課件比賽-臨床微生物檢驗標本的采集-血液標本

第二章臨床微生物檢驗標本的采集第二節(jié)血液標本采集第二章臨床微生物檢驗標本的采集第二節(jié)血液標本采集主要內(nèi)容

主要內(nèi)容

一、標本采集（一）引言（二）采血指征（三）采集方法（四）標本運輸與接收（五）檢出率的重要影響因素（六）結(jié)果報告（七）結(jié)果解釋之污染問題whywhenHow一、標本采集（一）引言whywhenHow

（一）引言正常人的血液是無菌的。菌血癥（bacteremia）：當少量細菌侵入血液循環(huán)，為一過性，不繁殖或很少繁殖，不引起或僅引起輕微的炎癥反應(yīng)者稱為菌血癥。敗血癥（sepsis）：敗血癥是指有全身性炎癥反應(yīng)的表現(xiàn)。血流感染是一種危重的全身感染，對其進行病原菌的檢驗，提供病原學(xué)的診斷極為重要。

why（一）引言正常人的血液是無菌的。why

（二）采血指征一般患者出現(xiàn)以下一種體征時可作為采血的重要指征發(fā)熱（≥38℃）或低溫（≤36℃）；寒戰(zhàn)；白細胞增多（計數(shù)大于10.0×109/L，特別有“核左移”時）；皮膚粘膜出血，休克；昏迷；多器官衰竭，血壓降低，CRP升高及呼吸快；特殊患者出現(xiàn)粒細胞減少,血小板減少等。when（二）采血指征一般患者出現(xiàn)以下一種體征時可作為采血的重要指

（二）采血指征同時具備上述幾種體征時而臨床可疑菌血癥應(yīng)采集血液培養(yǎng)。

新生兒可疑菌血癥，應(yīng)該同時做尿液和腦脊液培養(yǎng)。對入院危重感染患者應(yīng)在未進行抗菌藥物治療之前，及時做培養(yǎng)。（二）采血指征同時具備上述幾種體征時而臨床可疑菌血癥應(yīng)采（三）血液標本的采集方法

（三）血液標本的采集方法

1.采血部位靜脈,非動脈。不同部位多次采血。不應(yīng)從留置導(dǎo)管內(nèi)取血。如果血培養(yǎng)是通過靜脈植入管采集的，不用棄去起始部分的血液，應(yīng)同時自外周靜脈采集血液進行血培養(yǎng)，以協(xié)助判讀血培養(yǎng)陽性結(jié)果

。（三）血培養(yǎng)標本采集How1.采血部位（三）血培養(yǎng)標本采集How

（三）血培養(yǎng)標本采集2.皮膚消毒程序嚴格執(zhí)行以下三步法:70%酒精30秒1%～2%碘酊30秒or10%碘伏消毒60秒70%酒精脫碘60秒之前應(yīng)消毒血培養(yǎng)瓶的橡皮塞子：70%酒精60秒（三）血培養(yǎng)標本采集2.皮膚消毒程序嚴格執(zhí)行以下三（三）血培養(yǎng)標本采集3.靜脈穿刺和培養(yǎng)瓶接種程序在穿刺前或穿刺期間，不可接觸穿刺點用注射器無菌穿刺取血后，勿換針頭，直接注入血培養(yǎng)瓶。血標本接種培養(yǎng)瓶后，輕輕顛倒混勻以防血液凝固。立即送檢，切勿冷藏。

（三）血培養(yǎng)標本采集3.靜脈穿刺和培養(yǎng)瓶接種程序在穿刺前或穿課件比賽-臨床微生物檢驗標本的采集——血液標本課件比賽-臨床微生物檢驗標本的采集——血液標本4.采血量血培養(yǎng)中采集血液的量，是影響細菌血癥或真菌血癥的偵測最重要的因素。研究表明：血液量增加1ml血量，陽性率增加3%～5%。血液量由2ml增加到20ml時，血培養(yǎng)的陽性率增加30%～50%。對于嬰幼兒患者，采血量不超過患者總血量的1％。在此前提下，增加采血量也會增加陽性率。自動化儀器要求成人采血量是8～10ml/瓶，兒童1～5ml/瓶。（三）血培養(yǎng)標本采集4.采血量（三）血培養(yǎng)標本采集9%+14%+9%+11%+發(fā)熱高峰前12-2.5小時發(fā)熱高峰前2.5-0.5小時發(fā)熱高峰期間發(fā)熱高峰后1-12小時166病人105病人199病人258病人Thomsonetal.1991.ASCP.MayoClinicStudy5.血培養(yǎng)的時機

