教學(xué)課件 62朗伯 比爾定律

回顧昨天分析化學(xué)的一個(gè)里程碑基本完成歷史使命重量分析法正在淡出，或許不超過10%滴定分析法又一里程碑，技術(shù)上升為科學(xué)分析化學(xué)的昨天回顧昨天分析化學(xué)的一個(gè)里程碑基本完成歷史使命重正在淡出，或許1儀器分析法我是主流，一統(tǒng)天下！AirHydrogenGasCarrier

DatasystemRegulatorsHRESETFilters/TrapsColumnSyringe/SamplerDetectors光/電/色譜分析登場(chǎng)！走進(jìn)今天儀器分析法我是主流，一統(tǒng)天下！AirHydrogenGas2第六章吸光光度法6.1光譜分析概述

6.2基本理論6.3儀器6.4測(cè)定條件6.5應(yīng)用新技術(shù)光導(dǎo)纖維與漫反射第六章吸光光度法6.1光譜分析概述6.2基本理論6.36.1光譜分析概述6.1.1光的性質(zhì)6.1.2光譜分析概念6.1.3光吸收的選擇性6.1光譜分析概述6.1.1光的性質(zhì)6.1.2光譜分析46.1.1光的性質(zhì)光是電磁波，波粒二象性光速波長頻率波數(shù)波動(dòng)性粒子性光子的能量普朗克常數(shù)折射/衍射/干涉吸收/發(fā)射/散射6.1光譜分析概述6.1.1光的性質(zhì)光是電磁波，波粒二象性光速波長頻率波數(shù)波56.1.1光的性質(zhì)不同波長范圍能量高低典型的光譜學(xué)波長范圍量子躍遷類型高能輻射γ射線發(fā)射X射線吸收、發(fā)射、熒光0.005～1.4A0.1～100A核能級(jí)內(nèi)層電子中間部分真空紫外吸收紫外可見吸收、發(fā)射、熒光紅外吸收、拉曼散射10～200nm200～800nm0.8～300μm價(jià)電子價(jià)電子分子轉(zhuǎn)動(dòng)與振動(dòng)長波部分微波吸收電子自旋共振0.75～3.75mm3cm分子的轉(zhuǎn)動(dòng)磁場(chǎng)中電子自旋核磁共振0.6～10m磁場(chǎng)中核自旋6.1光譜分析概述短波長波6.1.1光的性質(zhì)不同波長范圍能量高低典型的光譜學(xué)波長范圍66.1.1光的性質(zhì)可見光400～750nm本章討論紫外可見光的吸收200～800nm6.1光譜分析概述6.1.1光的性質(zhì)可見光400～750nm本章討論紫外可76.1.1光的性質(zhì)光的互補(bǔ)單色光與復(fù)合光，互補(bǔ)光同波長的光能復(fù)合成白光的兩種光反射、散射、吸收、透射光照溶液4現(xiàn)象變臟？曬太陽哪里熱？決定顏色？6.1光譜分析概述6.1.1光的性質(zhì)光的互補(bǔ)單色光與復(fù)合光，互補(bǔ)光同波長的光86.1.1光的性質(zhì)物質(zhì)顏色與吸收色的互補(bǔ)關(guān)系6.1光譜分析概述6.1.1光的性質(zhì)物質(zhì)顏色與吸收色的互補(bǔ)關(guān)系6.1光譜分96.1.2光譜分析概念雙原子分子的能級(jí)示意圖2量子化的E總=E電子+E振+E轉(zhuǎn)

分子總能量：△E=E2-E1

=△E電+△E振+△E轉(zhuǎn)

