄積的分類物質(zhì)蓄積（materialaccumulation）

機(jī)體反復(fù)多次接觸化學(xué)物后，可用化學(xué)分析法在體內(nèi)測出該物質(zhì)的原型或代謝產(chǎn)物的蓄積，這種蓄積稱為物質(zhì)蓄積。功能蓄積（functionalaccumulation）如在機(jī)體內(nèi)不能測出其原形或代謝產(chǎn)物的蓄積，卻產(chǎn)生了相應(yīng)的慢性毒性作用，則稱為功能蓄積。注：功能蓄積是損害效應(yīng)累計(jì)的結(jié)果技術(shù)方法尚不能檢出的一種物質(zhì)蓄積物質(zhì)蓄積與功能蓄積兼而有之4.機(jī)體耐受性當(dāng)外源化學(xué)物與機(jī)體多次相互作用后，機(jī)體對于本來可引起一定毒效應(yīng)的劑量，可能不再引起反應(yīng)，故欲產(chǎn)生原有效應(yīng)，必須加大劑量，這種現(xiàn)象即機(jī)體對化學(xué)物產(chǎn)生了耐受性耐受性是蓄積毒性的表現(xiàn)之一4.蓄積作用的意義化學(xué)物是否引起潛在的慢性毒性依據(jù)制定衛(wèi)生限量標(biāo)準(zhǔn)時(shí)選擇安全系數(shù)的一種依據(jù)二、短期毒性作用重復(fù)劑量毒性作用、亞急性毒性作用指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或人連續(xù)接觸外源化學(xué)物4周（28天）內(nèi)所產(chǎn)生的毒效應(yīng)短期毒性試驗(yàn)?zāi)康?/p>

初步確定相應(yīng)的NOAEL和（或）LOAEL為亞慢性和慢性毒性試驗(yàn)劑量選擇、觀察指標(biāo)、效應(yīng)終點(diǎn)提供依據(jù)我國食品、消毒劑、農(nóng)藥和新化學(xué)品的毒理學(xué)評價(jià)NOAEL和LOAEL三、亞慢性毒性（subchronictoxicity）(一)概念指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或人連續(xù)較長期（約相當(dāng)于其生命周期的1/10）接觸外源化學(xué)物所產(chǎn)生的中毒效應(yīng)嚙齒類動(dòng)物規(guī)定染毒期限為90天，犬為1年

（二）亞慢性毒性試驗(yàn)的目的研究受試物亞慢性毒性劑量一反應(yīng)關(guān)系，確定其NOAEL和（或）LOAEL確定受試物亞慢性毒性的效應(yīng)譜，毒作用特點(diǎn)和靶器官研究受試物亞慢性毒性損害的可逆性為慢性毒性試驗(yàn)的劑量設(shè)計(jì)及觀察指標(biāo)選擇提供依據(jù)（三）亞慢性毒性試驗(yàn)的方法要點(diǎn)1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇選擇兩種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，一種為嚙齒類，另一種為非嚙齒類亞慢性毒性試驗(yàn)期較長，選擇動(dòng)物的體重(年齡)應(yīng)較小

年齡：大鼠50~100g

狗4~6月小鼠10~15g數(shù)量：小動(dòng)物≥20

大動(dòng)物≥8性別：雌雄各半2.染毒途徑與染毒頻率染毒途徑的選擇：盡量選擇與人群實(shí)際接觸途徑相似的途徑應(yīng)與預(yù)期進(jìn)行慢性毒性試驗(yàn)的接觸途徑相一致具體接觸途徑主要有經(jīng)口、經(jīng)呼吸道和注射染毒三種。染毒頻率：1次/日，連續(xù)給予5次或6次/周（1）經(jīng)口染毒

大鼠、小鼠：灌胃法、喂飼法

犬：膠囊法

食品或食品污染物：喂飼法（比例：5%-10%）（2）經(jīng)呼吸道染毒

2~6h/天，工業(yè)毒物可以縮短至1小時(shí)或延長，環(huán)境污染物可延長至8小時(shí)（3）注射染毒

靜脈注射、腹腔注射染毒途徑3.劑量選擇和分組（1）有LD50的受試物陰性對照組低劑量組：動(dòng)物無中毒反應(yīng)（相當(dāng)于NOAEL）中劑量組:兩者之間（LOAEL）高劑量組：（1/20~1/5）LD50

