醫(yī)院細胞遺傳室各類儀器設備標準操作規(guī)程

3.53.5水純化裝置醫(yī)院細胞遺傳室各類儀器設備標準操作規(guī)程目的規(guī)范各類儀器的正常使用和保養(yǎng)，延長儀器的使用壽命，確保各結(jié)果的準確性。儀器使用環(huán)境：1）無灰塵、通風環(huán)境良好。2）避免陽光直射。3）室內(nèi)溫度18?30C,變化不超過±2c4）室內(nèi)濕度2?80%RH。5）電源電壓變化再20V±10V之內(nèi)，5m內(nèi)不能有配電器。3使用儀器程序超凈工作臺超凈工作臺是目前實驗室內(nèi)普遍應用的無菌操作裝置，在超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作，可明顯地減少細菌污染的機會。超凈工作臺的工作原理是利用鼓風機驅(qū)動空氣，通過高效空氣微粒濾層凈化，使操作范圍形成無菌環(huán)境。CO2培養(yǎng)箱實驗室一般應置備二臺CO2培養(yǎng)箱，將來自同一標本的培養(yǎng)瓶分兩線放入不同的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，以保證細胞培養(yǎng)的成功率。 CO2培養(yǎng)箱常見的是隔水式培養(yǎng)箱。培養(yǎng)的細胞需要一個恒定的溫度，過低或過高的環(huán)境溫度均可導致細胞死亡，因此對培養(yǎng)箱的靈敏度要求在±0.5℃。此外，一定濃度的CO也是細胞培養(yǎng)所必需的。 CO培養(yǎng)箱可恒定地提供細胞所需的CO（通常是5%），使培養(yǎng)液的pH值保持穩(wěn)定，適用于開放性培養(yǎng)。使用時應注意每三個月定期校正，如有異常應及時調(diào)整。培養(yǎng)箱內(nèi)空氣必須保持清潔，應定期用酒精擦拭消毒，消毒時每層隔板均需洗刷干凈，并用 75％酒精紗布擦拭。每周定期更換箱底水盤中的水，以保持相對濕度。為防污染可在水盤內(nèi)加入 1%。新潔爾滅。箱內(nèi)高效空氣過濾器堵塞時，指示燈提示后需及時更換烤箱烤箱用于玻璃器皿的烘干和干熱滅菌，一般以 650mm<500mm<500mm勺比較適用?？鞠涠佳b有豉風裝置， 豉風與升溫同時開始。干熱滅菌物品時一般為 180℃維持 1.5h，滅菌后應待箱內(nèi)溫度下降至80℃時方可開門，以免驟冷而致玻璃器皿損壞。應注意的是橡皮制品、塑料培養(yǎng)板、有機玻璃制品禁用烤箱滅菌。恒溫水浴鍋恒溫水浴鍋是實驗室不可缺少的設備。主要用于顯帶處理和培養(yǎng)基的加溫。由專人負責每周更換蒸餾水并添加防腐劑。4.1.24.1.2每周保養(yǎng)3.93.9高壓蒸汽滅菌裝置離體培養(yǎng)的細胞對水的要求特別高，培養(yǎng)細胞用的器皿清洗最后一道程序應用二蒸水沖洗，培養(yǎng)基的配制也應用二蒸水或超純水。目前常用的有自動雙重純水蒸餾器（石英管加熱），因為普通的橡皮對細胞是有毒的，所以制備好的二蒸水應避免通過橡皮管放出。冰箱實驗室必須配備有普通冰箱和低溫冰箱（-20℃），普通冰箱用于培養(yǎng)液、生理鹽水、Hanks溶液等試劑和標本短期的存放，低溫冰箱用于貯存需要冷凍保持生物活性及長時間存放的試劑如血清等。細胞冷凍貯存器細胞冷凍裝置一般分為運輸用和儲存用二種液氮罐，用于細胞株和標本的保存，液氮罐雙層結(jié)構(gòu)中間為真空層，其內(nèi)膽頸部與體部經(jīng)焊接相連，故搬動和裝入液氮時，應緩慢加入，使容器內(nèi)的溫度均勻下降，有條件可配備有程控降溫儀的液氮儲存系統(tǒng)，該系統(tǒng)的特點是可自動控制冷凍箱的降溫速度。離心機細胞培養(yǎng)需要經(jīng)常消化分離細胞、漂洗制備細胞懸液和進行傳代以及染色體的收獲，因此接種培養(yǎng)室與細胞處理室內(nèi)可各配置一臺可調(diào)速的小型臺式離心機。高壓滅菌是利用高壓蒸汽使細菌體內(nèi)蛋白凝固而達到滅菌，是最常用的滅菌方法。