鈣衛(wèi)蛋白在腫瘤壞死因子抑制劑治療幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎臨床應(yīng)答中的預(yù)測(cè)作用

鈣衛(wèi)蛋白在腫瘤壞死因子抑制劑治療幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎臨床應(yīng)答中的預(yù)測(cè)作用李暉;蔡瑋;陳開(kāi)瀾【摘要】ObjectiveToinvestigatethecorrelationofserumcalprotectin(MRP8/14)expressionwithclinicalresponseinChinesejuvenileidiopathicarthritis(JIA)patientstreatedwithatumornecrosisfactor(TNF)inhibitor.MethodsSeventy-twoJIApatientsand30healthvolunteers(HCs)wereenrolledinthisprospectivestudy.AllJIApatientsreceivedetanerceptfor24weeks.SerumwascollectedfromJIApatientsatbaselinebeforetreatmentandfromHCs.ClinicalresponsewasdefinedaccordingtotheAmericanCollegeofRheumatology(ACR)Pedi50criteria.ResultsSerumMRP8/14expressionwasgreaterinJIApatientsthaninHCs(P＜0.001).SerumMRP8/14levelwasgreaterinrespondersthaninnon-responders(areaunderthereceiveroperatingcharacteristiccurve,0.823;95thathighserumMRP8/14expressionwasanindependentpredictivefactorforclinicalresponse(P=0.003).ConclusionSerumMRP8/14levelcanbeusedasaconvincingandnovelbiomarkerforclinicalresponseinJIApatientstreatedwithaTNFinhibitor.%目的評(píng)估血清鈣衛(wèi)蛋白(MRP8/14)水平在腫瘤壞死因子(TNF)抑制劑治療中國(guó)人群幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎(JIA)患者臨床應(yīng)答中的預(yù)測(cè)作用.方法納入72例接受依那西普治療24周的JIA患者和30例健康志愿者(HCs),采用免疫酶吸附法檢測(cè)JIA患者基線(xiàn)期和HCs血清MRP8/14水平.臨床應(yīng)答定義為實(shí)現(xiàn)ACR兒科臨床應(yīng)答標(biāo)準(zhǔn)ACRpedi50.結(jié)果JIA患者中血清MRP8/14水平HCs(P0.001)MRP8/14組(P0.001),MRP8/140.823(95CI:0.706～0.939)logisticMRP8/14(P=0.003)MRP8/14TNFJIA【期刊名稱(chēng)】《中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》【年(卷),期】2017(046)009【總頁(yè)數(shù)】5頁(yè)(P825-829)【關(guān)鍵詞】幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎;鈣衛(wèi)蛋白;腫瘤壞死因子抑制劑;臨床應(yīng)答【作者】李暉;蔡瑋;陳開(kāi)瀾【作者單位】430016430016430016【正文語(yǔ)種】中文【中圖分類(lèi)】R593.22腫瘤壞死因子（tumornecrosisfactor，TNF）抑制劑作為幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎（juvenileidiopathicarthritis，JIA）最有效的治療方式，可快速緩解患者的疾病活動(dòng)度，在一定程度上抑制放射學(xué)進(jìn)展［1］，但依然有20%～30%的患者治療療效不佳［2］。鈣衛(wèi)蛋白（MRP8/14）是中性粒細(xì)胞的衍生蛋白，其在JIA、類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoidarthritis，RA）、炎癥性腸?。╥nflammatoryboweldisease，IBD）等多種免疫性疾病中都表現(xiàn)出促炎作用［3-5］。