=hν

光子能量匹配，產(chǎn)生吸收由價(jià)電子躍遷吸收光子產(chǎn)生UV-Vis吸收光譜6.1光譜分析概述6.1.2光譜分析概念雙原子分子的能級(jí)示意圖2量子化的E總106.1.2光譜分析概念原子光譜、分子光譜2原子光譜：原子外層電子在不同能級(jí)間運(yùn)動(dòng)所產(chǎn)生分子光譜：分子外層電子在不同能級(jí)間運(yùn)動(dòng)所產(chǎn)生線狀光譜電子能級(jí)與振動(dòng)、轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)綜合效應(yīng)，產(chǎn)生帶狀光譜6.1光譜分析概述6.1.2光譜分析概念原子光譜、分子光譜2原子光譜：原子外116.1.2光譜分析概念吸收、發(fā)射與熒光光譜吸收光譜：原子或分子吸收特定波長的光后躍遷至更高能級(jí)，光強(qiáng)減弱發(fā)射光譜：處于激發(fā)態(tài)的原子回到低能級(jí)，放出相應(yīng)波長的光。AES熒光光譜：吸收光至激發(fā)態(tài)，又回到基態(tài)放出波長稍長的光。光致發(fā)光6.1光譜分析概述6.1.2光譜分析概念吸收、發(fā)射與熒光光譜吸收光譜：原子或126.1.2光譜分析概念分子吸收光譜的產(chǎn)生eee熒光的產(chǎn)生eeee6.1光譜分析概述6.1.2光譜分析概念分子吸收光譜的產(chǎn)生eee熒光的產(chǎn)生e136.1.2光譜分析概念光譜分析分類原子光譜分子光譜

AAS

AES吸收其他發(fā)光紫外可見紅外熒光磷光化學(xué)發(fā)光紅外是振動(dòng)能級(jí)折射等是非光譜分析6.1光譜分析概述6.1.2光譜分析概念光譜分析分類原子光譜分子光譜AAS146.1.3光吸收的選擇性物質(zhì)吸收光，從基態(tài)躍遷至激發(fā)態(tài)能級(jí)量子化，吸收選擇性可見光范圍內(nèi)吸收剩余光，即物質(zhì)的顏色互補(bǔ)原理分子吸收在紫外可見區(qū)6.1光譜分析概述剩余的是什么？肉？還是青菜？6.1.3光吸收的選擇性物質(zhì)吸收光，從基態(tài)躍遷至激發(fā)態(tài)能級(jí)15腦筋急轉(zhuǎn)彎紅光照射紅色溶液，看透過什么色？紅光照射綠色溶液，看透過什么色？冬季出門穿什么顏色衣服暖？燈光下與日光下不同顏色6.1光譜分析概述腦筋急轉(zhuǎn)彎紅光照射紅色溶液，看透過什么色？紅光照射綠色溶液，166.2光吸收基本定律6.2.1朗伯-比爾定律6.2.2吸收曲線6.2.3定量方法6.2.4偏離比爾定律6.2光吸收基本定律6.2.1朗伯-比爾定律6.2.2176.2.1朗伯比爾定律6.2朗伯-比爾定律bI0I透光度T：吸光度A：I0：入射光強(qiáng)度I：透過光強(qiáng)度Lambert

JH1760Beer

A1852定義光吸收基本定律（郎伯-比爾定律）新的定義特殊性質(zhì)6.2.1朗伯比爾定律6.2朗伯-比爾定律bI0I透光度186.2.1朗伯比爾定律郎伯-比爾定律表達(dá)式A：吸光度；對(duì)光的吸收程度b：液層厚度，單位cmc：溶液的濃度，mol·L-１ε：摩爾吸收系數(shù)，L·mol-１·cm-１如果c單位：g·L-１則吸收系數(shù)為a，單位：L·g-１·cm-１ε的特點(diǎn)ε=f(λ)定律適用單色光ε標(biāo)志靈敏度6.2朗伯-比爾定律6.2.1朗伯比爾定律郎伯-比爾定律表達(dá)式A：吸光度；對(duì)196.2.1朗伯比爾定律ε進(jìn)一步討論吸收物質(zhì)在一定波長和溶劑條件下的特征常數(shù)ε=f(λ)，在λmax處測(cè)得εmax，為最大靈敏度>105:超高靈敏;104～105:高靈敏;<103:不靈敏數(shù)值上為c=1

