兒童原發(fā)性免疫缺陷病

兒童原發(fā)性免疫缺陷病的臨床表型及基因診斷分析1952年發(fā)現(xiàn)首例X-連鎖無(wú)丙種球蛋白血癥(X-Iinkedagammaglobulinemia,XLA多PIDPID2001502-3PID和致病基PID臨床表現(xiàn)多種多樣,程度輕重不一,但共同臨床特點(diǎn)均為嚴(yán)重、反復(fù)或持久PIDPID患兒也不能接觸已經(jīng)服用了活的脊髓灰質(zhì)炎病毒疫苗的兒童。我TIgA缺乏癥的患兒應(yīng)避免使用含有IgAIgAPID病兒生后易患嚴(yán)10100PIDPID40%1,405,15165%PIDPIDPID有關(guān)PID的發(fā)病率,世界范圍內(nèi)已有許多國(guó)家展了全國(guó)范圍的PID登記,并且公布了其發(fā)病情況,根據(jù)國(guó)外的資料,澳大利?報(bào)道PID發(fā)病率約為人口的2.82/100()00[3],其中還不包括無(wú)癥狀性IgA、IgG1/5香港地區(qū)報(bào)道約為1/8000[4]不,同類(lèi)型PID發(fā)病情況差異很大,如重癥聯(lián)合免疫缺陷病(Severecombinedimmunodeficiency1/100擇性IgAPID1/5活3000PID60005~1050099%的PID1970WHO和國(guó)際免疫協(xié)會(huì)(ImmunologicalSocieties,2?3PID2009PID及PID新分類(lèi)進(jìn)行了充分討論。目前PIDT細(xì)胞和B細(xì)胞聯(lián)合免疫缺陷病、以抗體7PID550%,包括X3(Common;TB220%,包括X-(X-linkedseverecombinedimmunodeficiencydisease,XL-SCID)Omenn綜合征各1220%,包括高IgE綜合征(Hyper-IgEsyndrome,HIES)各11占10%(Chronicgranulomatous10例PID斷和治療PIDX(X-linkedagammaglobulinemia,XLA)是由于人類(lèi)B細(xì)胞系列發(fā),1952Bmton病是Bmton酪氨酸激酶(BmtontyrosineBBTK基BTKBTK究在臨床上通過(guò)檢測(cè)B細(xì)胞數(shù)目、免疫球蛋白定量及基因分析確診3XLA。現(xiàn)對(duì)其臨床表型和基因診斷分析總結(jié)如下,以提高對(duì)該病的認(rèn)識(shí)。資料與方法一般資料本組3例,為2005.08?2009.12就診于本院兒科的患兒,均為男性,3例均來(lái)自貴州,均為漢族。發(fā)病年齡分別為315412623911619XLA臨床擬診依據(jù)我國(guó)XLA

復(fù)較嚴(yán)重細(xì)

或不伴有母系家族中有類(lèi)似疾病表現(xiàn)的男性患者。1.3常規(guī)免疫功能評(píng)價(jià)血清免疫球蛋白測(cè)定采用免疫池度法,使用免疫球蛋白IgG、IgM、IgA檢測(cè)試B淋巴細(xì)胞分化簇(CD)測(cè)定使用突光標(biāo)記的抗CD19、抗CD3、抗CD4和抗CD8,BD軟件分析。RT-PCR及序列測(cè)定BTK基因突變情況基因擴(kuò)增采集患兒及母親外周靜脈血各約5TotalRNAPurificationKit(GenemegaRNA,l}xgRNA為模板,應(yīng)用隨機(jī)引物進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA,]設(shè)計(jì)4RT-PCR方法擴(kuò)增BTKcDNAPCR:9°C預(yù)變性5min;4C172°C10。