（三）血培養(yǎng)標本采集細菌通常在寒戰(zhàn)和發(fā)燒前1小時進入血流考慮到方便操作上的原因，建議常規(guī)血培養(yǎng)應(yīng)于病人寒戰(zhàn)和發(fā)燒時，于30-60分鐘內(nèi)采集2-3套血培養(yǎng)；除非有懷疑感染性心內(nèi)膜炎可采用間隔式采血法。9%+14%+9%+11%+發(fā)熱高峰前12-2.5?。ㄈ┭囵B(yǎng)標本采集6.血培養(yǎng)的數(shù)量※一套血培養(yǎng)/一份血培養(yǎng)標本：一次靜脈穿刺獲得的血液被分配到相應(yīng)的幾個血培養(yǎng)瓶，該幾個培養(yǎng)瓶/統(tǒng)稱為一套血培養(yǎng)。解釋為一份血培養(yǎng)標本。（三）血培養(yǎng)標本采集6.血培養(yǎng)的數(shù)量※一套血培養(yǎng)/一份血培（三）血培養(yǎng)標本采集理由1：血培養(yǎng)組合的累積敏感性

DetectionofBloodstreamInfectionsinAdults:HowManyBloodCulturesAreNeeded.

Weinsteinetal.JClinMicrobiol.2007;45:3546-3548（三）血培養(yǎng)標本采集理由1：血培養(yǎng)組合的累積敏感性

Dete（三）血培養(yǎng)標本采集敗血癥vs.“污染的”血培養(yǎng)MayoClinicStudy%陽性心內(nèi)膜炎菌血癥皮膚定植細菌血培養(yǎng)套數(shù)理由2：區(qū)分血培養(yǎng)的真實陽性和污染（三）血培養(yǎng)標本采集敗血癥vs.“污染的”血培養(yǎng)May（三）血培養(yǎng)標本采集目前的指南推薦采集2-3套血培養(yǎng)從不建議操作單套的血培養(yǎng)在采取血培養(yǎng)后的2-5天內(nèi)，不需要再重復(fù)采取血培養(yǎng)，因為采取治療后的2-5天血液中的感染細菌不會馬上消失。

6.血培養(yǎng)的數(shù)量（三）血培養(yǎng)標本采集目前的指南推薦采集2-3套血培養(yǎng)6.血培（三）血培養(yǎng)標本采集AnaerobicBottlesareStillImportantinBloodCultureSets.P.Khanna,P.Collignon.EurJClinMicrobiolInfectDis.2001Mar;20(3):217-9.

Clinicalvalueofanaerobicbloodculture:aretrospectiveanalysisofpositivepatientepisodes.PeterAJames，KhalidMAl-Shafi.J.Clin.Pathol.2000;53;231-233需氧血培養(yǎng)瓶和厭氧血培養(yǎng)瓶

這些研究中，使用“配對需氧/厭氧血培養(yǎng)瓶”比用“兩個需氧血培養(yǎng)瓶”復(fù)現(xiàn)出更多的金葡、腸桿菌科細菌和厭氧菌。Anaerobicbloodcultures:usefulintheICU?ByrdRPJr,RoyTM.Chest.2003Jun;123(6):2158-9……（三）血培養(yǎng)標本采集AnaerobicBottlesar（三）血培養(yǎng)標本采集