mol·L-１;b=1cm

時(shí)的absorbanceA定性參考依據(jù)，無干擾時(shí)，定量通常選擇λmax6.2朗伯-比爾定律6.2.1朗伯比爾定律ε進(jìn)一步討論吸收物質(zhì)在一定波長和溶劑206.2.1朗伯比爾定律A與T的關(guān)系100203040506070809010000.10.20.30.40.50.60.81.01.5∞AT/%圖6-2A與T的關(guān)系圖早期儀器刻度直讀，A>0.8讀不準(zhǔn)。現(xiàn)在為數(shù)顯儀器。吸光度具有加和性n元混合液：6.2.1朗伯比爾定律A與T的關(guān)系100203040506216.2.2吸收曲線A(右)或ε(左)與波長λ的關(guān)系曲線KMnO4苯甲苯λmax=255nmλmax=525nm6.2朗伯-比爾定律6.2.2吸收曲線A(右)或ε(左)與波長λ的關(guān)系曲線226.2.3定量方法Ac標(biāo)準(zhǔn)曲線法選定條件下,測(cè)一系列標(biāo)液得標(biāo)準(zhǔn)曲線,又稱工作曲線據(jù)Ax,查出cxcx標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比法僅測(cè)一個(gè)標(biāo)液cs得As測(cè)Ax,得出一定要有標(biāo)準(zhǔn)calibration6.2朗伯-比爾定律6.2.3定量方法Ac標(biāo)準(zhǔn)曲線法選定條件下,測(cè)一系列標(biāo)液236.2.4偏離比爾定律1儀器因素：非單色光入射光必須是單色光ε=f(λ)儀器提供較小波長范圍的復(fù)合光建議改進(jìn)儀器，得較純的單色光選ε變化較小處測(cè)量，如εmax一階導(dǎo)數(shù)為0偏離是指：6.2朗伯-比爾定律6.2.4偏離比爾定律1儀器因素：非單色光入射光必須是單246.2.4偏離比爾定律1儀器因素：非單色光1波長選擇效果示意圖2λmaxλmaxε變化較大處6.2朗伯-比爾定律6.2.4偏離比爾定律1儀器因素：非單色光1波長選擇效果256.2.4偏離比爾定律2介質(zhì)因素：不均勻定律適用于均相混濁溶液散射，產(chǎn)生正偏離建議改進(jìn)儀器，積分球技術(shù)避免乳濁或懸濁物存在6.2朗伯-比爾定律6.2.4偏離比爾定律2介質(zhì)因素：不均勻定律適用于均相混261,2,3為相應(yīng)的SCN-配比溶劑:水/丙酮(用’區(qū)分)6.2.4偏離比爾定律3化學(xué)因素：解離/締合等又一前提:

吸光物質(zhì)間無相互作用顯色劑濃度(配比)/溶劑影響例:Fe3+-SCN-配合物酸堿度影響CrO42-(黃)+2H+

=Cr2O72-(橙)

+H2O建議保持相同條件:pH值/溶劑/顯色劑濃度/溫度/離子強(qiáng)度等6.2朗伯-比爾定律1,2,3為相應(yīng)的SCN-配比6.2.4偏離比爾定律3化276.2.4偏離比爾定律4溶液濃度：又一假設(shè):