HOLZINGER等［6］發(fā)現(xiàn)，血清MRP8/14在JIA患者中高表達(dá)，且與疾病活動(dòng)度相關(guān)；ANINK［3］的研究顯示，血清MRP8/14JIA6MRP8/14TNFJIA患者中的療效預(yù)測(cè)作用尚未MRP8/14水平在TNF抑制劑治療中國(guó)人群JIA患者臨床療效應(yīng)答中的預(yù)測(cè)作用。2010912015830TNF（依那西普）治療的JIA72例。入組標(biāo)準(zhǔn)：家屬簽2001（internationalleagueofassociationsforrheumatology，ILAR）JIA3和血液、內(nèi)分泌系統(tǒng)病變及病史者（嚴(yán)重程度的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)為肝功能≥2g/L；血小板80×109/L）；正處于急、慢性感染期間，或既往有活動(dòng)性結(jié)核史者；惡性度心力衰竭（3～4）；研究者認(rèn)為的不適合使用依那西普的其他30JIA本研究獲得武漢市婦女兒童醫(yī)療保健中心倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有受試者家屬均簽署書(shū)面知情同意書(shū)。JIA患者均采用依那西普進(jìn)行治療（0.4mg/kg皮下注射，2次/周），2424ACRACRpedi50將患者劃分為應(yīng)答組與不應(yīng)答組［7］。ACRpedi50應(yīng)答標(biāo)準(zhǔn)為以下6項(xiàng)核心指標(biāo)中至少3項(xiàng)改善≥50%，且不超過(guò)1項(xiàng)惡化≥30%：紅細(xì)胞沉降率（erythrocytesedimentationrate，ESR）、兒童健康評(píng)估問(wèn)卷（childhoodhealthassessmentquestionnaire，CHAQ）、活動(dòng)性炎性關(guān)節(jié)計(jì)數(shù)、活動(dòng)受限關(guān)節(jié)計(jì)數(shù)、醫(yī)師對(duì)疾病的總體評(píng)估、患兒或患兒父母對(duì)病情的總體評(píng)估［7］。MRP8/14JIA4mL，置于不含乙二胺四乙酸（ethylenediaminetetraaceticacid，EDTA）1h，41000g10min416000g10min，取上清液置于-80采用免疫酶聯(lián)吸附法（enzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA），按照MRP8/14ELISA試劑盒（Immunodiagnostik公司，德國(guó)）說(shuō)明書(shū)操作，對(duì)患者血清中MRP8/14的水平進(jìn)行檢測(cè)。采用SPSS21.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。定量資料的組間差異比較采用Mann-Whitney檢驗(yàn)（偏態(tài)），定性資料組間的差異比較采用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行分析。應(yīng)用受試者工作特征（receiveroperatingcharacteristic，ROC）曲線(xiàn)進(jìn)行血清MRP8/14對(duì)依那西普治療JIA患者臨床應(yīng)答的預(yù)測(cè)作用分析，并進(jìn)一步采用單因素、多因素logistic邏輯回歸模型分析影響依那西普治療JIA患者臨床應(yīng)答的因素。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。JIA患者中血清MRP8/14水平為1464（798～2947）ng/mL，顯著高于年齡、性別匹配的健康對(duì)照組［202（112～368）ng/mL，P＜0.001］。72例JIA患者中，9例未持續(xù)用藥至第24周（4例感染和3例失訪(fǎng)，未納入最后臨床應(yīng)答分析；2例療效不佳，納入不應(yīng)答組進(jìn)行分析），因此納入最終分析的24周臨床療效應(yīng)答患者為65例，患者年齡中位值為11.5（8.3～14.2）歲、女42例（65%）、病程42（24～67）個(gè)月，其他臨床特征、合并用藥和JIA類(lèi)型見(jiàn)表1。2465JIA46ACRpedi50，為應(yīng)答組；19ACRpedi5019例無(wú)應(yīng)答患者，6TNF（英夫利昔單抗）治療，96（interleukin6，IL-6）抑制劑治療，43C反應(yīng)蛋白（C-reactiveprotein，CRP）［34.9（23.3～42.6）mg/Lvs24.4（17.1～35.2）mg/L，P=0.076］；JIA（7%vs26%，P0.027）。