絕大多數(shù)需氧的致病菌都是兼性厭氧菌。雙倍的血培養(yǎng)血量；一些兼性厭氧菌在厭氧環(huán)境中得以更快的生長出來。

結(jié)論：推薦常規(guī)血培養(yǎng)包括配對的需氧/厭氧血培養(yǎng)瓶。當抽得的血少于推薦血量時，應(yīng)該首先接種需氧瓶；剩余血液接種厭氧瓶。注意：對于那些僅用需氧瓶的實驗室來講，每次采血必須注入2個需氧瓶中以確保足夠的采血量。需氧血培養(yǎng)瓶和厭氧血培養(yǎng)瓶（三）血培養(yǎng)標本采集絕大多數(shù)需氧的致病菌都是兼

血培養(yǎng)瓶應(yīng)立即被送往實驗室，任何延誤送入自動連續(xù)監(jiān)測血培養(yǎng)儀的行為，將會延誤或阻止檢測細菌的生長。如不能立即送檢，應(yīng)該置于室溫下，不得被冷藏或冷凍,且不超過數(shù)小時。裝載到培養(yǎng)箱前應(yīng)進行特殊標記，以便隨后的結(jié)果分析。

1.血培養(yǎng)標本的轉(zhuǎn)運（四）標本轉(zhuǎn)運與接收血培養(yǎng)瓶應(yīng)立即被送往實驗室，任何延誤送入自動連續(xù)監(jiān)1.血培

2.不合格血培養(yǎng)標本的處理（四）標本轉(zhuǎn)運與接收(1)拒收培養(yǎng)瓶卷標錯誤或未貼標簽的血培養(yǎng)瓶破損的或滲漏的血培養(yǎng)瓶血液凝固的血培養(yǎng)瓶(2)補做培養(yǎng)瓶血標本采集后放置12h以上(手工法除外)用不適當類型的培養(yǎng)瓶收集標本用過期的培養(yǎng)瓶收集標本采血量不足2.不合格血培養(yǎng)標本的處理（四）標本轉(zhuǎn)運與接收(1)拒收（五）檢出率的重要影響因素血量孵育條件血液-肉湯比例添加劑培養(yǎng)基（五）檢出率的重要影響因素血量孵育條件血液-肉湯比例添加劑培

（五）檢出率的重要影響因素1.血液送檢量？成人血液中每毫升的菌落形成單位(CFU)很低，因此增

加送檢血液量可以提升檢出率。兒童的血液中每毫升的菌落形成單位(CFU)高于成人，因此送檢血量應(yīng)參照總血容量和年齡。當送檢的血量少于推薦量時，監(jiān)控血培養(yǎng)的送檢量和提供臨床反饋是實驗室質(zhì)量保證計劃的一項重要指標。（五）檢出率的重要影響因素1.血液送檢量？成人

正常人的血液中含有某些物質(zhì)，可以抑制血液中細菌的生長。因此血液與肉湯的比例須適當，以便稀釋和減少這些物質(zhì)的抑制細菌作用。推薦的血液與肉湯的比例是1:5-1:10。兒童的血培養(yǎng)須采用專用兒童瓶，以符合兒童的采血量的血液與肉湯的比例要求。（五）檢出率的重要影響因素2.血液與肉湯的比例正常人的血液中含有某些物質(zhì)，可以抑制血液中細菌的生長。（五

多種商業(yè)化的培養(yǎng)基配方，可用于人工及自動化血培養(yǎng)系統(tǒng)。含不同改良配方的商用培養(yǎng)基，可以改善檢出率。3.培養(yǎng)基（五）檢出率的重要影響因素因為沒有一種培養(yǎng)基可以檢出所有的細菌、真菌及分支桿菌；故結(jié)合使用多種不同配方的培養(yǎng)基，可以提升病原菌檢出率。質(zhì)控檢查多種商業(yè)化的培養(yǎng)基配方，可用于人工及自動化血培養(yǎng)系統(tǒng)。3.抗凝劑0.025-0.05％SPS（聚茴香腦磺酸鈉）是最常用抗凝劑。

其他血液抗凝劑，如：肝素，EDTA和枸櫞酸則對微生物有毒，因此不能被用于血培養(yǎng)。SPS抑制奈瑟菌的生長！4.培養(yǎng)基添加劑（五）檢出率的重要影響因素