吸光質(zhì)點(diǎn)間無相互作用僅適用于稀溶液c<10-2mol·L-1高濃度產(chǎn)生負(fù)偏離，另外c太大，A也很大，誤差大建議確認(rèn)適當(dāng)?shù)臐舛确秶?，并保持適當(dāng)?shù)奈舛确秶?.2朗伯-比爾定律6.2.4偏離比爾定律4溶液濃度：又一假設(shè):吸光質(zhì)點(diǎn)間286.3分光光度計(jì)的主要部件6.3.1目視比色與吸光光度法6.3.2分光光度計(jì)的主要部件光源單色器吸收池檢測(cè)器顯示系統(tǒng)6.3分光光度計(jì)的主要部件6.3.1目視比色與吸光光度法296.3.1目視比色與吸光光度法比色法一套玻璃管，常10/25/50ml規(guī)格設(shè)備簡單,眼睛看互補(bǔ)色,雜色/無色不能,誤差大光度法用儀器測(cè)量吸收光的程度A6.3儀器主要部件6.3.1目視比色與吸光光度法比色法一套玻璃管，常10/2306.3.2分光光度計(jì)主要部件6.3儀器主要部件整個(gè)光區(qū)(UV-Vis)可以發(fā)射連續(xù)光譜可見區(qū)鎢燈。發(fā)射波長范圍320～2500nm2光源光強(qiáng)大/穩(wěn)定性較長的使用壽命紫外區(qū)氫/氘燈。發(fā)射波長范圍185～400nm氘燈:光強(qiáng)大3-5倍，壽命更長6.3.2分光光度計(jì)主要部件6.3儀器主要部件整個(gè)光區(qū)(316.3.2分光光度計(jì)主要部件將光源產(chǎn)生的復(fù)合光色散成單色光入射狹縫2單色器準(zhǔn)直透鏡色散元件聚焦透鏡出口狹縫色散元件:

棱鏡，現(xiàn)通用光柵6.3儀器主要部件6.3.2分光光度計(jì)主要部件將光源產(chǎn)生的復(fù)合光色散成單色光326.3.2分光光度計(jì)主要部件將光源產(chǎn)生的復(fù)合光色散成單色光入射狹縫2單色器準(zhǔn)直透鏡色散元件聚焦透鏡出口狹縫色散元件:

棱鏡，現(xiàn)通用光柵Flash制作感謝CB分光光度計(jì)6.3儀器主要部件6.3.2分光光度計(jì)主要部件將光源產(chǎn)生的復(fù)合光色散成單色光336.3.2分光光度計(jì)主要部件2單色器光柵原理圖6.3.2分光光度計(jì)主要部件2單色器光柵原理圖346.3.2分光光度計(jì)主要部件3吸收池常比色皿普通玻璃石英玻璃紫外區(qū)測(cè)量必須石英比色皿，普通玻璃有大吸收1cm最常見6.3儀器主要部件6.3.2分光光度計(jì)主要部件3吸收池常比色皿普通玻璃石英356.3.2分光光度計(jì)主要部件3吸收池普通玻璃石英玻璃紫外區(qū)測(cè)量必須石英比色皿，普通玻璃有大吸收6.3儀器主要部件6.3.2分光光度計(jì)主要部件3吸收池普通玻璃石英玻璃紫外366.3.2分光光度計(jì)主要部件4檢測(cè)器將光信號(hào)轉(zhuǎn)換成電信號(hào)(電流),測(cè)量光電管6.3儀器主要部件6.3.2分光光度計(jì)主要部件4檢測(cè)器將光信號(hào)轉(zhuǎn)換成電信號(hào)376.3.2分光光度計(jì)主要部件4檢測(cè)器陣列型CCD/PDA光電二極管陣列PDA示意圖可記錄全波長光譜如Agilent8453,1024個(gè)同時(shí)記錄190-1100nm6.3儀器主要部件6.3.2分光光度計(jì)主要部件4檢測(cè)器陣列型CCD/P386.3.2分光光度計(jì)主要部件4讀出裝置檢流計(jì)通過A/D轉(zhuǎn)換成數(shù)字信號(hào)計(jì)算機(jī)存儲(chǔ)/處理/顯示數(shù)字顯示是主流趨勢(shì)微安表記錄儀數(shù)顯器6.3儀器主要部件6.3.2分光光度計(jì)主要部件4讀出裝置檢流計(jì)通過A/D轉(zhuǎn)39回顧昨天分析化學(xué)的一個(gè)里程碑基本完成歷史使命重量分析法正在淡出，或許不超過10%滴定分析法又一里程碑，技術(shù)上升為科學(xué)分析化學(xué)的昨天回顧昨天分析化學(xué)的一個(gè)里程碑基本完成歷史使命重正在淡出，或許40儀器分析法我是主流，一統(tǒng)天下！AirHydrogenGasCarrier

