f第六章-胺類藥物的分析課件

Chapter6Analysisofamines

胺類藥物的分析

Analysisofamines

胺類藥物的分析

The

analysisofaromaticamines

芳胺類藥物的分析

Theanalysisofphenyl-ethylamines

苯乙胺類藥物的分析Theanalysisofthederivativesofaminoether

氨基醚衍生物類藥物的分析本章基本要求掌握以上三種藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)，理化性質(zhì)及主要鑒別反應(yīng)掌握亞硝酸鈉法、非水滴定法，HPLC法在以上三類藥物含量測定中的應(yīng)用熟悉各類藥物中的雜質(zhì)檢查項目及方法了解其它含量測定方法

Fundamentalrequirements

Masteringthestructures,physicalandchemicalpropertiesandthemainidentificationtestsoftypicaldrugs;Masteringthediazotisationtitration,non-aqueoustitrationandHPLCinassays;Familiarizingwiththeitemsandmethodsforimpuritytests.

Understandingothermethodsforassays;TheanalysisofaromaticaminesP-aminobenzoicacidesterAmidesGeneralstructuresSection1BenzocaineProcainehydrochlorideTetracainehydrochlorideParacetamolAcedapsoneLidocainehydrochlorideBubivacainehydrochlorideP-aminobenzoicacidesters

Aromaticprimaryaminecharacteristics

本類藥物因其分子結(jié)構(gòu)中的芳伯胺基，故顯重氮化－偶合反應(yīng)；與芳醛縮和合成Schiff堿的反應(yīng)；易氧化變色等。鹽酸丁卡因則無此特性。

Hydrolysis

因分子結(jié)構(gòu)中有酯鍵（或酰胺鍵），使其容易水解。其水解的快慢受光線、熱或堿性條件的影響。除鹽酸丁卡因水解產(chǎn)物為BABA外，上述其它藥物的水解產(chǎn)物主要為PABA。Weakbasicity

除苯佐卡因外，因其脂烴胺側(cè)鏈為叔胺氮原子，故具有弱堿性。Othercharacteristics

本類藥物因苯環(huán)上具有芳伯氨基或同時具有脂烴胺側(cè)鏈，其游離堿多為堿性油狀液體或低熔點固體，難溶于水，可溶于有機溶劑。其鹽酸鹽均系白色結(jié)晶性粉末，具有一定的熔點，易溶于水或乙醇，難溶于有機溶劑。

Mastering

Amides

Aromaticprimaryaminecharacteristicsafterhydrolysis

水解芳酰氨基芳伯胺基(顯芳伯胺基特性反應(yīng))酸性溶液利多卡因和布比卡因由于空間位阻影響，較難水解，所以其鹽的水溶液比較穩(wěn)定。

Hydrolysatereaction對乙酰氨基酚水解乙醇醋氨苯砜硫酸介質(zhì)(香味)醋酸醋酸乙酯

Phenolichydroxylreaction

（Paracetamol）（Violet）3＋

FeCl33+3HCl

ThesidechainofaliphaticammineofLidocaineandbubivacainepossessesbasicitybecauseofthetertiaryaminenitrogen.Itcanreactwithacidtoformsaltandwithalkaloidreagentstoformprecipitation.Theprecipitationhasacertainmeltingpointwhenreactingwithtri-nitrophenol.

Weakbasicity

Precipitationreaction

Theamidenitrogensoflidocainehydrochlorideandbubivacainehydrochloridecancomplexwithcopperionorcobaltion.Theprecipitationofcoordinationcompoundhasspecificcolor.

Ultravioletabsorptionandinfraredabsorptionspectrum

canbeusedfortheanalysisofthisgroupofdrugs.IdentificationDiazotizationreactionFerricchloridereactionHeavymetalionreactionHydrolysatereactionMeasuringthemeltingpointofderivative

Ultravioletabsorptionspectrum(benzenering)

InfraredabsorptionspectrumDiazotizationreactionAromaticprimaryaminereactionBenzocaineProcaineParacetamolAcedapsoneHydrolysisDiazotizationNaNO2/H+

Diazosalt

β－naphtholColoreddazodye

TetracaineHydrochlorideNaNO2/H+

whiteprecipitate（Aromaticsecondaryamine）OH-H+HeavymetalionreactionReactionwithcopperion

