生物技術(shù)講義

第七章離體授粉與合子胚培養(yǎng)＊＊＊＊＊＊＊＊植物受精障礙因素：受精前或合子期前障礙：＊花粉在柱頭上不能萌發(fā)；＊花粉管不能進(jìn)入胚珠（柱頭太長(zhǎng)或花粉管生長(zhǎng)太慢）；＊花粉管在花柱中破裂。受精后障礙：＊胚與胚乳不親和性；＊胚乳發(fā)育不良，雜種胚不能成熟。第一節(jié)離體授粉離體授粉—

在離體條件下通過(guò)在裸露的胚珠上授粉而結(jié)實(shí)的方法稱做“試管受精”，把通過(guò)在培養(yǎng)的整個(gè)雌蕊的柱頭上授粉而結(jié)實(shí)的方法稱做“離體授粉”一、離體授粉的方法1、離體授粉的方式：＊柱頭授粉＊子房授粉＊胎座授粉2、離體授粉方法：＊確定開(kāi)花與受精過(guò)程各階段的時(shí)間；＊去雄隔離；＊采集花粉粒，并選擇適當(dāng)培養(yǎng)基。離體授粉方法成功的標(biāo)志：

受精后能否由胚珠（在胚珠和胎座授粉中）或子房（在柱頭授粉中）形成有生活力的種子。二、胚珠和子房培養(yǎng)胚珠培養(yǎng)

＊胚珠培養(yǎng)是離體授粉的需要；＊通過(guò)離體培養(yǎng)可以對(duì)合子及早期原胚的離體培養(yǎng)反應(yīng)進(jìn)行研究。子房培養(yǎng)胚珠和子房培養(yǎng)（續(xù)）三、離體授粉中影響結(jié)實(shí)的因素1、外植體2、培養(yǎng)基3、培養(yǎng)條件4、基因型四、離體授粉的應(yīng)用胎座授粉方法應(yīng)用：

1）克服自交不親合性；

2）克服雜交不親合性；

3）通過(guò)孤雌生殖產(chǎn)生單倍體。該方法最重要的應(yīng)用潛力：合子期前障礙的從未形成雜種的植物間建立雜種?？蓢L試進(jìn)行種間、屬間、科間的雜交。第二節(jié)合子胚培養(yǎng)一、合子胚培養(yǎng)方法

1、植物材料

2、消毒方法

3、胚的剝離

4、胚乳看護(hù)培養(yǎng)二、對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件的要求無(wú)機(jī)鹽碳水化合物和培養(yǎng)基滲透壓氨基酸和維生素天然植物浸提液生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)培養(yǎng)基pH培養(yǎng)條件三、胚柄在胚培養(yǎng)中的作用

胚柄促進(jìn)生長(zhǎng)的活性在胚的心形早期達(dá)到高潮。四、早熟萌發(fā)不經(jīng)過(guò)完成正常的胚胎發(fā)育過(guò)程而形成幼苗的現(xiàn)象。五、通過(guò)胚拯救獲得遠(yuǎn)緣雜種胚拯救適用于“受精后障礙”不能形成有萌發(fā)能力的種子的情況下。胚拯救的方式：

1、雜種幼胚在人工培養(yǎng)基上培養(yǎng)；

2、雜種幼胚的胚乳看護(hù)培養(yǎng)；

3、雜種幼胚的愈傷組織培養(yǎng)