教學(xué)第2章折射旋光和圓二色性法課件

第二章

折射、旋光和圓二色性法第二章

折射、旋光和圓二色性法1參考文獻(xiàn)趙藻藩等編，儀器分析，高等教育出版社，北京，1990何金蘭，儀器分析原理，科學(xué)出版社，北京，2002劉驥等編，醫(yī)用生物物理學(xué)，人民衛(wèi)生出版社，1997RichardA.Paselk,TheEvolutionoftheAbbeRefractometer,BulletinoftheScientificInstrumentSociety,1999,62,19-22,/~scimus/Essays/EvolAbbeRef/EvolAbbeRef.htm參考文獻(xiàn)趙藻藩等編，儀器分析，高等教育出版社，北京，1992目錄2-1折射法

2-1-1折射法基本原理 2-1-2折射儀 2-1-3折射法的應(yīng)用2-2旋光和圓二色性法

2-2-1旋光法基本原理 2-2-2旋光法和圓二色性法的儀器 2-2-3旋光法和圓二色性法的應(yīng)用目錄2-1折射法32-1折射法折射法(Refractometry)是通過(guò)測(cè)量物質(zhì)的折射率來(lái)獲得某些分析信息的方法。這種方法的優(yōu)點(diǎn)是快速，設(shè)備簡(jiǎn)單。但由于折射率是物質(zhì)的一種非專(zhuān)一的性質(zhì)，所以在分析化學(xué)中的應(yīng)用受到很大的限制。2-1折射法折射法(Refractome42-1-1折射法基本原理1.折射現(xiàn)象真空：n=1空氣：n=1.000272-1-1折射法基本原理1.折射現(xiàn)象真空：n=152.影響折射率測(cè)量的因素溫度n20波長(zhǎng)n20D壓力對(duì)氣體折射率的影響大2.影響折射率測(cè)量的因素溫度n2063.比折射度與摩爾折射度輻射光束在介質(zhì)中的傳播速度，與其中電子的密度及電子周?chē)沫h(huán)境有關(guān)。這一情況可以通過(guò)比折射度這一參數(shù)來(lái)表征。混合溶液的比折射度具有加合性：比折射度：d：密度摩爾折射度：Mr：相對(duì)分子量m、m1、m2分別為混合液、組分1組分2的質(zhì)量3.比折射度與摩爾折射度輻射光束在介質(zhì)中的74.色散系數(shù)nD:鈉黃光589.3nmnF:氫藍(lán)光486.1nmnc:氫紅光656.3nm4.色散系數(shù)nD:鈉黃光589.3nm82-1-2折射儀1.折射計(jì)2-1-2折射儀1.折射計(jì)9np：棱鏡的折射率光源為單色光np：棱鏡的折射率光源為單色光10阿貝折射計(jì)光源為白光，利用Amici棱鏡作補(bǔ)償器，消除鈉黃光以外光線(xiàn)的干擾。1869年，ErnstAbbe搭建了第一臺(tái)折射儀。阿貝折射計(jì)光源為白光，利用Amici棱鏡作補(bǔ)償器，消11阿貝折射儀2W.2WAJ主要技術(shù)規(guī)格 2W 2WAJ折射率ND測(cè)量范圍 1.300-1.700 1.300-1.700折射率ND測(cè)量準(zhǔn)確度 0.0003 0.0002折射率ND最小分度值 0.001 0.0005糖量濃度(%)測(cè)量范圍 0-95 0-95糖量濃度(%)最小分度值 0.5 0.25是測(cè)量透明,半透明液體或固體的折射率ND和平均色散Nf-Nc的儀器。并能測(cè)出糖溶液內(nèi)含糖量濃度的百分?jǐn)?shù)。接上恒溫器則可測(cè)定液體溫度在0-70℃范圍內(nèi)的折射率ND。上海光學(xué)儀器五廠(chǎng)阿貝折射儀2W.2WAJ主要技術(shù)規(guī)格是122.干涉儀利用光干涉的原理進(jìn)行測(cè)量。精度高，無(wú)可動(dòng)部件，可以連續(xù)測(cè)定某一樣品，適合于動(dòng)力學(xué)研究。參考液體的折射率應(yīng)當(dāng)已知。2.干涉儀利用光干涉的原理進(jìn)行測(cè)量。精度高132-1-3應(yīng)用1．定性分析根據(jù)已知的折射率數(shù)據(jù)，判斷有機(jī)化合物的純度食品檢驗(yàn)，如牛奶是否被摻水。2．定量分析二元混合物的分析簡(jiǎn)單體系微量雜質(zhì)的測(cè)定3．有機(jī)物結(jié)構(gòu)鑒定根據(jù)色散系數(shù)進(jìn)行鑒定蔗糖溶液的質(zhì)量分?jǐn)?shù)0-95%，相當(dāng)于折射率為1.333-1.531。2-1-3應(yīng)用1．定性分析蔗糖溶液的質(zhì)量分?jǐn)?shù)0-95%，14目錄2-1折射法 2-1-1折射法基本原理 2-1-2折射儀 2-1-3折射法的應(yīng)用2-2旋光和圓二色性法