鹽酸利多卡因與硫酸銅反應(yīng)生成藍紫色配位化合物，轉(zhuǎn)入氯仿中顯黃色。

+VioletLidocaineHydrochlorideReactionwith

cobaltion

在酸性溶液中與氯化鈷試液反應(yīng)，生成亮綠色細小鈷鹽沉淀。

+BrightgreenLidocaineHydrochloride羥肟酸鐵鹽反應(yīng)普魯卡因胺濃H2O2加熱至沸羥肟酸FeCl3羥肟酸鐵(紫紅色→暗棕色-棕黑色)與汞離子反應(yīng)鹽酸利多卡因

(水溶液）硝酸酸化硝酸汞試液煮沸黃色溶液注：對氨基苯甲酸酯類藥物顯紅色或橙黃色，可與之區(qū)別Hydroximicacidferricsaltreaction

Procainamideconc.HeatingtoboilHydroximicacidFerricchlorideHydroximicacidferric(fuchsia→darkbrowntoblack)ReactionwithmercuryionLidocaineParacetamolAcidificationMercuricnitratesolutionboilingYellowsolutionRedororangesolutionHydrolysatereaction

Identificationofprocainehydrochloride·+·(Whiteprecipitation)(Whiteprecipitation)(Makingtheredlitmuspaperblue)Identificationofbenzocaine++4+6+5++5+（Iodoform)MasteringThemeltingpointofderivativesThederivativeoftri-nitrophenol

（三硝基苯酚）LidocaineHydrochlorideBupivacaineHydrochlorideTri-nitrophenolDerivative(Yellowprecipitate)Filtration

WaterwashingDesiccationDerivativemp.：228～232℃mp.：194℃105℃DerivativeThederivative

ofthiocyanate（硫氰酸鹽）TetracaineHydrochloride5%aceticacidsolution

Dissolution25%ammoniumthiocyanatesolutionWhitecrystalFiltration

WaterwashingDesiccation80℃Crystal(mp.：131℃）Ultravioletabsorptionspectrum(benzenering)對乙酰氨基酚HCl（0.1mol/l）5249約880BP（1998），USP（25）－甲醇（1：99）與對照品紫外吸收相同0.4％NaOH257715中國藥典（2000）苯佐卡因氯仿5278USP（25）與對照品紫外吸收相同，兩者吸收不超過3.0%鹽酸丁卡因水含10％pH610310同上；兩者之差不超過磷酸鹽緩沖液2.0％鹽酸普魯卡因胺NaOH20275BP（1998），于230～(0.

02mol/l)350nm波長處掃描水5280中國藥典（2000），片劑鑒別醋氨苯砜無水乙醇5256中國藥典（2000）藥物溶劑濃度λmaxE1％1cm

備注（ug/ml）（nm）Infraredabsorptionspectrum該法特別適用于化學(xué)結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜、化學(xué)結(jié)構(gòu)相互之間差別較小的藥物的鑒別與區(qū)別。IRisausefultooltoidentifyanddistinguish

the

drugs,whicharecomplicatedin

chemicalstructuresandhardlytobeanalysedbyothermethods.InfraredspectrumofparacetamolasaKBrdiscImpuritytest

Impuritytestofparacetamol

Thesourcesofimpurity

Testitems

ThetestofPABAinprocainehydrochlorideinjectionUnderstanding

Thesourcesofimpurity

以對硝基氯苯為原料，水解后制得對硝基酚，經(jīng)還原生成對氨基酚，再經(jīng)乙?；蠖频谩Ｒ苑訛樵辖?jīng)亞硝化及還原反應(yīng)制得對氨基酚。P-chloro-nitrobenzene(rawmaterial)HydrolysisP-nitrophenolReducedP-aminophenolAcetylateParacetamolPhenolNitrosationClarityandcolorofethanolsolution