2間其他人口學(xué)信息、臨床特征、合并用藥、JIA亞型差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表1MRP8/142189（995～3588）ng/mL，顯著高于不應(yīng)答組［748（284～1130）ng/mL，P＜0.001］。采用ROC曲線(xiàn)進(jìn)行分析，顯示MRP8/14水平預(yù)測(cè)依那西普治療JIA患者臨床應(yīng)答曲線(xiàn)下面積（areaundercurve，AUC）為0.823，95%CI：0.706～0.939（圖1）。采用整體65例JIA患者中MRP8/14血清水平中位值1426ng/mL作為切割點(diǎn)，預(yù)測(cè)敏感度65.2%，特異度84.2%。MRP8/14JIA65JIAMRP8/141426ng/mL為切割點(diǎn)，將MRP8/14高水平組（＞1426ng/mL）MRP8/14低水平組（≤1426ng/mL），1中應(yīng)答組與不應(yīng)答組差異分析中P0.1的因素一起納logistic回歸分析，單因素回歸分析中P0.1的因素再進(jìn)一步納入多l(xiāng)ogisticCRP65JIA28.9mg/L為切割點(diǎn)，分CRP組（＞28.9mg/L）CRP組（≤28.9mg/L）；按照是否全身型JIAJIAJIA單因素logistic回歸顯示，基線(xiàn)期血清MRP8/14高水平可以顯著預(yù)測(cè)臨床應(yīng)答（OR=9.098，95%CI：2.310～35.832，P=0.002），JIA（OR=5.199，95%CI：1.083～24.196，P=0.039）。logisticMRP8/14JIA患者約8（OR=8.926，95%CI：2.085～38.218，P=0.003），見(jiàn)表2。MRP8/14，又稱(chēng)S100A8/A9，隸屬于S100類(lèi)蛋白，其亞基包含2個(gè)鈣結(jié)合EF手型結(jié)構(gòu)蛋白，是中性粒細(xì)胞中比例最高的蛋白［8-9］。MRP8/14表達(dá)具有組織或細(xì)胞特異性，可作為急性炎癥細(xì)胞活化的標(biāo)志物［10］，同時(shí)它也是一種宿主防御蛋白，進(jìn)入細(xì)胞微環(huán)境后可結(jié)合微生物生長(zhǎng)繁殖所必須的鋅錳離子，進(jìn)而抑制其增殖，從而發(fā)揮抑制病原微生物生長(zhǎng)的作用［11］。MRP8/14Toll4CD8+TIL-17表達(dá)水平的上調(diào)［12］。在抗原誘導(dǎo)的小鼠關(guān)節(jié)炎模型中，S100A8-/A9-（MRP8-/14-）小鼠關(guān)節(jié)腫脹數(shù)顯著低于對(duì)照組，軟MRP8-/14-組未顯示MRP8/14并破壞關(guān)節(jié)軟骨［13］。本研究發(fā)現(xiàn)，JIAMRP8/14水平顯著高于健康HOLZINGER等［6］MRP8/14JIAMONCRIEFFE［14］MRP8/14水平可以預(yù)測(cè)接受甲氨蝶呤治JIA患者的治療應(yīng)答。ANINK［3］TNF6JIAMRP8/14TNF24MRP8/14MRP8/14高表達(dá)水平是TNF抑制劑治療JIA患者療效應(yīng)答的獨(dú)立預(yù)測(cè)因素，其可以增加8倍療效應(yīng)答概率。MRP8/14TNF［5］對(duì)使用不同TNFRA16MRP8/14水平顯著高于不應(yīng)答組，進(jìn)一步多因素回歸分析發(fā)現(xiàn)，MRP8/14的獨(dú)立預(yù)測(cè)因素；BOSCHETTI等［15］納入使用TNF抑制誘導(dǎo)治療的IBD患者，持續(xù)隨訪(fǎng)1年，發(fā)現(xiàn)糞便MRP8/14水平與誘導(dǎo)治療應(yīng)答顯著相關(guān)。此研究尚有一些不足之處，樣本量可以進(jìn)一步擴(kuò)大，除依那西普外其他TNF抑制劑治療JIA的評(píng)估未納入。因此進(jìn)一步研究方向?yàn)榧{入更大樣本量的JIA患者，使用不同類(lèi)型TNF抑制劑進(jìn)行治療，檢測(cè)其治療前基線(xiàn)期MRP8/14血清水平，深入評(píng)估MRP8/14在不同TNF抑制劑治療JIA患者中的臨床應(yīng)答預(yù)測(cè)作用。TNFJIA患者，達(dá)到臨床應(yīng)答MRP8/14MRP8/14MRP8/148TNFJIA［1］KLOTSCHEJ，NIEWERTHM，HAASJP，etal.Long-termsafetyofetanerceptandadalimumabcomparedtomethotrexateinpatientswithjuvenileidiopathicarthritis（JIA）［J］.AnnRheumDis，2016，75（5）：855-861.DOI：10.1136/annrheumdis-annrheumdis-2014-206747.