抗生素吸附劑：樹脂及活性碳有助于已接受抗生素治療病人血培養(yǎng)的病源菌，及部分葡萄球菌與酵母菌的檢出率?？鼓齽?.培養(yǎng)基添加劑（五）檢出率的重要影響因素抗生

溫度：35-37℃適合的環(huán)境時間推薦自動化血培養(yǎng)系統(tǒng)采用5天的孵育周期。搖動有助于需氧瓶內(nèi)病原菌的檢出率監(jiān)測的間隔傳統(tǒng)方法VS自動化系統(tǒng)5.孵育條件（五）檢出率的重要影響因素溫度：35-37℃5.孵育條件（五）檢出率的重要影響因素1血培養(yǎng)已開單但未收到標本。2血培養(yǎng)標本已收到。3檢測中，尚無結(jié)果。4

24小時無菌生長。5

48小時無菌生長。6

72小時無菌生長，建議可送第二套血培養(yǎng)。7陽性報警，分離培養(yǎng)和藥敏進行中，并報告初步涂片染色結(jié)果。8陽性培養(yǎng)結(jié)果（細菌鑒定和藥敏試驗的最終結(jié)果）。

（六）結(jié)果報告

由于血培養(yǎng)結(jié)果的重要性，無論陰性或陽性狀態(tài)，提倡有效、持續(xù)地向臨床報告培養(yǎng)狀態(tài)。有條件的醫(yī)院應(yīng)充分利用實驗室信息系統(tǒng)（LIS）和醫(yī)院信息系統(tǒng)（HIS），讓臨床醫(yī)生隨時掌握血培養(yǎng)檢測的進展情況，包括如下情況：1血培養(yǎng)已開單但未收到標本。（六）結(jié)果報告分級報告制度+一級報告二級報告三級報告分級報告制度+一級報告二級報告三級報告如果皮膚定植的細菌沒有被殺死，這些細菌將通過針頭被吸入血培養(yǎng)瓶并在瓶中生長。污染問題（七）結(jié)果解釋之1.產(chǎn)生如果皮膚定植的細菌沒有被殺死，這些細菌將通過針頭被吸入血培養(yǎng)污染細菌

血培養(yǎng)污染定義為在幾次血培養(yǎng)中單個血培養(yǎng)下列細菌陽性:凝固酶陰性葡萄球菌棒狀桿菌微球菌丙酸桿菌芽孢桿菌等某些細菌(主要為凝固酶陰性葡萄球菌)引起導(dǎo)管相關(guān)性敗血癥。醫(yī)生不能將真的凝固酶葡萄球菌感染和皮膚定植菌“污染”相區(qū)分，因此他們很可能會用萬古霉素治療患者。污染問題2.細菌污染細菌血培養(yǎng)污染定義為在幾次血培養(yǎng)中單個血培一個污染的血培養(yǎng)結(jié)果會導(dǎo)致不必要的抗菌藥物治療，延長住院時間，提高治療費用。目前發(fā)現(xiàn)每個假陽性結(jié)果會導(dǎo)致：延長患者住院時間4.5天；增加抗菌藥物使用達39%；額外支出4400美元。萬古霉素不必要使用引起萬古霉素耐藥腸球菌(VRE)和潛在的萬古霉素耐藥金黃色葡萄球菌的增加然而，即使遵循正確的血液采集步驟，2%的污染率還是不可能避免的。可接受的污染概率在3％以下。污染問題3.危害一個污染的血培養(yǎng)結(jié)果會導(dǎo)致不必要的抗菌藥物治療，延長住院時間實驗室必須采用標準的血培養(yǎng)采集步驟，以有效的將污染降至最低。增加70％異丙基酒精消毒步驟。整個采集血液過程嚴格遵從無菌操作，除非有戴無菌手套，否則不允許在消毒后按壓靜脈。許多研究表明：采血后與接種是否需要換針頭，并無明顯的污染率差異。污染問題4.解決主要內(nèi)容