生產(chǎn)工藝中使用鐵粉作為還原劑，可能帶入成品中，致使乙醇溶液產(chǎn)生渾濁。中間體對氨基酚的有色氧化產(chǎn)物，在乙醇中顯橙紅色或橙色。

（colorimetry）

Relevantsubstances

因生產(chǎn)工藝路線不同，會帶入有機雜質(zhì)，主要包括中間體、副產(chǎn)物及分解產(chǎn)物。如：對氨基酚、對氯乙酰苯胺、ο–乙酰基對乙酰氨基酚、偶氮苯、氧化偶氮苯、苯醌和醌亞胺等。藥典對本品“有關(guān)雜質(zhì)”項下檢查，以對氯乙酰苯胺為對照品。（TLC）

Paracetamol

本品合成過程中，由于乙酰化不完全或貯藏不當發(fā)生水解，引入對氨基酚。利用對氨基酚在堿性條件下可與亞硝基鐵氰化鈉生成藍色配位化合物，而對乙酰氨基酚無此反應(yīng)的特點，于對照品比較，進行限量檢查。

（colorimetry）

TestitemsTestforPABAinprocainehydrochloride

injection

普魯卡因分子結(jié)構(gòu)中有酯鍵，易發(fā)生水解反應(yīng)。其注射液制備過程中受滅菌溫度、時間、溶液pH值、貯藏時間以及光線和金屬離子等因素的影響，可水解生成對氨基苯甲酸和2–二乙氨基醇。對氨基苯甲酸隨貯藏時間的延長或高溫加熱，可進一步脫羧轉(zhuǎn)化為苯胺，苯胺又被氧化，使注射液變黃，療效下降，毒性增加。故藥典中規(guī)定檢查水解產(chǎn)物對氨基苯甲酸，其限度不得超過1.2％。

（TLC）

Assays

DiazotisationtitrationNon-aqueoustitrationSpectrophotometryColorimetricmethod

RapidlyfluorescencedeterminationofprocainamideHPLCDiazotisationtitrationPrinciple

Conditions

IndicationmethodsMasteringPrinciple

本類藥物分子結(jié)構(gòu)中具芳伯氨基或水解后具芳伯氨基，在酸性溶液中與亞硝酸鈉定量反應(yīng)，生成重氮鹽，用永停滴定法或外指示劑法指示終點。

++++2++2

PrincipleThistypeoftitrationisquitesimpletocarryoutandisveryusefulfortheanalysisofsulphonamidesandaminobenzoicacid-derivedlocalanaesthetics.Titrationiscarriedoutwithacidifiedsodiumnitritecausingtheprimaryaromaticaminefunctiontobeconvertedtoadiazoniumsalt.Conditions

速度:加入適量溴化鉀加快反應(yīng)速度（中國藥典規(guī)定2g）：酸度:加入過量鹽酸加速反應(yīng)：重氮化反應(yīng)速度加快；重氮鹽在酸性溶液中穩(wěn)定；防止生成偶氮氨基化合物；一般，加入鹽酸得量按芳胺類藥物與酸得摩爾比約為1：2.5～6。溫度:室溫（10～30℃）條件下滴定：溫度高，重氮化反應(yīng)速度快；溫度太高，使亞硝酸逸失，并可使重氮鹽分解。方式:滴定管尖端插入液面下滴定：為避免滴定過程中亞硝酸揮發(fā)和分解，滴定時將滴定管尖端插入液面下約2/3處，一次將大部分亞硝酸鈉滴定液在攪拌條件下迅速加入，使其盡快反應(yīng)。然后，將滴定管尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，再緩緩滴定。近終點時，須在最后一滴加入后，攪拌1～5分鐘，再確定終點是否真正到達。

Dead-stoptitration

中國藥典規(guī)定永停法指示亞硝酸鈉滴定法的終點。電流計指針突然偏轉(zhuǎn)，并不在回復(fù)，即為滴定終點。（永停滴定儀）

Outerindicatortitration

常用碘化鉀－淀粉糊劑或指示液，滴定到達終點時，稍過量的亞硝酸鈉在酸性溶液中氧化碘化鉀，析出的碘遇淀粉即顯藍色。使用時，將糊劑在白瓷板上鋪為薄層，當以細玻璃棒蘸取少許測定液劃過，立即顯藍色，即為終點。

