獸藥殘留分析方法概述報(bào)告

獸藥殘留分析方法概述報(bào)告報(bào)告人:單吉浩第1頁，共21頁。報(bào)告內(nèi)容

獸藥殘留分析方法的特點(diǎn)

方法建立步驟

前處理方法

發(fā)展與展望第2頁，共21頁。獸藥殘留分析方法的特點(diǎn)1、待測物濃度低，濃度波動范圍大

多數(shù)為ug/kg_mg/kg甚至更低的水平濃度變化范圍達(dá)1：1000以上2、樣品基質(zhì)復(fù)雜，干擾物質(zhì)多生物材料種屬器官藥物自身代謝動物日糧環(huán)境污染3、以各種儀器分析方法為主第3頁，共21頁。方法建立步驟

-分析原理原理：

1）——分離一般占整個(gè)過程的90%以上（1）1個(gè)提取步驟—將待測物從樣品中釋放進(jìn)入溶液狀態(tài)（2）1-3個(gè)凈化步驟；—除去部分干擾雜質(zhì)（3）1個(gè)分離步驟（分辨）—儀器在線分離過程2）——檢測紫外可見（UV/Vis)、紅外（IR）、熒光（Fluor）、核磁共振（NMR）、質(zhì)譜（MS）等第4頁，共21頁。方法建立步驟

-分析原理采樣與樣品制備（樣品預(yù)處理）提取凈化濃縮衍生化分辨檢測第5頁，共21頁。方法建立步驟

1、文獻(xiàn)檢索——獲得某些信息或啟示——站在巨人的肩膀上——了解待測物的理化性質(zhì)（極性、溶解性、酸堿性、穩(wěn)定性、熔點(diǎn)或蒸汽壓、波譜學(xué)性質(zhì)等）體內(nèi)過程（代謝物、組織分布、排泄途徑和藥動學(xué)性質(zhì)）藥理毒學(xué)（理殘留毒性、MRLs、WTD）專業(yè)期刊：《分析化學(xué)》、《色譜》等國內(nèi)外叢書或手冊藥典第6頁，共21頁。方法建立步驟

2、建立測定方法紫外可見（UV/Vis)、紅外（IR）、熒光（Fluor）、核磁共振（NMR）、質(zhì)譜（MS）等3、建立樣品處理方法——最為重要的步驟提取、凈化、濃縮、衍生化4、標(biāo)準(zhǔn)曲線（定量手段）外標(biāo)法內(nèi)標(biāo)法（質(zhì)譜一般用待測物的穩(wěn)定同位素標(biāo)記物）第7頁，共21頁。方法建立步驟5、穩(wěn)定性試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)溶液樣品溫度、時(shí)間、環(huán)境6、分析方法的評價(jià)——標(biāo)準(zhǔn)添加樣品進(jìn)行至少3個(gè)濃度（10MRL、1MRL、0.1MRL）每個(gè)濃度4次重復(fù)第8頁，共21頁。方法建立步驟6、分析方法的評價(jià)（1）精密度（precision)

RSD，（變異系數(shù)CV）重復(fù)性：批內(nèi)精密度、批間精密度重現(xiàn)性：不同試驗(yàn)條件下（實(shí)驗(yàn)室、人員、儀器、試劑等）獨(dú)立測定值之間-與待測物濃度有關(guān)（參見相關(guān)部門規(guī)定范圍）