實驗室必須采用標準的血培養(yǎng)采集步驟，以有效的將污染降至最低。二、血液中常見的病原體

種類病原菌G+球菌金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、肺炎鏈球菌、化膿鏈球菌、草綠色鏈球菌、腸球菌G+桿菌結(jié)核分枝桿菌、產(chǎn)單核李斯特菌G-球菌腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌，卡他布蘭漢菌G-桿菌大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、克雷伯桿菌、腸桿菌、變形桿菌、沙雷菌、沙門菌、不動桿菌、嗜肺軍團菌、嗜血桿菌真菌念珠菌、曲霉菌、隱球菌、球孢子菌厭氧菌擬桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌二、血液中常見的病原體種類病原菌G+球菌金黃色葡萄課件比賽-臨床微生物檢驗標本的采集——血液標本三、血液感染的臨床意義葡萄球菌菌血癥由MRSA/MRCNS引起的逐年增多。腸球菌菌血癥常見泌尿生殖道、消化道和腹腔感染的病人。易并發(fā)心內(nèi)膜炎。此菌可對多種抗生素耐藥，病情較重。G-桿菌菌血癥主要侵犯免疫功能低下的病人。常源于泌尿生殖道、胃腸道、膽道及呼吸道感染。L型菌感染菌血癥使用抑制細胞壁的抗生素，由缺損細胞壁的細菌感染所致。厭氧菌菌血癥常合并需氧菌感染，癥狀重而復(fù)雜。真菌血癥常由條件致病性真菌引起，有念珠菌/曲霉/毛霉等。多數(shù)伴有細菌感染。三、血液感染的臨床意義葡萄球菌菌血癥由MRSA/MRCNS引三級報告制度？標本的正確選擇、采集和運送是實驗室工作準確和有效的前提，是保證實驗室質(zhì)量的重要環(huán)節(jié)。小結(jié)三級報告制度？標本的正確選擇、采集和運送是實驗室工作準確和有主編：Brooks等主編:P.R.默里等參考文獻微生物之家：/主編：Brooks等主編:P.R.默里等參考文獻微生物之家：ThankYou！ThankYou！第二章臨床微生物檢驗標本的采集第二節(jié)血液標本采集第二章臨床微生物檢驗標本的采集第二節(jié)血液標本采集主要內(nèi)容

主要內(nèi)容

一、標本采集（一）引言（二）采血指征（三）采集方法（四）標本運輸與接收（五）檢出率的重要影響因素（六）結(jié)果報告（七）結(jié)果解釋之污染問題whywhenHow一、標本采集（一）引言whywhenHow

（一）引言正常人的血液是無菌的。菌血癥（bacteremia）：當少量細菌侵入血液循環(huán)，為一過性，不繁殖或很少繁殖，不引起或僅引起輕微的炎癥反應(yīng)者稱為菌血癥。敗血癥（sepsis）：敗血癥是指有全身性炎癥反應(yīng)的表現(xiàn)。血流感染是一種危重的全身感染，對其進行病原菌的檢驗，提供病原學(xué)的診斷極為重要。

why（一）引言正常人的血液是無菌的。why

（二）采血指征一般患者出現(xiàn)以下一種體征時可作為采血的重要指征發(fā)熱（≥38℃）或低溫（≤36℃）；寒戰(zhàn)；白細胞增多（計數(shù)大于10.0×109/L，特別有“核左移”時）；皮膚粘膜出血，休克；昏迷；多器官衰竭，血壓降低，CRP升高及呼吸快；特殊患者出現(xiàn)粒細胞減少,血小板減少等。when（二）采血指征一般患者出現(xiàn)以下一種體征時可作為采血的重要指

（二）采血指征同時具備上述幾種體征時而臨床可疑菌血癥應(yīng)采集血液培養(yǎng)。

新生兒可疑菌血癥，應(yīng)該同時做尿液和腦脊液培養(yǎng)。對入院危重感染患者應(yīng)在未進行抗菌藥物治療之前，及時做培養(yǎng)。（二）采血指征同時具備上述幾種體征時而臨床可疑菌血癥應(yīng)采（三）血液標本的采集方法

（三）血液標本的采集方法

1.采血部位靜脈,非動脈。不同部位多次采血。不應(yīng)從留置導(dǎo)管內(nèi)取血。如果血培養(yǎng)是通過靜脈植入管采集的，不用棄去起始部分的血液，應(yīng)同時自外周靜脈采集血液進行血培養(yǎng)，以協(xié)助判讀血培養(yǎng)陽性結(jié)果