2+2+42++2+2+2Themethodsofindicatingend-pointing

永停滴定儀裝置圖Non-aqueoustitration鹽酸丁卡因和鹽酸利多卡因側(cè)鏈烴胺的叔胺氮具有弱堿性，而鹽酸布比卡因側(cè)鏈哌啶環(huán)上的叔胺氮也具有弱堿性，均可采用非水溶液滴定法測定含量。鹽酸丁卡因和鹽酸利多卡因測定時，將供試品溶解在冰醋酸中，以結(jié)晶紫為指示劑，用高氯酸液（0.1mol/l）滴定至終點。鹽酸丁卡因在冰醋酸中顯較弱的堿性，加入適量的醋酐使堿性增強，滴定至終點時，溶液顯藍色；鹽酸利多卡因滴定至終點時，溶液顯綠色；鹽酸布比卡因測定時以萘酚苯甲醇為指示劑，滴定至終點時，溶液顯綠色。

MasteringSpectrophotometry

對乙酰氨基酚在0.4％氫氧化鈉溶液中，于257nm波長處有最大吸收，可用于其原料及其制劑的含量測定。USP(25)采用甲醇－水混合溶劑，于244nm波長處測定吸收度，與對照品溶液進行對照測定其含量；中國藥典（2000版）采用百分吸收系數(shù)法，測定對乙酰氨基酚原料、片劑、注射液、栓劑及膠囊劑的含量。對乙酰氨基酚的測定

Thedeterminationofp-aminophenol片劑溶出度的測定

Thedissolutionoftablets分光光度法測定人唾液中對乙酰氨基酚的含量Determiningthecontentofp-aminophenolinsalivabyspectrophotometry

利用對乙酰氨基酚水解產(chǎn)物對氨基酚與亞硝酰鐵氰化鈉在堿性條件下生成藍色配位化合物，于695.6nm波長處有最大吸收，可測定人唾液中對乙酰氨基酚的含量。

Colorimetricmethod利用芳伯氨基的重氮化-偶合反應(yīng)，生成的有色偶氮染料，在可見光范圍內(nèi)測定吸收度進行比色測定。本法專屬性較低。鹽酸普魯卡因在水溶液中與1，2-萘醌-4-磺酸鈉溶液反應(yīng)，生成紅棕色化合物，可在482nm的波長處測定吸收度進行比色測定。本法在pH4～9范圍內(nèi)色澤均勻穩(wěn)定。本法準確，簡便，使用于鹽酸普魯卡因及其制劑的常規(guī)分析。也使用于普魯卡因青霉素及其注射液的測定。

Rapidfluoescencedeterminationofprocainamide在pH7.5的緩沖溶液中，利用鹽酸普魯卡因胺結(jié)構(gòu)中的芳伯氨基與熒胺反應(yīng)，生成熒光物?？稍讦薳x400nm、λem485nm波長處測定其熒光強度。本法適用于普魯卡因胺制劑的測定。

HPLC

用高效液相色譜法，以苯甲酸為內(nèi)標，可以同時測定鹽酸普魯卡因注射液中普魯卡因及其降解產(chǎn)物對氨基苯甲酸，不需分離提取，方法準確簡便。Conditions

Column

μ-BondapakC18300nm×4nm;

Mobilephase

Methanol-1％aceticacid（40：60，pH4.7）Freshlyprepared,Flowrate1.1ml/min;

DetectorUV，wavelength

250nm；Sensitivity

0.5aufs；Paperspeed

0.5cm/min.MasteringMethod

取鹽酸普魯卡因?qū)φ掌?50mg及PABA對照品20mg，精密稱定，置于25ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，作為貯備液，準確吸取此液0.5、1.0、1.5、2.0ml，分別置于25ml量瓶中，加3.0ml苯甲酸內(nèi)標液，加水至刻度，混勻，過濾，作為對照品溶液。取鹽酸普魯卡因注射液適量（相當于含鹽酸普魯卡因10～20mg，PABA0.5～2.0mg），置于25ml量瓶中，同上處理制備供試液。取以上不同濃度的對照品溶液，分別進樣5ul，在測定條件下記錄色譜圖（圖6－4）并測定供試液，由標準曲線或峰面積比計算含量。Application

本法用于研究鹽酸普魯卡因溶液的穩(wěn)定性。

Phenyl-ethylamines

analysisGeneralstructureandtypicaldrugsSection2Typicaldrugsofphenyl-ethylaminesNamesR1R2R3HX