［2］OTTENMH，PRINCEFH，ARMBRUSTW，etal.Factorsassociatedwithtreatmentresponsetoetanerceptinjuvenileidiopathicarthritis［J］.JAMA，2011，306（21）：2340-2347.DOI：10.1001/jama.2011.1671.［3］ANINKJ，VANSUIJLEKOM-SMITLW，OTTENMH，etal.MRP8/14serumlevelsasapredictorofresponsetostartingandstoppinganti-TNFtreatmentinjuvenileidiopathicarthritis［J］.ArthritisResTher，2015，17：200.DOI：10.1186/s13075-015-0723-1.［4］MOSLIMH，ZOUG，GARGSK，etal.C-reactiveprotein，fecalcalprotectin，andstoollactoferrinfordetectionofendoscopicactivityinsymptomaticinflammatoryboweldiseasepatients：asystematicreviewandmeta-analysis［J］.AmJGastroenterol，2015，110（6）：802-819，820.DOI：10.1038/ajg.2015.120.［5］CHOIIY，GERLAGDM，HERENIUSMJ，etal.MRP8/14serumlevelsasastrongpredictorofresponsetobiologicaltreatmentsinpatientswithrheumatoidarthritis［J］.AnnRheumDis，2015，74（3）：499-505.DOI：10.1136/annrheumdis-2013-203923.［6］HOLZINGERD，F(xiàn)ROSCHM，KASTRUPA，etal.TheToll-likereceptor4agonistMRP8/14proteincomplexisasensitiveindicatorfordiseaseactivityandpredictsrelapsesinsystemic-onsetjuvenileidiopathicarthritis［J］.AnnRheumDis，2012，71（6）：974-980.DOI：10.1136/annrheumdis-2011-200598.［7］GIANNINIEH，RUPERTON，RAVELLIA，etal.Preliminarydefinitionofimprovementinjuvenilearthritis［J］.ArthritisRheum，1997，40（7）：1202-1209.［8］HEIZMANNCW，F(xiàn)RITZG，SCHAFERBW.S100proteins：structure，functionsandpathology［J］.FrontBiosci，2002，7：d1356-d1368.［9］LEUKERTN，VOGLT，STRUPATK，etal.Calcium-dependenttetramerformationofS100A8andS100A9isessentialforbiologicalactivity［J］.JMolBiol，2006，359（4）：961-972.DOI：10.1016/j.jmb.2006.04.009.［10］UCHIDAT，F(xiàn)UKAWAA，UCHIDAM，etal.Applicationofanovelproteinbiochiptechnologyfordetectionandidentificationofrheumatoidarthritisbiomarkersinsynovialfluid［J］.JProteomeRes，2002，1（6）：495-499.［11］BROPHYMB，HAYDENJA，NOLANEM.Calciumiongradientsmodulatethezincaffinityandantibacterialactivityofhumancalprotectin［J］.JAmChemSoc，2012，134（43）：18089-18100.DOI：10.1021/ja307974e.［12］VOGLT，TENBROCKK，LUDWIGS，etal.Mrp8andMrp14areendogenousactivatorsofToll-likereceptor4，promotinglethal，end