2-2-1旋光法基本原理 2-2-2旋光法和圓二色性法的儀器 2-2-3旋光法和圓二色性法的應(yīng)用目錄2-1折射法152-2旋光和圓二色性法旋光法(Polarimetry)是一種很早就出現(xiàn)并應(yīng)用廣泛的研究分子非對(duì)稱(chēng)性結(jié)構(gòu)的光學(xué)方法。隨著旋光色散(或稱(chēng)旋光光譜OpticalRotatoryDispersion，ORD)和圓二色譜(CircularDichroism，CD)這些靈敏方法的出現(xiàn)，使得人們有可能從這些實(shí)驗(yàn)技術(shù)中得到一些新的結(jié)構(gòu)信息，為更深入地研究分子的立體化學(xué)和電子結(jié)構(gòu)提供了條件．ORD和CD在測(cè)定手性化合物的構(gòu)型和構(gòu)象、確定某些官能團(tuán)(如羰基)在手性分子中的位置方面有獨(dú)到之處，是其它光譜無(wú)法代替的。2-2旋光和圓二色性法旋光法(Polar162-2-1旋光法基本原理1.旋光及旋光光譜平面偏振光可以分解成左右圓振光。2-2-1旋光法基本原理1.旋光及旋光光譜平面偏振光可以17疊加原理一束自然光可以分解或看作兩束相互垂直而沒(méi)有相位關(guān)系的平面偏振光的加和。

平面偏振光可以分解成兩束相位相等而旋轉(zhuǎn)方向相反的圓偏振光的加和。當(dāng)振幅相等，并同步的左、右圓偏振光相加，則產(chǎn)生平面偏振光；如果這兩束圓偏振光的振幅不等則產(chǎn)生橢圓偏振光(ellipticallypolarizedlight)

兩束相互垂直而相位相差1/4波長(zhǎng)的平面偏振光可以加和成一束圓偏振光疊加原理一束自然光可以分解或看作兩束相互垂直而沒(méi)有相位關(guān)系的18平面偏振光通過(guò)旋光活性介質(zhì)后，由于左、右圓偏振光的折射率不同，振動(dòng)方向發(fā)生改變，轉(zhuǎn)了一個(gè)角度。這種現(xiàn)象稱(chēng)為旋光，為旋光度。朝光源看，偏振面按順時(shí)針?lè)较蛐D(zhuǎn)的，稱(chēng)為右旋，用“+”號(hào)表示；偏振面按逆時(shí)針?lè)较蛐D(zhuǎn)的，稱(chēng)為左旋，用“-”號(hào)表示比旋光度摩爾旋光度T：溫度 ：波長(zhǎng)l：介質(zhì)厚度 ：介質(zhì)密度c：g/100mL Mr：相對(duì)分子量平面偏振光通過(guò)旋光活性介質(zhì)后，由于左、右圓偏19測(cè)量不同波長(zhǎng)下的，得到旋光色散曲線(xiàn)。兩種類(lèi)型的旋光色散曲線(xiàn)：平坦型：旋光度隨波長(zhǎng)單調(diào)上升或下 降。科頓效應(yīng)曲線(xiàn)：存在波峰或波谷，一般 在吸收帶附近。統(tǒng)稱(chēng)旋光光譜。測(cè)量不同波長(zhǎng)下的，得到旋光色散曲線(xiàn)。20