DatasystemRegulatorsHRESETFilters/TrapsColumnSyringe/SamplerDetectors光/電/色譜分析登場(chǎng)！走進(jìn)今天儀器分析法我是主流，一統(tǒng)天下！AirHydrogenGas41第六章吸光光度法6.1光譜分析概述

6.2基本理論6.3儀器6.4測(cè)定條件6.5應(yīng)用新技術(shù)光導(dǎo)纖維與漫反射第六章吸光光度法6.1光譜分析概述6.2基本理論6.426.1光譜分析概述6.1.1光的性質(zhì)6.1.2光譜分析概念6.1.3光吸收的選擇性6.1光譜分析概述6.1.1光的性質(zhì)6.1.2光譜分析436.1.1光的性質(zhì)光是電磁波，波粒二象性光速波長頻率波數(shù)波動(dòng)性粒子性光子的能量普朗克常數(shù)折射/衍射/干涉吸收/發(fā)射/散射6.1光譜分析概述6.1.1光的性質(zhì)光是電磁波，波粒二象性光速波長頻率波數(shù)波446.1.1光的性質(zhì)不同波長范圍能量高低典型的光譜學(xué)波長范圍量子躍遷類型高能輻射γ射線發(fā)射X射線吸收、發(fā)射、熒光0.005～1.4A0.1～100A核能級(jí)內(nèi)層電子中間部分真空紫外吸收紫外可見吸收、發(fā)射、熒光紅外吸收、拉曼散射10～200nm200～800nm0.8～300μm價(jià)電子價(jià)電子分子轉(zhuǎn)動(dòng)與振動(dòng)長波部分微波吸收電子自旋共振0.75～3.75mm3cm分子的轉(zhuǎn)動(dòng)磁場(chǎng)中電子自旋核磁共振0.6～10m磁場(chǎng)中核自旋6.1光譜分析概述短波長波6.1.1光的性質(zhì)不同波長范圍能量高低典型的光譜學(xué)波長范圍456.1.1光的性質(zhì)可見光400～750nm本章討論紫外可見光的吸收200～800nm6.1光譜分析概述6.1.1光的性質(zhì)可見光400～750nm本章討論紫外可466.1.1光的性質(zhì)光的互補(bǔ)單色光與復(fù)合光，互補(bǔ)光同波長的光能復(fù)合成白光的兩種光反射、散射、吸收、透射光照溶液4現(xiàn)象變臟？曬太陽哪里熱？決定顏色？6.1光譜分析概述6.1.1光的性質(zhì)光的互補(bǔ)單色光與復(fù)合光，互補(bǔ)光同波長的光476.1.1光的性質(zhì)物質(zhì)顏色與吸收色的互補(bǔ)關(guān)系6.1光譜分析概述6.1.1光的性質(zhì)物質(zhì)顏色與吸收色的互補(bǔ)關(guān)系6.1光譜分486.1.2光譜分析概念雙原子分子的能級(jí)示意圖2量子化的E總=E電子+E振+E轉(zhuǎn)

分子總能量：△E=E2-E1

=△E電+△E振+△E轉(zhuǎn)