Adrenaline(腎上腺素)(重酒石酸去甲腎上腺素)(重酒石酸間羥胺)Metaraminolbitartrate

Noradrenalinebitartrate

(鹽酸去氧腎上腺素)Phenylephrinehydrochloride

(鹽酸異丙腎上腺素)Isoprenalinehydrochloride

(鹽酸苯乙雙胍)Phenforminhydrochloride

(鹽酸克侖特羅)ClenbterolhydrochlorideMainchamicalproperties

Weakbasicity

本類藥物分子結(jié)構(gòu)中具有烴氨基側(cè)鏈，其氮為仲胺氮，顯弱堿性，游離堿難溶于水，易溶于有機溶劑，其鹽可溶于水。Phenolichydroxylreaction

分子結(jié)構(gòu)中具有鄰二酚羥基（或苯酚）結(jié)構(gòu)，可與重金屬離子絡(luò)合呈色,露置空氣中或遇光、熱易氧化，色漸變深，在堿性溶液中更易變色。

Opticalactivity

多數(shù)藥物分子結(jié)構(gòu)中具有手性(chiral)碳原子，具旋光性，可供分析用?？藖鎏亓_的芳伯氨基，具特性可供分析用。

IdentificationFerricchloride

腎上腺素和鹽酸去氧腎上腺素等藥物的分子結(jié)構(gòu)中具有酚羥基，與離子絡(luò)合顯色，加入堿性溶液，隨即被高鐵離子氧化而顯紫色或紫紅色。

Oxidationreaction

本類藥物分子結(jié)構(gòu)中多具有酚羥基，易被碘、過氧化氫、鐵氰化鉀等氧化劑氧化呈現(xiàn)不同的顏色。如何區(qū)別重酒石酸去甲腎上腺素和腎上腺素，鹽酸異丙腎上腺素？

中國藥典規(guī)定本品溶液加酒石酸氫鉀飽和溶液(pH3.56)溶解，加碘試液放置5min后，加硫代硫酸鈉試液，溶液為無色或僅顯微紅色或淡紫色。在此條件下，腎上腺素和鹽酸異丙腎上腺素可被氧化產(chǎn)生明顯的紅棕色或紫色。在pH6.5的緩沖溶液中，這三種藥物均被碘氧化產(chǎn)生紅色。

Theanswer

Reactionwith

formaldehyde-sulfuricacid

(與甲醛－硫酸反應(yīng))藥物三氯化鐵甲醛－硫酸

腎上腺素

0.1mol/l鹽酸液中翠綠，加氨試液顯紫色－紫紅色

紅色

重酒石酸去甲

腎上腺素翠綠色，加碳酸氫鈉試液顯藍色－紅色

淡紅

鹽酸去氧腎上腺素

紫色

玫瑰紅－紅棕－深棕紅

鹽酸異丙腎上腺素

深綠色，滴加新制的5％碳酸鈉溶液，顯藍紫色－紅色

棕－暗紫

鹽酸多巴胺

墨綠色，滴加1％氨溶液，紫紅色

Ultravioletabsorptionspectrum

藥物溶劑濃度（mg/ml）λmax（nm）A重酒石酸間羥胺水0.10272

鹽酸異丙腎上腺素水0.052800.50

鹽酸多巴胺0.5％硫酸0.03280

鹽酸芬氟拉明0.1mol/L鹽酸0.25263，270

鹽酸苯乙雙胍水0.012340.60鹽酸克倫特羅0.1mol/L鹽酸0.03243，296鹽酸沙丁胺醇水0.08274

Sodiumnitroferricyanidereaction

（RiminiTest）

重酒石酸間羥胺分子中具有脂肪伯氨基，加水溶解后，加亞硝基鐵氰化鈉試液、丙酮數(shù)滴與碳酸氫鈉少量，加熱后，即顯紅紫色。此為脂肪族伯胺的專屬反應(yīng)。試驗中所用丙酮必須不含甲醛。

Impuritytests

Ketonematerials

本類藥物在生成中由其酮體氫化還原制得，若氫化不完全，易引入酮體雜質(zhì)，故藥典規(guī)定檢查酮體.