化合物無(wú)發(fā)色團(tuán)時(shí)，對(duì)旋光度為負(fù)值的化合物，ORD譜線(xiàn)從紫外到可見(jiàn)區(qū)呈單調(diào)上升；而旋光值為正的化合物是單調(diào)下降。兩種情況下都趨向和逼近[φ]λ=O的線(xiàn)，但不與O線(xiàn)相交，即譜線(xiàn)只是在一個(gè)相內(nèi)延伸，沒(méi)有峰也沒(méi)有谷。這類(lèi)ORD譜線(xiàn)稱(chēng)為正常的或平坦的旋光譜線(xiàn)，。化合物無(wú)發(fā)色團(tuán)時(shí)，對(duì)旋光度為負(fù)值的化合物，ORD譜21分子中有一個(gè)簡(jiǎn)單的發(fā)色團(tuán)(如羰基)的ORD譜線(xiàn)，ORD曲線(xiàn)在紫外光譜λmax處越過(guò)零點(diǎn)，進(jìn)入另一個(gè)相區(qū)。形成的一個(gè)峰和一個(gè)谷組成的ORD譜線(xiàn)，稱(chēng)為簡(jiǎn)單科頓效應(yīng)(Conntoneffect,CE)譜線(xiàn)。當(dāng)波長(zhǎng)由長(zhǎng)波一端向短波一端移動(dòng)時(shí)，ORD譜由峰向谷變化稱(chēng)為正的康頓效應(yīng)；而ORD譜線(xiàn)由谷向峰變化則稱(chēng)為負(fù)的康頓效應(yīng)。而ORD與零線(xiàn)相交點(diǎn)的波長(zhǎng)稱(chēng)為λK。谷至峰之間的高度稱(chēng)為振幅。分子中有一個(gè)簡(jiǎn)單的發(fā)色團(tuán)(如羰基)的ORD譜222.圓二色性（CircularDichroism，CD）光學(xué)活性分子對(duì)左、右圓偏振光的吸收也不同，使左、右圓偏振光透過(guò)后變成橢圓偏振光，這種現(xiàn)象稱(chēng)為圓二色性。橢圓度比橢圓度摩爾橢圓度2.圓二色性光學(xué)活性分子對(duì)左、右圓偏振光的23圓二色性的表示吸收(率)差

=L-

R

A=AL–AR

橢圓度，摩爾橢圓度[]

=2.303(AL–AR)/4

[]=3298(L-

R)3300(L-

R)

在蛋白質(zhì)研究中，常用平均殘基摩爾橢圓度圓二色性的表示吸收(率)差

=L-R

24第2章折射旋光和圓二色性法課件25旋光色散與圓二色相互轉(zhuǎn)換旋光色散和圓二色是同時(shí)產(chǎn)生的，他們包括同樣的分子結(jié)構(gòu)信息，并且可以由Kronig-Krammers轉(zhuǎn)換方程相互轉(zhuǎn)換。旋光色散與圓二色相互轉(zhuǎn)換旋光色散和圓二色是同時(shí)產(chǎn)生的，他們包262-2-2旋光法和圓二色性法的儀器旋光計(jì) 一般得到鈉黃光處的旋光度2-2-2旋光法和圓二色性法的儀器旋光計(jì)27數(shù)顯自動(dòng)旋光儀WZZ-2A通過(guò)對(duì)樣品旋光度的測(cè)量，可以分析確定物質(zhì)的濃度、含量和純度等。主要技術(shù)規(guī)格：測(cè)量范圍：±45°不準(zhǔn)確度：±(0.01°+測(cè)量值×5/10000)可測(cè)樣品最低透過(guò)率：10%（對(duì)鈉光）顯示器：自動(dòng)數(shù)字顯示，最小讀數(shù)值0.005°試管長(zhǎng)度：100mm/200mm上海光學(xué)儀器五廠(chǎng)數(shù)顯自動(dòng)旋光儀WZZ-2A通過(guò)對(duì)樣品旋光度的測(cè)量，282.分光旋光計(jì)