。（三）血培養(yǎng)標本采集How1.采血部位（三）血培養(yǎng)標本采集How

（三）血培養(yǎng)標本采集2.皮膚消毒程序嚴格執(zhí)行以下三步法:70%酒精30秒1%～2%碘酊30秒or10%碘伏消毒60秒70%酒精脫碘60秒之前應(yīng)消毒血培養(yǎng)瓶的橡皮塞子：70%酒精60秒（三）血培養(yǎng)標本采集2.皮膚消毒程序嚴格執(zhí)行以下三（三）血培養(yǎng)標本采集3.靜脈穿刺和培養(yǎng)瓶接種程序在穿刺前或穿刺期間，不可接觸穿刺點用注射器無菌穿刺取血后，勿換針頭，直接注入血培養(yǎng)瓶。血標本接種培養(yǎng)瓶后，輕輕顛倒混勻以防血液凝固。立即送檢，切勿冷藏。

（三）血培養(yǎng)標本采集3.靜脈穿刺和培養(yǎng)瓶接種程序在穿刺前或穿課件比賽-臨床微生物檢驗標本的采集——血液標本課件比賽-臨床微生物檢驗標本的采集——血液標本4.采血量血培養(yǎng)中采集血液的量，是影響細菌血癥或真菌血癥的偵測最重要的因素。研究表明：血液量增加1ml血量，陽性率增加3%～5%。血液量由2ml增加到20ml時，血培養(yǎng)的陽性率增加30%～50%。對于嬰幼兒患者，采血量不超過患者總血量的1％。在此前提下，增加采血量也會增加陽性率。自動化儀器要求成人采血量是8～10ml/瓶，兒童1～5ml/瓶。（三）血培養(yǎng)標本采集4.采血量（三）血培養(yǎng)標本采集9%+14%+9%+11%+發(fā)熱高峰前12-2.5小時發(fā)熱高峰前2.5-0.5小時發(fā)熱高峰期間發(fā)熱高峰后1-12小時166病人105病人199病人258病人Thomsonetal.1991.ASCP.MayoClinicStudy5.血培養(yǎng)的時機

（三）血培養(yǎng)標本采集細菌通常在寒戰(zhàn)和發(fā)燒前1小時進入血流考慮到方便操作上的原因，建議常規(guī)血培養(yǎng)應(yīng)于病人寒戰(zhàn)和發(fā)燒時，于30-60分鐘內(nèi)采集2-3套血培養(yǎng)；除非有懷疑感染性心內(nèi)膜炎可采用間隔式采血法。9%+14%+9%+11%+發(fā)熱高峰前12-2.5小（三）血培養(yǎng)標本采集6.血培養(yǎng)的數(shù)量※一套血培養(yǎng)/一份血培養(yǎng)標本：一次靜脈穿刺獲得的血液被分配到相應(yīng)的幾個血培養(yǎng)瓶，該幾個培養(yǎng)瓶/統(tǒng)稱為一套血培養(yǎng)。解釋為一份血培養(yǎng)標本。（三）血培養(yǎng)標本采集6.血培養(yǎng)的數(shù)量※一套血培養(yǎng)/一份血培（三）血培養(yǎng)標本采集理由1：血培養(yǎng)組合的累積敏感性

DetectionofBloodstreamInfectionsinAdults:HowManyBloodCulturesAreNeeded.