C1

CImin35瓊脂糖凝膠電泳鑒定鋪板制備1.5,120壓電泳30BTK基因序列測(cè)定BTK基因組DNA的PCR產(chǎn)物采用QIAGEN瓊脂糖膠回收試劑結(jié)果臨床表現(xiàn)本組3例,臨床表現(xiàn)以反復(fù)感染為主。均有反復(fù)發(fā)作的上呼吸道感染、肺炎及腹灣表現(xiàn),例1反復(fù)多次患中耳炎、鼻竇炎;例2有反復(fù)全身膿皰瘆史,并因左髖關(guān)節(jié)91133.5歲時(shí)死亡。2.2體格檢查家族史3例家族史均不十分明確。病例2有一弟弟,1年患12次以上呼吸道感染,不能23123例血清IgG、IgMIgA白低下的程度與發(fā)病早晚和臨床表現(xiàn)的嚴(yán)重程度無(wú)關(guān)。循環(huán)B細(xì)胞水平均明顯低下,B2CD4/CD8比值明顯倒置。診斷時(shí)Ig水平/g'L循環(huán)B細(xì)胞IS~T77V~(CD19)/%IgGIgMIgABTK3例經(jīng)基因診斷明確存在BTK突變。例1為外顯子9的949位G缺失,例2為外顯子17的錯(cuò)義突變,例3為外顯子15的錯(cuò)義突變,對(duì)例2、例3患兒母親進(jìn)行BTK23常,治療及預(yù)后3(Intravenousimmunoglobulin,,400mg/kg1?2月13IVIG替代治療死亡。3XLA致病基因已經(jīng)成功克隆,所編碼的蛋白屬于酪氨酸激酶家族,稱(chēng)為BTK,BTKBB淋巴細(xì)胞的分BB淋巴細(xì)胞和楽細(xì)胞導(dǎo)致各類(lèi)免疫球X-連鎖隱性遺傳0.5?1/1萬(wàn)[9BTK定位于X染色體q21.3-2BTK基因全長(zhǎng)37.5kb19118個(gè)編碼BTK蛋白的659BTK屬于非受體型蛋白酪氨酸激酶Tec5N末端起為PHTHSH3SH2TK段RT-PCR及序列測(cè)定BTK基因突變情況明確診斷。該病典型病例發(fā)病年齡多于出生后4?12315ConleyXLA3?44?921284262263Conley53個(gè)研究機(jī)構(gòu)診斷XLA3520%12XLA診斷時(shí)平均年齡3.5歲]。國(guó)外報(bào)道也見(jiàn)5139116195721126B淋巴細(xì)胞數(shù)顯著降低及缺乏各類(lèi)免疫球Lederman等74%ConleyXLA患者上呼吸道感染以中耳炎、鼻竇炎為4]313XLA合并支氣管內(nèi)膜結(jié)核的報(bào)道2該病特征性的體征是扁桃體和淺表淋巴結(jié)發(fā)育不良。盡管存在反復(fù)細(xì)菌感染,局XLA和進(jìn)一步進(jìn)行免疫功能評(píng)價(jià)具有重要指導(dǎo)意義。此外,XLA患兒普遍存在營(yíng)養(yǎng)不良和生長(zhǎng)發(fā)育延遲,1-DNA21,9歲時(shí)因左髖關(guān)節(jié)脫位和化膿性左髖關(guān)節(jié)炎而行髓關(guān)節(jié)復(fù)位術(shù)和切33.5歲夭折。20%的XLAXLAXLA115XLA71XLA為X50%2、例3的母親進(jìn)行BTK分析,23實(shí)驗(yàn)室檢查蛋白電泳顯示免疫球蛋白比例血清IgGIgAIgM水平顯著減,IgG常少于2g/。BTK突變類(lèi)型與血清Ig水平和疾病的嚴(yán)重程度并無(wú)直接關(guān)〗4。本組外周血B細(xì)胞明顯降低或缺如。在基因突變方有學(xué)者對(duì)來(lái)自973個(gè)不相關(guān)家庭中的1111名BTK基因突變病例進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)錯(cuò)義突變40%,無(wú)意義突變17%,缺失20%,剪接錯(cuò)誤16%,插入7%[19]。本組3例患兒基因分析均證實(shí)存在BTK基因突例1為BTK基因錯(cuò)義突外顯子9的949位G缺)例2為BTKcDNA1764G>T 錯(cuò)義突導(dǎo)致編碼氨基酸R544S患兒母親為該基因異?；驍y帶者。例3為BTKcDNA 16370A錯(cuò)義突導(dǎo)致編碼氨基酸C502Y,患兒母親為該基因異常基因攜帶者。靜脈注射免疫球蛋白替代療法是治療該病的標(biāo)準(zhǔn)療法Roifman等_研究發(fā)與低劑(200mg/kg次每月1次相比高劑(600mg/kg次每月1次)維持血清IgG谷質(zhì)量濃度>5g/l可減少感染的機(jī)會(huì)并能改善肺功能。血清IgG谷質(zhì)量濃度可減少支氣管擴(kuò)張的發(fā)生早期即開(kāi)始大劑量IVIG治療的患者其肺炎細(xì)菌性腦膜炎及胃腸道感染的發(fā)生率明顯降低關(guān)節(jié)炎的控制也較理想。因此最好在嬰兒期就開(kāi)始大劑量IVIG治療治療的目標(biāo)是使血清IgG濃度維持在以上此3例均使用丙種球蛋白次每1?2月1治療有效。對(duì)于病情嚴(yán)重的患可試行骨髓移植重建免疫治療。此外應(yīng)用基因治療方法進(jìn)行免疫重建也在研究之中Drabek等通過(guò)人類(lèi)BTKcDNA與鼠MHCII區(qū)調(diào)節(jié)因子的轉(zhuǎn)基因治療糾正了BTK缺陷鼠的B淋巴細(xì)胞功能。