繪制旋光光譜2.分光旋光計(jì)293.圓二色計(jì)(圓二色譜儀)3.圓二色計(jì)(圓二色譜儀)30圓二色譜儀J-810日本分光公司（JASCO）Applications:Protein/PeptideconfirmationstudiesThermalandchemicaldenaturationstudiesStructuraldeterminationTheJ-810isthelatestintroductiontothelonglineofCircularDichroisminstrumentationfromJasco.UnparalleledopticalperformanceandoptionallyavailablemeasurementmodesarecombinedinamannertomaketheJ-810true"chiroopticalspectroscopyworkbench".圓二色譜儀J-810日本分光公司（JASCO）Applic312-2-3旋光法和圓二色性法的應(yīng)用1.單波長(zhǎng)旋光法蔗糖+水葡萄糖+果糖酸還原簡(jiǎn)單體系的分析和純度鑒定，動(dòng)力學(xué)研究反應(yīng)機(jī)理研究2-2-3旋光法和圓二色性法的應(yīng)用1.單波長(zhǎng)旋光法蔗糖+322.旋光色散法有機(jī)物結(jié)構(gòu)分析2.旋光色散法有機(jī)物結(jié)構(gòu)分析333.圓二色性法用于蛋白質(zhì)折疊、蛋白質(zhì)構(gòu)象研究,DNA/RNA反應(yīng)，酶動(dòng)力學(xué)，光學(xué)活性物質(zhì)純度測(cè)量，藥物定量分析。天然有機(jī)化學(xué)與立體有機(jī)化學(xué)，物理化學(xué)，生物化學(xué)與宏觀(guān)大分子，金屬絡(luò)合物，聚合物化學(xué)等相關(guān)的科學(xué)研究。3.圓二色性法用于蛋白質(zhì)折疊、蛋白質(zhì)構(gòu)象研究34例1：(+)-天然樟腦構(gòu)型的確定天然樟腦(+)-樟腦可能有兩種絕對(duì)構(gòu)型，W.HVekel曾人為的指定它為A那樣的構(gòu)型，而Fredge等人卻確定它為B那樣的構(gòu)型。最后根據(jù)(+)-樟腦的CD和ORD譜，構(gòu)型確定為A。AORDCD300400500600700/nm例1：(+)-天然樟腦構(gòu)型的確定天然樟腦(+35例2：鼠肝組蛋白與尼古丁作用后的構(gòu)象變化采用紫外差譜、熒光光譜和圓二色性光譜法對(duì)鼠肝組蛋白H1和H3與尼古丁作用后的構(gòu)象變化進(jìn)行了體外研究.結(jié)果表明，隨尼古丁作用劑量的增加其構(gòu)象逐漸由有序向無(wú)序變化，這可能是尼古丁或其代謝產(chǎn)物與組蛋白H1，H3發(fā)生加合。組蛋白H1（左）、H3（右）與尼古丁作用后的CD光譜曲線(xiàn)1-6尼古丁反應(yīng)濃度分別為：0，0.10，0.20，0.40，0.80，1.60mmol/L；組蛋白H1、H3的測(cè)定濃度均為0.275mmol/L平均氨基酸殘基濃度。吳小紅，孫紅芳，劉元方，科學(xué)通報(bào)，1999，44，2504-2508例2：鼠肝組蛋白與尼古丁作用后的構(gòu)象變化采用36第二章

折射、旋光和圓二色性法第二章

折射、旋光和圓二色性法37參考文獻(xiàn)趙藻藩等編，儀器分析，高等教育出版社，北京，1990何金蘭，儀器分析原理，科學(xué)出版社，北京，2002劉驥等編，醫(yī)用生物物理學(xué)，人民衛(wèi)生出版社，1997RichardA.Paselk,TheEvolutionoftheAbbeRefractometer,BulletinoftheScientificInstrumentSociety,1999,62,19-22,/~scimus/Essays/EvolAbbeRef/EvolAbbeRef.htm參考文獻(xiàn)趙藻藩等編，儀器分析，高等教育出版社，北京，19938目錄2-1折射法