組距：2-4倍（2）無LD50的受試物采用人體可能擬用的最高劑量為劑量設(shè)計(jì)依據(jù)

藥品：10、30和100倍臨床用量（大鼠）5、15和50倍臨床用量（非嚙齒類）

食品：最大給予量4.觀察指標(biāo)的選擇外觀生長發(fā)育行為功能毒性體征一般觀察亞慢性毒性試驗(yàn)過程中器官/組織最終體重臟器濕重臟/體比大體尸解病理觀察生物體液血液學(xué)血生化尿常規(guī)生物學(xué)指標(biāo)酶內(nèi)源性成分膽汁尿注：其他特異性指標(biāo)活殺解剖（1）一般觀察

動(dòng)物體重：每周稱量所有動(dòng)物體重一次每周觀察并記錄飼料消耗量食物利用率：即動(dòng)物每食入100g飼料所增長的體重克數(shù)（g體重/100g飼料）中毒癥狀（2）實(shí)驗(yàn)室檢測項(xiàng)目

血液學(xué)指標(biāo)：紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白濃度、白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類、血小板計(jì)數(shù)、凝血時(shí)間等血液生化學(xué)指標(biāo)：ALT、AST、AKP、Urea、Cre、Glu、TP、Alb、TC、TG（3）病理學(xué)檢查

大體解剖檢查：所有動(dòng)物臟器系數(shù)：指某個(gè)臟器的濕重和單位體重的比值，通常是每100g體重中某臟器所占的質(zhì)量。表示為臟器質(zhì)量（g）/體重（100g），又稱臟/體比值組織病理學(xué)(4)可逆性觀察

最后染毒后24小時(shí)，每組活殺動(dòng)物(如2/3)，檢測各項(xiàng)指標(biāo)，剩下停止染毒，繼續(xù)觀察4周如病理學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)有異常變化，應(yīng)將剩下動(dòng)物活殺剖檢，重點(diǎn)觀察毒性反應(yīng)器官(5)特異性指標(biāo)

指毒物對機(jī)體毒作用本質(zhì)的特征性指標(biāo)，與其毒作用機(jī)制有關(guān)，有時(shí)可作為效應(yīng)生物學(xué)標(biāo)志根據(jù)受試物毒性資料，適當(dāng)增加檢測指標(biāo):心血管系統(tǒng)有毒性內(nèi)分泌毒性免疫毒性神經(jīng)毒性5.觀察時(shí)間每天觀察一次一般狀況和癥狀每周記錄飼料消耗量和動(dòng)物體重各一次恢復(fù)期觀察停止給予受試物后繼續(xù)觀察28天四、慢性毒性（chronictoxicity）指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或人長期接觸外源化學(xué)物所引起的毒性效應(yīng)。注：新藥臨床前長期毒性評價(jià)：一般為臨床用藥的2-3倍。（一）慢性毒性試驗(yàn)?zāi)康拇_定在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的大部分生命期間重復(fù)給予受試物而引起的慢性毒性效應(yīng)闡明受試物慢性毒性的劑量-反應(yīng)關(guān)系和靶器官確定慢性毒性的NOAEL和（或）LOAEL為預(yù)測人群接觸該受試物后可能發(fā)生慢性毒性的危險(xiǎn)性，并為制定人群的接觸限制提供依據(jù)1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和染毒途徑的選擇

與亞慢性毒性試驗(yàn)相同性別：雌雄各半年齡：不超過9周大鼠（短期）

6～8周齡大鼠（亞慢性）剛斷乳大鼠（慢性）數(shù)量：每組不少于10只（短期）每組不少于20只（亞慢性）每組不少于40只（慢性）（二）慢性毒性試驗(yàn)方法要點(diǎn)2.染毒劑量和期限的