（UV）Relevantsubstancestest

（TLC）Thetestofreleventbiguanide(雙胍)

inphenforminhydrochloride

（PC

toseperate，elutingthendetermine

UV）Assays

Non-aqueoustitration

(非水溶液滴定法)Bromometrictitration(溴量法)Colorimetry

(比色法)

Extractiveacid/basetitration

(提取酸堿滴定法)

Fluorescencespectrocopyofadrenalin

(腎上腺素的熒光分光光度法)HPLCNon-aqueoustitration

Condition

冰醋酸為溶劑，加入醋酸汞試液以消除氫鹵酸的干擾，并用結(jié)晶紫指示液指示終點。如堿性較弱，終點不明顯可加入醋酐，提高其堿性，使終點突躍明顯。注意:加入醋酐應(yīng)注意防止氨基被乙?；?，乙?；飰A性很弱，如為伯氨基的乙?；铮越Y(jié)晶紫為指示劑不能被滴定。

DrugsamountofaddingHAc

addingHg（Ac）2

indicatorendingsampling（g）（ml）（ml）-pointcolor

Adrenaline0.1510－crystalvioletcyanNoradrenaline0.210－crystalvioletcyan

bitartrateDopamine0.15255crystalvioletcyanhydrochlorideIsoprenaline0.15305crystalvioletbluehydrochlorideFenfluramine0.220(saturatedHgCl250)crystalvioletbluehydrochlorideThemainconditionsofthesedrugsDrugsamountofaddingHAc

addingHg（Ac）2

indicatorendingsampling（g）（ml）（ml）-pointcolorClorprenaline0.15203crystalvioletcyanhydrochlorideMethoxamine0.2105naphtholKellyhydrochloridebenzoicalcoholSalbutamol0.410（addingaceticcrystalvioletcyansulfate

anhydride15）Clenbuterol0.25205potentiometrictitrationhydrochoridePhenformin0.1305potentiometrictitrationhydrochorideThemainconditionsofthesedrugsBromometrictitration

Principle

藥物分子中的苯酚結(jié)構(gòu)，在酸性溶液中酚羥基的鄰、對位活潑氫能與過量的溴定量的發(fā)生溴代反應(yīng)，再以碘量法測定剩余的溴，根據(jù)消耗的硫代硫酸鈉滴定液的量，即可計算供試品的含量。

Titer

每1ml溴滴定液（0.1mol./L）相當于3.395mg的C9H12NO2?HCl。

Application

重酒石酸間羥胺、鹽酸去氧腎上腺素及其注射液均采用溴量法測定含量。

Colorimetry

利用藥物分子結(jié)構(gòu)中的酚羥基可與亞鐵離子絡(luò)合顯色，測定鹽酸異丙腎上腺素注射液和鹽酸多巴胺注射液的含量。利用分子結(jié)構(gòu)中的芳伯氨基進行重氮化－偶合反應(yīng)顯色，測定鹽酸克倫特羅栓劑的含量。

Extractiveacid/basetitration

藥典中鹽酸苯丙胺及其片劑、注射液的含量測定用此法Fluorescencespectroscopyofadrenalin

利用腎上腺素分子結(jié)構(gòu)中的鄰二酚羥基，可被弱氧化劑氧化，生成的腎上腺素紅在一定條件下發(fā)生轉(zhuǎn)位，生成具有熒光性的N-甲基-3，5，6-三羥基吲哚，可用分光光度法測定。HPLC

重酒石酸去甲腎上腺素注射液的高效液相色譜測定法

Noradrenalinebitartrate

injection

色譜條件與系統(tǒng)使用性試驗

Chromatographyconditionsandsystemsuitability

內(nèi)標溶液的制備Preparationof

internalstandardsolution

測定方法

Determination血漿中兒茶酚胺類的HPLC-EChD測定法

TheHPLC-EChDdeterminationofcatecholaminesinplasmaChromatographyconditionsandsystemsuitability用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以磷酸二氫鈉7.8g與十二烷基磺酸鈉0.14g，加水溶解成1000ml，用磷酸調(diào)節(jié)pH值為3.8后，取出620ml加甲醇380ml，作為流動相；檢測波長為280nm。理論板數(shù)按重酒石酸去甲腎上腺素計算應(yīng)不低于3000，重酒石酸去甲腎上腺素和內(nèi)標峰的分離度應(yīng)大于1.5。