2-1-1折射法基本原理 2-1-2折射儀 2-1-3折射法的應(yīng)用2-2旋光和圓二色性法

2-2-1旋光法基本原理 2-2-2旋光法和圓二色性法的儀器 2-2-3旋光法和圓二色性法的應(yīng)用目錄2-1折射法392-1折射法折射法(Refractometry)是通過(guò)測(cè)量物質(zhì)的折射率來(lái)獲得某些分析信息的方法。這種方法的優(yōu)點(diǎn)是快速，設(shè)備簡(jiǎn)單。但由于折射率是物質(zhì)的一種非專(zhuān)一的性質(zhì)，所以在分析化學(xué)中的應(yīng)用受到很大的限制。2-1折射法折射法(Refractome402-1-1折射法基本原理1.折射現(xiàn)象真空：n=1空氣：n=1.000272-1-1折射法基本原理1.折射現(xiàn)象真空：n=1412.影響折射率測(cè)量的因素溫度n20波長(zhǎng)n20D壓力對(duì)氣體折射率的影響大2.影響折射率測(cè)量的因素溫度n20423.比折射度與摩爾折射度輻射光束在介質(zhì)中的傳播速度，與其中電子的密度及電子周?chē)沫h(huán)境有關(guān)。這一情況可以通過(guò)比折射度這一參數(shù)來(lái)表征。混合溶液的比折射度具有加合性：比折射度：d：密度摩爾折射度：Mr：相對(duì)分子量m、m1、m2分別為混合液、組分1組分2的質(zhì)量3.比折射度與摩爾折射度輻射光束在介質(zhì)中的434.色散系數(shù)nD:鈉黃光589.3nmnF:氫藍(lán)光486.1nmnc:氫紅光656.3nm4.色散系數(shù)nD:鈉黃光589.3nm442-1-2折射儀1.折射計(jì)2-1-2折射儀1.折射計(jì)45np：棱鏡的折射率光源為單色光np：棱鏡的折射率光源為單色光46阿貝折射計(jì)光源為白光，利用Amici棱鏡作補(bǔ)償器，消除鈉黃光以外光線(xiàn)的干擾。1869年，ErnstAbbe搭建了第一臺(tái)折射儀。阿貝折射計(jì)光源為白光，利用Amici棱鏡作補(bǔ)償器，消47阿貝折射儀2W.2WAJ主要技術(shù)規(guī)格 2W 2WAJ折射率ND測(cè)量范圍 1.300-1.700 1.300-1.700折射率ND測(cè)量準(zhǔn)確度 0.0003 0.0002折射率ND最小分度值 0.001 0.0005糖量濃度(%)測(cè)量范圍 0-95 0-95糖量濃度(%)最小分度值 0.5 0.25是測(cè)量透明,半透明液體或固體的折射率ND和平均色散Nf-Nc的儀器。并能測(cè)出糖溶液內(nèi)含糖量濃度的百分?jǐn)?shù)。接上恒溫器則可測(cè)定液體溫度在0-70℃范圍內(nèi)的折射率ND。上海光學(xué)儀器五廠(chǎng)阿貝折射儀2W.2WAJ主要技術(shù)規(guī)格是482.干涉儀利用光干涉的原理進(jìn)行測(cè)量。精度高，無(wú)可動(dòng)部件，可以連續(xù)測(cè)定某一樣品，適合于動(dòng)力學(xué)研究。參考液體的折射率應(yīng)當(dāng)已知。2.干涉儀利用光干涉的原理進(jìn)行測(cè)量。精度高492-1-3應(yīng)用1．定性分析根據(jù)已知的折射率數(shù)據(jù)，判斷有機(jī)化合物的純度食品檢驗(yàn)，如牛奶是否被摻水。2．定量分析二元混合物的分析簡(jiǎn)單體系微量雜質(zhì)的測(cè)定3．有機(jī)物結(jié)構(gòu)鑒定根據(jù)色散系數(shù)進(jìn)行鑒定蔗糖溶液的質(zhì)量分?jǐn)?shù)0-95%，相當(dāng)于折射率為1.333-1.531。2-1-3應(yīng)用1．定性分析蔗糖溶液的質(zhì)量分?jǐn)?shù)0-95%，50目錄2-1折射法 2-1-1折射法基本原理 2-1-2折射儀 2-1-3折射法的應(yīng)用2-2旋光和圓二色性法

