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文檔簡介
/4PCR培訓(xùn)班考試試題一、選擇題(共20題,每題2分)1、PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA,需要的條件是(A)①目的基因②引物③四種脫氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖體A、①②③④B、②③④⑤C、①③④⑤D、①②③⑥2、鎂離子在DNA或RNA體外擴(kuò)增反應(yīng)的濃度一般為(D)A、0.3-1mmol/LB、0.5-1mmol/LC、0.3-2mmol/LD、0.5-2mmol/L3、多重PCR需要的引物對(duì)為(D)A、一對(duì)引物B、半對(duì)引物C、兩對(duì)引物D、多對(duì)引物4、PCR是在引物、模板和4種脫氧核糖核苷酸存在的條件下依賴于DNA聚合酶的酶促合成反應(yīng),其特異性決定因素為(B)A、模板B、引物C、dNTPD、鎂離子5、在PCR反應(yīng)中,下列哪項(xiàng)可以引起非靶序列的擴(kuò)增的擴(kuò)增(C)A、TaqDNA聚合酶加量過多B、引物加量過多C、A、B都可D、緩沖液中鎂離子含量過高6、PCR技術(shù)的發(fā)明人是(A)A、MullisB、史蒂文.沙夫C、蘭德爾.才木7、PCR產(chǎn)物短期存放可在(A)保存。A、4°CB、常溫C、-80°CD、高溫8、PCR產(chǎn)物長期儲(chǔ)存最好置于(D)。A、4°CB、常溫C、16°CD、-20C9、PCR的基本反應(yīng)過程包括(A)A、變性、退火、延伸B、變性、延伸C、變性、退火10、在實(shí)際工作中,基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室污染類型包括(D)A、擴(kuò)增產(chǎn)物的污染B、天然基因組DNA的污染C、試劑污染和標(biāo)本間交叉污染D、A、B、C都可能11、PCR技術(shù)于哪一年發(fā)明(A)A、1983B、1971C、1987D、199312、TaqDNA聚合酶酶促反應(yīng)最快最適溫度為(C)A、37°CB、50-55°CC、70-75°CD、80-85°C13、以下哪種物質(zhì)在PCR反應(yīng)中不需要(D)A、TaqDNA聚合酶B、dNTPsC、鎂離子D、RNA酶14、PCR檢測(cè)中,經(jīng)過n個(gè)循環(huán)的擴(kuò)增,拷貝數(shù)將增加(C)A、nB、2nC、2nD、n215、PCR基因擴(kuò)增儀最關(guān)鍵的部分是(A)A、溫度控制系統(tǒng)B、熒光檢測(cè)系統(tǒng)C、軟件系統(tǒng)D、熱蓋16、以下哪項(xiàng)不是臨床PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的一般原則(A)A、各區(qū)合并B、注意風(fēng)向C、因地制宜D、方便工作17、PCR實(shí)驗(yàn)室一般包括(D)A、試劑準(zhǔn)備區(qū)B、標(biāo)本制備區(qū)C、擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)D、A、B、C都含18、PCR技術(shù)不僅為遺傳病的診斷帶來了便利,而且改進(jìn)了檢測(cè)細(xì)菌和病毒的方法。若要檢測(cè)一個(gè)人是否感染了艾滋病病毒,你認(rèn)為可以用PCR擴(kuò)增血液中的(D)。A、白細(xì)胞DNAB、病毒蛋白質(zhì)C、血漿抗體D、病毒核酸19、如果反應(yīng)體系中加入模板DNA分子100個(gè),則經(jīng)過30個(gè)循環(huán)后,DNA分子的數(shù)量將達(dá)到(D)個(gè)。A、100x30B、100x30x2C、100X302D100x23020、PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的分析方法主要有(D)A、凝膠電泳分析法B、點(diǎn)雜交法C、熒光探針定量PCR法D、A、B、C都是二、判斷題(共20題,每題2分)I、PCR引物設(shè)計(jì)的目的是在擴(kuò)增特異性和擴(kuò)增效率間間取得平衡。(v)2、在PCR反應(yīng)中,dATP在DNA擴(kuò)增中可以提供能量,同時(shí)作為DNA合成的原料。(v)3、DNA擴(kuò)增過程未加解旋酶,可以通過先適當(dāng)加溫的方法破壞氫鍵,使模板DNA解旋。(V4、PCR反應(yīng)中,復(fù)性過程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合是依靠堿基互補(bǔ)配對(duì)原則完成。(V)5、PCR與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比所需要酶的最適溫度較高。(V6、PCR技術(shù)可用于基因診斷,判斷親緣關(guān)系等。(V7、PCR技術(shù)需在體內(nèi)進(jìn)行。(X8、PCR反應(yīng)體系中的緩沖液相當(dāng)于細(xì)胞中的體液。(V9、核酸的復(fù)制是由5Z方向進(jìn)行的。(V10、配對(duì)的堿基總是A與T和G與CO(VII、HBsAg轉(zhuǎn)陰性后一段時(shí)間才出現(xiàn)可檢測(cè)的HBsAb,此段間隔期稱之為窗□期”(V12、市面上多數(shù)試劑用淬滅基團(tuán)Q基團(tuán)和報(bào)告基團(tuán)R基團(tuán)來標(biāo)記熒光定量PCR的探針。(V)13、PCR反應(yīng)體系中Mg2+的作用是促進(jìn)TaqDNA聚合酶活性°(V)14、若標(biāo)本中含有蛋白變性劑(如甲醛),PH、離子強(qiáng)度、Mg2+等有較大改變都會(huì)影響Taq酶活性°(V)15、每個(gè)子代DNA分子中均保留一條親代DNA鏈和一條新合成的DNA鏈,這種復(fù)制方式稱之為半保留復(fù)制。(V)16、發(fā)生溶血的標(biāo)本對(duì)PCR結(jié)果沒影響。(x)17、“平臺(tái)效應(yīng)〃是描述PCR后期循環(huán)產(chǎn)物對(duì)數(shù)累積趨于飽和°(V)18、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(reversetranscription-PCR,RT-PCR)就是在應(yīng)用PCR方法檢測(cè)RNA病毒時(shí),以RNA為模板,在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下形成cDNA鏈,然后以cDNA為模板進(jìn)行正常的PCR循環(huán)擴(kuò)增°(V)19、在定量PCR中,72°C這一步對(duì)熒光探針的結(jié)合有影響,故去除,實(shí)際上55C仍可充分延伸,完成擴(kuò)增復(fù)制°(V)20、PCR可應(yīng)用于遺傳病、腫瘤及病原體檢測(cè)三大方面(V)三、簡答(共兩題,每題10分)1、PCR技術(shù)答:PCR技術(shù)是用一對(duì)寡聚核苷酸作為引物(要點(diǎn)1:2分),通過高溫變性、低溫退火、中溫延伸(要點(diǎn)2:5分)這一周期的多次循環(huán),使特異的DNA
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