Thepreparationof

internalstandardsolution

取對氨基苯甲酸，加流動相溶解制成每1ml中含0.16mg的溶液，搖勻，即得。

Determination

取重酒石酸去甲腎上腺素對照品約70mg，精密稱定，置25ml量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取此溶液與內(nèi)標溶液各2ml，置10ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻；取2μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另精密量取本品適量（約相當于重酒石酸去甲腎上腺素5mg），置10ml量瓶中，精密加入內(nèi)標溶液2ml，用流動相稀釋至刻度，搖勻，取2μl注入液相色譜儀，同法測定。按內(nèi)標法以峰面積計算，即得。TheHPLC-EChDdeterminationofcatecholaminesinbloodplasma

采用反相分離系統(tǒng)，以O(shè)DS型鍵合相為固定相，用含有離子對試劑的流動相進行洗脫，流出組分用電化學(xué)檢測器（EChD）檢測。

Analysisofamino-etherderivativesStructuresoftypicaldrugs

(鹽酸苯海拉明)DiphenhydraminehydrochlorideDimendydrinate

（茶苯海明）Section3Mainproperties

均為白色結(jié)晶性粉末，無臭。前者在水中極易溶解，在醇或氯仿中易溶,在乙醚或苯中極微溶；后者在乙醇或氯仿中微溶。遇光均漸分解為二苯酮、二苯甲基醇和β－二甲氨基乙醇。在酸性溶液中，漸分解生成二苯基醇及β－二甲氨基乙醇。

DiphenhydraminehydrochlorideandDimendydrinateIdentificationtests

Colorreactionwithsulfuricacid

Meltingpointofderivatives(trinitrophenol)

Hydrolysis

PrecipitationreactionwithsilvernitrateUVandIRColorreactionwithsulfuricacid苯海拉明分子中具有二苯甲氧基的結(jié)構(gòu)，能與硫酸反應(yīng)，初顯黃色，隨即變成橙紅色，滴加水，即成白色乳濁液。

DimendydrinateSulfuricacidSolution(yellow)Solution(salmon)WateremulsionMeltingpointofderivatives茶苯海明與三硝基苯酚反應(yīng)生成結(jié)晶性沉淀mp:128～132℃。苯海拉明的鹽酸鹽與三硝基苯酚反應(yīng)生成結(jié)晶性沉淀，mp:128～132℃。Hydrolysis鹽酸苯海拉明水溶液遇酸易水解，生成水溶性很小的二苯基甲醇，分散在水層，呈白色乳濁，加熱煮沸數(shù)分鐘，聚集成油狀體，放冷，凝固成白色蠟狀固體。

DimendydrinatehydrochlorideacidhydrolysisBenzhydrol(milkysoln)HeatingtoboilBenzhydrol(oil)Benzhydrol（whiteceroidsolid)Precipitationreactionwithsilvernitrate鹽酸苯海拉明水溶液中，滴加硝酸銀試液，即生成白色凝乳狀沉淀。如加氨試液，析出鹽基成乳濁液，加硝酸也產(chǎn)生混濁。

DimendydrinatehydrochlorideSilvernitratesolutionPrecipitation(freezingmilkywhite)EmulsionTurbidityammoniasolutionNitrateacidUVandIR

鹽酸苯海拉明的鹽酸溶液（0.5mg/ml），紫外吸收光譜在253nm和258nm的波長處有兩個最大吸收峰，紅外光譜于2700～2400cm－1處有叔胺鹽γN-H峰，1115cm－1有醚的γC-O峰。

Assays

Non-aqueoustitrationArgentimetrictitration(銀量法）Aciddyecolorimetry

(酸性染料比色法)

Anionicsurfactanttitration（陰離子表面活性劑滴定法）HPLCNon-aqueoustitrationPrinciple

鹽酸苯海拉明為有機堿的鹽酸鹽，在冰醋酸中加醋酸汞后，可定量地與高氯酸生成苯海拉明的高氯酸鹽。Method

取本品約