=hν

光子能量匹配，產(chǎn)生吸收由價(jià)電子躍遷吸收光子產(chǎn)生UV-Vis吸收光譜6.1光譜分析概述6.1.2光譜分析概念雙原子分子的能級(jí)示意圖2量子化的E總496.1.2光譜分析概念原子光譜、分子光譜2原子光譜：原子外層電子在不同能級(jí)間運(yùn)動(dòng)所產(chǎn)生分子光譜：分子外層電子在不同能級(jí)間運(yùn)動(dòng)所產(chǎn)生線狀光譜電子能級(jí)與振動(dòng)、轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)綜合效應(yīng)，產(chǎn)生帶狀光譜6.1光譜分析概述6.1.2光譜分析概念原子光譜、分子光譜2原子光譜：原子外506.1.2光譜分析概念吸收、發(fā)射與熒光光譜吸收光譜：原子或分子吸收特定波長的光后躍遷至更高能級(jí)，光強(qiáng)減弱發(fā)射光譜：處于激發(fā)態(tài)的原子回到低能級(jí)，放出相應(yīng)波長的光。AES熒光光譜：吸收光至激發(fā)態(tài)，又回到基態(tài)放出波長稍長的光。光致發(fā)光6.1光譜分析概述6.1.2光譜分析概念吸收、發(fā)射與熒光光譜吸收光譜：原子或516.1.2光譜分析概念分子吸收光譜的產(chǎn)生eee熒光的產(chǎn)生eeee6.1光譜分析概述6.1.2光譜分析概念分子吸收光譜的產(chǎn)生eee熒光的產(chǎn)生e526.1.2光譜分析概念光譜分析分類原子光譜分子光譜

AAS

AES吸收其他發(fā)光紫外可見紅外熒光磷光化學(xué)發(fā)光紅外是振動(dòng)能級(jí)折射等是非光譜分析6.1光譜分析概述6.1.2光譜分析概念光譜分析分類原子光譜分子光譜AAS536.1.3光吸收的選擇性物質(zhì)吸收光，從基態(tài)躍遷至激發(fā)態(tài)能級(jí)量子化，吸收選擇性可見光范圍內(nèi)吸收剩余光，即物質(zhì)的顏色互補(bǔ)原理分子吸收在紫外可見區(qū)6.1光譜分析概述剩余的是什么？肉？還是青菜？6.1.3光吸收的選擇性物質(zhì)吸收光，從基態(tài)躍遷至激發(fā)態(tài)能級(jí)54腦筋急轉(zhuǎn)彎紅光照射紅色溶液，看透過什么色？紅光照射綠色溶液，看透過什么色？冬季出門穿什么顏色衣服暖？燈光下與日光下不同顏色6.1光譜分析概述腦筋急轉(zhuǎn)彎紅光照射紅色溶液，看透過什么色？紅光照射綠色溶液，556.2光吸收基本定律6.2.1朗伯-比爾定律6.2.2吸收曲線6.2.3定量方法6.2.4偏離比爾定律6.2光吸收基本定律6.2.1朗伯-比爾定律6.2.2566.2.1朗伯比爾定律6.2朗伯-比爾定律bI0I透光度T：吸光度A：I0：入射光強(qiáng)度I：透過光強(qiáng)度Lambert

JH1760Beer

A1852定義光吸收基本定律（郎伯-比爾定律）新的定義特殊性質(zhì)6.2.1朗伯比爾定律6.2朗伯-比爾定律bI0I透光度576.2.1朗伯比爾定律郎伯-比爾定律表達(dá)式A：吸光度；對(duì)光的吸收程度b：液層厚度，單位cmc：溶液的濃度，mol·L-１ε：摩爾吸收系數(shù)，L·mol-１·cm-１如果c單位：g·L-１則吸收系數(shù)為a，單位：L·g-１·cm-１ε的特點(diǎn)ε=f(λ)定律適用單色光ε標(biāo)志靈敏度6.2朗伯-比爾定律6.2.1朗伯比爾定律郎伯-比爾定律表達(dá)式A：吸光度；對(duì)586.2.1朗伯比爾定律ε進(jìn)一步討論吸收物質(zhì)在一定波長和溶劑條件下的特征常數(shù)ε=f(λ)，在λmax處測(cè)得εmax，為最大靈敏度>105:超高靈敏;104～105:高靈敏;<103:不靈敏數(shù)值上為c=1