2-2-1旋光法基本原理 2-2-2旋光法和圓二色性法的儀器 2-2-3旋光法和圓二色性法的應(yīng)用目錄2-1折射法512-2旋光和圓二色性法旋光法(Polarimetry)是一種很早就出現(xiàn)并應(yīng)用廣泛的研究分子非對(duì)稱(chēng)性結(jié)構(gòu)的光學(xué)方法。隨著旋光色散(或稱(chēng)旋光光譜OpticalRotatoryDispersion，ORD)和圓二色譜(CircularDichroism，CD)這些靈敏方法的出現(xiàn)，使得人們有可能從這些實(shí)驗(yàn)技術(shù)中得到一些新的結(jié)構(gòu)信息，為更深入地研究分子的立體化學(xué)和電子結(jié)構(gòu)提供了條件．ORD和CD在測(cè)定手性化合物的構(gòu)型和構(gòu)象、確定某些官能團(tuán)(如羰基)在手性分子中的位置方面有獨(dú)到之處，是其它光譜無(wú)法代替的。2-2旋光和圓二色性法旋光法(Polar522-2-1旋光法基本原理1.旋光及旋光光譜平面偏振光可以分解成左右圓振光。2-2-1旋光法基本原理1.旋光及旋光光譜平面偏振光可以53疊加原理一束自然光可以分解或看作兩束相互垂直而沒(méi)有相位關(guān)系的平面偏振光的加和。

平面偏振光可以分解成兩束相位相等而旋轉(zhuǎn)方向相反的圓偏振光的加和。當(dāng)振幅相等，并同步的左、右圓偏振光相加，則產(chǎn)生平面偏振光；如果這兩束圓偏振光的振幅不等則產(chǎn)生橢圓偏振光(ellipticallypolarizedlight)

兩束相互垂直而相位相差1/4波長(zhǎng)的平面偏振光可以加和成一束圓偏振光疊加原理一束自然光可以分解或看作兩束相互垂直而沒(méi)有相位關(guān)系的54平面偏振光通過(guò)旋光活性介質(zhì)后，由于左、右圓偏振光的折射率不同，振動(dòng)方向發(fā)生改變，轉(zhuǎn)了一個(gè)角度。這種現(xiàn)象稱(chēng)為旋光，為旋光度。朝光源看，偏振面按順時(shí)針?lè)较蛐D(zhuǎn)的，稱(chēng)為右旋，用“+”號(hào)表示；偏振面按逆時(shí)針?lè)较蛐D(zhuǎn)的，稱(chēng)為左旋，用“-”號(hào)表示比旋光度摩爾旋光度T：溫度 ：波長(zhǎng)l：介質(zhì)厚度 ：介質(zhì)密度c：g/100mL Mr：相對(duì)分子量平面偏振光通過(guò)旋光活性介質(zhì)后，由于左、右圓偏55測(cè)量不同波長(zhǎng)下的，得到旋光色散曲線(xiàn)。兩種類(lèi)型的旋光色散曲線(xiàn)：平坦型：旋光度隨波長(zhǎng)單調(diào)上升或下 降?？祁D效應(yīng)曲線(xiàn)：存在波峰或波谷，一般 在吸收帶附近。統(tǒng)稱(chēng)旋光光譜。測(cè)量不同波長(zhǎng)下的，得到旋光色散曲線(xiàn)。56