Weinsteinetal.JClinMicrobiol.2007;45:3546-3548（三）血培養(yǎng)標本采集理由1：血培養(yǎng)組合的累積敏感性

Dete（三）血培養(yǎng)標本采集敗血癥vs.“污染的”血培養(yǎng)MayoClinicStudy%陽性心內(nèi)膜炎菌血癥皮膚定植細菌血培養(yǎng)套數(shù)理由2：區(qū)分血培養(yǎng)的真實陽性和污染（三）血培養(yǎng)標本采集敗血癥vs.“污染的”血培養(yǎng)May（三）血培養(yǎng)標本采集目前的指南推薦采集2-3套血培養(yǎng)從不建議操作單套的血培養(yǎng)在采取血培養(yǎng)后的2-5天內(nèi)，不需要再重復(fù)采取血培養(yǎng)，因為采取治療后的2-5天血液中的感染細菌不會馬上消失。

6.血培養(yǎng)的數(shù)量（三）血培養(yǎng)標本采集目前的指南推薦采集2-3套血培養(yǎng)6.血培（三）血培養(yǎng)標本采集AnaerobicBottlesareStillImportantinBloodCultureSets.P.Khanna,P.Collignon.EurJClinMicrobiolInfectDis.2001Mar;20(3):217-9.

Clinicalvalueofanaerobicbloodculture:aretrospectiveanalysisofpositivepatientepisodes.PeterAJames，KhalidMAl-Shafi.J.Clin.Pathol.2000;53;231-233需氧血培養(yǎng)瓶和厭氧血培養(yǎng)瓶

這些研究中，使用“配對需氧/厭氧血培養(yǎng)瓶”比用“兩個需氧血培養(yǎng)瓶”復(fù)現(xiàn)出更多的金葡、腸桿菌科細菌和厭氧菌。Anaerobicbloodcultures:usefulintheICU?ByrdRPJr,RoyTM.Chest.2003Jun;123(6):2158-9……（三）血培養(yǎng)標本采集AnaerobicBottlesar（三）血培養(yǎng)標本采集

絕大多數(shù)需氧的致病菌都是兼性厭氧菌。雙倍的血培養(yǎng)血量；一些兼性厭氧菌在厭氧環(huán)境中得以更快的生長出來。

結(jié)論：推薦常規(guī)血培養(yǎng)包括配對的需氧/厭氧血培養(yǎng)瓶。當抽得的血少于推薦血量時，應(yīng)該首先接種需氧瓶；剩余血液接種厭氧瓶。注意：對于那些僅用需氧瓶的實驗室來講，每次采血必須注入2個需氧瓶中以確保足夠的采血量。需氧血培養(yǎng)瓶和厭氧血培養(yǎng)瓶（三）血培養(yǎng)標本采集絕大多數(shù)需氧的致病菌都是兼

血培養(yǎng)瓶應(yīng)立即被送往實驗室，任何延誤送入自動連續(xù)監(jiān)測血培養(yǎng)儀的行為，將會延誤或阻止檢測細菌的生長。如不能立即送檢，應(yīng)該置于室溫下，不得被冷藏或冷凍,且不超過數(shù)小時。裝載到培養(yǎng)箱前應(yīng)進行特殊標記，以便隨后的結(jié)果分析。

1.血培養(yǎng)標本的轉(zhuǎn)運（四）標本轉(zhuǎn)運與接收血培養(yǎng)瓶應(yīng)立即被送往實驗室，任何延誤送入自動連續(xù)監(jiān)1.血培

2.不合格血培養(yǎng)標本的處理（四）標本轉(zhuǎn)運與接收(1)拒收培養(yǎng)瓶卷標錯誤或未貼標簽的血培養(yǎng)瓶破損的或滲漏的血培養(yǎng)瓶血液凝固的血培養(yǎng)瓶(2)補做培養(yǎng)瓶血標本采集后放置12h以上(手工法除外)用不適當類型的培養(yǎng)瓶收集標本用過期的培養(yǎng)瓶收集標本采血量不足2.不合格血培養(yǎng)標本的處理（四）標本轉(zhuǎn)運與接收(1)拒收（五）檢出率的重要影響因素血量孵育條件血液-肉湯比例添加劑培養(yǎng)基（五）檢出率的重要影響因素血量孵育條件血液-肉湯比例添加劑培

（五）檢出率的重要影響因素1.血液送檢量？成人血液中每毫升的菌落形成單位(CFU)很低，因此增

加送檢血液量可以提升檢出率。兒童的血液中每毫升的菌落形成單位(CFU)高于成人，因此送檢血量應(yīng)參照總血容量和年齡。當送檢的血量少于推薦量時，監(jiān)控血培養(yǎng)的送檢量和提供臨床反饋是實驗室質(zhì)量保證計劃的一項重要指標。（五）檢出率的重要影響因素1.血液送檢量？成人