精密度的要求：待測物濃度(mg/kg)批內(nèi)批間1001.52.310711111160.117260.0121320.00130450.00014364第9頁，共21頁。方法建立步驟（2）準(zhǔn)確度（accuracy)通常采用添加回收率來表示濃度（ug/kg)允許范圍（%）小于150-1201-1060-12010-10070-110大于10080-110第10頁，共21頁。方法建立步驟6、分析方法的評價(jià)（3）檢測限與定量限檢測限:LOD（limitofdetection)一般LOD≤0.1MRLLOD=B+3SD不作定量可靠性要求（精密度、回收率等）定量限：LOQ（limitofquantitation)一般LOD≤0.2MRLLOD=B+10SD一般CV≤20%，回收率≥70%第11頁，共21頁。方法建立步驟6、分析方法的評價(jià)（4）線性范圍R≥0.9900，R2（5）選擇性內(nèi)源性物質(zhì)的干擾代謝物的干擾其他藥物的干擾（6）與參比方法的分析結(jié)果比較（7）實(shí)驗(yàn)室協(xié)同研究（collaborativestudy)-實(shí)際樣品、添加樣品-一般3個(gè)實(shí)驗(yàn)室，影響方法至少8個(gè)-考慮地域、氣候、部門、行業(yè)等7、分析方法報(bào)告8、分析質(zhì)量監(jiān)控第12頁，共21頁。前處理方法的建立1、概述目的：分離-檢測基本內(nèi)容：提取、凈化、濃縮、衍生化2、樣品預(yù)處理采集制備貯存第13頁，共21頁。前處理方法的建立3、提取方法1）樣品種類尿液、血漿、膽汁、奶、蛋、動物組織（肉、肝、腎等）2）提取溶劑-相似相溶原則-一般采用乙腈、甲醇和丙酮等水溶性溶劑-混合溶劑，增加選擇性第14頁，共21頁。前處理方法的建立3）提取方法-組織搗碎法（homogenization)-振蕩法(shaking)-索氏提取法(Soxhletextraction)-超聲波輔助提取（SAE）-超臨界流體萃?。⊿FE）-強(qiáng)化溶劑萃?。ˋSE）-微波輔助萃取（MAE）-消解法：酸消解、堿消解、酶消解-其他技術(shù)：冷凍干燥、制備干混物、起泡分離第15頁，共21頁。前處理方法的建立4、凈化方法1）液液萃取LLE2）固相萃取SPE3）固相微萃取（SPME）4）制備色譜法（HPLC、TLC）5）凝膠滲透色譜法（GPC）6）吹掃-捕集（P&T）7）膜分離技術(shù)8）浸透限制固定相（RAS）9）基質(zhì)固相分散技術(shù)（MSPD）10）免疫親和柱（IAC）11）分子印跡技術(shù)（MIPs)12)其他技術(shù)第16頁，共21頁。前處理方法的建立5、濃縮與富集-旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮-氣流吹蒸法-濃縮器濃縮-真空離心濃縮濃縮過程組分最容易損失第17頁，共21頁。前處理方法的建立6、衍生化-反應(yīng)速度快-容易重復(fù)-定量完全、轉(zhuǎn)化率穩(wěn)定-產(chǎn)物易純化-產(chǎn)物易于分離和檢測-GC衍生化方法-HPLC衍生化方法-衍生化方式：柱前、柱后、固相衍生化、光化學(xué)衍生化第18頁，共21頁。第19頁，共21頁。謝謝！第20頁，共21頁。內(nèi)容梗概獸藥殘留分析方法概述報(bào)告。1、待測物濃度低，濃度波動范圍大。多數(shù)為ug/kg_mg/kg甚至更低的水平。1）——分離。（1）1個(gè)提取步驟。2）——檢測。采樣與樣品制備（樣品預(yù)處理）。——獲得某些信息或啟示?！驹诰奕说募绨蛏?。體內(nèi)過程（代謝物、組織分布、排泄途徑和藥動學(xué)性質(zhì)）。藥理毒學(xué)（理殘留毒性、MRLs、WTD）。——最為重要的步驟?！獦?biāo)準(zhǔn)添加樣品進(jìn)行。至少3個(gè)濃度（10MRL、1MRL、0.1MRL）。（1）精密度（precision)。重復(fù)性：批內(nèi)精密度、批間精密度。重現(xiàn)性：不同試驗(yàn)條件下（實(shí)驗(yàn)室、人員、儀器、試劑等）獨(dú)立測定值之間。（2）準(zhǔn)確度（accuracy)。（3）檢測限與定量限。定量限：LOQ（limitofquanti