在115.5℃，30分鐘就能殺死所有繁殖型細菌的芽胞。高壓蒸汽滅菌比其它滅菌方法效果都好。由于蛋白質(zhì)的凝固需有水分存在，當細菌體內(nèi)含有水分在 25％以下時，蛋白質(zhì)的凝固溫度如下：水分含量凝固溫度TOC\o"1-5"\h\z25 ％ 74-80 ℃8 ％ 80-90 ℃6 ％ 145 ℃由此可見，在細菌體內(nèi)有水分存在的條件下可以大大降低滅菌所需的溫度。高壓滅菌主要用于細胞培養(yǎng)所需的二蒸水、生理鹽水、手術(shù)器械、布類、橡皮類等。顯微鏡與細胞遺傳圖象分析工作站顯微鏡是分析染色體的必備工具，一般要求每位實驗室技術(shù)人員配備一臺。有條件的實驗室可配備細胞遺傳圖象分析工作站。維護保養(yǎng)記錄每日保養(yǎng)每日登記各儀器的運行和使用情況，保證每臺儀器的正常運行。每周對各儀器進行清潔維護，檢查各儀器是否存在各類使用的隱患。每月保養(yǎng)每月不定期的對各儀器進行抽樣檢查運行使用情況的檢查。小型設備天平普通稱量0.1克的電子天平以及分析天平是實驗室所必需的，要求每年做一次校正。真空泵培養(yǎng)液的配制都用過濾的方法進行除菌，一般30升旋轉(zhuǎn)式的真空泵即可。酸度計 又稱為氫離子測定計或 pH計，是測定各種液體酸堿度的必須工具，要求每半年做一次校正。加樣器 加樣器是細胞培養(yǎng)不可缺少的用具，其規(guī)格有0.5-10ul、10-100ul、100-1000ul,末端可安裝不同容量吸管，吸入和注入液體較方便。使用時吸入的液體量不能在其設定范圍之外，而且要求每半年做一次校正。常用玻璃器皿及器械 培養(yǎng)器皿是供細胞接種生長等用的器皿，可用透明度好，中性硬質(zhì)的玻璃制成。另外，還可使用透明、平滑、無毒、干凈并經(jīng)放射性核素照射滅菌密封包裝的一次性使用塑料培養(yǎng)器皿，其優(yōu)點是打開包裝即可用于培養(yǎng)操作，缺點是費用較高。目前國內(nèi)一般實驗室使用的還是玻璃器皿。溶液瓶其規(guī)格常為500ml、250ml、100ml的配膠塞的鹽水瓶和配塑料螺旋蓋的盛液瓶，用于貯存各種試劑等。培養(yǎng)瓶有玻璃和塑料二種，常用的規(guī)格有25cm2(70ml)和75cM(275ml),160-175cm2(600ml)等規(guī)格，國內(nèi)培養(yǎng)瓶常用的規(guī)格有25ml，100ml和250ml等規(guī)格，主要用于細胞培養(yǎng)，早期的玻璃培養(yǎng)瓶是用膠塞封口，僅能用于密閉培養(yǎng)，現(xiàn)被螺旋蓋培養(yǎng)瓶取代。螺旋蓋培養(yǎng)瓶適宜在CO2培養(yǎng)箱中使用， 瓶的底壁是供細胞貼壁生長的生長面，而其它內(nèi)壁為非生長面。培養(yǎng)皿有玻璃和塑料二種，常用的有 120mm，100mm和60mm#規(guī)格，主要用于培養(yǎng)和分離組織用，也可用作單細胞分離及單層細胞貼壁培養(yǎng)等實驗，。多孔培養(yǎng)板 材料僅有塑料的一種，其規(guī)格有96孔，24孔，12孔，6孔，4孔，用于少量細胞或單個細胞的克隆生長，細胞轉(zhuǎn)化及細胞毒性等各種檢測實驗。吸管有玻璃和塑料二種，主要用于移送培養(yǎng)基，玻璃吸管有直頭和彎頭二種，直頭吸管用于吸加少量培養(yǎng)基，加抗菌素，加NaHCO調(diào)pH等用；彎頭吸管用于吹打分散和混懸細胞用。離心管有玻璃和塑料二種，主要用于離心、漂洗和分離細胞，常用的規(guī)格有50ml，10ml，5ml三種規(guī)格，此外還有微量離心管，規(guī)格有1.5ml，1ml，0.5ml，以供貯存少量試劑或其它實驗用。器械主要用于取材和原代培養(yǎng)中切割組織。常用的器械有：組織剪、鑷子等。使用過程中應注意保護刀鋒，用畢擦凈、晾干、以防生銹，消毒以煮、高壓滅菌或 75%酒精浸泡。其它如配制溶液的量筒、容量瓶以及試管、高壓