正常人的血液中含有某些物質(zhì)，可以抑制血液中細菌的生長。因此血液與肉湯的比例須適當，以便稀釋和減少這些物質(zhì)的抑制細菌作用。推薦的血液與肉湯的比例是1:5-1:10。兒童的血培養(yǎng)須采用專用兒童瓶，以符合兒童的采血量的血液與肉湯的比例要求。（五）檢出率的重要影響因素2.血液與肉湯的比例正常人的血液中含有某些物質(zhì)，可以抑制血液中細菌的生長。（五

多種商業(yè)化的培養(yǎng)基配方，可用于人工及自動化血培養(yǎng)系統(tǒng)。含不同改良配方的商用培養(yǎng)基，可以改善檢出率。3.培養(yǎng)基（五）檢出率的重要影響因素因為沒有一種培養(yǎng)基可以檢出所有的細菌、真菌及分支桿菌；故結(jié)合使用多種不同配方的培養(yǎng)基，可以提升病原菌檢出率。質(zhì)控檢查多種商業(yè)化的培養(yǎng)基配方，可用于人工及自動化血培養(yǎng)系統(tǒng)。3.抗凝劑0.025-0.05％SPS（聚茴香腦磺酸鈉）是最常用抗凝劑。

其他血液抗凝劑，如：肝素，EDTA和枸櫞酸則對微生物有毒，因此不能被用于血培養(yǎng)。SPS抑制奈瑟菌的生長！4.培養(yǎng)基添加劑（五）檢出率的重要影響因素

抗生素吸附劑：樹脂及活性碳有助于已接受抗生素治療病人血培養(yǎng)的病源菌，及部分葡萄球菌與酵母菌的檢出率?？鼓齽?.培養(yǎng)基添加劑（五）檢出率的重要影響因素抗生

溫度：35-37℃適合的環(huán)境時間推薦自動化血培養(yǎng)系統(tǒng)采用5天的孵育周期。搖動有助于需氧瓶內(nèi)病原菌的檢出率監(jiān)測的間隔傳統(tǒng)方法VS自動化系統(tǒng)5.孵育條件（五）檢出率的重要影響因素溫度：35-37℃5.孵育條件（五）檢出率的重要影響因素1血培養(yǎng)已開單但未收到標本。2血培養(yǎng)標本已收到。3檢測中，尚無結(jié)果。4

24小時無菌生長。5

48小時無菌生長。6

72小時無菌生長，建議可送第二套血培養(yǎng)。7陽性報警，分離培養(yǎng)和藥敏進行中，并報告初步涂片染色結(jié)果。8陽性培養(yǎng)結(jié)果（細菌鑒定和藥敏試驗的最終結(jié)果）。

（六）結(jié)果報告

由于血培養(yǎng)結(jié)果的重要性，無論陰性或陽性狀態(tài)，提倡有效、持續(xù)地向臨床報告培養(yǎng)狀態(tài)。有條件的醫(yī)院應(yīng)充分利用實驗室信息系統(tǒng)（LIS）和醫(yī)院信息系統(tǒng)（HIS），讓臨床醫(yī)生隨時掌握血培養(yǎng)檢測的進展情況，包括如下情況：1血培養(yǎng)已開單但未收到標本。（六）結(jié)果報告分級報告制度+一級報告二級報告三級報告分級報告制度+一級報告二級報告三級報告如果皮膚定植的細菌沒有被殺死，這些細菌將通過針頭被吸入血培養(yǎng)瓶并在瓶中生長。污染問題（七）結(jié)果解釋之1.產(chǎn)生如果皮膚定植的細菌沒有被殺死，這些細菌將通過針頭被吸入血培養(yǎng)污染細菌

血培養(yǎng)污染定義為在幾次血培養(yǎng)中單個血培養(yǎng)下列細菌陽性:凝固酶陰性葡萄球菌棒狀桿菌微球菌丙酸桿菌