2022年醫(yī)學專題-第7章-細菌感染的檢查方法與防治原則

第七章

細菌感染的檢查與防治

要求：（1）掌握臨床標本的采集原則；（2）掌握細菌的檢驗程序(chéngxù)（3）了解常用的血清學診斷方法第一頁，共四十七頁。第七章

細菌感染的檢查與防治

感染性疾病的病因學診斷

確定感染的微生物，為臨床診斷提供根據。由于該診斷是通過確定感染的微生物而確立的，故稱微生物學診斷（病原學診斷）。關系到正確的治療(zhìliáo)、控制和預防。第二頁，共四十七頁。

檢查方法

微生物學(細菌的形態(tài)學檢查、分離培養(yǎng)(péiyǎng)和鑒定）

免疫學（查Ag或Ab）

分子生物學（查核酸）

第三頁，共四十七頁。

一、標本(biāoběn)的采集和送檢原則無菌操作(cāozuò)適當的標本(biāoběn)（注意病程）早期采集采集雙份血清做好標記盡快送檢（標本必須新鮮）

第一節(jié)

細菌感染的實驗室診斷第四頁，共四十七頁。第五頁，共四十七頁。（一）細菌形態(tài)學檢查

針對(zhēnduì)一些在形態(tài)與染色上具有特征的病原菌。

1）光學顯微鏡

2）染色法檢查

第六頁，共四十七頁。（二）細菌分離培養(yǎng)(péiyǎng)與鑒定主要內容：1、細菌分離培養(yǎng)—菌落大小、色素、溶血；2、涂片、染色、鏡檢。尤其用于在形態(tài)、排列和染色性方面無特征的某些病原菌的檢查。陽性率高于直接鏡檢，但時間長。

第七頁，共四十七頁。革蘭染色原理：細胞壁結構不同。

G+結構致密、肽聚糖層厚、乙醇不易透入；乙醇使胞壁脫水形成一道屏障(píngzhàng)，短暫阻止結晶紫-碘復合物從胞內滲出；G-疏松、肽聚糖層薄、外膜均含大量脂質，易被乙醇溶解，使胞壁通透性增高，胞內結晶紫-碘復合物被溶解脫出而脫色。

第八頁，共四十七頁。革蘭染色(rǎnsè)實際意義---鑒別細菌選擇用藥研究細菌致病性其它染色有：單染色、抗酸染色、特殊染色等。第九頁，共四十七頁。

抗酸染色法第十頁，共四十七頁。特殊染色法：鞭毛(biānmáo)染色

莢膜染色

負染色法第十一頁，共四十七頁。2、生化反應

現有(xiànyǒu)“程序控制的自動分析儀”。3、血清學鑒定：用已知Ab鑒定從標本中分離培養(yǎng)出的未知菌（玻片法簡便易行）。分群、分型第十二頁，共四十七頁。4、動物試驗用于：①分離(fēnlí)鑒定病原菌；②測定細菌的毒力及產毒性

選用高度易感、健康等條件的動物。

第十三頁，共四十七頁。如：毒素(dúsù)-抗毒素中和試驗---小白鼠；鉤端螺旋體---幼齡豚鼠、金地鼠。

第十四頁，共四十七頁。5、藥物敏感試驗

指導臨床選擇用藥，及時治療(zhìliáo)和控制感染有重要意義。

藥敏試驗(shìyàn)（紙片法）第十五頁，共四十七頁。

第十六頁，共四十七頁。6、自動(zìdòng)微生物鑒定和藥敏分析系統(tǒng)：微生物編碼鑒定技術---數據庫微量培養(yǎng)自動監(jiān)測分析自動記錄藥敏結果第十七頁，共四十七頁。（三）細菌抗原的檢測

用已知Ab檢測未知抗原（Ag-Ab反應）。優(yōu)點--特異、靈敏、簡便方法：玻片凝集、協(xié)同(xiétóng)凝集、間接血凝試驗、乳膠凝集、對流免疫、酶免疫技術、免疫熒光技術。第十八頁，共四十七頁。載體顆粒(kēlì)SPA、乳膠特異性Ab待檢Ag凝集(níngjí)協(xié)同凝集(níngjí)試驗示意圖常用的免疫學技術有—--協(xié)同凝集試驗乳膠凝集試驗第十九頁，共四十七頁。酶聯(lián)免疫吸附試驗(shìyàn)(ELISA,間接法)

enzymessuchasperoxidasereactwithappropriatesubstratessuchas3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine),thiscausesachangeincolor.第二十頁，共四十七頁。對流(duìliú)免疫電泳第二十一頁，共四十七頁。免疫擴散試驗(shìyàn)第二十二頁，共四十七頁。（四）細菌核酸(hésuān)的檢測核酸雜交、PCR、16SrRNA基因測序、基因芯片等技術。

更特異、敏感、快速第二十三頁，共四十七頁。5’3’5’3’PCR3’5’3’5’5’5’3’5’3’5’3’3’5’3’5’5’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’第二十四頁，共四十七頁。檢測(jiǎncè)PCR產物