mol·L-１;b=1cm

時(shí)的absorbanceA定性參考依據(jù)，無干擾時(shí)，定量通常選擇λmax6.2朗伯-比爾定律6.2.1朗伯比爾定律ε進(jìn)一步討論吸收物質(zhì)在一定波長和溶劑596.2.1朗伯比爾定律A與T的關(guān)系100203040506070809010000.10.20.30.40.50.60.81.01.5∞AT/%圖6-2A與T的關(guān)系圖早期儀器刻度直讀，A>0.8讀不準(zhǔn)。現(xiàn)在為數(shù)顯儀器。吸光度具有加和性n元混合液：6.2.1朗伯比爾定律A與T的關(guān)系100203040506606.2.2吸收曲線A(右)或ε(左)與波長λ的關(guān)系曲線KMnO4苯甲苯λmax=255nmλmax=525nm6.2朗伯-比爾定律6.2.2吸收曲線A(右)或ε(左)與波長λ的關(guān)系曲線616.2.3定量方法Ac標(biāo)準(zhǔn)曲線法選定條件下,測(cè)一系列標(biāo)液得標(biāo)準(zhǔn)曲線,又稱工作曲線據(jù)Ax,查出cxcx標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比法僅測(cè)一個(gè)標(biāo)液cs得As測(cè)Ax,得出一定要有標(biāo)準(zhǔn)calibration6.2朗伯-比爾定律6.2.3定量方法Ac標(biāo)準(zhǔn)曲線法選定條件下,測(cè)一系列標(biāo)液626.2.4偏離比爾定律1儀器因素：非單色光入射光必須是單色光ε=f(λ)儀器提供較小波長范圍的復(fù)合光建議改進(jìn)儀器，得較純的單色光選ε變化較小處測(cè)量，如εmax一階導(dǎo)數(shù)為0偏離是指：6.2朗伯-比爾定律6.2.4偏離比爾定律1儀器因素：非單色光入射光必須是單636.2.4偏離比爾定律1儀器因素：非單色光1波長選擇效果示意圖2λmaxλmaxε變化較大處6.2朗伯-比爾定律6.2.4偏離比爾定律1儀器因素：非單色光1波長選擇效果646.2.4偏離比爾定律2介質(zhì)因素：不均勻定律適用于均相混濁溶液散射，產(chǎn)生正偏離建議改進(jìn)儀器，積分球技術(shù)避免乳濁或懸濁物存在6.2朗伯-比爾定律6.2.4偏離比爾定律2介質(zhì)因素：不均勻定律適用于均相混651,2,3為相應(yīng)的SCN-配比溶劑:水/丙酮(用’區(qū)分)6.2.4偏離比爾定律3化學(xué)因素：解離/締合等又一前提:

吸光物質(zhì)間無相互作用顯色劑濃度(配比)/溶劑影響例:Fe3+-SCN-配合物酸堿度影響CrO42-(黃)+2H+

=Cr2O72-(橙)

+H2O建議保持相同條件:pH值/溶劑/顯色劑濃度/溫度/離子強(qiáng)度等6.2朗伯-比爾定律1,2,3為相應(yīng)的SCN-配比6.2.4偏離比爾定律3化666.2.4偏離比爾定律4溶液濃度：又一假設(shè):

吸光質(zhì)點(diǎn)間無相互作用僅適用于稀溶液c<10-2mol·L-1高濃度產(chǎn)生負(fù)偏離，另外c太大，A也很大，誤差大建議確認(rèn)適當(dāng)?shù)臐舛确秶?，并保持適當(dāng)?shù)奈舛确秶?.2朗伯-比爾定律6.2.4偏離比爾定律4溶液濃度：又一假設(shè):吸光質(zhì)點(diǎn)間676.3分光光度計(jì)的主要部件6.3.1目視比色與吸光光度法6.3.2分光光度計(jì)的主要部件光源單色器吸收池檢測(cè)器顯示系統(tǒng)6.3分光光度計(jì)的主要部件6.3.1目視比色與吸光光度法686.3.1目視比色與吸光光度法比色法一套玻璃管，常10/25/50ml規(guī)格設(shè)備簡單,眼睛看互補(bǔ)色,雜色/無色不能,誤差大光度法用儀器測(cè)量吸收光的程度A6.3儀器主要部