臨床醫(yī)師應(yīng)加強(qiáng)對(duì)這類(lèi)免疫缺陷病的認(rèn)對(duì)疑似病例進(jìn)行免疫功能評(píng)價(jià)及BTK基因檢測(cè)提高該病的診斷率及早診斷減少并發(fā)癥的發(fā)生及病死率通過(guò)BTK基因分析也有利于發(fā)現(xiàn)攜帶者和進(jìn)行遺傳咨詢。(CommonvariableimmunodeficiencyVID)一組病因不同的主要影響抗體合成的另一個(gè)常見(jiàn)的以抗體缺陷為主的CVID發(fā)病率為1/1020?30B細(xì)胞數(shù)目、免疫球蛋白定量及基因分析排除其它XLA、高IgM2例CVID,資料與方法一般資料2201052011137613610。結(jié)果臨床表現(xiàn)本組2例均有反復(fù)上下呼吸道感染,例1患中耳炎及反復(fù)肺炎,2次合并膿胸、2反復(fù)雀斑樣皮疫,嚴(yán)重時(shí)高出皮面,平素為色素沉著斑,例2長(zhǎng)期全身淋巴結(jié)腫大,曾行頸部淋體格檢查例1淺表淋巴結(jié)、扁桃體、肝脾腫大。例2全身皮膚可見(jiàn)散在色素沉著斑,顏面家族史家族史均為陰性。實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果例126.92-47.9XI09/L,CRPK18mm/h,外周血免疫球蛋白IgA、IgG、IgM均下降明顯(見(jiàn)表3)。流式細(xì)胞儀檢測(cè)提示外周血T淋巴細(xì)胞占73.6%,B淋巴細(xì)胞占6.6%。胸部CT示雙肺感染合并左側(cè)胸腔積液、左肺膿腫。腹部B超提示左側(cè)包裹性胸腔積液。例2WBC12.6X109/L,N79.1%,L11.6%,CRPl球蛋白IgG降低,IgM明顯升高,IgA、IgE無(wú)明顯異常。胸部CT提示雙側(cè)腋窩、縱膈淋巴結(jié)腫大。腹部B超:肝脾腫大,腹腔淋巴結(jié)腫大。骨髓活檢:增生明顯活躍,粒系百分比偏高,形態(tài)大致正常。細(xì)胞免疫:B淋巴細(xì)胞降低,NK細(xì)胞3.6%,Th/Ts0.27例均經(jīng)基因分析排除XLA、高IgM綜合征、重癥聯(lián)合免疫缺陷病及伴有低免2.511?2IVIG替(400rng/k2身感染加重而死亡。討論CVID發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,是主要影響抗體合成的PID。該病發(fā)病率較高,可發(fā)生于(TransmembraneactivatorandCAMLinteractor,AI(inducibleICOS)f26CD19的突變都可導(dǎo)致CVID[27]。CVIDTBTB細(xì)胞數(shù)多數(shù)正常,少數(shù)病例可表現(xiàn)B細(xì)胞減少XLA鑒別XLA,酸和維生素Bi22XLA23XLA發(fā)病年齡多于出生后4?12XLA水平,絕大多數(shù)患者血清IgG含量不超過(guò)300mg/dl500mg/d?；純和庵苎狟B細(xì)胞表面標(biāo)記正常,外周血B細(xì)胞呈未成熟狀態(tài)。外周血T細(xì)胞數(shù)大致正常,經(jīng)絲裂原PID2IgG0.01g3.49g/1血B淋巴細(xì)胞占6.6%2血B淋巴細(xì)胞2.6%,2例均經(jīng)基因分析排除XLA、高IgMCVID治療上同XLA,CVID3?41IgGXLA報(bào)道有存活至702955451在明確診斷后給予定期行IVIG2因放棄治療全身感染加重而死亡。X-連鎖重癥聯(lián)合免疫缺陷病的臨床表型及基因診斷分析(Severecombinedimmunodeficiencydisease,CD)T細(xì)胞生長(zhǎng)和T8SCID,分別是IL-2受體C鏈ARTEMISRAGKRAG2、ADA、CD45JAK3和TB)NK細(xì)胞的不同缺陷,SCID

T(-)B(+)NK(+)等。SCID的遺傳方式有X-X-連鎖重癥聯(lián)合免疫缺陷病(X-linkedsevercombinedimmunodeficiencydiseaseXL-SCID)最常見(jiàn),占SCID病例的50%?60%[35]:TNK細(xì)胞(CD16+CD56+)缺如或顯著減少;B結(jié)合臨床表現(xiàn)和基因分析明確診斷1例XL-SCID資料與方法一般資料20113241.2常規(guī)免疫功能評(píng)價(jià)同第一節(jié)1.3。1.3IL-2RGRNA快速提取試劑盒(Genemega,SanDiego,CA,USA)提取總RNA;用血液基因組DNA產(chǎn)物用瓊脂糖膠回收試劑盒(Qiagen,Hilden,GermanABIPRISM3100測(cè)序儀(PEAppliedPCR結(jié)果臨床表現(xiàn)患兒出生后25次粗濕卩羅音。家族史實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果患兒輔查WBC19.0X1