第二十五頁，共四十七頁。三、細菌感染的血清學診斷(serologicaldiagnosis)查Ab：檢測病人血液中由于細菌感染而產生的特異性抗體，輔助臨床診斷。

廣泛用于多種病原體的微生物診斷和流行病學(liúxínɡbìnɡxué)調查。第二十六頁，共四十七頁。

雙份血清(xuèqīng)：早期（急性期）晚期（恢復期）結果：根據雙份血清中測到的抗體效價，若升高4倍或以上，有輔助診斷價值。

方法：凝集試驗，中和試驗，ELISA等。

第二十七頁，共四十七頁。第二十八頁，共四十七頁。致病菌的檢驗(jiǎnyàn)程序藥物(yàowù)敏感試驗標本(biāoběn)直接涂片染色分離培養(yǎng)生化試驗血清學試驗動物試驗明確診斷初步診斷分子生物學技術其他檢測技術第二十九頁，共四十七頁。第二節(jié)細菌感染的特異性預防

一、人工(réngōng)主動免疫(artificialactiveimmunization)

（一）疫苗、類毒素

1、死疫苗—傷寒、霍亂等。

2、活疫苗—BCG、鼠疫等。

第三十頁，共四十七頁。

疫苗(yìmiáo)接種第三十一頁，共四十七頁。第三十二頁，共四十七頁。區(qū)別點死疫苗活疫苗制劑特點死，強毒株活，減毒株接種劑量與特點量大，2~3次量較小，1次保存及有效期易保存，約1年不易保存免疫效果較低，維持數月~2年較高，維持3~5年甚至更長死疫苗(yìmiáo)與活疫苗(yìmiáo)的比較第三十三頁，共四十七頁。3、亞單位疫苗(subunitvaccine)利用現代生物技術，除去細菌或病毒無關有害成分，分離提取純化對人體有保護性的抗原。如：肺炎鏈球菌、腦膜炎球菌的莢膜多糖疫苗，+佐劑即成。接種少量(shǎoliàng)抗原可使人體產生良好免疫應答，且接種反應輕微。

第三十四頁，共四十七頁。優(yōu)點

a、去除引起副反應的物質；

b、因不含核酸可免去減毒活疫苗回復突變及滅活全疫苗發(fā)生感染性復活的可能(kěnéng)；c、消除腫瘤病毒潛在的致癌作用；

d、可利用化學試劑分解病毒體。

第三十五頁，共四十七頁。4、基因工程疫苗本質上是亞單位疫苗如：含宋內志賀菌表面抗原質粒的傷寒沙門菌Ty21a優(yōu)點：安全、經濟、可批量生產；缺點：抗原的回收(huíshōu)純化困難。第三十六頁，共四十七頁。5、重組載體疫苗將抗原表位的目的基因(jīyīn)片段轉入減毒的病毒或細菌。形式：整合于病毒、細菌基因組或質粒本質：活疫苗第三十七頁，共四十七頁。6、核酸(hésuān)疫苗（DNAVaccine）第三十八頁，共四十七頁。核酸疫苗原理：將病原體的保護性抗原基因與質粒重組，重組體注入機體，使機體持續(xù)表達該抗原，誘導體液和細胞免疫。優(yōu)點：

a、制備簡便、成本低；

b、便于(biànyú)貯藏和運輸；

c、免疫應答持久。

第三十九頁，共四十七頁。核酸疫苗缺點：安全性問題a、人們擔心外源DNA整合(zhěnɡhé)到宿主染色體中而激活癌基因和影響抑癌基因的表達，導致細胞的惡性轉化。b、可能誘導自身免疫性疾病。第四十頁，共四十七頁。（二）類毒素概念：可誘導(yòudǎo)機體建立特異性抗毒素免疫。

+吸附劑（佐劑）如：白喉-百日咳-破傷風三聯(lián)疫苗（DPT）

第四十一頁，共四十七頁。二、人工被動免疫

1．抗毒素如：精制破傷風、白喉(báihóu)、肉毒抗毒素

2．血清丙種球蛋白、胎盤丙種球蛋白

3．抗菌血清：已淘汰

4．其他免疫制劑：IFN、IL等。

第四十二頁，共四十七頁。第四十三頁，共四十七頁。區(qū)別要點人工主動免疫人工被動免疫免疫物質抗原抗體、細胞因子接種次數免疫出現時間1~3次慢，2~4周1次快，立即免疫維持時間長，數年~數月短，2~3周主要用途預防治療或緊急預防

兩種人工免疫(rénɡōnɡm(xù)iǎnyì)方法比較第四十四頁，共四十七頁。第三節(jié)細菌感染的治療主要采用抗菌藥物來治療細菌感染。有：天然的抗菌藥物人工合成—磺胺類喹諾酮類微生物合成(héchéng)的抗生素類

正確的選擇和合理的使用十分重要。第四十五頁，共四十七頁。第三節(jié)細菌(xìjūn)感染的治療原則抗生素①細菌性感染；②病原體種類及其藥敏實驗；③藥物抗菌作用及其體內(tǐnèi)代謝過程特點。第四十六頁，共四十七頁。內