化合物無(wú)發(fā)色團(tuán)時(shí)，對(duì)旋光度為負(fù)值的化合物，ORD譜線(xiàn)從紫外到可見(jiàn)區(qū)呈單調(diào)上升；而旋光值為正的化合物是單調(diào)下降。兩種情況下都趨向和逼近[φ]λ=O的線(xiàn)，但不與O線(xiàn)相交，即譜線(xiàn)只是在一個(gè)相內(nèi)延伸，沒(méi)有峰也沒(méi)有谷。這類(lèi)ORD譜線(xiàn)稱(chēng)為正常的或平坦的旋光譜線(xiàn)，?；衔餆o(wú)發(fā)色團(tuán)時(shí)，對(duì)旋光度為負(fù)值的化合物，ORD譜57分子中有一個(gè)簡(jiǎn)單的發(fā)色團(tuán)(如羰基)的ORD譜線(xiàn)，ORD曲線(xiàn)在紫外光譜λmax處越過(guò)零點(diǎn)，進(jìn)入另一個(gè)相區(qū)。形成的一個(gè)峰和一個(gè)谷組成的ORD譜線(xiàn)，稱(chēng)為簡(jiǎn)單科頓效應(yīng)(Conntoneffect,CE)譜線(xiàn)。當(dāng)波長(zhǎng)由長(zhǎng)波一端向短波一端移動(dòng)時(shí)，ORD譜由峰向谷變化稱(chēng)為正的康頓效應(yīng)；而ORD譜線(xiàn)由谷向峰變化則稱(chēng)為負(fù)的康頓效應(yīng)。而ORD與零線(xiàn)相交點(diǎn)的波長(zhǎng)稱(chēng)為λK。谷至峰之間的高度稱(chēng)為振幅。分子中有一個(gè)簡(jiǎn)單的發(fā)色團(tuán)(如羰基)的ORD譜582.圓二色性（CircularDichroism，CD）光學(xué)活性分子對(duì)左、右圓偏振光的吸收也不同，使左、右圓偏振光透過(guò)后變成橢圓偏振光，這種現(xiàn)象稱(chēng)為圓二色性。橢圓度比橢圓度摩爾橢圓度2.圓二色性光學(xué)活性分子對(duì)左、右圓偏振光的59圓二色性的表示吸收(率)差

=L-

R

A=AL–AR

橢圓度，摩爾橢圓度[]

=2.303(AL–AR)/4

[]=3298(L-

R)3300(L-

R)

在蛋白質(zhì)研究中，常用平均殘基摩爾橢圓度圓二色性的表示吸收(率)差

=L-R

60第2章折射旋光和圓二色性法課件61旋光色散與圓二色相互轉(zhuǎn)換旋光色散和圓二色是同時(shí)產(chǎn)生的，他們包括同樣的分子結(jié)構(gòu)信息，并且可以由Kronig-Krammers轉(zhuǎn)換方程相互轉(zhuǎn)換。旋光色散與圓二色相互轉(zhuǎn)換旋光色散和圓二色是同時(shí)產(chǎn)生的，他們包622-2-2旋光法和圓二色性法的儀器旋光計(jì) 一般得到鈉黃光處的旋光度2-2-2旋光法和圓二色性法的儀器旋光計(jì)63數(shù)顯自動(dòng)旋光儀WZZ-2A通過(guò)對(duì)樣品旋光度的測(cè)量，可以分析確定物質(zhì)的濃度、含量和純度等。主要技術(shù)規(guī)格：測(cè)量范圍：±45°不準(zhǔn)確度：±(0.01°+測(cè)量值×5/10000)可測(cè)樣品最低透過(guò)率：10%（對(duì)鈉光）顯示器：自動(dòng)數(shù)字顯示，最小讀數(shù)值0.005°試管長(zhǎng)度：100mm/200mm上海光學(xué)儀器五廠(chǎng)數(shù)顯自動(dòng)旋光儀WZZ-2A通過(guò)對(duì)樣品旋光度的測(cè)量，642.分光旋光計(jì)

繪制旋光光譜2.分光旋光計(jì)653.圓二色計(jì)(圓二色譜儀)3.圓二色計(jì)(圓二色譜儀)66圓二色譜儀J-810日本分光公司（JASCO）Applications:Protein/PeptideconfirmationstudiesThermalandchemicaldenaturationstudiesStructuraldeterminationTheJ-810isthelatestintroduction